A estratégia experimental para medir a atividade da enzima succinato desidrogenase (SDH) é baseada na capacidade da enzima em catalisar a oxidação do succinato a fumarato, com a redução simultânea do aceptor de elétrons, o FAD (dinucleotídeo de flavina e adenina), a FADH2. A redução do FAD é acompanhada pela formação de um produto colorido, o formazan, que pode ser quantificado por espectrofotometria. Os componentes em cada tubo de ensaio são: - Tubo 1: Controle negativo, sem succinato, para verificar se a cor do formazan é gerada pela SDH ou por outros componentes do ensaio. - Tubo 2: Controle positivo, com succinato e sem inibidor, para verificar se a SDH está funcionando corretamente. - Tubo 3: Ensaio com succinato e rotenona, um inibidor específico da SDH, para verificar se a atividade da SDH é inibida. - Tubo 4: Ensaio com malonato, um inibidor competitivo da SDH, para verificar se a atividade da SDH é inibida. O resultado esperado para cada tubo é: - Tubo 1: Não deve haver formazan, pois não há succinato para ser oxidado pela SDH. - Tubo 2: Deve haver formazan, indicando que a SDH está funcionando corretamente. - Tubo 3: Não deve haver formazan, pois a rotenona inibe a atividade da SDH. - Tubo 4: Deve haver formazan, pois o malonato é um inibidor competitivo da SDH e não afeta a formação do formazan.
Para escrever sua resposta aqui, entre ou crie uma conta
Compartilhar