Vamos analisar a situação apresentada e as alternativas de resposta. 1. O gene de interesse tem 540 pb e está localizado a jusante de um promotor de 200 pb. Portanto, a sequência total que estamos considerando para a clonagem é de 740 pb (200 pb do promotor + 540 pb do gene). 2. O pesquisador usou a enzima de restrição SmaI para clonar o gene no vetor. O sítio de reconhecimento da SmaI é CCC↓GGG, e o gene contém um único sítio para a enzima EcoRI, que está 70 pb a jusante do códon iniciador. 3. Quando o vetor é digerido com as enzimas HindIII e EcoRI, o padrão de digestão esperado deve incluir a sequência do promotor, a sequência do gene e a parte do vetor. Agora, vamos analisar as alternativas: a. ~270 pb + ~470 pb + o restante da estrutura vetor. - Não parece correto, pois não corresponde ao tamanho total esperado. b. ~740 pb + ~70 pb + o restante da estrutura vetor. - Não faz sentido, pois não se espera um fragmento de 70 pb adicional. c. ~200 pb + o restante da estrutura vetor. - Não é correto, pois não inclui o gene de 540 pb. d. ~810 pb + o restante da estrutura vetor. - Não é correto, pois não corresponde ao tamanho total esperado. e. ~200 pb + 540 pb + o restante da estrutura vetor. - Esta alternativa está correta, pois inclui o promotor (200 pb) e o gene (540 pb), totalizando 740 pb, além do restante da estrutura do vetor. Portanto, a alternativa correta é: e) ~200 pb + 540 pb + o restante da estrutura vetor.