Vamos analisar cada uma das afirmações sobre a técnica ELISA direta: ( ) Essa técnica utiliza anticorpo marcado com radioisótopo. É falsa (F). A técnica ELISA geralmente utiliza anticorpos marcados com enzimas, não radioisótopos. ( ) O antígeno não ligado é removido por lavagem. É verdadeira (V). Após a incubação, os antígenos que não se ligaram são removidos por meio de lavagens. ( ) Essa técnica utiliza suporte sólido com uma quantidade fixa de antígenos. É falsa (F). Na ELISA direta, o suporte sólido é geralmente revestido com antígenos, não com uma quantidade fixa de antígenos. ( ) O anticorpo secundário marcado com a enzima e não-ligado deve ser removido com lavagens. É verdadeira (V). Anticorpos não ligados devem ser removidos para evitar resultados falso-positivos. ( ) Após adicionar o substrato e incubação é possível visualizar reação de cor em amostras positivas. É verdadeira (V). A adição do substrato resulta em uma reação que produz cor, indicando a presença do antígeno. Agora, organizando as respostas: F - V - F - V - V. Portanto, a alternativa correta é: B) F - V - F - V - V.