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Assinale a alternativa correta em relação à técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), suas variantes e/ou características. Alternativas A No PCR convencional, a enzima utilizada para converter RNA em DNA complementar (cDNA) é a transcriptase reversa. B A primeira etapa do ciclo realizado pelo termociclador é o anelamento, que tem como finalidade a separação da dupla fita de DNA pela temperatura. C A reação em cadeia de polimerização em tempo real (qPCR) combina a metodologia de PCR convencional com um mecanismo de detecção e quantificação por turbidimetria. D As moléculas de DNA previamente amplificadas em outras reações (amplicons) não representam ameaças de contaminação (falsos positivos), quando as áreas de extração e ampliação-detecção são separadas. E A tecnologia Multiplex permite a detecção simultânea de vários alvos genéticos em uma única análise, utilizando diferentes pares de primers.
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nathannevianna

há 4 semanas

Respostas

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há 4 semanas

Vamos analisar cada alternativa: A) No PCR convencional, a enzima utilizada para converter RNA em DNA complementar (cDNA) é a transcriptase reversa. Incorreta: No PCR convencional, a enzima usada é a DNA polimerase. A transcriptase reversa é usada na etapa de RT-PCR (PCR com transcrição reversa), que converte RNA em cDNA antes da amplificação. B) A primeira etapa do ciclo realizado pelo termociclador é o anelamento, que tem como finalidade a separação da dupla fita de DNA pela temperatura. Incorreta: A primeira etapa é a desnaturação, que separa as fitas de DNA. O anelamento (hibridização dos primers) ocorre depois, em temperatura mais baixa. C) A reação em cadeia de polimerização em tempo real (qPCR) combina a metodologia de PCR convencional com um mecanismo de detecção e quantificação por turbidimetria. Incorreta: A qPCR utiliza fluorescência para detecção e quantificação, não turbidimetria. D) As moléculas de DNA previamente amplificadas em outras reações (amplicons) não representam ameaças de contaminação (falsos positivos), quando as áreas de extração e ampliação-detecção são separadas. Incorreta: Mesmo com áreas separadas, amplicons podem causar contaminação e falsos positivos se não houver cuidados rigorosos. E) A tecnologia Multiplex permite a detecção simultânea de vários alvos genéticos em uma única análise, utilizando diferentes pares de primers. Correta: Multiplex PCR usa múltiplos pares de primers para amplificar vários alvos em uma única reação. Resposta correta: E

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