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1Os polimorfismos podem ser diferentes tipos, como polimorfismos de nucleotídeo único (SNP) ou polimorfismos promovidos por inserções ou deleções no DNA, chamadas de polimorfismos indel, os quais podem ser do tipo polimorfismo no número de cópias (CNP), polimorfismo repetido em tandem curta (STRP) ou polimorfismo de repetição em tandem de número variável (VNTR). Sobre os polimorfismos, assinale a alternativa CORRETA: A O polimorfismo STRP é conhecido como repetição em tandem de número variável, também denominado como DNA minissatélite, com cerca de milhares de nucleotídeos. B As técnicas de PCR e sequenciamento pelo método Sanger conseguem identificar qualquer polimorfismo. C O polimorfismo de nucleotídeo único ocorre em um único nucleotídeo. D O polimorfismo VNTR ou DNA microssatélites são difíceis de ser sequenciados, tendo sequências curtas de DNA, com 10 a 100 nucleotídeos. 2O método de coleta utilizado no teste do pezinho, em que somente uma pequena quantidade de amostra em papel-filtro é coletada, associado à grande vantagem do diagnóstico precoce de doenças potencialmente graves e ao tratamento também precoce, com significativa melhora na condição do paciente, alavancou a descoberta e implementação de novos testes baseados em uma extensa gama de técnicas e metodologias de avaliação que pudessem ser incluídas na triagem pré- natal. Com base no teste do pezinho, também conhecido como teste da triagem neonatal, analise as sentenças a seguir: I- A triagem Neonatal é ofertada de forma gratuita em inúmeros países, sendo que cada país determina quais testes serão oferecidos. No entanto, laboratórios privados disponibilizam testes ampliados para mais de cem doenças ou condições. II- No Brasil, a triagem neonatal é realiza para 6 doenças, sendo elas a fenilcetonúria, a deficiência da biotinidase, a anemia falciforme, a hiperplasia adrenal congênita, o hipotireoidismo congênito e a fibrose cística. III- É importante ressaltar que muitos dos resultados obtidos por esses testes indicam a possibilidade da doença em investigação, mas não o diagnóstico em si, embora os testes sejam bastante específicos. Assinale a alternativa CORRETA: A Somente a sentença I está correta. B Somente a sentença III está correta. C Somente a sentença II está correta. D As sentenças I, II e III estão corretas. 3O advento das técnicas de biologia molecular possibilitou o estudo genético de diversos organismos, incluindo os seres humanos. Esses estudos têm trazido ganhos significativos no entendimento de doenças, síndromes e mecanismos de ação de substâncias. De acordo com a importância das técnicas de clonagem do DNA e construção de bibliotecas genômicas, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as falsas: ( ) As enzimas de restrição são utilizadas na construção de bibliotecas de DNA, com o objetivo de fragmentar o DNA genômico, já que podem ser conhecidas como tesouras moleculares. ( ) Os vetores são essenciais na técnica de clonagem e são utilizados tanto na construção de bibliotecas de DNA, quanto de cDNA, uma vez que carregam os fragmentos de DNA ou o cDNA extraído. ( ) As bibliotecas de cDNA são construídas a partir da extração do DNA de células ou tecidos, que posteriormente é submetido à clonagem do DNA. ( ) O mRNA é convertido em cDNA pela transcrição reversa, para então serem introduzidos em vetores e submetidos ao processo de clonagem para originar as bibliotecas de cDNA. Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA: A V - F - V - V. B V - F - F - V. C F - F - V - F. D V - V - F - V. 4O processo de transcrição reversa, é uma das técnicas mais utilizadas na área de pesquisa de expressão gênica. Essa técnica é conhecida como RT-PCR, ou transcrição reversa, seguida por PCR. Com base no RT-PCR, analise as sentenças a seguir: I- O RT-PCR avalia a expressão diferencial do mRNA, o qual será convertido em DNA complementar (cDNA). II- A enzima transcriptase reversa (RT) é responsável pela síntese de uma fita de DNA, utilizando como molde uma fita simples de RNA. III- A técnica de RT-PCR é realizada em 40 ciclos, para formação de uma quantidade adequada de cDNA. Assinale a alternativa CORRETA: A Somente a sentença II está correta. B As sentenças I e III estão corretas. C Somente a sentença III está correta. D As sentenças I e II estão corretas. 5"Biópsia líquida começa a ser usada para avaliar a evolução de tumores e a necessidade de mudar o tratamento" (ZORZETTO, 2017, p. 15). Sobre a biópsia líquida, assinale a alternativa CORRETA: FONTE: ZORZETTO, R. No Sangue, mais pistas sobre o câncer. Pesquisa FAPESP. Disponível em: https://revistapesquisa.fapesp.br/wp- content/uploads/2017/03/051-055_Biopsia. Acesso em: 5 fev. 2021. A A biópsia líquida é um procedimento invasivo e doloroso, que normalmente determina risco de vida ao paciente para a obtenção da amostra. B A utilização de amostras sanguíneas para avaliação do DNA livre circulante (ctDNA) de origem tumoral só é possível devido a técnicas moleculares avançadas, como o sequenciamento NGS de cerca de 120 genes relacionadas a tumores. C A biópsia líquida deve ser realizada somente como triagem molecular, sendo um procedimento complexo, que inviabiliza o monitoramento dos pacientes em tratamento. D A avaliação do DNA tumoral pela biópsia líquida pode ser realizada somente em tumores de origem sanguínea, como as leucemias, já que a coleta é diretamente na medula óssea do paciente. 6Diferentemente do genoma, que é idêntico em todas as células somáticas de um mesmo organismo, uma importante característica do transcriptoma é ser específico em cada tipo celular e se apresenta de maneira bastante variável a diferentes condições, refletindo efeitos de diferentes estímulos, sejam eles químicos, fisiológicos, patológicos, entre outros. Sobre as técnicas utilizadas para análise do transcriptoma, assinale a alternativa CORRETA: A A ORESTES sequencia somente as extremidades do cDNA, identificando o RNA por meio de comparações com bancos de dados, como o BLAST. B Tanto a metodologia utilizada pela EST quanto a ORESTES, comparam os dados obtidos com bancos de dados disponíveis, como o BLAST, a fim de identificar os genes correspondentes. C O método EST tem todo o cDNA clonado sequenciado, fornecendo informações sobre a região codificadora do RNA mensageiro. D A técnica do microarray, ou microarranjos de DNA limita a busca de genes a um pequeno número de cDNA, pois necessita de sondas específicas marcadas com fluoróforo. 7A função do genoma pode ser investigada por meio da supressão da função gênica e, para tanto, algumas técnicas podem ser aplicadas, como, por exemplo, a promoção de mutações gênicas diretamente no DNA, a interferência na expressão gênica com a utilização de RNA de interferência (iRNA). Sobre os RNAs de interferência (iRNAs), assinale a alternativa CORRETA: A Os iRNAs modificam a expressão ou tradução gênica, não afetando o DNA diretamente. B A utilização do iRNAs alteram a expressão gênica diretamente no DNA. C O uso de moléculas de RNA conhecidas como microRNAs (miRNAs) se ligam a partes específicas do DNA e sinalizam para degradação do material genético. D Os iRNAs promovem modificação permanente na expressão gênica. 8A escolha do gel para a técnica de eletroforese deve-se dar através do tamanho da molécula a ser isolada e do objetivo do isolamento. Com base nas matrizes de agarose e poliacrilamida para a técnica de eletroforese em gel, analise as sentenças a seguir: I- A poliacrilamida pode separar fragmentos de DNA com até mesmo uma única base nitrogenada de diferença. II- A agarose, apresenta menor resolução, ou seja, cada banda presente no gel, representa um agrupamento de moléculas de tamanho semelhantes. III- No gel de poliacrilamida, uma menor faixa de tamanho das moléculas pode se movimentar, enquanto fragmentos maiores de DNApodem migrar facilmente no gel de agarose. Assinale a alternativa CORRETA: A Somente a sentença II está correta. B Somente a sentença I está correta. C As sentenças I, II e III estão corretas. D Somente a sentença III está correta. 9A microbiota, por vezes referida como microbioma, pode ser definida como o conjunto de micro-organismos presentes em determinado microambiente, o que inclui, por exemplo, diferentes regiões do corpo humano como a boca, o intestino, o trato genital, entre outros. Com base no microbioma, analise as sentenças a seguir: I- O microbioma intestinal não é de interesse científico, uma vez que suas principais funções estão relacionadas à prevenção da proliferação de organismos patogênicos no trato intestinal, impossibilitando funções fisiológicas complexas. II- As técnicas de sequenciamento podem ser utilizadas para analisar o DNA presente na amostra de fezes, que posteriormente, é analisada por ferramentas de bioinformática, a fim de identificar o metagenoma intestinal e apontar quais micro- organismos compõem esse microbioma. III- A avaliação do microbioma intestinal pode ser realizada somente para auxiliar no diagnóstico de doenças inflamatórias intestinais, sendo que não contribui para diagnóstico ou monitoramento de outras doenças, ou seus respectivos tratamentos. Assinale a alternativa CORRETA: A As sentenças I e II estão corretas. B Somente a sentença I está correta. C As sentenças I e III estão corretas. D Somente a sentença II está correta. 10Apesar do avanço nas tecnologias e da possibilidade de expansão da quantidade de enfermidades testadas nos painéis de triagem neonatal, existe uma série de controvérsias em relação à importância de todos esses testes serem aplicados. No entanto, uma série de questões éticas têm sido debatidas sobre essa expansão. Sobre o exposto, avalie as asserções a seguir e a relação proposta entre elas: I- Dentro da bioética, discute-se a importância da expansão desses testes, especialmente, devido a problemas que possam decorrer desses diagnósticos precoces ou resultados falso-positivos, que podem afetar a vida da família do neonato. PORQUE II- Muitos testes que poderiam ser incluídos em painéis de testagem neonatal são para doenças ou condições que não são totalmente esclarecidas quanto a sua severidade, nem mesmo quanto ao benefício do diagnóstico precoce para seu tratamento, sendo que muitas dessas doenças, não apresentam tratamento disponível. Assinale a alternativa CORRETA: A A asserção I é uma proposição verdadeira, e a II é uma proposição falsa. B As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I. C As asserções I e II são proposições falsas. D As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.
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