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Hematologia Eritropoiese, Eritograma e Índices hematimétricos O que é hematologia? • Estudo da fisiologia e das patologias do sangue, da medula óssea e dos gânglios linfáticos Componentes do sangue • O sangue é um conjunto de plasmas e hemácias (tecido conjuntivo líquido) • Plasma: água, proteínas (albumina), eletrólitos, gases dissolvidos (O2 e CO2) • Capa leucocitária: plaquetas e leucócitos • Eritrócitos • Estima-se que o peso corporal de um animal é constituído de 7% de sangue • O peso corporal do animal é constituído de 7% de sangue Funções do sangue • Nutrição e oxigenação dos tecidos • Transporte de gases, nutrientes, hemácias, leucócitos, hôrmonios • Regulação térmica e hídrica • Defesa e imunidade, transporta os leucócitos e anticorpos • Coagulação Hemograma completo • É a avaliação do sangue e seus componentes - Eritrograma, leucograma, plaquetograma (componentes básicos de um hemograma completo) Serve para: • Avaliação do estado geral de saúde do paciente, descobre se o paciente está ou não com alguma alteração • Apoio ao diagnóstico de condições médicas do paciente • Monitorar a progressão da doença e da resposta a um tratamento ➝ O hemograma é a “foto de um momento”, isso porque o sangue é dinâmico e está em constante transformação • O sangue irriga e troca metabólitos a todo o momento com os demais tecidos do corpo • Algumas células sanguíneas têm meia vida de menos de 1 dia, e podem ser consumidas em condições patológicas (então o hemograma em um dia pode mudar) • O nível de hidratação pode estar relacionado com a concentração ou diluição dos componentes sanguíneos ➝ O hemograma dificilmente será um diagnóstico definitivo • O hemograma revela alterações que se correlacionam com processos patológicos no organismo • Essas alterações devem ser correlacionadas com os sinais clínicos do paciente e demais resultados de exames O hemograma dificilmente será um diagnóstico definitivo • Sendo um exame de apoio e devera ser avaliado junto com os sintomas (exceto em doenças com presença de hemoparasitas) • Pode fechar (leucemia, hemoparasitose, anemia hemolítica imunomediada), mas ainda assim será necessário pedir outros exames • O hemograma revela alterações que se correlacionam com processos patológicos no organismo • Essas alterações devem ser correlacionadas com os sinais clinicos do paciente e os demais resultados de exames Hematopoiese • É a produção e diferenciação das células sanguíneas (Haima = sangue, Poiesis = criação, produção) que define o processo de produção das células sanguíneas. Desde a célula tronco até a formação da célula Tronco - Célula que pode, se multiplicar diversas vezes, podendo até se autorrenovar e possui potencial de virar outras células Progenitora - São células tronco diferenciadas, conseguem se dividir e se diferenciar, mas não podem se autorrenovar Precursora - Derivadas das células progenitors que não possui capacidade de autorrenovação e se divide em células cada vez mais diferenciadas Células maduras – Eventualmente encontradas no sangue ou nos tecidos Locais onde ocorre a hematopoiese > Na vida intrauterina, o primeiro local de produção das células sanguíneas é o saco vitelínico e, posteriormente, essa função é assumida pelo fígado, baço e medula óssea > No recém-nascido, a produção das células sanguíneas passa a ocorrer na medula óssea de todos os ossos do corpo. > À medida que o animal vai crescendo e chegando à fase adulta, a produção das células do sangue ocorre apenas na medula óssea dos ossos chatos, ossos longos (epífises) e esterno Medula óssea – variação do perfil com a idade Com o avanço da idade dos mamíferos existe uma alteração do perfil da medula óssea Filhote Adulto Idoso • > 75% de células hematopoiéticas • < 25% de células adiposas • ≅ 50% de células hematopoiéticas • ≅ 50% de células adiposas • < 25% de células hematopoiéticas • > 75% de células adiposas Eritropoiese - Produção de hemácias • Esse processo demora e cerca 4 dias (3 a 4 dias para ver a resposta na circulação) • Um precursor eritroide imaturo consegue dar origem a 32 hemácias • O citoplasma da célula vai ficando cada vez mais vermelha porque começa a produzir hemoglobina • Pode ser indício de regeneração frente a anemia Eritropoitina • É um hormônio glicoproteico, produzido nos rins (90%) e fígado (10%), que atua como principal fator estimulante da eritropoiese (tendo a endógena e exógena) • Sua produção é estimulada pela queda de oxigênio (hipoxia), o rim percebe a falta de O2 e produz eritropoitina (infarto renal – edema pulmonar – condições patológicas que levam a produção de eritropoitina) > Exógena – aplicada em pacientes que não estão respondendo a anemia Funções • Diferenciação dos precursores eritroides na medula óssea • Acelerar o tempo de maturação do precursor até a hemácia • Proteção contra a destruição das hemácias e seus precursores Cofatores da eritropoiese Minerais Ferro • Síntese da hemoglobina. Cobre • Disponibilidade do ferro para a medula óssea Cobalto • Parte da estrutura da vitamina B12 e está associado com fatores responsáveis pela produção de EPO (eritropoietina) Selênio • Protege as células hematopoiéticas de estresse oxidativo Vitaminas Vitamina B6 • Síntese do grupamento heme Vitamina B9 • Coenzima para o processo de divisão celular e necessária para a síntese de DNA na célula eritroide Vitamina B12 • Coenzima necessária para a síntese de DNA na célula eritroide Hemácias ➝ São as unidades morfológicas da série vermelha, e são denominadas também de eritrócitos ou glóbulos vermelhos ➝ São produzidas na medula óssea e seguem para circulação sanguínea • Célula discoide anucleada e bicôncava na maioria dos mamíferos • Essa estrutura facilita a troca de gases entre meio interno e externo • Não possuem organelas depois de maduras • Obtém energia por via glicolítica • Possuem um citoesqueleto que permite certo grau de deformidade a depender do que ela precise • Membrana possui carga eletronegativa, não tendem a ficar se empilhando uma na outra, permitindo que elas fiquem afastadas na circulação e não tendem a se juntar Função da hemácia • Transporte de gases sanguíneos ligados a hemoblogina A vida da hémacia • Vive em média 100 dias • A hemácia é produzida na medula óssea, vai para a circulação e quando fica velha é destruída no baço Hemocaterese • Consiste no processo de destruição de hemácias envelhecidas, pois essas hemácias consomem todas as suas enzimas e possuem menos mecanismos metabólicos para manter sua deformidade • A hemácia velha começa a expressar antígenos em sua membrana, dessa forma quando estão no baço os macrófagos esplênicos identificam e fagocitam as hemácias senescentes • São destruídas (em condições saudáveis) cerca de 5 milhões de hemácias por microlitro de sangue por segundo ➝ Ou está produzindo menos/mais ou destruindo menos/mais ➝ Hemácias do cão são maiores do que as hemacias do gato ➝ Hemácia sem núcleo troca O2 mais facilmente DEFINIÇÕES IMPORTANTES Hematopoiese define o processo de produção das células sanguíneas. Hemocatarese é o processo pelo qual as hemácias e outros elementos figurados do sangue são destruídos. Hemólise define o processo de destruição, patológico ou fisiológico, das hemácias e pode ocorrer dentro do vaso sanguíneo (hemólise intravascular) ou em órgãos ricos em células do SMF (macrófagos) como baço e fígado (hemólise extravascular). Eritrograma Diferenças das hemácias entre as espécies • Concentração de reticulócitos – há espécies com mais ou com menos quantidade de hemácias *Não existe contagem de reticulócito em hemograma de equinos O tempo de vida do eritrócito muda de acordo com a espécie: ➝ Cães-100dias ➝ Gatos - 70 dias ➝ Equinos e bovinos 150 dias Componentes do eritrograma • Contagem de eritrócitos ou hematimetria • Concentração de hemoglobina sanguínea • Hematócrito ou volume globular • Índices hematimétricos • RDW • Avaliação morfológica das hemácias Contagem de eritrócitos • Número absoluto de hemácias em 1 microlitro ou mm3 de sangue • Há duas formas de realizar a contagem, sendo: manual (câmara de Neubauer) ou automatizado Contagem manual > Dilui o sangue em solução isotônica (3,98 mL + 0,02 mL de sangue 200:1) > Contar as hemácias de 5 quadrados (4 cantos e 1 central) da área central da câmara – total de 25 quadrados > São incluídas hemácias que estejam sobre 2 lados da linha tripla e que encostem na segunda linha Correção da contagem • Area de contagem = x5 (conta-se 5 quadradinhos) • Altura da câmara = x10 • Diluição = x200 • Fator de correção de 10.000 Exemplo > He: 50 x 5 (área) x 10 (altura) x 200 (diluição) > 50 hemácias x 5 = 250 > 250 x 10 = 2.500 > 2.500 x 200 = 500.000 > Ou pode simplesmente multiplicar por 10.000 (50x10.000 = 500.000 / mm3) HCM é um índice incompleto e redundante • Paciente 1 tem muito mais eficiência do que o paciente 2 • Usa-se HGM porque ele corrige pelo volume da hemácia Exemplo 1 – canino He = 6,00 (milhões/uL) Hb = 14 (g/dL) Ht = 42% VCM = 42/6x10 = 70 fl CHCM = 14/42*100 = 0,333 x 100 = 33,3 g/dL Contagem automatizada • A contagem é feita por impedância eletrônica • A amostra é diluída em solução isotônica • Essas hemácias diluídas passam por uma abertura – passagem de uma hemácia por vez • O aparelho contabiliza a quantidade de vezes que a corrente elétrica parou com a passagem da hemácia • A quantidade de paradas determina o número de células e o tempo parado determina o tamanho da hemácia ➝ Máquina não faz contagem de hemograma de silvestres ➝ É obrigatório avaliar esfregaço porque a máquina não lê hemoparasitas Concentração de hemoglobina • Quantidade de hemoglobina em gramas por 1 dL (100 mL) de sangue • A contagem feita através de espectrofotometria Hematócrito ou volume globular • Porcentagem do volume do sangue que é preenchida por hemácias ➝ Exemplo: Se o hematócrito está em 45%, há 45 mL de hemácias em 100 mL de sangue • Pode ser realizado pelo método manual • Na avaliação manual é possível saber se há hemólise, lipemia e icterícia • No automatizado, a máquina não conta hematócrito, ele é calculado a partir dos demais índices Índices hematimétricos • São as interrelações entre 3 valores medidos • Utilizado para a caracterização morfológica média das hemácias Existem 3 índices: 1. VCM - volume médico dos eritrócitos em fL 2. HCM - massa de hemoglobina por eritrócito em pg 3. CHCM - concentração de hemoglobina por hemácia em g/dL VOLUME CORPUSCULAR MÉDIO MEMOGLOBINA CORPUSCULAR MÉDIA CONCENTRAÇÃO DE HEMOGLOBINA MÉDIA VCM = hematócrito / hematimetria × 10 • Canino = 70fL • Felino = 50fL • Equino = 45fL • Bovino = 50fL HCM = hemoglobina / hematimetria × 10 • Canino = 25pg • Felino = 15pg • Equino = 16pg CHCM = hemoglobina / hematócrito × 100 • Mamíferos = 31-36 g dL ➝ Os índices hematimétricos servem para a classificação morfológica das anemias ➢ VCM reduzido: microcitose (hemácia se dividindo mais vezes) ➢ VCM normal: normocitose ➢ VCM aumentado: macrocitose (menos divisão das hemácias ou hemácias jovens) ➢ CHCM reduzido: hipocromia (pouco ferro ou ainda não reproduziu) ➢ CHCM normal: normocromia ➢ CHCM aumentado: hipercromia (não existe) Proteína plasmática total • Exame de triagem para proteinograma e desidratação • É o primeiro passo para determinação de fibrogênio em grandes animais e pode indicar inflamação RDW (red cell distribution width) • Índice automatizado de anisocitose pela variação de tamanho das hemácias • Quando tem anisocitose as hemácias ficam mais espalhados no gráfico Esfregaço sanguíneo • Feito pela extensão do sangue pela lamínula Erros na confecção do esfregaço sanguíneo A. Borda irregular da lâmina extensora B. Pausas na hora de mover a lâmina extensora C. Movimento muito rápido D. Gota de sangue muito pequena E. Gota de sangue concentrada no centro da lâmina F. Sujeira ou gordura na lâmina ou amostra lipêmica G. Pressão desigual na lâmina extensora H. Demora na confecção do esfregaço/gota seca ➝ Coloração utilizada – Panótico ➝ Analisar a cauda do esfregaço, área de contagem (pré-cauda) e corpo do esfregaço Interpretar hemograma • Intervalo de referência – resultados esperados para a maioria dos pacientes saudáveis (95%) • Diferenças esperadas devido variação de espécies, raças, idade, sexo, região geográfica
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