Identificação de bactérias Gram-negativas parte 2 2

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Identificação de bactérias 
Gram-negativas
Professor Ivson Cassiano 
Gram-negativas 
Cocos 
Neisseria meningitidis
Neisseria gonorrhoeae
Cocobacilos 
Haemophilus influenzae
Brucella spp.
Bordetella pertussis
Bacilos 
Vibrio cholerae
Campylobacter jejune
Vibriões 
Enterobactérias 
Pseudomonas aeruginosa
Acinetobacter baumannii
Neisseria gonorrhoeae
Características: Diplococos Gram-negativos
Catalase +
Oxidase +
Fermentam a glicose 
Amostras Urina
Secreções – endocervical, uretral, 
orofaringe, canal vaginal, anal, 
conjuntiva
Sangue
Diagnostico: Coloração de Gram
Cultura em meio Thayer Martins
Teste da catalase (+)
Teste da oxidase (+)
Fermenta a glicose 
Neisseria meningitidis
Características: Diplococos Gram-negativos
Catalase +
Oxidase +
Fermentam a glicose e maltose
Amostras Liguor
Sangue
Diagnostico: Coloração de Gram
Cultura em meio Thayer Martins
Teste da catalase (+)
Teste da oxidase (+)
Fermenta a glicose e a maltose 
Haemophilus influenzae
Características: Cocobacilos Gram-negativos
Catalase +
Oxidase +
Amostras Sangue
Liguor
Diagnostico: Coloração de Gram
Cultura em Ágar chocolate 
Teste da catalase (+)
Teste da oxidase (+)
Imóveis 
Gram-negativas 
Cocobacilos 
Haemophilus influenzae
Brucella spp.
Bordetella pertussis
Brucella spp.
Brucelose 
B. abortus B. melitensis B. suis B. canis
Brucelose é considerada uma zoonose, o que é 
uma zoonose ?
Contato direto com secreções e excreções de animais infectados
Ingestão de carne mal cozida, leite cru ou produtos lácteos contendo 
microrganismos viáveis
Inalação de material infeccioso aerossolizado
Raramente, transmissão de uma pessoa para outra
Brucella spp é um potencial agente 
de bioterrorismo.
https://www.msdmanuals.com/pt/profissional/les%C3%B5es-intoxica%C3%A7%C3%A3o/armas-de-destrui%C3%A7%C3%A3o-em-massa/armas-biol%C3%B3gicas
Febre ondulante; febre de Malta; febre do Mediterrâneo; febre de Gibraltar
Brucella spp.
calafrios e febre, cefaleia intensa, dores articulares e 
lombares, mal-estar e, às vezes, diarreia
a febre intermitente persiste por 1 a 5 semanas
Complicações: 
endocardite ou 
complicações graves 
do sistema nervoso 
central.
anorexia
Cansaço 
Náuseas 
Constipação 
intestinal Vómitos 
Tosse seca Comportamento
Sono 
Brucelose Doença ocupacional 
Trabalhadores agrícolas 
Veterinários 
Centros de abates 
Laboratório
Brucella spp.
+1 patógeno 
restrito ou 
primário 
Características:
- Cocobacilo Gram-negativo pequena 
Brucella spp.
+1 patógeno 
restrito ou 
primário 
Características:
- Cocobacilo Gram-negativo pequena 
- Não encapsulado 
NÃO TEM !
Brucella spp.
+1 patógeno 
restrito ou 
primário 
Características:
- Cocobacilo Gram-negativo pequena 
- Não encapsulado 
- Patógeno intracelular 
Brucella spp.
+1 patógeno 
restrito ou 
primário 
Características:
- Cocobacilo Gram-negativo pequena 
- Não encapsulado 
- Patógeno intracelular 
- Imóvel 
Brucella spp.
+1 patógeno 
restrito ou 
primário 
Características:
- Cocobacilo Gram-negativo pequena 
- Não encapsulado 
- Patógeno intracelular 
- Imóvel 
- Aeróbicas 
Brucella spp.
+1 patógeno 
restrito ou 
primário 
Características:
- Cocobacilo Gram-negativo pequena 
- Não encapsulado 
- Patógeno intracelular 
- Imóvel 
- Catalase +
possui a enzima catalase 
Responsável por quebrar radicais livres 
formados durante o processo aeróbico, 
como por exemplo o peroxido de 
hidrogênio 
Brucella spp.
+1 patógeno 
restrito ou 
primário 
Características:
- Cocobacilo Gram-negativo pequena 
- Não encapsulado 
- Patógeno intracelular 
- Imóvel 
- Catalase +
- Urease + 
Ureia 
Urease
Amônia Gás carbônico 
Brucella spp.
+1 patógeno 
restrito ou 
primário 
Características:
- Cocobacilo Gram-negativo pequena 
- Não encapsulado 
- Patógeno intracelular 
- Imóvel 
- Catalase +
- Urease + 
Meio de cultura com ureia e o 
indicador de pH vermelho de 
fenol 
Amônia é alcanina
Aumenta o pH, muda de cor 
Brucella spp.
+1 patógeno 
restrito ou 
primário 
Características:
- Cocobacilo Gram-negativo pequena 
- Não encapsulado 
- Patógeno intracelular 
- Imóvel 
- Catalase +
- Urease + 
Em quem eu vou suspeitar da infecção por Brucelose ?
Fúngica ?
Bactérias ? Virose ?
Inflamação ?
Trabalhadores agrícolas 
Veterinários 
Centros de abates 
Laboratório
O que eu vou coletar para fazer o diagnostico ?
Brucella spp
O que eu vou coletar para fazer o diagnostico ?
Líguor Sangue
Brucella spp
Diagnostico 
Cocobacilos Cultura 
Brucella spp
Teste sorológico 
Brucella spp. 
Fastidiosa 
Meio de cultivo:
Ágar Sangue
Ágar Chocolate
Porque os testes 
sorológicos são mais 
utilizados? 
Até 4 semanas para 
crescer
Testes sorológicos 
Detecção de anticorpos 
B. abortus B. melitensis B. suis
O laudo é liberado como Brucella spp., pq ?
B. canis
Brucella spp
Características: Cocobacilos Gram-negativos
Catalase +
Não encapsulado 
Patógeno intracelular
Imóvel
Urease + 
Amostras Sangue
Liguor
Diagnostico: Coloração de Gram
Cultura em Ágar sangue/chocolate
Teste da catalase (+)
Teste da oxidase (+)
Imóveis 
Testes sorológicos 
Infecção Febre ondulante, podendo gerar 
meningite
Gram-negativas 
Cocobacilos 
Haemophilus influenzae
Brucella spp.
Bordetella pertussis
Bordetella pertussis
Coqueluche +1 patógeno 
restrito ou 
primário 
Crianças e adolescentes 
Bordetella pertussis
Coqueluche +1 patógeno 
restrito ou 
primário 
Aerossol 
A infecção é 
altamente contagiosa 
e causa doença em ≥ 
80% dos contatos 
próximos. 
O período de 
incubação é de 
aproximadamente 7 
a 14 dias (máximo 
de 3 semanas).
Fase catarral
- Espirros
- Coriza
- Anorexia
- Apatia
- Tosse seca noturna 
que vai se tornando 
diurna
Fase paroxística
- Crises fortes de tosse 
- Intensas 
- Frequentes
- Inspiração profunda
- Secreção viscosa 
- Vômitos
- Acessos sufocantes 
Próprio da intensificação repentina dos sintomas de uma 
doença.
Vômitos
Asfixia
Otite
Convulsão
Hemorragia cerebral
Hemorragia nos olhos, pele 
e mucosas
Prolapso retal
Fase convalescência 
- Diminuição dos 
sintomas
- Melhora do paciente
3 semanas a 3 meses ou mais
•Diminuição da imunidade em adolescentes e adultos previamente 
vacinados
•Pais que recusam vacinar seus filhos
Porque ela voltou a ser um problema ? 
Bordetella pertussis
Características
Cocobacilos Gram-negativos 
Bordetella pertussis
Características
Cocobacilos Gram-negativos
Aeróbia estrita 
Bordetella pertussis
Características
Cocobacilos Gram-negativos
Aeróbia estrita 
Oxidase positiva
Catalase negativa 
possui a enzima citocromo C oxidase
Presente em organismos aeróbicos 
catalisam o transporte de elétrons de 
compostos doadores (NADH) para 
aceptores de elétrons (geralmente 
oxigênio). 
Bordetella pertussis
Características
Cocobacilos Gram-negativos
Aeróbia estrita 
Oxidase positiva
Catalase negativa 
Imóveis 
O que eu vou coletar para fazer o diagnostico ?
Bordetella pertussis
Bordetella pertussis
Swab de nasofaringe 
Diagnostico 
Cocobacilos Cultura 
Bordetella pertussis
Na microbiologia 
a cultura é 
considerado o 
padrão ouro 
para diagnostico. 
A amostra deve ser encaminhada para o laboratório imediatamente em 
temperatura ambiente.
Bordetella pertussis
+ 1 bactéria fastidiosa 
O meio de cultura para amostras 
suspeitas é o meio RL (Regan-Lowe)
Bordetella pertussis
+ 1 bactéria fastidiosa 
O meio de cultura para amostras 
suspeitas é o meio RL (Regan-Lowe)
Meio seletivo para isolamento de 
Bordetella pertussis
Bordetella pertussis
Composição do meio 
Extrato de carne bovina e a digestão enzimática -> fornecem os aminoácidos e outras 
substâncias nitrogenadas complexas 
Cloreto de sódio -> mantém o equilíbrio osmótico
Sangue desfibrinado do cavalo -> fornece os nutrientes
Ácido nicotínico -> é uma vitamina ( vitamina B₃) que promove o crescimento
Carvão e amido -> neutralizam substâncias tóxicascomo ácidos graxos e peróxidos
Cefalexina -> é um antibiótico que inibe a maioria da microbiota da nasofaringe.
Bordetella pertussis
Exame 
Suspeita Coleta 
Bordetella pertussis
Ágar carvão/Regan-Lowe Semeadura por esgotamento 
Estufa
37°C
Olhar a cultura diariamente para ver o crescimento de 
colônias -> por 12 dias 
E agora ?
Identificação bioquímica
Bordetella pertussis
Cocobacilos Gram-negativos
Aeróbia estrita 
Oxidase positiva
Catalase negativa 
Imóveis 
Bordetella pertussis
Teste da catalase 
Prova da oxidase
Oxidase positiva: a cor muda para roxo escuro em 5 a 10 segundos.
Oxidase negativa: a cor não muda ou demora mais de 2 minutos.
Bordetella pertussis
Cocobacilos Gram-negativos
Aeróbia estrita 
Oxidase positiva
Catalase negativa 
Imóveis 
Bordetella pertussis
Características: Cocobacilos Gram-negativos
Catalase negativa
Oxidase positiva 
Imóvel
Aeróbio estrito 
Amostras Swab de nasofaringe 
Diagnostico: Coloração de Gram
Cultura em Ágar carvão/Regan-
Lowe
Teste da catalase (-)
Teste da oxidase (+)
Imóveis 
Infecção Coqueluche