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02/03/2022 1 PhD DISSERTATION Here is where your presentation begins Líquidos Corporais Plasma e Soro Weslei G Correa O universo dos líquidos corporais • Vários são os tipos de fluídos e a grande importância que eles têm no diagnóstico de doenças. • Vamos estudar os seguintes líquidos biológicos: CASO: • Segue nossa situação hipotética para se aproxime dos conteúdos teóricos e práticos: • O laboratório Viver Mais é bem-conceituado e considerado de referência nas cidades onde atua, atendendo as demandas do Sistema Único de Saúde (SUS), convênios médico-hospitalares e atendimentos particulares. Esse laboratório está implantando e treinando sua equipe para realizar algumas análises por meio de amostras de saliva, visto que a coleta é menos invasiva e indolor ao paciente. Ana Luíza é uma das mais novas funcionárias do laboratório e iniciou o trabalho no setor de coleta de amostras. Esse setor é um dos mais importantes, pois a integridade da amostra determinará o resultado final dos exames. CASO: • Até a obtenção do resultado final, alguns procedimentos devem ser seguidos à risca para que não haja resultados falsos negativos ou positivos. Dentro desses procedimentos estão inclusas as fases laboratoriais conhecidas como pré-analítica, analítica e pós-analítica. • Joice sofre com excesso de peso e resolveu começar a se exercitar para tentar reduzi-lo. Na academia, seu professor solicitou um atestado médico liberando-a para as atividades. Joice, então, marcou uma consulta com um médico cardiologista. Este questionou-a sobre seus hábitos alimentares, e ela relatou que come muita coisa gordurosa. 02/03/2022 2 CASO: • O médico recomendou que Joice consultasse um nutricionista para adequar sua dieta e para liberá-la para atividades físicas. O cardiologista também solicitou alguns exames específicos, o ecocardiograma, o teste de esforços e alguns exames laboratoriais como: • Perfil lipídico. • Glicemia. • Ácido úrico. • Hormônios tireoidianos TSH e T4 livre. • Os eletrólitos sódio(Na+), potássio(K+), cálcio(Ca++) e fósforo(P-). • As isoenzimas TGO e TGP. • Hemograma completo. • Exames para avaliar a coagulação, como TP e TTPA. • Dosagem de cortisol na saliva. • Joice escolheu o laboratório Viver Mais para realizar seus exames. Foi Ana Luíza quem fez a coleta de suas amostras, cabe a ela conhecer todas as fases laboratoriais e aplicar todos os procedimentos envolvidos na etapa pré-analítica. • Vamos trabalhar situações que podem acontecer em um laboratório e podem interferir no resultado final, assim como alguns tipos de coletas e análises. Juntos vamos buscar soluções para cada uma dessas situações. Introdução ao soro e plasma • A composição do sangue, o qual origina o soro e o plasma, líquidos biológicos de extrema importância no diagnóstico de doenças. Aprenderemos também a realizar uma flebotomia (coleta de sangue venoso) e os principais interferentes pré-analíticos que ocorrem no momento pré e durante esse procedimento e que interferem diretamente nos resultados dos exames. Interferentes na flebotomia • Ana Luíza é nova no laboratório e não tinha experiência anterior com coleta de amostras, então estava aprendendo ao observar seus colegas, mas por causa do grande movimento do laboratório começou a fazer as coletas de sangue venoso. Realizou uma coleta com sucesso e sua próxima paciente era Joice. Ana Luíza realizou a anamnese de Joice, porém: CASO: • Com base no relato da coleta de sangue venoso feita por Ana Luíza, responda: Quais são as implicações da anamnese incompleta para os exames solicitados? O que o garroteamento por mais de um minuto pode acarretar nos resultados laboratoriais? A ordem dos tubos utilizados por Ana Luíza está correta? A troca na ordem dos tubos pode trazer algum problema para as análises? A antissepsia foi feita de forma correta? 02/03/2022 3 conceitos: Materiais necessários para todos os tipos de coleta de sangue • A flebotomia ou coleta de sangue venoso é o método utilizado para obtenção do sangue, líquido de extrema importância no diagnóstico laboratorial. Dos materiais necessários para realização dessa prática a caneta e a etiqueta de identificação só são utilizados quando o laboratório não tem sistema de impressão digital das etiquetas, o que hoje em dia é muito difícil. Introdução ao soro e plasma Introdução ao soro e plasma • Vamos, então, entrar em contato com os líquidos biológicos soro e plasma para conseguirmos resolver a situação problema apresentada e outros casos que eventualmente podem aparecer na rotina profissional. Afinal, de onde o plasma e o soro são originados? • O sangue é um tecido conjuntivo líquido que circula pelo corpo todo, levando oxigênio e nutrientes através de um sistema fechado, compondo o sistema circulatório. Relembrando, o sistema circulatório é composto pelo coração, que bombeia o sangue através dos vasos sanguíneos (veias, artérias e capilares). 02/03/2022 4 Introdução ao soro e plasma • O tecido sanguíneo, o sangue, contém em sua composição uma parte líquida, o plasma, e uma parte sólida, composta dos elementos figurados do sangue (as células sanguíneas). O plasma (matriz extracelular) é constituído de água (mais de 90% de sua composição), sais (carbonatos, cloretos, sulfatos e outros), aminoácidos, glicose, vitaminas, hormônios, ureia, proteínas, fatores que ativam a cascata da coagulação, entre outros elementos. Já os elementos figurados do sangue compreendem os eritrócitos (hemácias, células ou glóbulos vermelhos), leucócitos (células ou glóbulos brancos) e as plaquetas. Introdução ao soro e plasma • A fase líquida, também denominada de plasma, pode ser chamada de “soro”, quando os fatores de coagulação forem consumidos logo após a coleta sanguínea sem o uso de anticoagulantes. • Como assim, o plasma e o soro têm origem no sangue, e o plasma pode ser chamado de soro? Introdução ao soro e plasma • Mas é importante ressaltar que o plasma e o soro são líquidos diferentes, ou seja, se você precisa obter o plasma de uma amostra de sangue, terá que coletar o sangue com anticoagulante. Assim como, necessitando do soro, deverá coletar o sangue sem o uso de coagulante. Podemos diferenciar a composição do soro e o plasma, no soro não há os fatores de coagulação, visto que esses foram consumidos, pois o sangue é coletado sem anticoagulante, no plasma os fatores de coagulação estão presentes e a coleta é realizada com anticoagulante. Etapas dos procedimentos de análises laboratoriais 02/03/2022 5 Etapa pré-analítica: • Dentro das fases existentes nessa etapa, cabe aos médicos a indicação adequada do exame, assim como das condições em que necessita que o paciente colha o exame. Jejum necessário, dieta, interrupção de medicação ou atividades físicas. • Cabe ao laboratório o auxílio do paciente em casos de dúvidas ou informações adicionais como horário da coleta, retirada de frascos de coleta domiciliar e sua preservação até a entrega e, o mais importante, questionar se o paciente cumpriu as exigências para realização do exame, ou seja, a anamnese deve ser completa. Geralmente, essa etapa de checagem ocorre na recepção do paciente. O paciente nesse momento também é responsável por cumprir à risca as orientações passadas, sem omitir informações pessoais e críticas relevantes para o exame. Etapa pré-analítica: • Durante a anamnese do paciente, é de extrema importância que as seguintes perguntas sejam feitas: – Faz a prática de atividades físicas? Se sim, qual foi a última vez que realizou? – É fumante? Em casos afirmativos, pode-se esperar o aumento de eritrócitos, hemoglobina, volume corpuscular médio, leucócitos entre outros parâmetros. O aumento é dependente da quantidade de cigarro que o indivíduo fuma. Etapa pré-analítica: • Durante a anamnese do paciente, é de extrema importância que as seguintes perguntas sejam feitas: – Realizou o jejum solicitado para o exame? Em caso negativo, deverá ser analisado se para o exame solicitado é necessário o jejum ou não. O jejum é muitoimportante em alguns exames, pois após se alimentar circulam na corrente sanguínea alguns elementos da alimentação e isso pode interferir no exame. A maioria dos exames necessita de 2 a 4 horas de jejum, porém para os exames de glicemia são necessárias 8 horas e para o perfil lipídico 12 horas. Etapa pré-analítica: • Durante a anamnese do paciente, é de extrema importância que as seguintes perguntas sejam feitas: – Faz alguma dieta específica? Alguns exemplos: dietas vegetarianas. Dietas ricas em gordura. Dietas ricas em proteínas. – Faz o uso de medicação de rotina? – Qual a data da última menstruação? • Essas perguntas podem ser padronizadas para cada laboratório. 02/03/2022 6 Etapa pré-analítica: FLEBOTOMIA • As etapas da coleta de sangue venoso incluem: 1. Precauções padrão e medidas de segurança durante o procedimento. 2. Selecionar os materiais que serão utilizados e preparar o paciente para punção. 3. Selecionar, preparar o local de punção, fazer o torniquete e coletar o sangue. 4. Cuidar do local da punção e verificar se o paciente está bem e pode ser liberado. CASO: • As precauções padrão e medidas de segurança durante o procedimento incluem o uso de equipamentos de proteção individual (EPI), com finalidade de proteção, higienização das mãos e cuidados para calçar as luvas, pois há o risco de contaminação do flebotomista e do paciente. Dessa forma, é obrigatório o uso de: – Avental ou jaleco cujo comprimento chegue abaixo dos joelhos, de manga longas e com o punho fechado. – Luvas descartáveis, óculos e máscara de proteção e calçados fechados. Causas Pré-analíticas de Variações dos Resultados de Exames Laboratoriais Fase Pré-analítica • Atualmente, tem se tornado comum a declaração de que a fase pré- analítica é responsável por cerca de 70% do total de erros ocorridos nos laboratórios clínicos que possuem um sistema de controle da qualidade bem estabelecido. • A fase pré-analítica inclui a indicação do exame, redação da solicitação, transmissão de eventuais instruções de preparo do paciente, avaliação do atendimento às condições prévias, procedimentos de coleta, acondicionamento, preservação e transporte da amostra biológica até o momento em que o exame seja, efetivamente, realizado. Causas Pré-analíticas de Variações dos Resultados de Exames Laboratoriais Fase Pré-analítica • Dessa forma, a fase pré-analítica se desenvolve pela seqüência de ações de um grande número de pessoas, com diferentes formações profissionais, focos de interesse e grau de envolvimento. 02/03/2022 7 Fase Pré-analítica • Variação Cronobiológica: – Corresponde às alterações cíclicas na concentração de um determinado parâmetro em função do tempo. O ciclo de variação pode ser diário, mensal, sazonal, anual etc. – Concentrações do ferro e do cortisol no soro. As coletas realizadas à tarde fornecem resultados até 50% mais baixos do que os obtidos nas amostras coletadas pela manhã. – Concentração de aldosterona é cerca de 100% mais elevada na fase pré-ovulatória do que na fase Folicular. – Em dias quentes, por exemplo, a concentração sérica das Proteínas é, significativamente, mais elevada em amostras colhidas à tarde quando comparadas às obtidas pela manhã, em razão da hemoconcentração. Fase Pré-analítica • Gênero: – Diferenças hormonais. – Diferenças metabólicas e da massa muscular. • Idade: – A dependência da idade é resultante de diversos fatores, como maturidade funcional dos órgãos e sistemas, conteúdo hídrico e massa corpora. Fase Pré-analítica • Atividade Física: – O efeito da atividade física sobre alguns componentes sanguíneos, em geral, é transitório e decorre da mobilização de água e outras substâncias entre os diferentes compartimentos corporais, das variações nas necessidades energéticas do metabolismo e na eventual modificação fisiológica que a própria atividade física condiciona. Fase Pré-analítica • Jejum: – Habitualmente, é preconizado um período de jejum para a coleta de sangue para exames laboratoriais. Os estados pós-prandiais, em geral, se acompanham de turbidez do soro, o que pode interferir em algumas metodologias. Na população pediátrica e de idosos, o tempo de jejum deve guardar relação com os intervalos de alimentação. Devem ser evitadas coletas de sangue após períodos muito prolongados de jejum – acima de 16 horas. O período de jejum habitual para a coleta de rotina de sangue é de 8 horas, podendo ser reduzido a 4 horas, para a maioria dos exames e, em situações especiais, tratando-se de crianças de baixa idade, pode ser de 1 ou 2 horas apenas. 02/03/2022 8 Fase Pré-analítica • Uso de Fármacos: • Tipo de Amostra: Fase Pré-analítica • Principais Erros nesta Fase: – Amostra insuficiente; – Amostra incorreta; – Amostra inadequada; – Identificação incorreta; – Problemas no acondicionamento e transporte da amostra. Fase Pré-analítica • Procedimentos Básicos para Minimizar Ocorrências de Erro: – O flebotomista deve se assegurar de que a amostra será colhida do paciente especificado na requisição de exames. – Pedir que forneça nome completo, número da identidade, ou data de nascimento. – Recomenda-se que materiais não colhidos no laboratório sejam identificados como “amostra enviada ao laboratório”, e o laudo contenha essa informação. Fase Pré-analítica 02/03/2022 9 • Procedimentos Básicos para Minimizar Ocorrências de Erro: – Para obtenção de soro, o sangue é colhido em tubo sem anticoagulante e deixado coagular por um período de 30 a 60 minutos, à temperatura ambiente. Quando o tubo contiver gel separador, com ativador da coagulação, a espera pode ser de 30 a 45 minutos. – Dentre muitos outras recomendações ... Fase Pré-analítica COLETA SANGUÍNEA TIPOS DE PUNÇÕES CAPILAR VENOSA ARTERIAL COLETA DE SANGUE • FORMAS DE COLETA: – Agulha e seringa estéreis e descartáveis. – Lanceta estéril e descartável. – Coleta a vácuo. TIPOS DE COLETA COLETA A VÁCUO COLETA COM SERINGAS 02/03/2022 10 TIPOS DE COLETA COLETA COM SERINGAS COLETA COM ESCALPE COLETA SANGUÍNEA Principais sítios de punção venosa braquial: 1. Veia cubital média, 2. Veia basílica; 3. Veia cefálica; 4. Veia cefálica acessória. COLETA DE SANGUE VENOSO • Escolha da veia: • O local de preferência para as venopunções é a fossa antecubital, na área anterior do braço em frente e abaixo do cotovelo. 02/03/2022 11 COLETA DE SANGUE VENOSO • Coleta: • Hemólise tem sido definida como a “liberação dos constituintes intracelulares para o plasma ou soro”, quando ocorre a ruptura das células do sangue, o que pode interferir nos resultados de alguns analitos. COLETA DE SANGUE VENOSO • Coleta: • Lipemia: Presença de lipídeos no sangue, alterando a dosagem de analitos ou até mesmo impedindo a realização do exame. Centrifugação: • Os tubos não devem passar por um segundo processo de centrifugação após a formação da barreira. As barreiras têm maior estabilidade quando os tubos são centrifugados em centrífugas horizontais (caçamba de ângulo móvel), do que em centrífugas de ângulo fixo. COLETA DE SANGUE VENOSO • Coleta: • Sequência de coleta para tubos plásticos de coleta de sangue: 1) Frascos para hemocultura. 2) Tubos com citrato (tampa azul-claro). 3) Tubos para soro com ativador de coágulo, com ou sem gel separador (tampa vermelha ou amarela). 4) Tubos com heparina com ou sem gel separador de plasma (tampa verde). 5) Tubos com EDTA (tampa roxa). 6) Tubos com fluoreto (tampa cinza). 02/03/2022 12 COLETA DE SANGUE VENOSO • Sequência de coleta para tubos de vidro de coleta de sangue : 1) Frascos para hemocultura. 2) Tubos para soro vidro-siliconizados (tampa vermelha). 3) Tubos com citrato (tampa azul-claro). 4) Tubos para soro com ativador de coágulo com gel separador (tampa amarela). 5) Tubos com heparina com ou sem gel separador de plasma (tampa verde). 6) Tubos com EDTA (tampa roxa). 7) Tubos com fluoreto (tampa cinza). COLETA DE SANGUE VENOSO COLETA DE SANGUE VENOSO https://www.youtube.com/watch?v=QKn-V_-tx3YHomogeneização https://www.youtube.com/watch?v=QKn-V_-tx3Y 02/03/2022 13 • Procedimentos de Coleta de Sangue a Vácuo: 1) Verificar se a cabine da coleta está limpa e guarnecida para iniciar as coletas. 2) Solicitar ao paciente que diga seu nome completo para confirmação do pedido médico e etiquetas. 3) Conferir e ordenar todo o material a ser usado no paciente, de acordo com o pedido médico (tubo, gaze, torniquete etc.). Essa identificação dos tubos deve ser feita na frente do paciente. 4) Informar ao paciente como será o procedimento. 5) Abrir o lacre da agulha de coleta múltipla de sangue a vácuo em frente ao paciente. 6) Rosquear a agulha no adaptador do sistema a vácuo. 7) Higienizar as mãos. 8) Calçar as luvas. 9) Posicionar o braço do paciente, inclinando-o para baixo na altura do ombro. 10) Se o torniquete for usado para seleção preliminar da veia, pedir para que o paciente abra e feche a mão; em seguida, afrouxar o instrumento e esperar 2 minutos para utilizá-lo novamente. 11) Fazer a anti-sepsia. 12) Garrotear o braço do paciente. 13) Retirar a proteção que recobre a agulha de coleta múltipla de sangue a vácuo. 14) Fazer a punção numa angulação oblíqua de 30º, com o bisel da agulha voltado para cima. Se necessário, para melhor visualizar a veia, esticar a pele com a outra mão (longe do local onde foi feita a antissepsia). 14) Inserir o primeiro tubo a vácuo. 15) Quando o sangue começar a fluir para dentro do tubo, desgarrotear o braço do paciente e pedir para que abra a mão. 16) Realizar a troca dos tubos sucessivamente. 17) Homogeneizar imediatamente após a retirada de cada tubo, invertendo-o suavemente de 5 a 10 vezes. 18) Após a retirada do último tubo, remover a agulha e fazer a compressão no local da punção, com algodão ou gaze secos. 19) Exercer pressão no local, em geral, de 1 a 2 minutos, evitando-se, assim, a formação de hematomas e sangramentos. Se o paciente estiver em condições de fazê-lo, orientá-lo adequadamente para que faça a pressão até que o orifício da punção pare de sangrar. • Angulação: 30º 02/03/2022 14 COLETA COLETA COLETA COLETA 02/03/2022 15 COLETA DE SANGUE • Tubos com vácuo: – VERMELHO – Sem anticoagulante. – Obtenção de soro para bioquímica e sorologia. – Exemplo de testes: • Creatinina • Glicose* • Uréia • Colesterol • Hormonios • Pesquisa e identificação de anticorpos e ou antígenos no soro. COLETA DE SANGUE • Tubos com vácuo: – LAVANDA – Com anticoagulante EDTA sódico ou potássico – EDTA liga-se aos íons cálcio, bloqueando assim a cascata de coagulação – Obtém-se assim o sangue total para hematologia – Testes: • Eritrograma • Leucograma • Plaquetas • VHS COLETA DE SANGUE • Tubos com vácuo: – VERDE – Paredes internas revestidas com heparina. – Produção de uma amostra de sangue total. – Estabilização por até 48 horas. – Testes bioquímicos específicos: • Análises de chumbo, sódio, potássio e gasometria. COLETA DE SANGUE • Tubos com vácuo: – AZUL – Contém citrato de sódio – Anticoagulante utilizado para a obtenção de plasma para provas de coagulação, O plasma (obtido após centrifugação do tubo) é utilizado para exames de coagulação, como os exames de: • Tempo de Trombina (TT), • Tempo de Tromboplastina Parcial Ativada (TTPA), • Tempo e Atividade Protrombínica (TP/TP-AP), • Proteína C funcional, proteína S e fibrinogênio 02/03/2022 16 COLETA DE SANGUE • Tubos com vácuo: – PRETO – Os tubos para VHS – Contêm solução tamponada de citrato trissódico – Utilizados para coleta e transporte de sangue venoso para o teste de sedimentação. COLETA DE SANGUE • Tubos com vácuo: – AMARELO – Tubos para tipagem sangüínea – Com solução de ACD (ácido citrato dextrose) – Utilizados para teste de tipagem sangüínea ou preservação celular COLETA DE SANGUE • Tubos com vácuo: – CINZA – Tubos para glicemia – Contêm um anticoagulante e um estabilizador, em diferentes versões: • EDTA e fluoreto de sódio • oxalato de potássio e fluoreto de sódio • heparina sódica e fluoreto de sódio • heparina lítica e iodoacetato – Ocorre inibição da glicólise para determinação da taxa de glicose sanguínea COLETA DE SANGUE • Tubos com vácuo: – ROSA – Tubos para provas de compatibilidade cruzada – Duas versões: • Com ativador de coágulo » Provas cruzadas com soro. • Com EDTA » Testes com sangue total. 02/03/2022 17 COLETA DE SANGUE • Tubos com vácuo: – ROYAL – Três versões: • Sem aditivo • Com heparina sódica • Com ativador de coágulo – Utilizados para testar traços de elementos metálicos, como: Cu, Zn, Pb, etc. Para próxima aula: Problematizações • A anamnese incompleta pode interferir diretamente no resultado do paciente. No caso, a flebotomista Ana Luíza não questionou se a paciente Joice praticava exercícios físicos e quando fora a última prática. A prática de exercícios físicos, como vimos, pode aumentar a contagem dos leucócitos, causando uma pseudo- neutrofilia, aumento de creatinoquinase, lactato, creatinina, ácido úrico e diminuição de albumina. Pesquise outros exames em que a prática de exercícios físicos interfere. O ideal é que a pessoa esteja a 24 horas sem a prática. Além disso, não foi questionado sobre a dieta, sabemos que o tipo de dieta pode interferir em alguns tipos de análise, pois uma dieta rica em proteínas pode aumentar os níveis de amônia, ureia e ácido úrico, assim como a dieta rica em gordura pode aumentar os níveis de triglicérides. 02/03/2022 18 Para próxima aula: Problematizações • O garroteamento por mais de 1 minuto pode acarretar em hemólise da amostra ou na sua hemoconcentração. Pesquise o que a hemólise e a hemoconcentração significam e se a amostra poderá ser utilizada. Para próxima aula: Problematizações • A ordem dos tubos utilizados não está correta, visto que coletou um roxo, • dois vermelhos e dois azuis, e o correto, de acordo com a CLSI, seria diferente. Qual seria a ordem correta? FIM DO SLIDE ACHO BOM TU BATER PALMAS E NÃO FAZER PERGUNTAS
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