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Métodos de Diagnostico em Ornitopatologia Objetivo Determinação da etiologia da infecção em casos suspeitos Demonstração do status “livre de infecção” em determinada população Determinação da prevalência da infecção em determinada população Determinação da resposta imune de aves individuais ou de populações (resposta vacinal) Causas de enfermidade em aves Agentes infecciosos (mais comum) Agentes tóxicos: muito presente microtoxinas nas raçoes Deficiências nutricionais Neoplasias: pode ser causada por agente infeccioso Traumas Má-formação: geralmente de origem genética ou problemas relacionados no manejo do incubatório Enfermidades autoimunes Manejo deficiente Anamnese Aves e instalações Tipos de criação (espécie, linhagem) Idade Ganho de peso/produção de ovos Eclodibilidade/mortalidade embrionária Consumo de água e ração Instalações/equipamentos Manejo (água, ração, ambiente) Vacinação Medicação Enfermidade: Sinais clínicos: observação no local Velocidade de propagação Morbidade (porcentagem de aves /mortalidade (porcentagem de aves mortas em relação da população total)/letalidade (porcentagem de aves em relação as aves doentes) Curso Material utilizado para diagnostico Aves vivas ou mortas Tecidos Lâminas com “impressão” ou “esfregaço” Suabes Sangue/soro Fezes Ração/água/ovos Em que situação cada tipo de amostra deve ser colhida? Estágio da infecção (soro ou tecido?) Estado de portador Via de eliminação Tamanho do lote Objetivo: prevalência, determinação da presença do agente no lote, monitorização vacinal, diagnostico em animais individuais? Problemas no envio de amostras Quantidade/qualidade de gelo insuficiente Atrasos na entrega Envio de material próximo a finais de semana ou feriados Proporção de conservante/fixados inadequada Material inadequado para análise (soro hemolisado ou contaminado) Exames laboratoriais Exames sorológicos: exame de laboratório efetuado para comprovar a presença de anticorpos e antígenos no sangue. Também pode ser usado para identificar a presença (ou revelar a ausência) de anticorpos e antígenos relacionados a um patógeno no sangue do paciente e a presença do próprio patógeno (vírus, bactéria, protozoário, etc). Hematologia/bioquímica sérica ↪Hematologia: elementos figurados do sangue, tais como hemácias (glóbulos vermelhos), leucócitos (glóbulos brancos) e plaquetas. Estuda, também, a produção desses elementos e os órgãos onde eles são produzidos (órgãos hematopoiéticos - medula óssea, baço e linfonodos) Isolamento e identificação de vírus/bactérias/fungos Isolamento e pesquisa de protozoários Pesquisa de endo/ectoparasitos Exame histopatológico/citológico: ↪Histopatológico: é o exame de tecidos, órgãos e estruturas com a finalidade de investigar doenças. ↪Citopatológico: avaliação morfológica celular a caráter de exame complementar e determinante para a detecção. Microscopia eletrônica Detecção de antígenos: para detectar no tecido utiliza imuno-histoquímica ↪Imuno-histoquímica: é um método de localização de antígenos em tecidos, explorando o princípio da ligação específica de anticorpos a antígenos no tecido biológico. Detecção de toxinas: o teste mais utilizado é a cromatografia Amplificação e detecção de DNA/RNA Testes Sorológicos Soroaglutinação: as reações de aglutinação são reações de floculação celular em que o antígeno é constituído por suspensão homogênea de células. Estas células podem ser bactérias, hemácias etc., que normalmente são vistas no microscópio, mas quando aglutinadas, elas formam flocos que são aglomerados visíveis a olho nu. Um dos requisitos essenciais para se proceder a reação de aglutinação é que se possua uma suspensão celular estável. A reação se verifica somente com antígenos que estão situados na superfície celular. Inibição da hemaglutinação Ensaio imunoenzimatico indireto – ELISA: pode ser utilizado para detectar e mensurar tanto anticorpos como antígenos
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