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UNIVERSIDADE CRUZEIRO DO SUL Curso de Graduação de Biomedicina 4 E RELATÓRIO DA PRÁTICA: TÉCNICAS DE SEMEADURA DE BACTÉRIAS EM MEIOS DE CULTURA Microbiologia Básica CYNTHIA MORAIS MARTINS RGM:23185767 JHULIA SIMÕES RINALDI RGM:23242035 MARCELLA PEREIRA GONÇALVES RGM:23508655 MILENE PEREIRA ROCHA RGM:23277505 CAMPUS SÃO MIGUEL PAULISTA – MANHÃ 2021 Técnicas de semeadura de bactérias em meios de cultura Objetivo Como realizar as técnicas de semeadura de bactérias em meio de cultura, conhecer quais são e qual sua finalidade. Materiais: • Meio de Cultura Sólido (Placa de Petri com Agar) • Meio de Cultura Líquido • Tubo com Meio de Cultura • Alça Bacteriológica • Bico de Bunsen • Bactéria • Swab Técnicas de Semeadura: 1- Estrias de Diluição (semeadura por esgotamento) 2- Em Tubo (estoque) 3- Semeadura em Meio Líquido (estoque) 4- Semeadura com Swab (Técnica de Antibiograma) Procedimentos: 1- Estrias de Diluição - Acender o Bico de Bunsen (todos os procedimentos deverão ser realizados perto do fogo para manter o ambiente estéril); - Esterilizar a alça bacteriológica deixando uns segundos no fogo; - Pegar um pouco da bactéria na Placa de Petri; - Abrir a Placa de Petri ainda não utilizada e passar a alça, em uma posição que ela fique deitada, gentilmente por toda a superfície, fazendo o primeiro movimento de zigue-zague da parte de cima da Placa até um pouco antes da metade; - Esterilizar a alça bacteriológica e fazer um segundo movimento, agora puxando um pouco da última linha do primeiro movimento, formando um zigue-zague até metade do espaço restante; - Esterilizar a alça bacteriológica novamente e fazer um terceiro movimento, agora puxando um pouco da última linha do segundo movimento, formando um zigue-zague até completar o espaço restante; - Esterilizar a alça bacteriológica, fechar a Placa de Petri e aguardar o crescimento. 2- Em Tubo - Esterilizar a alça bacteriológica deixando uns segundos no fogo; - Pegar um pouco da bactéria na Placa de Petri; - Pegar o tubo com o Agar, apoiar nos dedos e abrir a tampa (não encostar na bancada pois está estéril); - Levar o bocal do tubo alguns segundos ao fogo para esterilizar; - Pegar a alça e passar somente a parte onde contém a bactéria e está esterilizada no Agar da lateral do tubo; - Fazer movimentos de zigue-zague por toda a superfície; - Retirar a alça de dentro do tubo, passar o bocal no fogo alguns segundos novamente para esterilizar e fechar o tubo; - Esterilizar a alça e aguardar o crescimento. 3- Semeadura em Meio Líquido - Esterilizar a alça bacteriológica deixando uns segundos no fogo; - Pegar um pouco da bactéria na Placa de Petri; - Pegar o tubo com o meio de cultura líquido, apoiar nos dedos e abrir a tampa (não encostar na bancada pois está estéril); - Levar o bocal do tubo alguns segundos ao fogo para esterilizar; - Pegar a alça e passar somente a parte onde contém a bactéria e está esterilizada no líquido do tubo, passar nas laterais também; - Retirar a alça de dentro do tubo, passar o bocal no fogo alguns segundos novamente para esterilizar e fechar o tubo; - Esterilizar a alça, guardar e aguardar o crescimento. 4- Semeadura com Swab - Pegar um Swab com embalagem estéril, abrir onde tem a ponta de plástico e pegá-lo; - Pegar o tubo com o meio de cultura líquido, apoiar nos dedos e abrir a tampa (não encostar na bancada pois está estéril); - Levar o bocal do tubo alguns segundos ao fogo para esterilizar; - Colocar o Swab com cuidado dentro do tubo, molhar no líquido, levantar ainda dentro e girar para retirar o excesso; - Retirar o Swab de dentro do tubo, passar o bocal no fogo alguns segundos novamente para esterilizar e fechar o tubo; - Pegar uma Placa de Petri ainda não utilizada, abri-la, e passar o Swab gentilmente fazendo uma linha que divida a Placa em duas (sem cortar o Agar); - Fazer movimento de zigue-zague de forma que cubra toda a Placa, de cima para baixo; - Fazer o movimento da direita para a esquerda; - Fazer o movimento debaixo para cima; - Fazer o movimento em volta da Placa, circulando; - Fechar a Placa de Petri e aguardar o crescimento; - Colocar o Swab de volta em sua embalagem, ou jogá-lo direto em lixo específico para contaminantes (cor branca).
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