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SEMANA 2 - Sistema CRISPR-Cas9 Encaminhe uma resenha com o funcionamento do Sistema CRISPR-Cas9, incluindo os tipos possíveis de reparo no DNA. Em 1987 foi descoberto o CRISPR, que significa clustered regularly interspaced short palindromic repeats, uma técnica de edição gênica. Essa descoberta foi possível por meio de algumas análises feitas no genoma de bactérias Escherichia coli (bactéria presente na microbiota intestinal) mas depois de algum tempo foi possível observar a presença de CRISPR em várias bactérias, e seu efeito na regulação de genes ou no reparo do DNA. Depois de um tempo esse sistema proporcionou mudanças na área da medicina, biotecnologia e biologia molecular devido o interesse de diversos cientistas, após a primeira aplicação da tecnologia ser bem sucedida. Essa primeira aplicação ocorreu em modificações genéticas de mamíferos. Com o passar dos anos apareceu um outro sistema de modificação do material genético utilizando uma sequência de RNA para auxiliar a nuclease Cas-9 encontrar a sequência de DNA que será clivada, sendo esse o complexo CRISPR-Cas9. Esse complexo pode ser definido como um mecanismo do sistema imune de arqueobactérias e bactérias contra agentes invasores como por exemplo plasmídeos de DNA e bacteriófagos. Depois de ser descoberto e modificado, se tornou uma importante ferramenta para a pesquisa genômica. O sistema CRISPR-Cas9 é composto pelo Cas9 que é uma proteína que vai clivar o DNA e pelo RNA guia que é uma molécula de RNA que juntos conseguem identificar e cortar algumas seções especificas de DNA. Quanto ao funcionamento, esse complexo atua ao detectar um DNA viral, ele localiza e se fixa em uma sequência no genoma que se chama PAM, assim que isso acontece o RNA guia desenrola uma parte da dupla hélice. Uma cadeia de RNA é preparada para ligar com uma sequência particular no DNA, quando isso acontece o Cas9 pode clivar o DNA, cada um dos seus dois domínios de nuclease faz um corte o que resulta em um corte de cadeia dupla. Com isso a célula tenta reparar essa clivagem que aconteceu mas pode ter alguns erros como a desativação do gene e por este motivo o CRISPR-Cas9 é uma ótima opção para apagar genes específicos. Com as diversas funções desse complexo, existe a possibilidade de modificar as informações genéticas de várias espécies, como por exemplo possibilita a capacidade de corrigir mutações genéticas que causam doenças hereditárias, sem alterar outros genes como por exemplo: fibrose cística, hemoglobinopatias e imunodeficiências. Outra possibilidade é realizar a técnica para combater uma infecção ocasionada por um vírus que ficam latentes no organismo ou agregado ao DNA do hospedeiro. Referencias: BARBOZA, Caroline Mota Souza et al. A técnica de CRISPR-Cas9 na terapia gênica: uma revisão da literatura. Revista Transformar, v. 14, n. 1, p. 562-698, 2020. Disponível em: http://www.fsj.edu.br/transformar/index.php/transformar/article/view/348. Acesso em: 15/08/2022. GONZAGA, GISDENILTON CARLOS; RAMOS, CAROLINE. Técnica CRISPR-Cas9 e sua utilização na Área Laboratorial. 2018. Disponível em: https://www.mastereditora.com.br/periodico/20190103_214255.pdf. Acesso em: 15/08/2022. http://www.fsj.edu.br/transformar/index.php/transformar/article/view/348 https://www.mastereditora.com.br/periodico/20190103_214255.pdf