Auxiliar Veterinario Leishmaniose

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Leishmaniose
Ramon Cassini Pautilho Praça
CRMV-MG 10230
ramoncassini@hotmail.com
História
Cerâmicas peruanas e equatorianas datadas de 400 a 900 d.C. já mostravam pessoas com deformidade em face (nariz e lábios)
Introdução
Ordem Kinetoplastidae
 Gênero Leishmania
Ampla distribuição geográfica
Zoonose e protozoonose
Leishmaniose Tegumentar
Leishmaniose Visceral
Leishmaniose Visceral Canina
Protozoário 
 Leishmania donovani
 Leishmania Chagasi
Vetor
Flebotomíneo
 Lutzomyia longipalpis
Mosquito Palha, Birigui, asa branca, cangalhilha
Reproduzem em locais terrestres úmidos:
 Pedras
 Folhas
 Solo
Normalmente não voam muito
 (aproximadamente 100m)
Tempo de vida de aprox. 20 dias
Ciclo no Vetor
Ciclo no Vertebrado
Meios de Infecção
Sintomas
Cães:
Febre Onicogrifose
Descamação cutânea Diarréias (Melena) 
Pelo opaco Hematoquesia
Ulcerações Caquexia
Hepato e esplenomelalias Inanição
Alopecias Óbito
No ser humano
Acomete principalmente crianças e imunossuprimidos
Caso ocorra a contração da doença: sinais principalmente sistêmicos
Diagnóstico
Aspectos clínicos
Laboratoriais
Testes sorológicos
Teste parasitológicos
LVC
Diagnóstico
Sorologia
ELISA
RIFI
TESTE RÁPIDO
PARASITOLÓGICO
Citologia
IHQ
Cultura
Molecular
PCR
PCR RT
Sorologia
Feito através do soro
Teste rápido (Qualitativo)
Rifi + Elisa (Quantitativo) 
	“Você é linda, mais que de mais
Você é linda sim
	Onda do mar do amor
Que bateu em mim” 
 (Caetano Veloso)
	“Tem sessenta de cintura
Que gostosura
105 de bundinha
Que bonitinha
1,70 de altura
Ninguém segura” 
 (É O Tchan)
Teste rápido
Usado para diagnostico em massa
Rápido e pratico
Cut-off 1/80
Sensível e bastante útil ?
Teste rápido
Janela Teste
Poço 2ª Solução tampão
Poço 1ª Amostra + Solução Tampão
ID
Teste rápido
G. Grimaldi Jr et al. 2012
Rifi + Elisa
Avaliação quantitativa de anticorpos (diluição total)
Marcadores de doença
Elisa
Leitura de densidade óptica
Rifi
Titulação máxima
O governo não esta disponibilizando o uso do reagente Elisa.
Para Elisa está sendo feito o DPP (Teste rápido)
Para melhor segurança é necessário o uso do Rifi Diluição total
Não se fecha um resultado de leish. somete com exames sorológicos*
Europa x Américas
ELISA + RIFI  1/40 e 1/80 resultados duvidosos*;
Alguns casos  confirmatório de infecção/doença
Sorologia
E.C. Ferreira et al. / Veterinary Parasitology 146 (2007) 235–241
Sorologia
LVC
Diagnóstico
Sorologia
ELISA
RIFI
TESTE RÁPIDO
PARASITOLÓGICO
Citologia
IHQ
Cultura
Molecular
PCR
PCR RT
Parasitológico
Punção de medula óssea ou linfonodo
Raspados de bordas de ulceras
Biopsia pele
A função do exame parasitologico é achar o parasito
Não é possivel da falso positivo.
Pode ocorrer falso negativo
LVC
Diagnóstico
Sorologia
ELISA
RIFI
TESTE RÁPIDO
Molecular
PCR
PCR RT
PARASITOLÓGICO
Citologia
IHQ
Cultura
Molecular
Procura o parasito através do seu DNA
Não é possível dar falso positivo
Exame muito caro
Somente para confirmação final
Solano-Gallego et al. Parasites & Vectors 2011, 4:86
Paciente
Anima com sinais clínicos
Consulta devido a problemas de pele
Paciente
Animal visualmente normal
Sintmas: 
epistaxe
Paciente
Exame prefeitura positivo
Sem sinais clinicos
Discussão
Matar cão resolve?
Não Reposição:
41% medo da doença
 falta de espaço
não gosta de animal
 falta de oportunidade
animal reposto já havia morrido (10%).
Resultado:
45% da população canina em um ano havia sido reposta;
31.793 em 2004 - 14.307 Desconsiderando os reposto que já haviam morrido ou prop. que estava à procura de outro animal.
19% foram repostos com mais um animal de mesma espécie (19.743 animais).
Conclusão do Autor:
“A não privação do direito dos ex-proprietários de adquirirem novos cães compromete a eficácia da eutanásia como medida de controle”
Modelo Dye: reposição influência negativa-mente o controle pela eutanásia;
Moreira Jr. et al. em Jequié - BA
 
Serviço da zoonose
Saneamento ambiental
Controle da população canina errante
Vacinas anti-leishmaniose
Uso de telas em canis individuais ou coletivos
Coleira impregnada com deltrametrina
Eutanasia de aniamais soropositivos
 Fonte: Manual de Vigilância e Controle da Leishmaniose Visceral
O que é proibido ou não!
Tratar leishmaniose com medicamentos humanos
Proibir o trabalho da zoonose
Caso não libere a zoonose coletar exame, entregar exame negativo
Existe tratamento para leishmaniose?
O que você entende por cura?
Cura sintomática
Cura transmissiva
Cura parasitária
Custo elevado
Sinais clínicos do animal
Disposição do proprietário...
Custo Básico
Inicial: exames: R$447,00
 vacinas: R$540,00
 medicamentos: R$300,00
Semestralmente:exames: R$447,00
 vacinas: R$180,00
 medicamentos: R$300,00
#FLW
20/8/2014 VeterLab
http://www.veterlab.com.br/telainicial.php# 1/2
TESTE SO RO LÓ GICO DE LEISHMANIO SE VISCERAL CANINA (LVC)
 
MÉTO DO 
Reação De Imunofluorescência Indireta - RIFI ( IMUNO DO T - partida 034) 
 Registro: MAPA Licença 9658/12 
RESULTADO RIFI
 REAGENTE 1/320
 
 VALORES DE REFERÊNCIAS
 
1. REAGENTE: Aquele que possua título igual ou superior a ponto de corte que é a diluição de 1:40 (RIFI) 
2. INDETERMINADO: Valores limites que os testes não foram capazes de determinar como reagente. RECOMENDA-SE UMA NOVA COLETA APÓS 30 DIAS DO
ULTIMO EXAME.
3. NÃO REAGENTE: Sem títulos de anticorpos. 
 Tecnicas Diagnosticas adcionais poderão ser utilizadas, mas para efeito da SAÚDE PUBLICA serão aceitas somente Teste rapido K28 PLATAFORMA DUPLA com
sensibilidade > = 90% para triagem e Teste ELISA com sensibilidade e especificidade igual ou superior a 90% para confirmação.
 Obrigado Deus!
Dr. Ricardo Afonso Ferreira Campos
Médico Veterinário - Diretor Técnico
CRMV – 3865
Nome: Bonifacio Registro: 51610
Requerente: Animal Clinica e Estetica Veterinaria
Data: 12/02/2014 Impressão: 09:44 - 20/08/2014
Proprietário: Afonso Timao Simplicio Veterinário(a): Dra. Clara Bandeira Silva Mendes
Raça: Boxer Espécie: Canina
DN/Idade: Sexo: Macho
Endereço:
20/8/2014 VeterLab
http://www.veterlab.com.br/telainicial.php# 2/2
Rua Jequitibás, nº 255 - Bairro Eldorado - Contagem - MG
Contatos: (31) 3356-3935 - (31) 3383-3705 - www.veterlab.com.br - veterlab@veterlab.com.br
20/8/2014 VeterLab
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TESTE SO RO LÓ GICO DE LEISHMANIO SE VISCERAL CANINA (LVC)
 
METO DO S
TR DPP Leishmaniose visceral ( Bio-Manguinhos - partida 134TV011Z) 
Registro: MAPA Licença n.º 9591/11 
Ensaio Imunoenzimático – ELISA ( Biogene - lote 05/13)
Registro: MAPA Licença n.º 7434/00
RESULTADO DPP
 
 REAGENTE
 
RESULTADO ELISA
 
 REAGENTE
 
 
VALORES DE REFERÊNCIAS
 
1. REAGENTE: Aquele que possua título acima da linha do corte recomendado pelo fabricante do KIT de ELISA;
2. INDETERMINADO:Valores limites que os testes não foram capazes de determinar como reagente ( ELISA). RECOMENDA-SE UMA NOVA COLETA APÓS 30 DIAS
DO ULTIMO EXAME. 
3. NÃO REAGENTE: Sem títulos de anticorpos. 
 
As duas técnicas sorológicas (DPP e ELISA) são recomendadas pelo Ministério da Saúde para o diagnóstico da LVC. Em caso de divergência entre as duas técnicas,
considera-se o ELISA como confirmatório. Tecnicas Diagnosticas adcionais poderão ser utilizadas, mas para efeito da SAÚDE PUBLICA serão aceitas somente Teste
rapido K28 PLATAFORMA DUPLA com sensibilidade > = 90% para triagem e Teste ELISA com sensibilidade e especificidade igual ou superior a 90% para confirmação.
"O TR-DPP Bio-Manguinhos é um teste distribuído pelo Ministério da Saúde à Rede de laboratórios de diagnóstico da leishmaniose Visceral Canina de Minas
Gerais (Resolução SES/MG Nº 3.709, de 17 de abril de 2013). Portanto, o laboratório deverá cobrar somente pelos custos operacionais envolvidos na execução
deste exame".
* CONFORME ACORDO (FUNED/IOM/SES-MG/CRMV-MG/SVS – MS)
Obrigado, Deus!!
Dr. Ricardo Afonso Ferreira Campos
Médico Veterinário - Diretor Técnico
CRMV – 3865
Rua Jequitibás, nº 255 - Bairro Eldorado - Contagem - MG
Contatos: (31) 3356-3935 - (31) 3383-3705 - www.veterlab.com.br - veterlab@veterlab.com.br
Nome: Thyzu Registro: 61375
Requerente: Animal Clinica e Estetica Veterinaria
Data: 12/05/2014 Impressão: 09:42 - 20/08/2014
Proprietário: Marlene Leal dos Reis Veterinário(a): Dra. Clara Bandeira Silva Mendes
Raça: Labrador Espécie: Canina
DN/Idade: Sexo: Macho
Endereço:
20/8/2014 VeterLab
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20/8/2014 VeterLab
http://www.veterlab.com.br/telainicial.php# 1/1
EXAME: Citologia
 
 
RESULTADO:
 
 
Material enviado: Citologia aspirativa de medula óssea.
 
Achados Citológicos:
Esfregaços normocelulares apresentando inúmeras estruturas com morfologia compatível com formas
amastigotas de Leishmania sp no interior de macrófagos e livres. 
 
 
Comentário: Quadro compatível com Leishmaniose Visceral Canina. Sugere-se a realização de outros
exames para confirmação do resultado.
 
Patologista responsável: TAISMARA SIMAS DE OLIVEIRA CRMV-MG 7476
 
Dr. Ricardo Afonso Ferreira Campos
Médico Veterinário - Diretor Técnico
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Nome: Nina Registro: 59482
Requerente: Animal Clinica e Estetica Veterinaria
Data: 21/03/2014 Impressão: 10:07 - 20/08/2014
Proprietário: Patricia Lisboa Veterinário(a): Dr. Ramon Cassini P. Praça
Raça: Akita Espécie: Canina
DN/Idade: Sexo: Fêmea
Endereço:
20/8/2014 VeterLab
http://www.veterlab.com.br/telainicial.php# 1/1
 
Amostra Biológica: Fragmentos de tecido em formalina a 10 %
Exame: Imuno-histoquímica Leishmania sp.
 
Resultado
 
 POSITIVO
 
Dr. Ricardo Afonso Ferreira Campos
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Requerente: Animal Clinica e Estetica Veterinaria
Data: 21/03/2014 Impressão: 10:07 - 20/08/2014
Proprietário: Patricia Lisboa Veterinário(a): Dr. Ramon Cassini P. Praça
Raça: Akita Espécie: Canina
DN/Idade: Sexo: Fêmea
Endereço:
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TESTE SO RO LÓ GICO DE LEISHMANIO SE VISCERAL CANINA (LVC)
 
MÉTO DO 
Reação De Imunofluorescência Indireta - RIFI ( IMUNO DO T - partida 034) 
 Registro: MAPA Licença 9658/12 
RESULTADO RIFI
REAGENTE 1/160
 
 VALORES DE REFERÊNCIAS
 
1. REAGENTE: Aquele que possua título igual ou superior a ponto de corte que é a diluição de 1:40 (RIFI) 
2. INDETERMINADO: Valores limites que os testes não foram capazes de determinar como reagente. RECOMENDA-SE UMA NOVA COLETA APÓS 30 DIAS DO
ULTIMO EXAME.
3. NÃO REAGENTE: Sem títulos de anticorpos. 
 Tecnicas Diagnosticas adcionais poderão ser utilizadas, mas para efeito da SAÚDE PUBLICA serão aceitas somente Teste rapido K28 PLATAFORMA DUPLA com
sensibilidade > = 90% para triagem e Teste ELISA com sensibilidade e especificidade igual ou superior a 90% para confirmação.
 Obrigado Deus!
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Nome: Nina Registro: 59482
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Data: 21/03/2014 Impressão: 11:21 - 20/08/2014
Proprietário: Patricia Lisboa Veterinário(a): Dr. Ramon Cassini P. Praça
Raça: Akita Espécie: Canina
DN/Idade: Sexo: Fêmea
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EXAME: Citologia
 
 
RESULTADO:
 
 
Material enviado: Citologia aspirativa de medula óssea.
 
Achados Citológicos:
Esfregaços normocelulares apresentando inúmeras estruturas com morfologia compatível com formas
amastigotas de Leishmania sp no interior de macrófagos e livres. 
 
 
Comentário: Quadro compatível com Leishmaniose Visceral Canina. Sugere-se a realização de outros
exames para confirmação do resultado.
 
Patologista responsável: TAISMARA SIMAS DE OLIVEIRA CRMV-MG 7476
 
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Data: 21/03/2014 Impressão: 10:07 - 20/08/2014
Proprietário: Patricia Lisboa Veterinário(a): Dr. Ramon Cassini P. Praça
Raça: Akita Espécie: Canina
DN/Idade: Sexo: Fêmea
Endereço:
20/8/2014 VeterLab
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Amostra Biológica: Fragmentos de tecido em formalina a 10 %
Exame: Imuno-histoquímica Leishmania sp.
 
Resultado
 
 POSITIVO
 
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Requerente: Animal Clinica e Estetica Veterinaria
Data: 21/03/2014 Impressão: 10:07 - 20/08/2014
Proprietário: Patricia Lisboa Veterinário(a): Dr. Ramon Cassini P. Praça
Raça: Akita Espécie: Canina
DN/Idade: Sexo: Fêmea
Endereço:
20/8/2014 VeterLab
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TESTE SO RO LÓ GICO DE LEISHMANIO SE VISCERAL CANINA (LVC)
 
METO DO S
TR DPP Leishmaniose visceral ( Bio-Manguinhos - partida 134TV008Z) 
Registro: MAPA Licença n.º 9591/11 
Ensaio Imunoenzimático – ELISA ( Biogene - lote 03/13)
Registro: MAPA Licença n.º 7434/00 
 
RESULTADO DPP
 
 REAGENTE
 
RESULTADO ELISA
 
 REAGENTE
 
 
VALORES DE REFERÊNCIAS
 
1. REAGENTE: Aquele que possua título acima da linha do corte recomendado pelo fabricante do KIT de ELISA;
2. INDETERMINADO: Valores limites que os testes não foram capazes de determinar como reagente ( ELISA). RECOMENDA-SE UMA NOVA COLETA APÓS 30 DIAS
DO ULTIMO EXAME. 
3. NÃO REAGENTE: Sem títulos de anticorpos. 
 
As duas técnicas sorológicas (DPP e ELISA) são recomendadas pelo Ministério da Saúde para o diagnóstico daLVC. Em caso de divergência entre as duas técnicas,
considera-se o ELISA como confirmatório. Tecnicas Diagnosticas adcionais poderão ser utilizadas, mas para efeito da SAÚDE PUBLICA serão aceitas somente Teste
rapido K28 PLATAFORMA DUPLA com sensibilidade > = 90% para triagem e Teste ELISA com sensibilidade e especificidade igual ou superior a 90% para confirmação.
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Obrigado, Deus!!
Dr. Ricardo Afonso Ferreira Campos
Médico Veterinário - Diretor Técnico
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Rua Jequitibás, nº 255 - Bairro Eldorado - Contagem - MG
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Nome: Boni Registro: 55012
Requerente: Animal Clinica e Estetica Veterinaria
Data: 04/12/2013 Impressão: 09:44 - 20/08/2014
Proprietário: Afonso Timão Veterinário(a): Dr. Ramon Cassini P. Praça
Raça: SRD Espécie: Canina
DN/Idade: Sexo: Macho
Endereço:
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20/8/2014 VeterLab
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TESTE SO RO LÓ GICO DE LEISHMANIO SE VISCERAL CANINA (LVC)
 
MÉTO DO 
Reação De Imunofluorescência Indireta - RIFI ( IMUNO DO T - partida 034) 
 Registro: MAPA Licença 9658/12 
RESULTADO RIFI
 REAGENTE 1/320
 
 VALORES DE REFERÊNCIAS
 
1. REAGENTE: Aquele que possua título igual ou superior a ponto de corte que é a diluição de 1:40 (RIFI) 
2. INDETERMINADO: Valores limites que os testes não foram capazes de determinar como reagente. RECOMENDA-SE UMA NOVA COLETA APÓS 30 DIAS DO
ULTIMO EXAME.
3. NÃO REAGENTE: Sem títulos de anticorpos. 
 Tecnicas Diagnosticas adcionais poderão ser utilizadas, mas para efeito da SAÚDE PUBLICA serão aceitas somente Teste rapido K28 PLATAFORMA DUPLA com
sensibilidade > = 90% para triagem e Teste ELISA com sensibilidade e especificidade igual ou superior a 90% para confirmação.
 Obrigado Deus!
Dr. Ricardo Afonso Ferreira Campos
Médico Veterinário - Diretor Técnico
CRMV – 3865
Nome: Bonifacio Registro: 51610
Requerente: Animal Clinica e Estetica Veterinaria
Data: 12/02/2014 Impressão: 09:44 - 20/08/2014
Proprietário: Afonso Timao Simplicio Veterinário(a): Dra. Clara Bandeira Silva Mendes
Raça: Boxer Espécie: Canina
DN/Idade: Sexo: Macho
Endereço:
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EXAME: Citologia
 
 
RESULTADO:
 
Material enviado: Punção de medula.
 
Achados Citológicos:
Esfregaços hipocelulares, apresentando inúmeras estruturas com morfologia compatível com formas
amastigotas de Leishmania sp no interior de macrófagos e livres. 
 
 
 
Comentário: Quadro compatível com Leishmaniose Visceral Canina. Sugere-se a realização de outros exames
para confirmação do resultado.
 
 
Patologista responsável: TAISMARA SIMAS DE OLIVEIRA CRMV-MG 7476
 
 
Dr. Ricardo Afonso Ferreira Campos
Médico Veterinário - Diretor Técnico
CRMV – 3865
Rua Jequitibás, nº 255 - Bairro Eldorado - Contagem - MG
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Nome: Bonifacio Registro: 51610
Requerente: Animal Clinica e Estetica Veterinaria
Data: 12/02/2014 Impressão: 09:45 - 20/08/2014
Proprietário: Afonso Timao Simplicio Veterinário(a): Dra. Clara Bandeira Silva Mendes
Raça: Boxer Espécie: Canina
DN/Idade: Sexo: Macho
Endereço:
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Amostra Biológica: Fragmentos de tecido em formalina a 10 %
Exame: Imuno-histoquímica ( Leishmaniose ) 
 
Resultado
 Negativo 
 
 
 
Dr. Ricardo Afonso Ferreira Campos
Médico Veterinário - Diretor Técnico
CRMV – 3865
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Nome: Bonifacio Registro: 51610
Requerente: Animal Clinica e Estetica Veterinaria
Data: 12/02/2014 Impressão: 09:45 - 20/08/2014
Proprietário: Afonso Timao Simplicio Veterinário(a): Dra. Clara Bandeira Silva Mendes
Raça: Boxer Espécie: Canina
DN/Idade: Sexo: Macho
Endereço:
20/8/2014 VeterLab
http://www.veterlab.com.br/telainicial.php# 1/2
TESTE SO RO LÓ GICO DE LEISHMANIO SE VISCERAL CANINA (LVC)
 
MÉTO DO 
Reação De Imunofluorescência Indireta - RIFI ( IMUNO DO T - partida 034) 
 Registro: MAPA Licença 9658/12 
RESULTADO RIFI
 REAGENTE 1/80
 
 VALORES DE REFERÊNCIAS
 
1. REAGENTE: Aquele que possua título igual ou superior a ponto de corte que é a diluição de 1:40 (RIFI) 
2. INDETERMINADO: Valores limites que os testes não foram capazes de determinar como reagente. RECOMENDA-SE UMA NOVA COLETA APÓS 30 DIAS DO
ULTIMO EXAME.
3. NÃO REAGENTE: Sem títulos de anticorpos. 
 Tecnicas Diagnosticas adcionais poderão ser utilizadas, mas para efeito da SAÚDE PUBLICA serão aceitas somente Teste rapido K28 PLATAFORMA DUPLA com
sensibilidade > = 90% para triagem e Teste ELISA com sensibilidade e especificidade igual ou superior a 90% para confirmação.
 Obrigado Deus!
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Médico Veterinário - Diretor Técnico
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Nome: Thyzu Registro: 61375
Requerente: Animal Clinica e Estetica Veterinaria
Data: 18/06/2014 Impressão: 09:41 - 20/08/2014
Proprietário: Marlene Leal dos Reis Veterinário(a): Dra. Clara Bandeira Silva Mendes
Raça: Labrador Espécie: Canina
DN/Idade: Sexo: Macho
Endereço:
20/8/2014 VeterLab
http://www.veterlab.com.br/telainicial.php# 2/2
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Contatos: (31) 3356-3935 - (31) 3383-3705 - www.veterlab.com.br - veterlab@veterlab.com.br
20/8/2014 VeterLab
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EXAME: Citologia
MATERIAL: Punção de
 
 
RESULTADO:
 
 
Material enviado: Citologia aspirativa de medula óssea.
Achados Citológicos:
Esfregaços normocelulares, não sendo visualizados agentes ou alterações sugestivas de neoplasia nos
esfregaços avaliados.
 
 
Comentário: Sugere-se a realização de outros exames para confirmação do resultado.
 
 
Patologista responsável: TAISMARA SIMAS DE OLIVEIRA CRMV-MG 7476
 
 
 
Dr. Ricardo Afonso Ferreira Campos
Médico Veterinário - Diretor Técnico
CRMV – 3865
Rua Jequitibás, nº 255 - Bairro Eldorado - Contagem - MG
Contatos: (31) 3356-3935 - (31) 3383-3705 - www.veterlab.com.br - veterlab@veterlab.com.br
Nome: Thyzu Registro: 61375
Requerente: Animal Clinica e Estetica Veterinaria
Data: 10/07/2014 Impressão: 11:29 - 20/08/2014
Proprietário: Marlene Leal dos Reis Veterinário(a): Dra. Clara Bandeira Silva Mendes
Raça: Labrador Espécie: Canina
DN/Idade: Sexo: Macho
Endereço:
20/8/2014 VeterLab
http://www.veterlab.com.br/telainicial.php# 1/1
 
Amostra Biológica: Fragmentos de tecido em formalina a 10 %
Exame: Imunohistoquimica para diagnostico de Leishmania sp.
 
Resultado
 
 Negativo 
 
 
Dr. Ricardo Afonso Ferreira Campos
Médico Veterinário - Diretor Técnico
CRMV – 3865
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Nome: Thyzu Registro: 61375
Requerente: Animal Clinica e Estetica Veterinaria
Data: 10/07/2014 Impressão: 11:29 - 20/08/2014
Proprietário: Marlene Leal dos Reis Veterinário(a): Dra. Clara Bandeira Silva Mendes
Raça: Labrador Espécie: Canina
DN/Idade: Sexo: Macho
Endereço: