Prévia do material em texto
(Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) Teste Imunoenzimatico TESTE SOROLÓGICO IMUNOENZIMÁTICO E.L.I.S.A • Reações antígeno-anticorpo detectáveis através de reações enzimáticas. • Existem vários modelos de ELISA, e eles envolvem testes usando anticorpos como reagentes. • A presença de antígenos e/ou anticorpos no espécime clínico é revelada pela produção de cor CARACTERÍSTICAS UTILIZAÇÃO Os testes sorológicos utilizam o soro como amostra para detectar a presença de anticorpos contra: • Parasitas • Fungos • Bactérias • Vírus • Doenças autoimunes • Alergias ELEMENTOS NECESSÁRIOS Placa de poliestireno Micropipeta Ag a ser pesquisado Soro ou plasma (amostra a ser analisada) Solução de lavagem (tampão) Conjugado (anticorpo+enzima) Substrato Leitor de Elisa ELISA DIRETO É realizado utilizando um anticorpo de detecção primária, formando assim um complexo antígeno-anticorpo. Então, o anticorpo de detecção primária é marcado diretamente com a enzima. ELISA INDIRETO Detecta principalmente Ac. é semelhante a ELISA direta, mas se utiliza um anticorpo secundário marcado, apresentando maior especificidade na detecção. ELISA SANDUICHE Detecta principalmente Ag. É realizada utilizando um antígeno aderido a um suporte sólido, como a placa de ELISA (geralmente deixado para se ligar à placa previamente, o que comumente chamamos de sensibilizar a placa) e a seguir coloca-se sobre este os soros em teste ( ex. soro humano), na busca de anticorpos contra o antígeno ELISA COMPETIÇÃO Detecta Ag com baixo peso molecular (monovalentes) ALTA SENSIBILIDADE ALTA ESPECIFICIDADE TESTE EM VÁRIAS AMOSTRAS AO MESMO TEMPO CUSTO BAIXO A MÉDIO COMPARADO A OUTROS VANTAGENS DESVANTAGENS • NECESSIDADE DE MÃO DE OBRA ESPECIALIZADA • ALGUNS REAGENTE PODEM DEGRADAR-SE COM FACILIDADE CONCLUSÃO • É uma técnica sempre empregada em detecção e diagnóstico, existem sempre melhoramentos e variações no tipo e aplicabilidade, como por exemplo o PCR-ELISA. • Outro uso que foi recentemente criado foi uma ELISA modificada para a detecção de Covid-19 por grupos brasileiros, que modificaram a técnica para uma detecção facilitada, mais rápida, segura e barata. Agradecemos pela atenção. FIM!