SISTEMA ABO

Prévia do material em texto

CETAM 
Centro de Educação Tecnológica do Amazonas 
Escola de Formação Profissional Enfermeira Francisca Saavedra 
 
 
Curso ETNM AC - Hematologia Data 02/07/2022 
Docente Mirlene Costa 
Disciplina Técnicas Imuno-hematologias 
 
Discente Luciana Rocha do Nascimento 
 
RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA 
Título: SISTEMA ABO 
 
INTRODUÇÃO 
 
O sangue é composto por uma parte líquida (plasma) e por uma parte sólida (células do sangue 
– hemácias, leucócitos e plaquetas). As hemácias possuem algumas proteínas em sua superfície 
chamadas de antígenos ou aglutinogênios, e a partir deles surgiu o Sistema ABO. Ele foi descrito em 
1900 e permanece até hoje como o sistema mais importante dentro das práticas imuno-hematologias. 
No sistema ABO, os eritrócitos/hemácias podem ou não apresentar, na superfície externa de 
suas membranas dois tipos de antígenos denominados, respectivamente de aglutinogênios A e B. De 
acordo com a presença ou não destes dois aglutinogênios, podem ser definidos quatro tipos de 
tipagem sanguíneas: 
Indivíduos que contenham o aglutinogênio A na superfície das hemácias: tipo A; 
Indivíduos que contenham o aglutinogênio B na superfície das hemácias: tipo B; 
Indivíduos que contenham os aglutinogênios A e B na superfície das hemácias: tipo AB; 
Indivíduos que não contenham nem o aglutinogênio A e nem o B na superfície das hemácias: 
tipo O. 
No plasma sanguíneo podem ou não existir dois tipos de anticorpos, denominados de 
aglutininas. As aglutinas podem definir o fenótipo sanguíneo através da prova reversa. 
Um indivíduo que possuí hemácia de tipo A produzirá aglutininas do tipo anti-B. Já o indivíduo 
que com hemácias do fenótipo B produzirá aglutininas anti-A e o indivíduo com hemácias AB não 
produzirá nenhuma aglutinina, pois apresenta os dois tipos de aglutinogênio. 
Os métodos de tipagem sanguínea podem ser classificados em manual ou automatizados (a 
Techno TwinStation, da Bio-Rad Laboratories, que é um sistema totalmente automatizado de análise 
para testes imunohematológicos em bancos de sangue), de acordo com a interação sangue-reagente. 
Testes manuais incluem os métodos da lâmina de vidro ou azulejo de porcelana branca, tubo de ensaio 
e placa ou microplacas de tipagem sanguínea. A maioria destas técnicas ainda é aplicada baseando-se 
no princípio da ação entre o antígeno e anticorpo e subsequente aglutinação de glóbulos vermelhos 
(resultado positivo) e a ausência de aglutinação indica a falta de interação (resultado negativo). 
Para determinação da tipagem ABO deve ser realizada obrigatoriamente por meio de duas 
provas: Prova direta ou globular (Beth Vincent): consiste em pôr em contato soros-teste conhecidos – 
anti-A, anti-B e anti-AB – com glóbulos vermelhos (GV) a serem testados, para identificar a presença 
ou não dos antígenos A e B. Assim, serão definidos os grupos sanguíneos: A, B, AB, O. E prova reversa, 
sérica (Simonin): que consiste em colocar em contato o soro a testar com pelo menos GV conhecidos 
A1 e B, permitindo reconhecer a presença ou não de anticorpos dirigidos contra esses antígenos. Essas 
duas provas, direta e reversa, devem ser realizadas preferencialmente por dois técnicos diferentes, 
sendo que cada teste realizado confirma o outro. 
CETAM 
Centro de Educação Tecnológica do Amazonas 
Escola de Formação Profissional Enfermeira Francisca Saavedra 
 
 
Em aula prática foram realizadas as técnicas de tipagem sanguínea em lâmina e a prova direta 
em tubo de ensaio, correlacionando-as, sendo possível apresentar vantagens e desvantagens entre as 
duas técnicas. 
OBJETIVO GERAL 
 
• Fornecer conhecimento prático de técnicas desenvolvidas para determinar o sistema ABO. 
 
OBJETIVO ESPECÍFICO 
 
• Realizar teste de tipagem sanguínea de uma amostra obtida em aula prática, com o intuito de 
identificar a qual grupo sanguíneo pertence. 
MATERIAIS 
• EPI’s; 
• Reagentes (anti-A, anti-B e anti-AB); 
• Lâminas; 
• Tubos; 
• Soro fisiológico 0,9% de NaCl/ Salina; 
• Pipetas automática e descartável; 
• Pincel; 
• Amostra de sangue total em EDTA; 
• Centrifuga. 
DESCRIÇÃO DO PROCEDIMENTO 
1. Tipagem Sanguínea em Lâmina: 
Antes de iniciar, o material necessário para realização da técnica, foi preparado e organizado 
sobre a bancada do laboratório. Duas lâminas limpas foram selecionadas, posteriormente os reagentes 
anti-A, anti-B e anti-AB e a amostra de sangue total em EDTA. 
Na lâmina, foi adicionado três gotas de 50 μl de sangue, após sobre cada gota de sangue uma 
gota dos reagentes, o anti-A na primeira gota, o anti-B na segunda gota e o anti-AB na última gota de 
sangue disperso na lâmina. Por fim foi realizado a homogeneização com uma outra lâmina formando 
círculos maiores em cada gota de sangue com os seu respectivo reagente, mantendo muito cuidado 
para não misturar um círculo com o outro ao lado. 
Para observar a reação se faz necessário movimentar a lâmina com leves 
movimentos rotatórios por 2 minutos. 
 
Figura 1 – preparo da tipagem em lâmina 
 
2. Prova Direta em Tubos de Ensaio 
CETAM 
Centro de Educação Tecnológica do Amazonas 
Escola de Formação Profissional Enfermeira Francisca Saavedra 
 
 
Para realização da prova direta foi necessário realizar uma suspensão de hemácia a 5%, que 
consiste em diluir 50 μl de concentrado de hemácia em 19 gotas de soro fisiológico 0,9% NaCl. 
Dando continuidade à técnica, três tubos de ensaio foram rotulados: A, B, AB. Nos tubos 
adequadamente rotulados, foi adicionado uma gota dos soros anti-A, anti-B e anti-AB, 
respectivamente. A cada tubo foi acrescentado uma gota de suspensão de hemácias da amostra = 50 
μl, sendo essa suspensão a 5% em soro fisiológico. Por fim os tubos foram homogeneizados e 
centrifugados adequadamente (1.000 rpm durante um minuto ou 3.400 rpm durante 15 segundos). 
A leitura da aglutinação foi realizada contra um fundo iluminado, ressuspendendo gentilmente 
o botão de aglutinação. 
 
 
Figura 2 - preparo de prova direta 
RESULTADOS E DISCURSÕES 
Após reação antígeno-anticorpo faz-se a “leitura” do tipo de sangue observando a 
presença ou ausência de aglutinação, visto que a caracterização dos tipos sanguíneos se dá pela 
presença ou ausência de aglutinogênios (antígenos) em suas hemácias e de aglutininas em seu plasma 
(anticorpos). 
Quanto ao sistema ABO, se houver aglutinação somente no soro anti-A, o indivíduo possui o 
sangue do tipo A; se houver aglutinação somente no soro anti-B, o indivíduo possui sangue do tipo B; 
se houver aglutinação nos dois o indivíduo possui sangue do tipo AB e se não houver aglutinação em 
ambos os soros anti-A e anti-B o indivíduo possui sangue do tipo O. 
 
1. Resultado Da Tipagem Em Lâmina: 
 
 
Houve aglutinação somente com o 
soro anti-A. As hemácias 
analisadas, possui aglutinogênio A 
Figura 3 - resultado tipagem em lâmina 
 
 
 
2. Resultado Da Prova Direta 
CETAM 
Centro de Educação Tecnológica do Amazonas 
Escola de Formação Profissional Enfermeira Francisca Saavedra 
 
 
 
 
Houve aglutinação somente no tubo 
A com o soro anti-A. As hemácias 
analisadas, possui aglutinogênio A 
 
 
 
Figura 4 - resultado prova direta 
 
 
A técnica feita em tubo de ensaio oferece uma maior segurança nos resultados, pois o sangue 
coletado é diluído em solução salina (0.9% de NaCl). O que permite maior sensibilidade na reação das 
hemácias com os reagentes, além de minimizar os erros no procedimento e evitar contaminação 
cruzada. 
CONSIDERAÇÕES FINAIS 
 
A realização desta prática proporcionou aos alunos, trabalhar os conceitos aplicados em sala de 
aula sobre técnicas imuno-hematologias. Além da realização de uma prática laboratorial cotidiana e de 
suma importância para o setor de imuno-hematologia que é a determinação do sistema ABO. 
REFERÊNCIAS 
 
OLIVEIRA, Maria Beatriz Siqueira Campos de et al. Conceitos básicos e aplicados em imuno- 
hematologia. 2013. 
 
DA SILVA, Paulo Henrique et al. Hematologia laboratorial: teoria e procedimentos. Artmed Editora, 
2015. 
 
MINISTÉRIODA SAÚDE Secretaria de Atenção à Saúde Departamento de Atenção 
Hospitalar e de Urgência. Imuno-Hematologia l a b o r a t o r i a l. Editora MS, 2014.