Introdução à Microscopia

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FITS PE - MEDICINA 
NATÁLIA MOURA 
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Histologia 
 
Conteúdo programático 
Objetivos específicos: 
● Identificar as partes do microscópio óptico; 
● Utilizar corretamente as lentes objetivas para 
visualização da preparação histológica; 
● Manusear corretamente o microscópio óptico e 
identificar a preparação da lâmina 
 
Conteúdo: 
● Conceito e histórico da microscopia 
● Classificação dos tipos de microscópios 
● Partes e funções do microscópio óptico 
 
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Microscopia 
 
Conceito: é a obtenção de imagens ampliadas de 
um objeto, que nos permitam distinguir detalhes 
não revelados a olho nu. 
 
Histórico: O crédito é dos holandeses Hans 
Janssen e seu filho Zacarias, 1591, fabricantes de 
óculos. Eles ampliavam as imagens e observavam 
objetos muito pequenos por meio de duas lentes de 
vidro montadas nas extremidades de um tubo. 
 
Depois, o holandês Antonie van Leewenhoek 
construiu microscópios de apenas uma lente, 
pequena e quase esférica, entre duas placas de 
cobre, aperfeiçoando o instrumento. Ele foi o 
primeiro a utilizar o microscópio visando o 
entendimento da natureza e por isso estudou 
materiais como água estagnada, embriões de 
plantas, sangue, esperma e visualizou micro-
organismos. 
 
Com essas descobertas, Robert Hooke foi 
encarregado de construir um microscópio ainda 
mais poderoso. Ele desenvolveu um aparelho com 
duas lentes ajustadas nas extremidades de um 
tubo de metal. E por possuir duas lentes, a ocular e 
a objetiva, ficou conhecido como microscópio 
composto. Com isso, novas pesquisas foram 
realizadas e a tecnologia aprimorada. 
 
 
 
Partes e funções do microscópio óptico: 
Sua composição é dividida em partes mecânicas e 
ópticas. 
1. Lentes objetivas: São capazes de 
aumentar um objeto em até 100x. 
1. Oculares: Em geral, com um aumento de 
até 15x, é a lente utilizada diretamente pelo 
observador. 
2. Diafragma: Regula a quantidade de luz que 
entra no condensador. 
3. Condensador: Concentra os feixes de luz 
sobre a amostra. 
4. Fonte de luz: Geralmente, trata-se de uma 
iluminação de baixa voltagem. 
Componentes mecânicos: 
1. Canhão: Utilizado como suporte para as 
lentes. 
2. Revólver: Disco que acomoda as objetivas, 
possibilitando a modificação da lente 
através da rotação. 
3. Platina: Local onde se apoia a lâmina para 
observação da amostra. 
4. Macrométrico e micrométrico: 
Responsáveis por focar a amostra ao 
movimentar a platina. 
5. Braço: É um suporte para as demais peças 
do microscópio. 
6. Base: Peça que dá sustentação ao 
microscópio. 
 
Tipos: 
I. Óptico: permite o aumento de imagens através 
da luz que após incidir sobre a amostra, passa por 
um conjunto de lentes objetivas (que formam e 
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aumentam a imagem) e oculares (que aumentam a 
imagem). Possui objetivas de 4, 10, 40 e 100, que 
proporcionam uma visão panorâmica de aumento 
aproximado de 40x, 100x, 400x e 1000x, 
respectivamente. 
 
 
 
 
 
1. Microscópio ultravioleta: Neste tipo, utiliza-se a 
radiação ultravioleta, que tem um comprimento de 
onda para a luz visível, melhorando o limite de 
resolução. 
2. Microscópio de fluorescência: A observação dos 
espécimes é feita através da fixação de 
substâncias fluorescentes (fluoro e cromos), que, 
ao receberem luz, podem ser observados através 
do brilho gerado. 
3. Microscópio de contraste de fase: Transforma 
diferentes fases dos raios de luz em diferenças 
luminosas, permitindo a observação dos espécimes 
através do contraste gerado. 
4. Microscópio de polarização: Constituído por dois 
prismas – um polarizador e outro analisador – este 
tipo de microscópio é utilizado na observação de 
materiais birrefringentes (estruturas anisotrópicas, 
com índices diferentes de refração como os ossos, 
músculos, fibras, cabelos, etc.). 
 
II. Eletrônico: permite a formação de uma imagem 
resultante da interação de um feixe de elétrons 
incidentes sobre o material a ser observado, dando 
origem a sinais os quais são captados por 
diferentes detectores, fornecendo informações 
características sobre a amostra. Apresenta um 
poder de resolução muito superior ao de luz, capaz 
de gerar imagens com aumentos superiores a 
500.000 vezes. 
 
 
 
1. Microscópio Eletrônico de Varredura (MEV) 
 
2. Microscópio Eletrônico de Transmissão (MET) 
Este tipo permite examinar detalhes ínfimos, 
ampliando o objeto em até um milhão de vezes. 
Seu funcionamento consiste na emissão de um 
feixe de elétrons que interage com a amostra 
enquanto a atravessa, formando uma imagem 
aumentada. Para a observação neste tipo de 
microscópio é necessário que o material seja 
cortado em camadas bem finas. 
Ao contrário da microscopia óptica, este tipo não 
utiliza lentes de vidro, mas sim ponteiras de vidro 
com alta sensibilidade à superfície da amostra, 
permitindo a formação de uma imagem com 
informações tridimensionais. Além da grande 
resolução, os microscópios que utilizam essa 
tecnologia podem medir características como 
dureza e elasticidade do material.