Baixe o app para aproveitar ainda mais
Prévia do material em texto
UNIVERSIDADE FEDERAL DE JUIZ DE FORA CAMPUS GOVERNADOR VALADARES ALEXANDRA ANDRADE GOUVEIA DANIELLE CRISTINA GOMES LETÍCIA RODRIGUES PEIXOTO PRÁTICA 03 DOSAGEM DE ALBUMINA E PROTEÍNAS TOTAIS Governador Valadares 2021 1. INTRODUÇÃO A albumina é uma proteína intrínseca, produzida pelo corpo que compõe grande parte do plasma sanguíneo consistindo cerca de 70% dos elementos “sólidos” do sangue, é essencial para o funcionamento do organismo e produzida pelo fígado exercendo diversas funções que asseguram o bom funcionamento do corpo. Boa parte de sua função é atuar como uma “carregadora” de substâncias, se ligando a compostos hidrofóbicos colaborando para que eles sejam transportados pela corrente sanguínea. Além disso, a albumina carrega essas moléculas para dentro e fora dos tecidos, e sem ela essa atividade não executada. Outra importante atividade da albumina é assegurar que o equilíbrio de água entre os tecidos e o sangue seja adequado. As proteínas totais do nosso corpo são um conjunto de compostos macromoleculares orgânicos de elevado peso molecular que são formados por aminoácidos unidos entre si por Ligações peptídicas. A sequência na qual os aminoácidos estão ligados entre si e o número de cadeias de aminoácidos, determinam a estrutura primária de proteínas. As proteínas são introduzidas no organismo através dos alimentos, em que é subsequentemente dividida para formar novas proteínas e aminoácidos através de um processo conhecido como a síntese de proteínas. As proteínas totais são o resultado da adição dos vários componentes presentes na proteína do corpo, tais como alfa1, alfa2, beta e gama globulina albumina. Fundamentos da Reação - Proteínas Na dosagem das proteínas totais, as ligações peptídicas das proteínas reagem com uma solução alcalina de sulfato de cobre (Reativo do Biureto), formando um complexo de coloração violeta, cuja intensidade de cor é proporcional à concentração de proteínas na amostra. Fundamentos da Reação - Albumina Na dosagem da albumina, esta reage com o Verde de Bromocresol, em meio ácido, formando um complexo corado de verde. A intensidade da cor é proporcional a concentração de albumina na amostra. 2. MATERIAIS, REAGENTES E EQUIPAMENTOS MATERIAIS • 03 tubos de ensaio; • 01 suporte para tubos de ensaio; • 01 pipeta automática P-100; • 01 pipeta automática P-1000; • Ponteiras para as pipetas; • Caneta permanente . REAGENTES • Kit proteínas totais: Padrão de 4,0 g/dL (contendo albumina bovina) • Biureto: contendo sulfato de cobre 12 mmol/L, hidróxido de sódio 600 mmol/L e estabilizador. EQUIPAMENTOS • Espectrofotômetro; • Vórtex; • Cronômetro; • Banho-maria. 3. PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL 1) Com uma caneta permanente, foi feita a identificação de cada tubo (A, P, B) que correspondiam a amostra, padrão e branco, respectivamente; 2) Fez-se então a adição de 1mL do reagente de cor, utilizando uma pipeta P-1000, em todos os três tubos; 3) Com uma pipeta P-100, adicionou-se 20μL do padrão no tubo identificado como P, e no tubo A, 20μL de amostra. No tubo B não foi feita nenhuma adição; 4) Todas as soluções (A, P e B) foram homogeneizadas, uma por uma, utilizando o vórtex; 5) Após a homogeneização, os tubos foram colocados no suporte e levados ao banho-maria, por 10 minutos cronometrados, á 37°C; 6) Com a solução do tubo B (branco), zerou-se o espectrofotômetro em 545nm; 7) Foram feitas então as leituras fotométricas do Padrão e da Amostra. 4. RESULTADOS E DISCUSSÃO Proteína: Baseando-se na embalagem da solução padrão, foi possível analisar que a densidade dessa solução, em uso, foi igual a 4,0 g/dL. A partir da leitura, no espectrofotômetro das soluções, obteve-se as seguintes absorbâncias: Absorbância do branco= 0,000 Absorbância da amostra = 0,257 Absorbância do padrão = 0,192 Após a análise da absorbância, os valores encontrados foram substituídos na seguinte fórmula: 𝑃𝑟𝑜𝑡𝑒í𝑛𝑎 𝑔 𝑑𝐿 = 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏â𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑑𝑜 𝑡𝑒𝑠𝑡𝑒 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏â𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑑𝑜 𝑝𝑎𝑑𝑟ã𝑜 . 4,0 𝑔/𝑑𝐿 𝑃𝑟𝑜𝑡𝑒í𝑛𝑎 ( 𝑔 𝑑𝐿 ) → 0,257 0,192 . 4,0 𝑔/𝑑𝐿 𝑷𝒓𝒐𝒕𝒆í𝒏𝒂 = 𝟓, 𝟑𝟓 𝒈/𝒅𝑳 Baseando-se na bula do teste (LABTEST,2014), o valor de referência do teste para a normalidade de proteína total, em prematuros é de 3,6 a 6,0 g/dL; para recém-nascido a termo é de 4,6 a 7,0 g/dL; para crianças de 7 dias a 1 ano é de 4,4 a 7,6 g/dL. No entanto, caso o soro em questão seja de algum paciente que esteja em alguma dessa faixa etária, ele apresenta uma quantidade de proteínas totais estáveis. Por outro lado, em crianças de 1 a 2 anos o valor de referência seria de 5,6 a 7,5 g/dL, e crianças acima de 3 anos 6,0 a 8,0 g/dL, e em adultos o valor ideal seria de 6,0 a 8,0 g/dL. Entretanto, se o soro em questão for de algum paciente que possui faixa etária acima de 1 ano, constata-se que ele apresenta uma quantidade de proteínas totais abaixo do valor de referência. Conforme a (LASTEST, 2014) as proteínas encontram-se diminuídas na gravidez; hiperhidratação, desnutrição grave, cirrose e outras doenças hepáticas, incluindo alcoolismo crônico; imobilização prolongada; insuficiência cardíaca; nefrose e insuficiência renal; hipertireoidismo; deficiência de cálcio e vitamina D e na síndrome de má absorção. Albumina: Baseando-se na embalagem da solução padrão, foi possível analisar que a densidade dessa solução, em uso, foi igual a 3,8 g/dL. A partir da leitura, no espectrofotômetro das soluções, obteve- se as seguintes absorbâncias: Absorbância do branco= 0,000 Absorbância da amostra = 0,255 Absorbância do padrão = 0,433 Após a análise da absorbância, os valores encontrados foram substituídos na seguinte fórmula: 𝐴𝑙𝑏𝑢𝑚𝑖𝑛𝑎 𝑔 𝑑𝐿 = 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏â𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑑𝑜 𝑡𝑒𝑠𝑡𝑒 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏â𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑑𝑜 𝑝𝑎𝑑𝑟ã𝑜 . 3,8 𝑔/𝑑𝐿 𝐴𝑙𝑏𝑢𝑚𝑖𝑛𝑎 ( 𝑔 𝑑𝐿 ) → = 0,255 0,433 . 3,8 𝑔/𝑑𝐿 𝑨𝒍𝒃𝒖𝒎𝒊𝒏𝒂 = 𝟐, 𝟎𝟒 𝒈/𝒅𝑳 Baseando-se na bula do teste (LABTESTE,2011), o valor de referência encontrado para a normalidade de albumina, em crianças de 1 a 30 dias é de 2,6 a 4,3 g/dL; para crianças com 31 a 182 dias é de 2,8 a 4,6 g/dL; para crianças de 183 a 365 dias é de 2,8 a 4,8 g/dL; para crianças e adolescentes de 1 a 18 anos é de 2,9 a 4,7 g/dL. Contudo, caso o soro do paciente em questão seja de algum paciente que esteja em alguma dessa faixa etária, sugere-se que ele apresente um caso de síndrome nefrôtica causada pela hipoalbuminemia, mas para a conclusão do caso são necessários outros critérios clínicos e laboratoriais. Entretanto, para adultos acima de 19 anos o valor de referência seria de 3,5 a 5,5 g/dL. Com isso, se o soro em questão, for de um paciente acima de 19 anos, sugere-se um caso de hipoalbuminemia. De acordo com (LABTESTE,2011) a diminuição da albumina pode estar associada ao alcoolismo crônico como cirrose doenças hepáticas, na gravidez relacionado ao uso de contraceptivos orais, em muitas doenças crônicas incluindo neoplasias, síndrome nefrótica, enteropatias com perda proteica, doenças inflamatórias como as doenças autoimunes, imobilização prolongada, falência cardíaca e outros estados catabólicos crônicos. Ademais, os sintomas mais comuns que estão relacionados com a hipoalbuminemia são confusão, fadiga e tontura. Além do mais, o paciente pode apresentar retenção de fluidos, gerando inchaço das mãos e pês, diarreia, perda de apetite, atrofia dos nervos e problemas digestivos. 5. CONCLUSÃO Observa-se que o paciente possivelmente deve sofrer de alguma doença hepática ou renal. Como a taxa de globulina está dentro da normalidade, significa dizer que o fígado está com seu funcionamento em ordem, logo, é provável que seja uma doença renal. 6. REFERÊNCIAS LABTEST. Albumina. Instruções de Uso, 2011. LABTEST.Proteínas Totais. Instruções de Uso, 2014. KERKAR, Pramod, et. al. Hypoalbuminemia: Causes, Symptoms, Treatment, Prognosis, Pain Assist, 2012. Disponível em: https://www.epainassist.com/endocrine/hypoalbuminemia. Acesso em: 25 de nov. de 2021
Compartilhar