1 - Hematologia - estágio

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Hematologia - estágio 
 
 O Conselho Regional de Biomedicina (CRBM-5) identifica a Hematologia como a área que decodifica os componentes sanguíneos, onde são analisadas a fisiologia e morfologia, buscando diagnosticar doenças através de alterações em seus componentes. Por isso, como meio de avaliar a saúde geral o hemograma é o exame com maior importância para a população, o qual possibilita o diagnóstico precoce de uma variedade de condições, antes da sintomatologia. (P., 2022) 
 O hemograma é a área das análises clínicas que realiza a análise das 3 linhagens sanguíneas, avaliando: os glóbulos branco, glóbulos vermelhos e plaquetas. Segue sendo o exame mais utilizado pela facilidade em ajudar ou concluir diagnósticos. O hemograma pode ser realizado de forma manual ou automatizada, não apresentam diferença de resultados, apenas retrata a evolução proporcionando a substituição pelos equipamentos automáticos. No estágio iremos utilizar certos equipamentos: microscópio, centrífuga ou microcentrífuga. O microscópio disponibiliza a realização da contagem de plaquetas, leucócitos e eritrócitos. A centrífuga ministra o valor do hematócrito. (P., 2022) (Naoum & Naoum, 2022) 
Nessa área será apresentado como realizamos o hemograma manual, para que serve e como interpretá-lo. Dia 08/09/22 foram iniciados os procedimentos para realização do hemograma manual e finalizados dia 19/09/22 com avaliação através de um hemograma manual realizado por cada aluno. 
Hemograma Manual 
1. Eritrograma 
 O eritrograma é a primeira parte a ser realizada que analisa a série vermelha, conhecidos como glóbulos vermelhos, hemácias ou eritrócitos. A contagem pode ser realizada de forma manual, através do microscópio ou em contador automático. A caracterização das hemácias é em forma bicôncava, sem núcleo e presença de coloração intensa na borda. O eritrograma avalia também a concentração de hemoglobina, que é uma proteína presente nas hemácias, responsável pelo transporte de moléculas de oxigênio da corrente sanguínea. Existem outros parâmetros relacionados a hemoglobina e ás hemácias que são informados através do eritrograma, são eles: hematócrito que avalia o volume total do plasma; volume corpuscular médio (VCM), que informa o tamanho das hemácias; hemoglobina corpuscular média (HCM) que é o peso médio da hemoglobina nas hemácias; concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM) que é a concentração média da molécula de hemoglobina presente na hemácia. (Dalaqua, 2015-2016) 
 
· Contagem Global de Eritrócito (procedimento) 
· Coleta sanguínea em tubo roxo; 
· Identificar um tubo de ensaio para realização do procedimento; 
· Adicionar 4ml de soro no tubo de ensaio; 
· Adicionar 20microlitros de sangue total no mesmo tubo de ensaio; 
· Homogeneizar; 
· Preencher a câmara de Newbawer com a amostra; 
· Focar respectivamente em 4x – 10x – 40x; 
· Contar 5 áreas do quadrante central (1 central e 4 extremidades); 
· Somar os 5 valores e multiplicar por 10.000 (resultado em mm3). 
 
Resultado do procedimento 
Valores de exemplo apenas para mostrar como é feito o calculo 
Valores encontrados nas 5 áreas = 113/102/129/97/132 
Soma 113+102+129+97+132 = 573 
Multiplicar valor por 10.000 Valor de referência
573 x 10.000 = 5.730.000 mm3 Feminino 4,0 – 5,4 milhões 
 Contagem Global de Células = 5.730.000 mm3 ou 5,7 Masculino 4,5 – 6,1 milhões 
 
2. Hematócrito 
 
 
 O hematócrito é o percentual em que as células vermelhas ocupam no volume de sangue total. Um hematócrito de 50% significa que 50% do sangue são eritrócitos e os outro 50% restante são substâncias diluídas e água, seguindo essa ordem, sabemos que metade do nosso sangue é formado por eritrócitos (células vermelhas). A análise do hematócrito é rápida, usada também para a avaliação de necessidade transfusional. É utilizado em conjunto com os demais índices hematimétricos do sangue para avaliação de desidratação, perda sanguínea e causa de anemia. O hematócrito é elevado quando o número de hemácias aumenta ou o volume de plasma diminui. O hematócrito diminui levando ao baixo transporte de oxigênio e o seu excesso leva a formação de coágulos. (Tostes, 2022) (Cisneiros, 2021) 
· Hematócrito (procedimento) 
· Coleta sanguínea colhida com tudo de EDTA; 
· Preencher o tubo capilar com sangue até ¾ do seu volume total; 
· Fechar uma das extremidades com a massa apropriada; 
· Levar a centrífuga por 5 minutos a 11RPM; 
· Depois dos 5 minutos realizar a leitura com a régua de hematócrito. 
 
Resultados do procedimento 
Valores de exemplo apenas para realizar como é feito o calculo 
Hematócrito em 50% Valor de referência 
 Homem – 40%-50% 
 Mulher – 36% - 45% 
 
 
 
3. Hemoglobina 
 
 A hemoglobina é uma proteína globular presente nas hemácias, tem a função de transportar oxigênio dos pulmões para diversas áreas do organismo. Quando se encontra em valores baixos temos a anemia, por isso, acaba sendo mais precisa na avaliação de uma anemia. (Cisneiros, 2021) 
· Hemoglobina (procedimento) 
· O valor da hemoglobina é obtido através do resultado do hematócrito; 
· Utilizamos a seguinte equação: Hemoglobina = hematócrito/3; 
 
Resultados do procedimento 
Valores de exemplo apenas para mostrar como é feito o calculo 
Hemoglobina = hematócrito / 3 Valor de referência 
Hemoglobina = 50/3 Homem – 13,0 – 16,9 
Hemoglobina = 16,7 Mulher – 11,5 – 14,9 
 
4. VCM 
 
 O volume corpuscular médio (VCM) é a indicação do tamanho médio das hemácias. Com valor elevado indica hemácias macrocíticas de tamanho alterado das hemácias que possibilita sinais de anemia por deficiência B12, hipotireoidismo, alterações na medula óssea, alcoolismo, dentre outras. Respectivamente quando o valor encontrasse baixo, é intitulado de microcíticas, indicamos condições como talassemia, doenças crônicas e anemia por deficiência de ferro. Com essas duas características podemos determinar vários tipos de anemia . (Câmara, 2019). 
· VCM (procedimento) 
· O valor do VCM é adquirido através do valor do hematócrito e das hemácias; 
· Utilizamos a equação: hematócrito x 10 / hemácias; 
 
Resultados do procedimento 
Valores de exemplo apenas para mostrar como é feito o calculo 
 
VCM = hematócrito x 10 / hemácias Valor de referência 
VCM = 50 x 10 / 5,7 80 – 100 FL 
VCM = 500 / 5,7 
VCM = 87,7 FL 
 
5. HCM 
 
 A hemoglobina corpuscular média (HCM) é a área que mede a quantidade média da hemoglobina que está dentro das hemácias, é o peso da hemoglobina nas células, indicativo da concentração total de hemoglobina através da medição do tamanho e coloração da hemácia, é utilizada para identificar o tipo de anemia, como normocrômica, hipercrômica ou hipocrômica. 
 
Em valores elevados o HCM indica hipercromia, caracterizado pela hemácia mais escura carecido a grande quantidade de hemoglobina presente. Em valores abaixo do normal é indicado a hipocromia, que posteriormente é a hemácia mais clara. (Lemos, tuasaude.com, 2022) (Alves, 2022) 
· Contagem do HCM (procedimento) 
· O valor do HCM é adquirido através dos valores anteriores de hemoglobina e hemácias; 
· Usamos a equação: hemoglobina x 10 / hemácias 
 
Resultados do procedimento 
Valores de exemplo apenas para mostrar como é feito o calculo 
HCM = hemoglobina x 10 / hemácias Valor de referência 
HCM = 16,7 x 10 / 5,7 28 – 34 g/dl 
HCM = 167 / 5,7 
HCM = 29,2 g/dl 
 
6. CHCM 
 
 A concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM) medea concentração de hemoglobina nas hemácias, o valor de HCM E CHCM são semelhantes, porém o CHCM disponibiliza mais precisão na concentração de hemoglobina. Por isso os valores de HCM e CHCM devem ser analisados em conjunto, para comprovar o diagnóstico clínico. (Failace & Fernandes, Hemogramama: Manual de Interpretação do Hemograma, 2015) 
· Contagem do CHCM (procedimento) 
· O valor de CHCM é adquirido através dos valores da hemoglobina e do hematócrito; 
· Usamos a equação: hemoglobina X 100 / hematócrito 
· Hemoglobina que temos é 16,7 
· Hematócrito é 50 
Resultados do procedimento 
Valores de exemplo apenas para mostrar como é feito o calculo 
CHCM = hemoglobina X 100 / hematócrito Valor de referência 
CHCM = 16,7 X 100 / 50 31-36 g/dl 
CHCM = 1.670 / 50 
CHCM = 33,4 g/dl 
 Esses são os exames contidos no eritrograma, paciente apresentou como resultados: 
Contagem global – 5.730.000mm³ 
Hematócrito – 50% 
Hemoglobina – 16,7 
VCM – 87,7 FL 
HCM – 29,2 g/dl 
CHCM – 33,4 g/dl 
 
 
7. Leucograma 
 
O Leucograma avalia os leucócitos também chamados de glóbulos brancos, que são as células responsáveis pela defesa do organismo, que basicamente reagem as infecções e alergias atuando contra a presença dos causadores de doenças como bactérias, parasitas e vírus. Os glóbulos brancos são produzidos na medula óssea e o seu valor aumentado pode sugerir infecção, ainda que existam casos em que pode vir a acontecer o contrário. Quando se apresenta um número elevado de leucócitos denominamos leucocitose e quando apresentamos um número baixo chamamos de leucopenia. Os leucócitos podem ser contados de duas formas sendo a primeira a “contagem global de leucócitos” onde os resultados são emitidos em mm³ e a segunda que é a “contagem diferencial” em que os resultados são apresentados em forma relativa (%) e forma absoluta (mm³). Os valores de referência da contagem global está entre 
4.000 e 10.000 leucócitos mm³ (Vivas, 2017) (Cisneiros, 2021) 
· Contagem global de leucócitos (procedimento) 
· Adicionar 380 microlitros do líquido de Turrec em um tubo de ensaio; 
· Acrescentar 20 microlitros de sangue total do paciente; 
· Preencher a câmara de Neubauer; 
· Visualizar no microscópio os 4 quadrantes laterais na objetiva de 10x; 
· Efetuar a contagem dos 4 quadrantes com objetiva de 40x; 
· Multiplicar o resultado da contagem por 50;  Resultado deve ser expresso em mm³. 
· Contagem diferencial de Leucócitos (procedimento) 
 
· Primeiro realizamos a confecção de um esfregaço sanguíneo; 
· Identificamos uma lâmina limpa/seca; 
· Adicionamos uma gota de sangue sobre a lâmina próximo a extremidade; 
· Deve-se tocar com o dorso de uma lâmina extensora a gota de sangue movimentando para trás em um ângulo de 45°; 
· Deslizar a extensora em direção oposta á extremidade em que o sangue está; 
· Deixar a lâmina seca naturalmente e realizar a coloração com panótico rápido; 
· Na coloração com panótico rápido mergulhamos a lâmina por 10x em cada corante lavando o dorso da lâmina depois de cada etapa, seguindo a ordem: 
· Álcool metílico (fixador) 
· Eosina (corante ácido) 
· Azul de metileno (corante básico) 
· Depois da lâmina corada esperamos ela secar naturalmente e realizamos a contagem relativa através do microscópio (adicionamos óleo de imersão e utilizamos objetiva de 100x) e com a ajuda do aplicativo “WBC Counter”. O aplicativo possibilita a contagem de 100 leucócitos em suas diferentes formas e disponibiliza o resultado em porcentagem. 
Resultados do procedimento 
 Referência do valor Relativo Resultado Relativo (%)
Bastonetes – 1% Bastonetes 0 - 5% 
Neutrófilos – 50% Neutrófilos 40 – 75% 
 
Linfócitos – 39% Linfócitos 20 – 40% 
Eosinófilos – 3% Eosinófilos 1 – 4% 
Basófilos – 1% Basófilos 0 – 1% 
Monócitos – 1% Monócitos 2 – 8% 
Resultado Absoluto (mm³) 
Para se obter o valor absoluto utilizamos a regra de 3 com o resultado da contagem global do Leucograma e com o resultado relativo da seguinte forma: 
 100 – C. global 
 Valor relativo – X 
Realizamos essa conta em cada leucócito 
 
8. Plaquetograma 
 
O Plaquetograma é um componente analítico que faz parte do hemograma e avalia a quantificação e morfologia das plaquetas. As plaquetas são células produzidas na medula óssea e circulam na corrente sanguínea ajudando na coagulação sanguínea. As plaquetas seguem no sangue por aproximadamente 10 dias, finalizando no baço, que realiza a sua destruição. O número plaquetário de uma pessoa saudável está em torno de 150.000 a 400.000 plaquetas por milímetro cúbico. A diminuição ou o aumento plaquetário pode estar relacionado a muitas doenças. Plaquetopenia é a definição da diminuição das plaquetas na corrente sanguínea e também chamada de trombocitopenia que pode indicar doenças como: lúpus, leucemia, anemia perniciosa, dentre outras. Temos a plaquetose quando ocorre o aumento das plaquetas ou trombocitose, que é a indicação de anemia ferropriva, linfoma, tumor sólido, artrite reumatoide e vários outros. (Failace & Fernandes, Hemograma - Manual de Interpretação, 2009) 
· Contagem Plaquetária através do método de fônio (procedimento) 
· Primeiro confeccionamos uma lâmina de esfregaço sanguíneo; 
· A lâmina deve ser corada com kit panótico; 
· Depois de pronta a lâmina e seca adicionamos óleo de imersão e visualizamos no microscópio na objetiva de 100x; 
· São analisados 10 campos, onde observaremos uma média de 100 hemácias; 
· São somados os números encontrados e então realizaremos 3 etapas para se obter o resultado. 
Resultado do procedimento 1° Etapa 
No dia do procedimento um estagiário apenas fez a contagem do hematócrito do paciente para realizar a primeira etapa e com o valor do hematócrito realizamos o cálculo a seguir: 
Hemácias = hematócrito/9 
H = 44/9 
H= 4,9 milhões 
 
2° Etapa 
Esse valor é encontrado através da lâmina no microscópio
Número de plaquetas contadas nos 10 campos 
6/8/5/2/3/3/6/2/7/3 
Somar os valores 
6+8+5+2+3+3+6+2+7+3= 45 
 
3° Etapa 
Realizamos o cálculo da regra de 3 utilizando todos os resultados das etapas anteriores. 
 1.000 hemácias – Plaquetas 
C. global hemác. – X 
 
 1.000 – 45 
4.9000.000 – X 
1.000X = 45 x 4.900.000 
X = 220.500.000/1.000 Valor de Referência 
X = 220.500mm³ 150.000 a 400.000 
 
9. Contagem de Reticulócitos 
 
Os reticulócitos são avaliados para se obter informações da funcionalidade da medula hematopoiética. A contagem deles é resultante de uma porcentagem em relação ao número total de hemácias, referenciadas pelos valores de 0,5 a 1,5%. Porém, existe uma forma mais acurada de mostrar o resultado que é o chamado “número absoluto” de reticulócitos por milímetro cúbico de sangue, que apresenta os valores com referência de 20.000 a 80.000mm³. Com a diminuição dos reticulócitos temos a chamada reticulocitopenia que pode indicar: anemias hipocrômicas (distúrbio na síntese de HB), anemias aplásticas (distúrbio na eritropoiese), anemia megaloblástica (distúrbio na síntese de DNA). Com o aumento dos valores temos a reticulocitose, que geralmente ocorre em pacientes anêmicos, a reticulocitose indica perda sanguínea (eritropoiese aumentada), anemias hemolíticas (destruição aumentada dos eritrócitos) (Diagnóstica, 2002) 
· Contagem de reticulócitos 
· Primeiro iremos preparar uma diluição de acordo com o valor do hematócrito do paciente, seguindo as seguintes comandas: 
· Para hematócrito até 30% usamos 12 gotas de sangue + 3 gotas de corante azul brilhante. 
· Para hematócrito entre 30 – 45% usamos 9 gotasde sangue + 3 gotas de corante. 
· Hematócrito > 45% usamos 6 gotas de sangue + 3 gotas de corante. 
· Depois de realizada a diluição devemos agitar o tubo e incubar em banho maria a 37c° por 20 minutos. 
· Confeccionamos uma lâmina de esfregaço sanguíneo; 
· Contamos 10 campos na objetiva de 100x com óleo de imersão. 
 
Resultado do procedimento
Resultado relativo (%) 
Para saber o valor de reticulócitos usamos o seguinte cálculo: 
Reticulócitos = Nº de reticulócitos contados X 100 / 1.000 
Campos contados através do microscópio 1/1/2/1/2/1/2/3/2/1 soma = 16 
Reticulócitos = 16 X 100 / 1.000 Referência do valor relativo 
Reticulócitos = 1.600/1.000 Adultos 0,5 – 1,5% 
Reticulócitos = 1,6% RN’s 2,0 – 6,0% 
 
Resultado Absoluto 
Para saber o valor absoluto do reticulócito precisamos do valor do hematócrito do paciente. 
Hematócrito da paciente foi 37%. 
Cálculo 
Reticulócitos = Valor relativo do reticulócito X Hematócrito/9 sobre 100 
Reticulócitos = 1,6 X 4.100.000 / 100 
Reticulócitos = 6.560.000/100 Referência do valor absoluto Reticulócitos = 65.600mm³ 20.000 a 80.000 mm³ 
 
10. Coagulograma 
 
O coagulograma é um conjugado de exames que vão analisar os métodos de coagulação do sangue. Temos diversos exames para se avaliar a hemostasia e suas funções, dentre eles realizamos o Tempo de tromboplastina parcial ativa (TTPa) e o Tempo de protrombina (TP). O TTPa é um exame que mede a via intrínseca da coagulação. Quando se tem suspeita de deficiência de fatores da via intrínseca da coagulação é indicado a realização do TTPa. Esse procedimento avalia os fatores de coagulação da via intrínseca (fatores 8, 9, 11 e 12) e também protrombina, fibrinogênio e fatores 5 e 10 da cascata de coagulação. A via intrínseca da cascata de coagulação caracteriza distúrbios pelo TTPa prolongado e o TP normal. O TP avalia fatores de coagulação 2, 5, 7 e 10 que fazem parte da via extrínseca. O TP elevado pode ser resultado de situações como deficiência de protrombina, deficiência de fibrinogênio, deficiência em algum dos fatores de coagulação. O TP pode ser diminuído em terapia de reposição hormonal, uso de contraceptivo oral e administração de suplemento alimentar. (Vasconcelos, 2022) 
· Tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPa) procedimento 
 
· Realizamos a coleta sanguínea em tubo azul e levamos o sangue para a centrifuga por 15 minutos a 3.000 RPM; 
· Realizaremos a análise em duplicata para somar os dois valores e resultar em uma média; 
· Primeiro deve aquecer o R2 a 37°; 
· Incubar 100 microlitros da amostra (plasma) a 37° por 2 minutos; 
· Acrescentar 100 microlitros de R1 junto com a amostra, homogeneizar e incubar a 37° por 3 minutos; 
· Adicionar 100 microlitros do R2 (preaquecido), e acionar o cronômetro; 
· A reação vai acontecer apenas se agitar o tubo, registrar em segundos o tempo de formação do coágulo e realizar o calculo a seguir
Resultado do procedimento 
No início foi pedida a realização da contagem em duplicata para somar os valores obtidos e calcular a média, os resultados do paciente foram: 
1° 31 segundos 31 + 35 = 66 
2° 29 segundos 66/2 = 33 
TTPa Valor de referência 
33 segundos 26 – 38 segundos 
 
· Tempo de Protrombina (TP) procedimento 
 
· Para começar o exame precisamos reconstituir o reagente previamente ao procedimento; 
· Fazemos a pré-incubação á 37°C do reagente TP (lembrando de realizar inversão para misturar o produto antes de usar); 
· Pipetamos 100 microlitros do plasma em um tubo e incubamos por 1 minuto á 37°C; 
· Depois pipetamos 200 microlitros do reagente (preaquecido) e ligamos o cronometro; 
· Realizar inversão e registrar o tempo de coagulação. 
Resultado do procedimento 
1° resultado 14 segundos 
2° resultado 12 segundos 
Soma e faz a média 
14+12 = 26 Valor de referência 
26/2 = 13 segundos 12 – 15 segundos