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07/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 1/5 maria valdenir da silva vieira 202003127752 Disciplina: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS AV Aluno: MARIA VALDENIR DA SILVA VIEIRA 202003127752 Professor: TAMIRES CRISTINA COSTA Turma: 9014 SDE4579_AV_202003127752 (AG) 19/11/2020 20:35:45 (F) Avaliação: 10,0 Nota Partic.: Nota SIA: 10,0 pts PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS 1. Ref.: 3115265 Pontos: 1,00 / 1,00 (IFF, Farroupilha-RS, 2016): O processo de extração e a purificação do DNA genômico compreende vários passos: Lise das células, extração de ácidos desoxiribonucleicos e precipitação do RNA; Lise das células, centrifugação e ressuspensão do DNA; Lise das células, extração das proteínas mais RNA e precipitação do DNA; Lise das células, extração de lipídeos e desoxiribonucleicos e precipitação do DNA. Quebra de lipídeos, precipitação do RNA e lise das proteínas; 2. Ref.: 3115308 Pontos: 1,00 / 1,00 (INMETRO, 2010): A técnica de PCR (reação em cadeia de polimerase), a mais utilizada para amplificação (clonagem) do DNA in vitro, revolucionou o acesso a informações genéticas. Com relação a essa técnica, assinale a opção correta: Com a PCR, a clonagem molecular necessita de 48 a 72 horas para ser executada; A PCR necessita ser acompanhada de um método de purificação para separar o fragmento amplificado do restante do genoma. Com a PCR, a enzima Taq polimerase é capaz de manter sua atividade mesmo nas altas temperaturas necessárias para desnaturar a molécula de DNA; A PCR também pode ser aplicada na análise de proteínas; Na PCR, os primers (iniciadores) se hibridam com moléculas de DNA fita dupla; 3. Ref.: 3907345 Pontos: 1,00 / 1,00 A técnica de eletroforese permite separar fragmentos de proteínas e ácidos nucléicos por tamanho e carga elétrica. Com base na figura abaixo, que representa uma corrida de eletroforese de DNA, marque a alternativa CORRETA: Educational Performace Solution EPS ® - Alunos TODAS QUESTÕES CORRIGIDAS javascript:voltar(); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3115265.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3115308.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3907345.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 07/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 2/5 A migração das amostras ocorre no sentido do polo negativo (-) para o polo positivo (+), devido a carga negativa do fosfato localizado no nucleotídeo de DNA. Os fragmentos menores de DNA migram mais rápido do que os fragmentos maiores, pois se aderem mais facilmente aos íons do tampão utilizado na eletroforese. A coloração é feita por um corante intercalante de DNA que tem afinidade com as ligações fosfodiéster da referida molécula. Os fragmentos maiores de DNA migram mais rápido do que os fragmentos menores, devido ao seu alto peso molecular. A utilização do Marcador Molecular é indicada para auxiliar na estimativa da concentração dos fragmentos de DNA que aparecerem no gel. 4. Ref.: 3121493 Pontos: 1,00 / 1,00 (Fiocruz, 2010): A técnica de PCR em tempo real permite ao usuário detectar, diferenciar variantes virais e quantificar ácidos nucléicos provenientes de uma infecção viral em uma única reação em tempo real, enquanto o PCR convencional basicamente permite apenas a detecção de ácidos nucléicos em uma única reação. De acordo com a frase acima, assinale a afirmativa correta: Está parcialmente errada, uma vez que não é possível diferenciar ácidos nucléicos no PCR em tempo real; Está parcialmente errada, uma vez que também é possível distinguir diferentes variantes virais no PCR convencional em uma única reação (por exemplo, PCR multiplex); Está parcialmente errada, uma vez que é possível quantificar em tempo real o PCR convencional; Está totalmente correta; Está parcialmente errada, uma vez que não é possível quantificar ácidos nucléicos por PCR em tempo real. 5. Ref.: 3122771 Pontos: 1,00 / 1,00 (IF, TO, 2016): As técnicas de hibridação Northern Blotting, Southern Blotting e Western Blotting permitem estudar respectivamente: RNA, proteínas e DNA; Proteínas, RNA e DNA. DNA, RNA e proteínas; DNA, proteínas e RNA; RNA, DNA e proteínas; 6. Ref.: 3123218 Pontos: 1,00 / 1,00 (Fiocruz, 2010): Com relação aos métodos de coloração de proteínas em gel, assinale a alternativa correta: A coloração por Coomassie Blue é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional, em função de seu alto grau de sensibilidade; A coloração de Coomassie Blue é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional acoplada à espectrometria de massa, uma vez que as proteínas não se fixam de forma irreversível ao gel;Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3121493.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122771.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3123218.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 07/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 3/5 A coloração por prata é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional acoplada à espectrometria de massa, em função de seu alto grau de sensibilidade; A coloração por Coomassie Blue é a mais indicada apenas em situações onde a detecção das proteínas será realizada por meio da purificação e do sequenciamento manual dos spots de interesse, uma vez que, com esta técnica de coloração, são necessárias quantidades muito grandes de proteínas, o que inviabilizaria sua aplicação com métodos de detecção mais sensíveis. A coloração por prata deve ser evitada quando a intenção é submeter as proteínas separadas eletroforeticamente à detecção por espectometria de massa em função do alto teor de spots falsos positivos detectados após o tratamento com nitrato de prata; 7. Ref.: 3122561 Pontos: 1,00 / 1,00 (Adaptado de CESPE, 2017): O projeto genoma, que tratou do sequenciamento das bases que compõem o genoma humano e da variação entre os indivíduos da espécie, trouxe benefícios diretos à saúde humana e de outros organismos vivos, além de melhorias na agropecuária, indústria farmacêutica, ciência forense, metodologia científica e no desenvolvimento de instrumentos de análise laboratorial e computacional, entre outros. Portanto, o projeto genoma humano não se restringiu apenas ao genoma humano. Acerca desse assunto, complete as lacunas do texto a seguir: "O conhecimento do genoma humano ajudou a consolidar a ideia da importância das ____________________ gênicas, que é a origem dos alelos, na promoção de ____________________ genéticas entre indivíduos de uma mesma espécie e na busca de homologias entre o genoma humano e os de outros organismos." Nenhuma das alternativas acima. Frequências/ trocas; Mutações/ variações; Mutações/ trocas; Frequências/ variações; 8. Ref.: 3122625 Pontos: 1,00 / 1,00 (Adaptada de TJMA, 2004): A clonagem molecular tem demonstrado ser uma técnica excepcional para o isolamento de fragmentos de DNA específicos de um organismo. Os processos de clonagem e isolamento de tais fragmentos começam com a construção de bibliotecas de DNA, cDNA ou genômicas. Uma biblioteca de cDNA não apresenta íntrons porque: Não podem ser construídas a partir de genes; É construída a partir do mRNA maduro; Nenhuma das alternativas acima. É construída a partir de DNA genômico; Os introns são retirados in vitro depois da construção do cDNA, por ação de exonucleases; 9. Ref.: 3122588 Pontos: 1,00 / 1,00 (Instituto AOCP, 2018, ITEP, RN, Perito Criminal): Marido entra na justiça para pedir teste de paternidade para comprovar se todos os 3 filhos que ele tem com sua esposa são mesmo dele. A partir de a figura a seguir, baseada nos marcadores genéticos compartilhados ou não por pai, mãe e filhos, avaliese algum dos 3 filhos realmente não é dele: Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122561.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122625.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122588.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 07/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 4/5 Filho 2 e 3 não são dele; Filho 1 e 3 não são dele; Todos são filhos dele. Nenhum é filho dele; Filho 1 e 2 não são dele; 10. Ref.: 3126529 Pontos: 1,00 / 1,00 (INEP, 2016): Desenvolvida recentemente, a técnica de edição de genoma denominada CRISPR/Cas9 mostra-se bastante promissora nas áreas de Biotecnologia e Medicina. Por engenharia genética, é possível direcionar o sistema CRISPR/Cas9 para clivar o DNA em um ponto específico dos genomas de vírus, de plantas, de fungos e de animais, inclusive de embriões humanos, o que tem gerado discussões a respeito dos aspectos éticos de sua utilização. (YANAGUI, K. Novas tecnologias, novos desafios. Ciência e Cultura, São Paulo, v. 68, n. 3, set. 2016 (adaptado).) Em relação às questões bioéticas envolvidas na edição genética, avalie as afirmações a seguir: I. No Brasil, não é permitido o uso de técnicas para a edição genética de embriões humanos; os estudos científicos nessa área devem ter como objetivo tratar e curar problemas de saúde e não alterar o genoma ou realizar clonagens; II. A despeito do caráter promissor da edição genética no tratamento de doenças graves, as intervenções feitas por meio da técnica de CRISPR/Cas9 em embriões podem ser passadas às gerações futuras, por esse motivo, a prática é considerada eugenista, o que ensejou a proibição de estudos desse tipo em embriões humanos em alguns países; III. Em alguns países, inclusive no Brasil, são permitidas por lei a manipulação e a modificação genética de embriões humanos para fins de pesquisa, entretanto, esses embriões devem ser descartados dentro do prazo de duas semanas. É correto o que se afirma em: II e III, apenas; III, apenas; I e II, apenas; I, II e III. I, apenas; Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3126529.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 07/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 5/5 Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 07/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 1/5 FRANCISCA UILDILENE FREITAS SILVA 202003017132 Disciplina: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS AV Aluno: FRANCISCA UILDILENE FREITAS SILVA 202003017132 Professor: LYANA RODRIGUES PINTO LIMA CAPOBIANCO TAMIRES CRISTINA COSTA Turma: 9011 SDE4579_AV_202003017132 (AG) 21/11/2020 19:38:58 (F) Avaliação: 10,0 Nota Partic.: Nota SIA: 10,0 pts PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS 1. Ref.: 3115265 Pontos: 1,00 / 1,00 (IFF, Farroupilha-RS, 2016): O processo de extração e a purificação do DNA genômico compreende vários passos: Lise das células, extração de lipídeos e desoxiribonucleicos e precipitação do DNA. Lise das células, centrifugação e ressuspensão do DNA; Lise das células, extração das proteínas mais RNA e precipitação do DNA; Lise das células, extração de ácidos desoxiribonucleicos e precipitação do RNA; Quebra de lipídeos, precipitação do RNA e lise das proteínas; 2. Ref.: 3115308 Pontos: 1,00 / 1,00 (INMETRO, 2010): A técnica de PCR (reação em cadeia de polimerase), a mais utilizada para amplificação (clonagem) do DNA in vitro, revolucionou o acesso a informações genéticas. Com relação a essa técnica, assinale a opção correta: Com a PCR, a enzima Taq polimerase é capaz de manter sua atividade mesmo nas altas temperaturas necessárias para desnaturar a molécula de DNA; Na PCR, os primers (iniciadores) se hibridam com moléculas de DNA fita dupla; A PCR necessita ser acompanhada de um método de purificação para separar o fragmento amplificado do restante do genoma. Com a PCR, a clonagem molecular necessita de 48 a 72 horas para ser executada; A PCR também pode ser aplicada na análise de proteínas; 3. Ref.: 3907345 Pontos: 1,00 / 1,00 A técnica de eletroforese permite separar fragmentos de proteínas e ácidos nucléicos por tamanho e carga elétrica. Com base na figura abaixo, que representa uma corrida de eletroforese de DNA, marque a alternativa CORRETA: Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:voltar(); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3115265.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3115308.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3907345.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 07/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 2/5 Os fragmentos menores de DNA migram mais rápido do que os fragmentos maiores, pois se aderem mais facilmente aos íons do tampão utilizado na eletroforese. A coloração é feita por um corante intercalante de DNA que tem afinidade com as ligações fosfodiéster da referida molécula. A migração das amostras ocorre no sentido do polo negativo (-) para o polo positivo (+), devido a carga negativa do fosfato localizado no nucleotídeo de DNA. A utilização do Marcador Molecular é indicada para auxiliar na estimativa da concentração dos fragmentos de DNA que aparecerem no gel. Os fragmentos maiores de DNA migram mais rápido do que os fragmentos menores, devido ao seu alto peso molecular. 4. Ref.: 3121493 Pontos: 1,00 / 1,00 (Fiocruz, 2010): A técnica de PCR em tempo real permite ao usuário detectar, diferenciar variantes virais e quantificar ácidos nucléicos provenientes de uma infecção viral em uma única reação em tempo real, enquanto o PCR convencional basicamente permite apenas a detecção de ácidos nucléicos em uma única reação. De acordo com a frase acima, assinale a afirmativa correta: Está parcialmente errada, uma vez que não é possível diferenciar ácidos nucléicos no PCR em tempo real; Está parcialmente errada, uma vez que é possível quantificar em tempo real o PCR convencional; Está parcialmente errada, uma vez que não é possível quantificar ácidos nucléicos por PCR em tempo real. Está totalmente correta; Está parcialmente errada, uma vez que também é possível distinguir diferentes variantes virais no PCR convencional em uma única reação (por exemplo, PCR multiplex); 5. Ref.: 3122771 Pontos: 1,00 / 1,00 (IF, TO, 2016): As técnicas de hibridação Northern Blotting, Southern Blotting e Western Blotting permitem estudar respectivamente: RNA, proteínas e DNA; DNA, RNA e proteínas; DNA, proteínas e RNA; Proteínas, RNA e DNA. RNA, DNA e proteínas; 6. Ref.: 3123218 Pontos: 1,00 / 1,00 (Fiocruz, 2010): Com relação aos métodos de coloração de proteínas em gel, assinale a alternativa correta: A coloração por prata é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional acoplada à espectrometria de massa, em função de seu alto grau de sensibilidade; A coloração por prata deve ser evitada quando a intenção é submeter as proteínas separadas eletroforeticamente à detecção por espectometria de massa em função do alto teor de spots falsos positivosEducational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3121493.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122771.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3123218.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 07/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/3/5 detectados após o tratamento com nitrato de prata; A coloração de Coomassie Blue é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional acoplada à espectrometria de massa, uma vez que as proteínas não se fixam de forma irreversível ao gel; A coloração por Coomassie Blue é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional, em função de seu alto grau de sensibilidade; A coloração por Coomassie Blue é a mais indicada apenas em situações onde a detecção das proteínas será realizada por meio da purificação e do sequenciamento manual dos spots de interesse, uma vez que, com esta técnica de coloração, são necessárias quantidades muito grandes de proteínas, o que inviabilizaria sua aplicação com métodos de detecção mais sensíveis. 7. Ref.: 3122561 Pontos: 1,00 / 1,00 (Adaptado de CESPE, 2017): O projeto genoma, que tratou do sequenciamento das bases que compõem o genoma humano e da variação entre os indivíduos da espécie, trouxe benefícios diretos à saúde humana e de outros organismos vivos, além de melhorias na agropecuária, indústria farmacêutica, ciência forense, metodologia científica e no desenvolvimento de instrumentos de análise laboratorial e computacional, entre outros. Portanto, o projeto genoma humano não se restringiu apenas ao genoma humano. Acerca desse assunto, complete as lacunas do texto a seguir: "O conhecimento do genoma humano ajudou a consolidar a ideia da importância das ____________________ gênicas, que é a origem dos alelos, na promoção de ____________________ genéticas entre indivíduos de uma mesma espécie e na busca de homologias entre o genoma humano e os de outros organismos." Mutações/ variações; Nenhuma das alternativas acima. Frequências/ trocas; Frequências/ variações; Mutações/ trocas; 8. Ref.: 3122625 Pontos: 1,00 / 1,00 (Adaptada de TJMA, 2004): A clonagem molecular tem demonstrado ser uma técnica excepcional para o isolamento de fragmentos de DNA específicos de um organismo. Os processos de clonagem e isolamento de tais fragmentos começam com a construção de bibliotecas de DNA, cDNA ou genômicas. Uma biblioteca de cDNA não apresenta íntrons porque: Não podem ser construídas a partir de genes; É construída a partir do mRNA maduro; Nenhuma das alternativas acima. Os introns são retirados in vitro depois da construção do cDNA, por ação de exonucleases; É construída a partir de DNA genômico; 9. Ref.: 3122588 Pontos: 1,00 / 1,00 (Instituto AOCP, 2018, ITEP, RN, Perito Criminal): Marido entra na justiça para pedir teste de paternidade para comprovar se todos os 3 filhos que ele tem com sua esposa são mesmo dele. A partir de a figura a seguir, baseada nos marcadores genéticos compartilhados ou não por pai, mãe e filhos, avalie se algum dos 3 filhos realmente não é dele: Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122561.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122625.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122588.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 07/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 4/5 Filho 2 e 3 não são dele; Nenhum é filho dele; Filho 1 e 3 não são dele; Todos são filhos dele. Filho 1 e 2 não são dele; 10. Ref.: 3126529 Pontos: 1,00 / 1,00 (INEP, 2016): Desenvolvida recentemente, a técnica de edição de genoma denominada CRISPR/Cas9 mostra-se bastante promissora nas áreas de Biotecnologia e Medicina. Por engenharia genética, é possível direcionar o sistema CRISPR/Cas9 para clivar o DNA em um ponto específico dos genomas de vírus, de plantas, de fungos e de animais, inclusive de embriões humanos, o que tem gerado discussões a respeito dos aspectos éticos de sua utilização. (YANAGUI, K. Novas tecnologias, novos desafios. Ciência e Cultura, São Paulo, v. 68, n. 3, set. 2016 (adaptado).) Em relação às questões bioéticas envolvidas na edição genética, avalie as afirmações a seguir: I. No Brasil, não é permitido o uso de técnicas para a edição genética de embriões humanos; os estudos científicos nessa área devem ter como objetivo tratar e curar problemas de saúde e não alterar o genoma ou realizar clonagens; II. A despeito do caráter promissor da edição genética no tratamento de doenças graves, as intervenções feitas por meio da técnica de CRISPR/Cas9 em embriões podem ser passadas às gerações futuras, por esse motivo, a prática é considerada eugenista, o que ensejou a proibição de estudos desse tipo em embriões humanos em alguns países; III. Em alguns países, inclusive no Brasil, são permitidas por lei a manipulação e a modificação genética de embriões humanos para fins de pesquisa, entretanto, esses embriões devem ser descartados dentro do prazo de duas semanas. É correto o que se afirma em: II e III, apenas; I e II, apenas; I, apenas; I, II e III. III, apenas; Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3126529.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 07/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 5/5 Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 07/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 1/6 RAFAEL CARDOSO BARRETO 202003571911 Disciplina: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS AV Aluno: RAFAEL CARDOSO BARRETO 202003571911 Professor: LYANA RODRIGUES PINTO LIMA CAPOBIANCO TAMIRES CRISTINA COSTA Turma: 9012 SDE4579_AV_202003571911 (AG) 07/11/2020 14:08:52 (F) Avaliação: 10,0 Nota Partic.: Av. Parcial.: 2,0 Nota SIA: 10,0 pts PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS 1. Ref.: 3907400 Pontos: 1,00 / 1,00 Para a extração de RNA/DNA, uma das etapas mais importante é a eliminação das proteínas durante o processo de purificação. Para a eliminação de proteínas na extração de RNA/DNA, assinale a afirmativa inadequada. Solubilização em tampões ácidos (pH menor que 3,5). Precipitação salina. Digestão das amostras com a enzima proteinase K. Solubilização em tampões de guanidina Extrações com misturas de solventes orgânicos como fenol e clorofórmio por repetidas vezes. 2. Ref.: 3115275 Pontos: 1,00 / 1,00 (PC, PI, 2018) - Em investigações criminais, alguns fios de cabelo, células da pele, sangue ou outros fluidos corporais podem ser deixados no local e o DNA recolhido a partir dessas amostras tem a capacidade de indicar a solução do crime. Muitas vezes a quantidade de DNA disponível para análise é limitada, contudo com a técnica de Reação em Cadeia de Polimerase (PCR), o menor vestígio de DNA encontrado pode ser amplificado, aumentando a quantidade de material e proporcionando o suficiente para traçar o perfil genético e assim garantir a análise. A respeito da técnica de PCR, assinale a opção correta: Atualmente, devem-se adicionar enzimas de polimerização a cada etapa de desnaturação. As etapas utilizadas para realizar a PCR são a desnaturação, extensão (Taq polimerase) e anelamento (primers) nesta ordem; Na PCR convencional, o resultado é comumente analisado por meio de uma eletroforese em gel de agarose ou de poliacrilamida; A PCR convencional permite a quantificação dos produtos por meio de fluorescência; Para realizar a PCR é necessário utilizar apenas o DNA a ser amplificado, Taq polimerase e nucleotídeos (dNTPs); 3. Ref.: 3907352 Pontos: 1,00 / 1,00Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:voltar(); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3907400.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3115275.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3907352.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulodo Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 07/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 2/6 Gabriela irá realizar a técnica de eletroforese para avaliar qualitativamente e quantitativa o RNA extraído de células bucais que será utilizado no seu projeto de mestrado. Porém, Gabriela tem dúvidas quanto ao príncipio e aplicação da técnicas. Marque a alternativa da melhor explicação que você daria a Gabriela. A eletroforese é uma técnica que utiliza corantes fluorescente como iodina para detectar e quantificar substâncias. A eletroforese é uma técnica ótica que associa a quantidade de luz transmitida com a quantidade da substância na amostra. A eletroforese é técnica que utiliza campo elétrico para separar moléculas de acordo com o peso molecular e afinidade. a) A eletroforese é uma técnica ótica que associa a quantidade de luz absorvida com a quantidade da substância na amostra. A eletroforese é técnica que utiliza campo elétrico para separar moléculas de acordo com carga e peso molecular 4. Ref.: 3121493 Pontos: 1,00 / 1,00 (Fiocruz, 2010): A técnica de PCR em tempo real permite ao usuário detectar, diferenciar variantes virais e quantificar ácidos nucléicos provenientes de uma infecção viral em uma única reação em tempo real, enquanto o PCR convencional basicamente permite apenas a detecção de ácidos nucléicos em uma única reação. De acordo com a frase acima, assinale a afirmativa correta: Está parcialmente errada, uma vez que também é possível distinguir diferentes variantes virais no PCR convencional em uma única reação (por exemplo, PCR multiplex); Está parcialmente errada, uma vez que é possível quantificar em tempo real o PCR convencional; Está totalmente correta; Está parcialmente errada, uma vez que não é possível diferenciar ácidos nucléicos no PCR em tempo real; Está parcialmente errada, uma vez que não é possível quantificar ácidos nucléicos por PCR em tempo real. 5. Ref.: 3907414 Pontos: 1,00 / 1,00 Considere a figura abaixo. Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3121493.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3907414.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 07/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 3/6 As etapas apresentadas na figura correspondem à técnica de: Western blotting. Pareamento indireto de DNA. ELISA indireto. Southern blotting. PCR. 6. Ref.: 3123218 Pontos: 1,00 / 1,00 (Fiocruz, 2010): Com relação aos métodos de coloração de proteínas em gel, assinale a alternativa correta: A coloração por prata deve ser evitada quando a intenção é submeter as proteínas separadas eletroforeticamente à detecção por espectometria de massa em função do alto teor de spots falsos positivos detectados após o tratamento com nitrato de prata; A coloração por Coomassie Blue é a mais indicada apenas em situações onde a detecção das proteínas será realizada por meio da purificação e do sequenciamento manual dos spots de interesse, uma vez que, com esta técnica de coloração, são necessárias quantidades muito grandes de proteínas, o que inviabilizaria sua aplicação com métodos de detecção mais sensíveis. A coloração por prata é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional acoplada à espectrometria de massa, em função de seu alto grau de sensibilidade; A coloração por Coomassie Blue é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional, em função de seu alto grau de sensibilidade;Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3123218.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 07/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 4/6 A coloração de Coomassie Blue é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional acoplada à espectrometria de massa, uma vez que as proteínas não se fixam de forma irreversível ao gel; 7. Ref.: 3122561 Pontos: 1,00 / 1,00 (Adaptado de CESPE, 2017): O projeto genoma, que tratou do sequenciamento das bases que compõem o genoma humano e da variação entre os indivíduos da espécie, trouxe benefícios diretos à saúde humana e de outros organismos vivos, além de melhorias na agropecuária, indústria farmacêutica, ciência forense, metodologia científica e no desenvolvimento de instrumentos de análise laboratorial e computacional, entre outros. Portanto, o projeto genoma humano não se restringiu apenas ao genoma humano. Acerca desse assunto, complete as lacunas do texto a seguir: "O conhecimento do genoma humano ajudou a consolidar a ideia da importância das ____________________ gênicas, que é a origem dos alelos, na promoção de ____________________ genéticas entre indivíduos de uma mesma espécie e na busca de homologias entre o genoma humano e os de outros organismos." Mutações/ trocas; Frequências/ trocas; Mutações/ variações; Nenhuma das alternativas acima. Frequências/ variações; 8. Ref.: 3122623 Pontos: 1,00 / 1,00 (UFC, 2015): Classicamente, a clonagem de segmentos DNA a partir de qualquer organismo envolve cinco processos gerais. Assinale a alternativa que lista corretamente esses cinco processos: Clivagem do DNA, seleção de vetores de clonagem, produção de uma molécula de DNA recombinante, transporte do DNA recombinante para a célula hospedeira, seleção da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; Seleção do DNA recombinante, uso de vetores de clonagem, transformação da célula hospedeira, eletroforese de DNA e seleção da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; Seleção do DNA a ser clonado, transporte do DNA recombinante para a célula hospedeira, extração de DNA, Eletroforese em gel de agarose e identificação da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; Extração e eletroforese de DNA, seleção de vetores de expressão, produção de uma molécula de DNA recombinante, transporte do DNA recombinante para a célula hospedeira, seleção da célula hospedeira que contém o DNA recombinante. Clivagem do DNA, eletroforese em gel de agarose, ligação do DNA recombinante em um vetor de clonagem, transporte do DNA recombinante para uma célula hospedeira, seleção da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; 9. Ref.: 3122588 Pontos: 1,00 / 1,00 (Instituto AOCP, 2018, ITEP, RN, Perito Criminal): Marido entra na justiça para pedir teste de paternidade para comprovar se todos os 3 filhos que ele tem com sua esposa são mesmo dele. A partir de a figura a seguir, baseada nos marcadores genéticos compartilhados ou não por pai, mãe e filhos, avalie se algum dos 3 filhos realmente não é dele: Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122561.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122623.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122588.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 07/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 5/6 Todos são filhos dele. Nenhum é filho dele; Filho 1 e 3 não são dele; Filho 2 e 3 não são dele; Filho 1 e 2 não são dele; 10. Ref.: 3126529 Pontos: 1,00 / 1,00 (INEP, 2016): Desenvolvida recentemente, a técnica de edição de genoma denominada CRISPR/Cas9 mostra-se bastante promissora nas áreas de Biotecnologia e Medicina. Por engenharia genética, é possível direcionar o sistema CRISPR/Cas9 para clivar o DNA em um ponto específico dos genomas de vírus, de plantas, de fungos e de animais, inclusive de embriões humanos, o que tem gerado discussões a respeito dos aspectos éticos de sua utilização. (YANAGUI, K. Novas tecnologias, novos desafios. Ciência e Cultura, São Paulo, v. 68, n. 3, set. 2016 (adaptado).) Em relação às questões bioéticasenvolvidas na edição genética, avalie as afirmações a seguir: I. No Brasil, não é permitido o uso de técnicas para a edição genética de embriões humanos; os estudos científicos nessa área devem ter como objetivo tratar e curar problemas de saúde e não alterar o genoma ou realizar clonagens; II. A despeito do caráter promissor da edição genética no tratamento de doenças graves, as intervenções feitas por meio da técnica de CRISPR/Cas9 em embriões podem ser passadas às gerações futuras, por esse motivo, a prática é considerada eugenista, o que ensejou a proibição de estudos desse tipo em embriões humanos em alguns países; III. Em alguns países, inclusive no Brasil, são permitidas por lei a manipulação e a modificação genética de embriões humanos para fins de pesquisa, entretanto, esses embriões devem ser descartados dentro do prazo de duas semanas. É correto o que se afirma em: II e III, apenas; I, II e III. I, apenas; III, apenas; I e II, apenas; Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3126529.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 07/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 6/6 Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 03/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2883639&matr_integracao=202005030721 1/5 Ineli conte 202005030721 Disciplina: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS AV Aluno: INELI CONTE 202005030721 Professor: LYANA RODRIGUES PINTO LIMA CAPOBIANCO TAMIRES CRISTINA COSTA Turma: 9011 SDE4579_AV_202005030721 (AG) 21/10/2020 23:39:19 (F) Avaliação: 10,0 Nota Partic.: Nota SIA: 10,0 pts PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS 1. Ref.: 3115261 Pontos: 1,00 / 1,00 (IGP, 2008): Analise as afirmações abaixo sobre a estrutura e composição dos ácidos nucléicos. I Quatro aspectos principais definem a estrutura da molécula de DNA: a dupla-hélice, o diâmetro uniforme, o giro para a direita e o antiparalelismo. II Considerando a regra de Chargaff, A+G = T+C; já a razão A+T para G+C varia entre as espécies. III As ligações químicas existentes entre as bases nitrogenadas são de hidrogênio, já as ligações entre o açúcar e a base nitrogenada são do tipo fosfodiéster. IV Um nucleosídeo é composto por um açúcar e uma base nitrogenada, já um nucleotídeo é composto por um açúcar, uma base nitrogenada e um grupamento fosfato. Quais estão corretas? A I, a II, a III e a IV. Apenas a I, a II e a III; Apenas a I e a II; Apenas a I, a II e a IV; Apenas a III e a IV; 2. Ref.: 3115271 Pontos: 1,00 / 1,00 (UFRJ, 2012): Para uma reação de PCR ocorrer corretamente, são necessários os seguintes componentes: uma polimerase de DNA termoestável, desoxirribonucleosídeos, um par de iniciadores e um molde de DNA; uma polimerase de DNA termolábil, desoxirribo-nucleotídeos trifosfatados, um iniciador e um molde de RNA; uma polimerase de DNA termoestável, desoxirribonucleotídeos trifosfatados, um par de iniciadores e um molde de DNA. uma polimerase de DNA termolábil, desoxirribonucleotídeos trifosfatados, um par de iniciadores e um molde de Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:voltar(); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3115261.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3115271.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 03/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2883639&matr_integracao=202005030721 2/5 ácido nucleico; uma polimerase de DNA termoestável, desoxirribonucleotídeos trifosfatados, dois pares de iniciadores e um molde de ácido nucleico; 3. Ref.: 3907341 Pontos: 1,00 / 1,00 A análise do DNA através da eletroforese é um procedimento de rotina em laboratórios de biotecnologia. Dados os fatores que influenciam a migração do DNA através do gel de agarose durante a eletroforese, I. Tamanho da molécula. II. Forma da molécula. III. Concentração da agarose. IV. Tampão de eletroforese. Verifica-se que está(ão) correto(s): B) I, II e III, apenas. D) IV, apenas. A) I, II, III e IV. E) I, apenas. C) II e III, apenas. 4. Ref.: 3907365 Pontos: 1,00 / 1,00 A técnica de PCR (reação em cadeia de polimerase) em tempo real revolucionou o processo de quantificação de fragmentos de DNA. Ela realiza a quantificação desses ácidos nucleicos de maneira precisa e com maior reprodutividade. Assinale o fator que permite essa quantificação: A eletroforese. Os marcadores STRs O sequenciamento do DNA O termociclador. A fluorescência. 5. Ref.: 3130841 Pontos: 1,00 / 1,00 (Adaptada de INCA, 2010): A respeito dos testes sorológicos, complete a lacuna a seguir: "_______________ é uma técnica sorológica que detecta a presença de anticorpos específicos contra o HIV." PCR; Clonagem; Southern Blot; Northern Blot; Western Blot. 6. Ref.: 3907435 Pontos: 1,00 / 1,00 A espectrometria de massa é uma técnica utilizada para o estudo de massas de átomos, moléculas ou fragmentos de moléculas, desde que estes estejam eletricamente carregados. A respeito desse assunto, julgue as afirmações. I. Um espectrômetro de massas determina a massa de uma molécula ou átomo medindo a razão massa/carga dos íons gerados. II. Os íons são gerados pela indução, perda ou ganho de carga por uma espécie eletricamente neutra. Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3907341.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3907365.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3130841.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3907435.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 03/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2883639&matr_integracao=202005030721 3/5 III. Uma vez formados, os íons são direcionados, por forças eletrostáticas, para dentro do analisador de massas, separados de acordo com suas razões massa/carga e finalmente detectados. Assinale a alternativa correta. Estão corretas apenas as afirmativas II e III Estão corretas apenas as afirmativas I e III Estão corretas apenas as afirmativas I e II Está correta apenas a afirmativa I Estão corretas todas as afirmativas 7. Ref.: 3122574 Pontos: 1,00 / 1,00 (INSTITUTO AOCP, 2018): Preencha as lacunas e assinale a alternativa correta: "As duas técnicas mais importantes para o sequenciamento de DNA são o método ____________________ desenvolvido por Allan Maxam e Walter Gilbert, em 1977, e o método ____________________ de Fred Sanger e colaboradores, de 1978. Os dois métodos são baseados na produção de um conjunto de fitas simples de DNA que são separadas pelo princípio de eletroforese." físico de depleção de bases / didesoxi de iniciação de cadeia. químico de depleção de bases / didesoxi ou terminação de cadeia; físico de degradação / desoxi ou terminação de cadeia; físico de depleção de bases / desoxi ou terminação de cadeia; químico de degradação de bases / didesoxi ou terminação de cadeia; 8. Ref.: 3279460 Pontos: 1,00 / 1,00 (Unesp, 2012): A obtenção de fragmentos de DNA contendo sequências complementares em suas extremidades é a primeira etapa a ser vencida no processo de clonagem de um gene. Esses fragmentos deverão ser ligados in vitro a vetores moleculares que se encarregarão de transportá-los para dentro das células e assim gerar clones. Um dos vetores de clonagem molecular comumente empregado são plasmídios, os quais se constituem de moléculas de: DNA circulares, dupla fita, incapazes de autorreplicação; DNA circulares, duplafita, capazes de autorreplicação; DNA helicoidais, dupla fita, capazes de autorreplicação; RNA circulares, dupla fita, capazes de autorreplicação; DNA circulares, fita simples, incapazes de autorreplicação. 9. Ref.: 3122586 Pontos: 1,00 / 1,00 (INEP, 2006): Testes de DNA para determinação de paternidade são hoje em dia realizados por meio da tecnologia de PCR (polymerase chain reaction, ou reação de polimerase em cadeia). Estes testes distinguem loci conhecidos como microssatélites. Em um desses testes foram observados os resultados ilustrados no esquema abaixo, que representa a migração eletroforética de uma análise de paternidade de uma criança ( F ), sua mãe ( M ) e o suposto pai (SP). Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122574.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3279460.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122586.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 03/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2883639&matr_integracao=202005030721 4/5 Analise as afirmações abaixo: I - PCR pode ser feito a partir de amostras com pouco DNA dos indivíduos, já que a técnica possibilita a amplificação de sequências específicas de DNA; II - O resultado revela que SP não deve ser o pai da criança, já que uma das bandas de DNA deste não é encontrada no DNA da criança; III - Microssatélites são regiões do genoma nas quais ocorrem repetições de sequências nucleotídicas e por isso cada locus pode resultar em variações de tamanho nos indivíduos testados. Está correto o que se afirma em: I e II, somente; II e III, somente; I, II e III. II, somente; I e III, somente; 10. Ref.: 3126527 Pontos: 1,00 / 1,00 (Adaptado de UNIFESP, 2017): Complete as lacunas do texto a seguir, a respeito do sistema de defesa CRISPR-Cas9 de bactérias: O Sistema CRISPR-Cas9 foi desenvolvido em laboratório e é constituído de um RNA-guia (CRISPR) associado a uma enzima de restrição (Cas9). O RNA-guia é uma sequência curta de RNA sintético __________ à sequência de um determinado trecho de __________. Quando introduzido em células vivas, o CRISPR-Cas9 detecta a sequência de DNA complementar e a enzima corta o DNA em um ponto específico. Em seguida, o sistema de reparo do DNA é ativado, unindo novamente os segmentos que foram separados. Nesse processo, podem ocorrer alterações na sequência original, causando a __________ de um gene. Sistemas semelhantes ao CRISPR-Cas9 são encontrados naturalmente em bactérias e ativados quando estas são infectadas por vírus. Idêntica/ DNA/ inativação; Complementar/ RNA/ inativação.Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3126527.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 03/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2883639&matr_integracao=202005030721 5/5 Complementar/ RNA/ativação; Idêntica/ RNA/ativação; Complementar/ DNA/ inativação; Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 07/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 1/5 Marcia muniz Matos 202004042841 Disciplina: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS AV Aluno: MARCIA MUNIZ MATOS 202004042841 Professor: LYANA RODRIGUES PINTO LIMA CAPOBIANCO TAMIRES CRISTINA COSTA Turma: 9012 SDE4579_AV_202004042841 (AG) 19/11/2020 03:34:18 (F) Avaliação: 10,0 Nota Partic.: Av. Parcial.: Nota SIA: 10,0 pts PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS 1. Ref.: 3115265 Pontos: 1,00 / 1,00 (IFF, Farroupilha-RS, 2016): O processo de extração e a purificação do DNA genômico compreende vários passos: Lise das células, extração de lipídeos e desoxiribonucleicos e precipitação do DNA. Lise das células, extração das proteínas mais RNA e precipitação do DNA; Quebra de lipídeos, precipitação do RNA e lise das proteínas; Lise das células, extração de ácidos desoxiribonucleicos e precipitação do RNA; Lise das células, centrifugação e ressuspensão do DNA; 2. Ref.: 3115308 Pontos: 1,00 / 1,00 (INMETRO, 2010): A técnica de PCR (reação em cadeia de polimerase), a mais utilizada para amplificação (clonagem) do DNA in vitro, revolucionou o acesso a informações genéticas. Com relação a essa técnica, assinale a opção correta: A PCR necessita ser acompanhada de um método de purificação para separar o fragmento amplificado do restante do genoma. Com a PCR, a enzima Taq polimerase é capaz de manter sua atividade mesmo nas altas temperaturas necessárias para desnaturar a molécula de DNA; Na PCR, os primers (iniciadores) se hibridam com moléculas de DNA fita dupla; Com a PCR, a clonagem molecular necessita de 48 a 72 horas para ser executada; A PCR também pode ser aplicada na análise de proteínas; 3. Ref.: 3907345 Pontos: 1,00 / 1,00 A técnica de eletroforese permite separar fragmentos de proteínas e ácidos nucléicos por tamanho e carga elétrica. Com base na figura abaixo, que representa uma corrida de eletroforese de DNA, marque a alternativa CORRETA: Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:voltar(); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3115265.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3115308.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3907345.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 07/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 2/5 Os fragmentos maiores de DNA migram mais rápido do que os fragmentos menores, devido ao seu alto peso molecular. A coloração é feita por um corante intercalante de DNA que tem afinidade com as ligações fosfodiéster da referida molécula. Os fragmentos menores de DNA migram mais rápido do que os fragmentos maiores, pois se aderem mais facilmente aos íons do tampão utilizado na eletroforese. A migração das amostras ocorre no sentido do polo negativo (-) para o polo positivo (+), devido a carga negativa do fosfato localizado no nucleotídeo de DNA. A utilização do Marcador Molecular é indicada para auxiliar na estimativa da concentração dos fragmentos de DNA que aparecerem no gel. 4. Ref.: 3121493 Pontos: 1,00 / 1,00 (Fiocruz, 2010): A técnica de PCR em tempo real permite ao usuário detectar, diferenciar variantes virais e quantificar ácidos nucléicos provenientes de uma infecção viral em uma única reação em tempo real, enquanto o PCR convencional basicamente permite apenas a detecção de ácidos nucléicos em uma única reação. De acordo com a frase acima, assinale a afirmativa correta: Está parcialmente errada, uma vez que é possível quantificar em tempo real o PCR convencional; Está parcialmente errada, uma vez que não é possível diferenciar ácidos nucléicos no PCR em tempo real; Está parcialmente errada, uma vez que também é possível distinguir diferentes variantes virais no PCR convencional em uma única reação (por exemplo, PCR multiplex); Está parcialmente errada, uma vez que não é possível quantificar ácidos nucléicos por PCR em tempo real. Está totalmente correta; 5. Ref.: 3122771 Pontos: 1,00 / 1,00 (IF, TO, 2016): As técnicas de hibridação Northern Blotting, Southern Blotting e Western Blotting permitem estudar respectivamente: Proteínas, RNA e DNA. RNA, proteínas e DNA; DNA, RNA e proteínas; DNA, proteínas e RNA; RNA, DNA e proteínas; 6. Ref.: 3123218 Pontos: 1,00 / 1,00 (Fiocruz, 2010): Com relação aos métodos de coloração de proteínas em gel, assinale a alternativa correta: A coloração por prata deve ser evitada quando a intenção é submeter as proteínas separadas eletroforeticamenteà detecção por espectometria de massa em função do alto teor de spots falsos positivos detectados após o tratamento com nitrato de prata; A coloração por Coomassie Blue é a mais indicada apenas em situações onde a detecção das proteínas seráEducational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3121493.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122771.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3123218.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 07/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 3/5 realizada por meio da purificação e do sequenciamento manual dos spots de interesse, uma vez que, com esta técnica de coloração, são necessárias quantidades muito grandes de proteínas, o que inviabilizaria sua aplicação com métodos de detecção mais sensíveis. A coloração por Coomassie Blue é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional, em função de seu alto grau de sensibilidade; A coloração de Coomassie Blue é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional acoplada à espectrometria de massa, uma vez que as proteínas não se fixam de forma irreversível ao gel; A coloração por prata é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional acoplada à espectrometria de massa, em função de seu alto grau de sensibilidade; 7. Ref.: 3122561 Pontos: 1,00 / 1,00 (Adaptado de CESPE, 2017): O projeto genoma, que tratou do sequenciamento das bases que compõem o genoma humano e da variação entre os indivíduos da espécie, trouxe benefícios diretos à saúde humana e de outros organismos vivos, além de melhorias na agropecuária, indústria farmacêutica, ciência forense, metodologia científica e no desenvolvimento de instrumentos de análise laboratorial e computacional, entre outros. Portanto, o projeto genoma humano não se restringiu apenas ao genoma humano. Acerca desse assunto, complete as lacunas do texto a seguir: "O conhecimento do genoma humano ajudou a consolidar a ideia da importância das ____________________ gênicas, que é a origem dos alelos, na promoção de ____________________ genéticas entre indivíduos de uma mesma espécie e na busca de homologias entre o genoma humano e os de outros organismos." Frequências/ variações; Frequências/ trocas; Nenhuma das alternativas acima. Mutações/ variações; Mutações/ trocas; 8. Ref.: 3122625 Pontos: 1,00 / 1,00 (Adaptada de TJMA, 2004): A clonagem molecular tem demonstrado ser uma técnica excepcional para o isolamento de fragmentos de DNA específicos de um organismo. Os processos de clonagem e isolamento de tais fragmentos começam com a construção de bibliotecas de DNA, cDNA ou genômicas. Uma biblioteca de cDNA não apresenta íntrons porque: Não podem ser construídas a partir de genes; Nenhuma das alternativas acima. É construída a partir de DNA genômico; É construída a partir do mRNA maduro; Os introns são retirados in vitro depois da construção do cDNA, por ação de exonucleases; 9. Ref.: 3122588 Pontos: 1,00 / 1,00 (Instituto AOCP, 2018, ITEP, RN, Perito Criminal): Marido entra na justiça para pedir teste de paternidade para comprovar se todos os 3 filhos que ele tem com sua esposa são mesmo dele. A partir de a figura a seguir, baseada nos marcadores genéticos compartilhados ou não por pai, mãe e filhos, avalie se algum dos 3 filhos realmente não é dele: Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122561.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122625.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122588.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 07/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 4/5 Filho 2 e 3 não são dele; Filho 1 e 3 não são dele; Todos são filhos dele. Filho 1 e 2 não são dele; Nenhum é filho dele; 10. Ref.: 3126529 Pontos: 1,00 / 1,00 (INEP, 2016): Desenvolvida recentemente, a técnica de edição de genoma denominada CRISPR/Cas9 mostra-se bastante promissora nas áreas de Biotecnologia e Medicina. Por engenharia genética, é possível direcionar o sistema CRISPR/Cas9 para clivar o DNA em um ponto específico dos genomas de vírus, de plantas, de fungos e de animais, inclusive de embriões humanos, o que tem gerado discussões a respeito dos aspectos éticos de sua utilização. (YANAGUI, K. Novas tecnologias, novos desafios. Ciência e Cultura, São Paulo, v. 68, n. 3, set. 2016 (adaptado).) Em relação às questões bioéticas envolvidas na edição genética, avalie as afirmações a seguir: I. No Brasil, não é permitido o uso de técnicas para a edição genética de embriões humanos; os estudos científicos nessa área devem ter como objetivo tratar e curar problemas de saúde e não alterar o genoma ou realizar clonagens; II. A despeito do caráter promissor da edição genética no tratamento de doenças graves, as intervenções feitas por meio da técnica de CRISPR/Cas9 em embriões podem ser passadas às gerações futuras, por esse motivo, a prática é considerada eugenista, o que ensejou a proibição de estudos desse tipo em embriões humanos em alguns países; III. Em alguns países, inclusive no Brasil, são permitidas por lei a manipulação e a modificação genética de embriões humanos para fins de pesquisa, entretanto, esses embriões devem ser descartados dentro do prazo de duas semanas. É correto o que se afirma em: I, II e III. I, apenas; I e II, apenas; III, apenas; II e III, apenas; Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3126529.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 07/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 5/5 Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 13/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 1/6 RAFAEL CARDOSO BARRETO 202003571911 Disciplina: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS AV Aluno: RAFAEL CARDOSO BARRETO 202003571911 Professor: LYANA RODRIGUES PINTO LIMA CAPOBIANCO TAMIRES CRISTINA COSTA Turma: 9012 SDE4579_AV_202003571911 (AG) 07/11/2020 14:08:52 (F) Avaliação: 10,0 Nota Partic.: Av. Parcial.: 2,0 Nota SIA: 10,0 pts PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS 1. Ref.: 3907400 Pontos: 1,00 / 1,00 Para a extração de RNA/DNA, uma das etapas mais importante é a eliminação das proteínas durante o processo de purificação. Para a eliminação de proteínas na extração de RNA/DNA, assinale a afirmativa inadequada. Solubilização em tampões ácidos (pH menor que 3,5). Precipitação salina. Digestão das amostras com a enzima proteinase K. Solubilização em tampões de guanidina Extrações com misturas de solventes orgânicos como fenol e clorofórmio por repetidas vezes. 2. Ref.: 3115275 Pontos: 1,00 / 1,00 (PC, PI, 2018) - Em investigações criminais, alguns fios de cabelo, células da pele, sangue ou outros fluidos corporais podem ser deixados no local e o DNA recolhido a partir dessas amostras tem a capacidade de indicar a solução do crime. Muitas vezes a quantidade de DNA disponível para análise é limitada, contudo com a técnica de Reação em Cadeia de Polimerase (PCR), o menor vestígio de DNA encontrado pode ser amplificado, aumentando a quantidade de material e proporcionando o suficiente para traçar o perfil genético e assim garantir a análise. A respeito da técnica de PCR, assinale a opção correta: Atualmente, devem-se adicionar enzimas de polimerização a cada etapa de desnaturação. As etapas utilizadas para realizar a PCR são a desnaturação, extensão (Taq polimerase) e anelamento (primers) nesta ordem;Na PCR convencional, o resultado é comumente analisado por meio de uma eletroforese em gel de agarose ou de poliacrilamida; A PCR convencional permite a quantificação dos produtos por meio de fluorescência; Para realizar a PCR é necessário utilizar apenas o DNA a ser amplificado, Taq polimerase e nucleotídeos (dNTPs); 3. Ref.: 3907352 Pontos: 1,00 / 1,00Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:voltar(); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3907400.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3115275.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3907352.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 13/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 2/6 Gabriela irá realizar a técnica de eletroforese para avaliar qualitativamente e quantitativa o RNA extraído de células bucais que será utilizado no seu projeto de mestrado. Porém, Gabriela tem dúvidas quanto ao príncipio e aplicação da técnicas. Marque a alternativa da melhor explicação que você daria a Gabriela. A eletroforese é uma técnica que utiliza corantes fluorescente como iodina para detectar e quantificar substâncias. A eletroforese é uma técnica ótica que associa a quantidade de luz transmitida com a quantidade da substância na amostra. A eletroforese é técnica que utiliza campo elétrico para separar moléculas de acordo com o peso molecular e afinidade. a) A eletroforese é uma técnica ótica que associa a quantidade de luz absorvida com a quantidade da substância na amostra. A eletroforese é técnica que utiliza campo elétrico para separar moléculas de acordo com carga e peso molecular 4. Ref.: 3121493 Pontos: 1,00 / 1,00 (Fiocruz, 2010): A técnica de PCR em tempo real permite ao usuário detectar, diferenciar variantes virais e quantificar ácidos nucléicos provenientes de uma infecção viral em uma única reação em tempo real, enquanto o PCR convencional basicamente permite apenas a detecção de ácidos nucléicos em uma única reação. De acordo com a frase acima, assinale a afirmativa correta: Está parcialmente errada, uma vez que também é possível distinguir diferentes variantes virais no PCR convencional em uma única reação (por exemplo, PCR multiplex); Está parcialmente errada, uma vez que é possível quantificar em tempo real o PCR convencional; Está totalmente correta; Está parcialmente errada, uma vez que não é possível diferenciar ácidos nucléicos no PCR em tempo real; Está parcialmente errada, uma vez que não é possível quantificar ácidos nucléicos por PCR em tempo real. 5. Ref.: 3907414 Pontos: 1,00 / 1,00 Considere a figura abaixo. Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3121493.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3907414.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 13/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 3/6 As etapas apresentadas na figura correspondem à técnica de: Western blotting. Pareamento indireto de DNA. ELISA indireto. Southern blotting. PCR. 6. Ref.: 3123218 Pontos: 1,00 / 1,00 (Fiocruz, 2010): Com relação aos métodos de coloração de proteínas em gel, assinale a alternativa correta: A coloração por prata deve ser evitada quando a intenção é submeter as proteínas separadas eletroforeticamente à detecção por espectometria de massa em função do alto teor de spots falsos positivos detectados após o tratamento com nitrato de prata; A coloração por Coomassie Blue é a mais indicada apenas em situações onde a detecção das proteínas será realizada por meio da purificação e do sequenciamento manual dos spots de interesse, uma vez que, com esta técnica de coloração, são necessárias quantidades muito grandes de proteínas, o que inviabilizaria sua aplicação com métodos de detecção mais sensíveis. A coloração por prata é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional acoplada à espectrometria de massa, em função de seu alto grau de sensibilidade; A coloração por Coomassie Blue é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional, em função de seu alto grau de sensibilidade;Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3123218.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 13/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 4/6 A coloração de Coomassie Blue é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional acoplada à espectrometria de massa, uma vez que as proteínas não se fixam de forma irreversível ao gel; 7. Ref.: 3122561 Pontos: 1,00 / 1,00 (Adaptado de CESPE, 2017): O projeto genoma, que tratou do sequenciamento das bases que compõem o genoma humano e da variação entre os indivíduos da espécie, trouxe benefícios diretos à saúde humana e de outros organismos vivos, além de melhorias na agropecuária, indústria farmacêutica, ciência forense, metodologia científica e no desenvolvimento de instrumentos de análise laboratorial e computacional, entre outros. Portanto, o projeto genoma humano não se restringiu apenas ao genoma humano. Acerca desse assunto, complete as lacunas do texto a seguir: "O conhecimento do genoma humano ajudou a consolidar a ideia da importância das ____________________ gênicas, que é a origem dos alelos, na promoção de ____________________ genéticas entre indivíduos de uma mesma espécie e na busca de homologias entre o genoma humano e os de outros organismos." Mutações/ trocas; Frequências/ trocas; Mutações/ variações; Nenhuma das alternativas acima. Frequências/ variações; 8. Ref.: 3122623 Pontos: 1,00 / 1,00 (UFC, 2015): Classicamente, a clonagem de segmentos DNA a partir de qualquer organismo envolve cinco processos gerais. Assinale a alternativa que lista corretamente esses cinco processos: Clivagem do DNA, seleção de vetores de clonagem, produção de uma molécula de DNA recombinante, transporte do DNA recombinante para a célula hospedeira, seleção da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; Seleção do DNA recombinante, uso de vetores de clonagem, transformação da célula hospedeira, eletroforese de DNA e seleção da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; Seleção do DNA a ser clonado, transporte do DNA recombinante para a célula hospedeira, extração de DNA, Eletroforese em gel de agarose e identificação da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; Extração e eletroforese de DNA, seleção de vetores de expressão, produção de uma molécula de DNA recombinante, transporte do DNA recombinante para a célula hospedeira, seleção da célula hospedeira que contém o DNA recombinante. Clivagem do DNA, eletroforese em gel de agarose, ligação do DNA recombinante em um vetor de clonagem, transporte do DNA recombinante para uma célula hospedeira, seleção da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; 9. Ref.: 3122588 Pontos: 1,00 / 1,00 (Instituto AOCP, 2018, ITEP, RN, Perito Criminal): Marido entra na justiça para pedir teste de paternidade para comprovar se todos os 3 filhos que ele tem com sua esposa são mesmo dele. A partir de a figura a seguir, baseada nos marcadores genéticos compartilhados ou não por pai, mãe e filhos, avalie se algum dos 3 filhos realmente não é dele: Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122561.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122623.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122588.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 13/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 5/6 Todos são filhos dele. Nenhum é filho dele; Filho 1 e 3 não sãodele; Filho 2 e 3 não são dele; Filho 1 e 2 não são dele; 10. Ref.: 3126529 Pontos: 1,00 / 1,00 (INEP, 2016): Desenvolvida recentemente, a técnica de edição de genoma denominada CRISPR/Cas9 mostra-se bastante promissora nas áreas de Biotecnologia e Medicina. Por engenharia genética, é possível direcionar o sistema CRISPR/Cas9 para clivar o DNA em um ponto específico dos genomas de vírus, de plantas, de fungos e de animais, inclusive de embriões humanos, o que tem gerado discussões a respeito dos aspectos éticos de sua utilização. (YANAGUI, K. Novas tecnologias, novos desafios. Ciência e Cultura, São Paulo, v. 68, n. 3, set. 2016 (adaptado).) Em relação às questões bioéticas envolvidas na edição genética, avalie as afirmações a seguir: I. No Brasil, não é permitido o uso de técnicas para a edição genética de embriões humanos; os estudos científicos nessa área devem ter como objetivo tratar e curar problemas de saúde e não alterar o genoma ou realizar clonagens; II. A despeito do caráter promissor da edição genética no tratamento de doenças graves, as intervenções feitas por meio da técnica de CRISPR/Cas9 em embriões podem ser passadas às gerações futuras, por esse motivo, a prática é considerada eugenista, o que ensejou a proibição de estudos desse tipo em embriões humanos em alguns países; III. Em alguns países, inclusive no Brasil, são permitidas por lei a manipulação e a modificação genética de embriões humanos para fins de pesquisa, entretanto, esses embriões devem ser descartados dentro do prazo de duas semanas. É correto o que se afirma em: II e III, apenas; I, II e III. I, apenas; III, apenas; I e II, apenas; Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3126529.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 13/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 6/6 Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 12/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 1/6 ROSI BITENCOURT 202001378111 Disciplina: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS AV Aluno: ROSI BITENCOURT 202001378111 Professor: LYANA RODRIGUES PINTO LIMA CAPOBIANCO Turma: 9013 SDE4579_AV_202001378111 (AG) 20/10/2020 23:51:06 (F) Avaliação: 10,0 Nota Partic.: Nota SIA: 10,0 pts PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS 1. Ref.: 3907400 Pontos: 1,00 / 1,00 Para a extração de RNA/DNA, uma das etapas mais importante é a eliminação das proteínas durante o processo de purificação. Para a eliminação de proteínas na extração de RNA/DNA, assinale a afirmativa inadequada. Digestão das amostras com a enzima proteinase K. Solubilização em tampões de guanidina Extrações com misturas de solventes orgânicos como fenol e clorofórmio por repetidas vezes. Solubilização em tampões ácidos (pH menor que 3,5). Precipitação salina. 2. Ref.: 3115275 Pontos: 1,00 / 1,00 (PC, PI, 2018) - Em investigações criminais, alguns fios de cabelo, células da pele, sangue ou outros fluidos corporais podem ser deixados no local e o DNA recolhido a partir dessas amostras tem a capacidade de indicar a solução do crime. Muitas vezes a quantidade de DNA disponível para análise é limitada, contudo com a técnica de Reação em Cadeia de Polimerase (PCR), o menor vestígio de DNA encontrado pode ser amplificado, aumentando a quantidade de material e proporcionando o suficiente para traçar o perfil genético e assim garantir a análise. A respeito da técnica de PCR, assinale a opção correta: Atualmente, devem-se adicionar enzimas de polimerização a cada etapa de desnaturação. As etapas utilizadas para realizar a PCR são a desnaturação, extensão (Taq polimerase) e anelamento (primers) nesta ordem; A PCR convencional permite a quantificação dos produtos por meio de fluorescência; Para realizar a PCR é necessário utilizar apenas o DNA a ser amplificado, Taq polimerase e nucleotídeos (dNTPs); Na PCR convencional, o resultado é comumente analisado por meio de uma eletroforese em gel de agarose ou de poliacrilamida; 3. Ref.: 3907352 Pontos: 1,00 / 1,00 Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:voltar(); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3907400.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3115275.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3907352.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 12/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 2/6 Gabriela irá realizar a técnica de eletroforese para avaliar qualitativamente e quantitativa o RNA extraído de células bucais que será utilizado no seu projeto de mestrado. Porém, Gabriela tem dúvidas quanto ao príncipio e aplicação da técnicas. Marque a alternativa da melhor explicação que você daria a Gabriela. a) A eletroforese é uma técnica ótica que associa a quantidade de luz absorvida com a quantidade da substância na amostra. A eletroforese é uma técnica que utiliza corantes fluorescente como iodina para detectar e quantificar substâncias. A eletroforese é uma técnica ótica que associa a quantidade de luz transmitida com a quantidade da substância na amostra. A eletroforese é técnica que utiliza campo elétrico para separar moléculas de acordo com carga e peso molecular A eletroforese é técnica que utiliza campo elétrico para separar moléculas de acordo com o peso molecular e afinidade. 4. Ref.: 3121493 Pontos: 1,00 / 1,00 (Fiocruz, 2010): A técnica de PCR em tempo real permite ao usuário detectar, diferenciar variantes virais e quantificar ácidos nucléicos provenientes de uma infecção viral em uma única reação em tempo real, enquanto o PCR convencional basicamente permite apenas a detecção de ácidos nucléicos em uma única reação. De acordo com a frase acima, assinale a afirmativa correta: Está parcialmente errada, uma vez que é possível quantificar em tempo real o PCR convencional; Está parcialmente errada, uma vez que também é possível distinguir diferentes variantes virais no PCR convencional em uma única reação (por exemplo, PCR multiplex); Está parcialmente errada, uma vez que não é possível diferenciar ácidos nucléicos no PCR em tempo real; Está parcialmente errada, uma vez que não é possível quantificar ácidos nucléicos por PCR em tempo real. Está totalmente correta; 5. Ref.: 3907414 Pontos: 1,00 / 1,00 Considere a figura abaixo. Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3121493.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3907414.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 12/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 3/6 As etapas apresentadas na figura correspondem à técnica de: PCR. Western blotting. Southern blotting. ELISA indireto. Pareamento indireto de DNA. 6. Ref.: 3123218 Pontos: 1,00 / 1,00 (Fiocruz, 2010): Com relação aos métodos de coloração de proteínas em gel, assinale a alternativa correta: A coloração por Coomassie Blue é a mais indicada apenas em situações onde a detecção das proteínas será realizada por meio da purificação e do sequenciamento manual dos spots de interesse, uma vez que, com esta técnica de coloração, são necessárias quantidades muito grandes de proteínas, o que inviabilizaria sua aplicação com métodos de detecção mais sensíveis. A coloração por Coomassie Blue é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional, em função de seu alto grau de sensibilidade; A coloração por prata é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional acoplada à espectrometria de massa, emfunção de seu alto grau de sensibilidade; A coloração por prata deve ser evitada quando a intenção é submeter as proteínas separadas eletroforeticamente à detecção por espectometria de massa em função do alto teor de spots falsos positivos detectados após o tratamento com nitrato de prata;Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3123218.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 12/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 4/6 A coloração de Coomassie Blue é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional acoplada à espectrometria de massa, uma vez que as proteínas não se fixam de forma irreversível ao gel; 7. Ref.: 3122561 Pontos: 1,00 / 1,00 (Adaptado de CESPE, 2017): O projeto genoma, que tratou do sequenciamento das bases que compõem o genoma humano e da variação entre os indivíduos da espécie, trouxe benefícios diretos à saúde humana e de outros organismos vivos, além de melhorias na agropecuária, indústria farmacêutica, ciência forense, metodologia científica e no desenvolvimento de instrumentos de análise laboratorial e computacional, entre outros. Portanto, o projeto genoma humano não se restringiu apenas ao genoma humano. Acerca desse assunto, complete as lacunas do texto a seguir: "O conhecimento do genoma humano ajudou a consolidar a ideia da importância das ____________________ gênicas, que é a origem dos alelos, na promoção de ____________________ genéticas entre indivíduos de uma mesma espécie e na busca de homologias entre o genoma humano e os de outros organismos." Mutações/ trocas; Frequências/ variações; Nenhuma das alternativas acima. Mutações/ variações; Frequências/ trocas; 8. Ref.: 3122623 Pontos: 1,00 / 1,00 (UFC, 2015): Classicamente, a clonagem de segmentos DNA a partir de qualquer organismo envolve cinco processos gerais. Assinale a alternativa que lista corretamente esses cinco processos: Clivagem do DNA, eletroforese em gel de agarose, ligação do DNA recombinante em um vetor de clonagem, transporte do DNA recombinante para uma célula hospedeira, seleção da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; Seleção do DNA a ser clonado, transporte do DNA recombinante para a célula hospedeira, extração de DNA, Eletroforese em gel de agarose e identificação da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; Clivagem do DNA, seleção de vetores de clonagem, produção de uma molécula de DNA recombinante, transporte do DNA recombinante para a célula hospedeira, seleção da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; Seleção do DNA recombinante, uso de vetores de clonagem, transformação da célula hospedeira, eletroforese de DNA e seleção da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; Extração e eletroforese de DNA, seleção de vetores de expressão, produção de uma molécula de DNA recombinante, transporte do DNA recombinante para a célula hospedeira, seleção da célula hospedeira que contém o DNA recombinante. 9. Ref.: 3122588 Pontos: 1,00 / 1,00 (Instituto AOCP, 2018, ITEP, RN, Perito Criminal): Marido entra na justiça para pedir teste de paternidade para comprovar se todos os 3 filhos que ele tem com sua esposa são mesmo dele. A partir de a figura a seguir, baseada nos marcadores genéticos compartilhados ou não por pai, mãe e filhos, avalie se algum dos 3 filhos realmente não é dele: Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122561.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122623.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122588.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 12/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 5/6 Todos são filhos dele. Filho 2 e 3 não são dele; Nenhum é filho dele; Filho 1 e 2 não são dele; Filho 1 e 3 não são dele; 10. Ref.: 3126529 Pontos: 1,00 / 1,00 (INEP, 2016): Desenvolvida recentemente, a técnica de edição de genoma denominada CRISPR/Cas9 mostra-se bastante promissora nas áreas de Biotecnologia e Medicina. Por engenharia genética, é possível direcionar o sistema CRISPR/Cas9 para clivar o DNA em um ponto específico dos genomas de vírus, de plantas, de fungos e de animais, inclusive de embriões humanos, o que tem gerado discussões a respeito dos aspectos éticos de sua utilização. (YANAGUI, K. Novas tecnologias, novos desafios. Ciência e Cultura, São Paulo, v. 68, n. 3, set. 2016 (adaptado).) Em relação às questões bioéticas envolvidas na edição genética, avalie as afirmações a seguir: I. No Brasil, não é permitido o uso de técnicas para a edição genética de embriões humanos; os estudos científicos nessa área devem ter como objetivo tratar e curar problemas de saúde e não alterar o genoma ou realizar clonagens; II. A despeito do caráter promissor da edição genética no tratamento de doenças graves, as intervenções feitas por meio da técnica de CRISPR/Cas9 em embriões podem ser passadas às gerações futuras, por esse motivo, a prática é considerada eugenista, o que ensejou a proibição de estudos desse tipo em embriões humanos em alguns países; III. Em alguns países, inclusive no Brasil, são permitidas por lei a manipulação e a modificação genética de embriões humanos para fins de pesquisa, entretanto, esses embriões devem ser descartados dentro do prazo de duas semanas. É correto o que se afirma em: I, apenas; III, apenas; I e II, apenas; I, II e III. II e III, apenas; Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3126529.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 12/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 6/6 Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 16/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 1/4 Heloisa Dos Santos SiMei Elias 202002261676 Disciplina: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS AV Aluno: HELOISA DOS SANTOS SIMEI ELIAS 202002261676 Professor: LYANA RODRIGUES PINTO LIMA CAPOBIANCO TAMIRES CRISTINA COSTA Turma: 9012 SDE4579_AV_202002261676 (AG) 04/11/2020 09:45:52 (F) Avaliação: 10,0 Nota Partic.: Nota SIA: 10,0 pts PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS 1. Ref.: 3115261 Pontos: 1,00 / 1,00 (IGP, 2008): Analise as afirmações abaixo sobre a estrutura e composição dos ácidos nucléicos. I Quatro aspectos principais definem a estrutura da molécula de DNA: a dupla-hélice, o diâmetro uniforme, o giro para a direita e o antiparalelismo. II Considerando a regra de Chargaff, A+G = T+C; já a razão A+T para G+C varia entre as espécies. III As ligações químicas existentes entre as bases nitrogenadas são de hidrogênio, já as ligações entre o açúcar e a base nitrogenada são do tipo fosfodiéster. IV Um nucleosídeo é composto por um açúcar e uma base nitrogenada, já um nucleotídeo é composto por um açúcar, uma base nitrogenada e um grupamento fosfato. Quais estão corretas? Apenas a I, a II e a III; A I, a II, a III e a IV. Apenas a I, a II e a IV; Apenas a I e a II; Apenas a III e a IV; 2. Ref.: 3115271 Pontos: 1,00 / 1,00 (UFRJ, 2012): Para uma reação de PCR ocorrer corretamente, são necessários os seguintes componentes: uma polimerase de DNA termoestável, desoxirribonucleotídeos trifosfatados, dois pares de iniciadores e um molde de ácido nucleico; uma polimerase de DNA termolábil, desoxirribonucleotídeos trifosfatados, um par de iniciadores e um molde de ácido nucleico; uma polimerase de DNA termoestável, desoxirribonucleosídeos, um par de iniciadores e um moldede DNA; uma polimerase de DNA termolábil, desoxirribo-nucleotídeos trifosfatados, um iniciador e um molde de RNA; uma polimerase de DNA termoestável, desoxirribonucleotídeos trifosfatados, um par de iniciadores e um molde de DNA. Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:voltar(); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3115261.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3115271.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 16/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 2/4 3. Ref.: 3907341 Pontos: 1,00 / 1,00 A análise do DNA através da eletroforese é um procedimento de rotina em laboratórios de biotecnologia. Dados os fatores que influenciam a migração do DNA através do gel de agarose durante a eletroforese, I. Tamanho da molécula. II. Forma da molécula. III. Concentração da agarose. IV. Tampão de eletroforese. Verifica-se que está(ão) correto(s): A) I, II, III e IV. E) I, apenas. C) II e III, apenas. D) IV, apenas. B) I, II e III, apenas. 4. Ref.: 3907365 Pontos: 1,00 / 1,00 A técnica de PCR (reação em cadeia de polimerase) em tempo real revolucionou o processo de quantificação de fragmentos de DNA. Ela realiza a quantificação desses ácidos nucleicos de maneira precisa e com maior reprodutividade. Assinale o fator que permite essa quantificação: O sequenciamento do DNA A eletroforese. A fluorescência. O termociclador. Os marcadores STRs 5. Ref.: 3130841 Pontos: 1,00 / 1,00 (Adaptada de INCA, 2010): A respeito dos testes sorológicos, complete a lacuna a seguir: "_______________ é uma técnica sorológica que detecta a presença de anticorpos específicos contra o HIV." Western Blot. Northern Blot; Clonagem; PCR; Southern Blot; 6. Ref.: 3907435 Pontos: 1,00 / 1,00 A espectrometria de massa é uma técnica utilizada para o estudo de massas de átomos, moléculas ou fragmentos de moléculas, desde que estes estejam eletricamente carregados. A respeito desse assunto, julgue as afirmações. I. Um espectrômetro de massas determina a massa de uma molécula ou átomo medindo a razão massa/carga dos íons gerados. II. Os íons são gerados pela indução, perda ou ganho de carga por uma espécie eletricamente neutra. III. Uma vez formados, os íons são direcionados, por forças eletrostáticas, para dentro do analisador de massas, separados de acordo com suas razões massa/carga e finalmente detectados. Assinale a alternativa correta. Estão corretas apenas as afirmativas I e III Está correta apenas a afirmativa I Estão corretas todas as afirmativasEducational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3907341.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3907365.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3130841.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3907435.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 16/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 3/4 Estão corretas apenas as afirmativas II e III Estão corretas apenas as afirmativas I e II 7. Ref.: 3122574 Pontos: 1,00 / 1,00 (INSTITUTO AOCP, 2018): Preencha as lacunas e assinale a alternativa correta: "As duas técnicas mais importantes para o sequenciamento de DNA são o método ____________________ desenvolvido por Allan Maxam e Walter Gilbert, em 1977, e o método ____________________ de Fred Sanger e colaboradores, de 1978. Os dois métodos são baseados na produção de um conjunto de fitas simples de DNA que são separadas pelo princípio de eletroforese." químico de degradação de bases / didesoxi ou terminação de cadeia; físico de depleção de bases / desoxi ou terminação de cadeia; físico de depleção de bases / didesoxi de iniciação de cadeia. físico de degradação / desoxi ou terminação de cadeia; químico de depleção de bases / didesoxi ou terminação de cadeia; 8. Ref.: 3279460 Pontos: 1,00 / 1,00 (Unesp, 2012): A obtenção de fragmentos de DNA contendo sequências complementares em suas extremidades é a primeira etapa a ser vencida no processo de clonagem de um gene. Esses fragmentos deverão ser ligados in vitro a vetores moleculares que se encarregarão de transportá-los para dentro das células e assim gerar clones. Um dos vetores de clonagem molecular comumente empregado são plasmídios, os quais se constituem de moléculas de: RNA circulares, dupla fita, capazes de autorreplicação; DNA circulares, dupla fita, incapazes de autorreplicação; DNA circulares, dupla fita, capazes de autorreplicação; DNA circulares, fita simples, incapazes de autorreplicação. DNA helicoidais, dupla fita, capazes de autorreplicação; 9. Ref.: 3122586 Pontos: 1,00 / 1,00 (INEP, 2006): Testes de DNA para determinação de paternidade são hoje em dia realizados por meio da tecnologia de PCR (polymerase chain reaction, ou reação de polimerase em cadeia). Estes testes distinguem loci conhecidos como microssatélites. Em um desses testes foram observados os resultados ilustrados no esquema abaixo, que representa a migração eletroforética de uma análise de paternidade de uma criança ( F ), sua mãe ( M ) e o suposto pai (SP). Analise as afirmações abaixo: I - PCR pode ser feito a partir de amostras com pouco DNA dos indivíduos, já que a técnica possibilita a amplificação de sequências específicas de DNA; Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122574.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3279460.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122586.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 16/12/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 4/4 II - O resultado revela que SP não deve ser o pai da criança, já que uma das bandas de DNA deste não é encontrada no DNA da criança; III - Microssatélites são regiões do genoma nas quais ocorrem repetições de sequências nucleotídicas e por isso cada locus pode resultar em variações de tamanho nos indivíduos testados. Está correto o que se afirma em: II e III, somente; I e III, somente; I e II, somente; I, II e III. II, somente; 10. Ref.: 3126527 Pontos: 1,00 / 1,00 (Adaptado de UNIFESP, 2017): Complete as lacunas do texto a seguir, a respeito do sistema de defesa CRISPR-Cas9 de bactérias: O Sistema CRISPR-Cas9 foi desenvolvido em laboratório e é constituído de um RNA-guia (CRISPR) associado a uma enzima de restrição (Cas9). O RNA-guia é uma sequência curta de RNA sintético __________ à sequência de um determinado trecho de __________. Quando introduzido em células vivas, o CRISPR-Cas9 detecta a sequência de DNA complementar e a enzima corta o DNA em um ponto específico. Em seguida, o sistema de reparo do DNA é ativado, unindo novamente os segmentos que foram separados. Nesse processo, podem ocorrer alterações na sequência original, causando a __________ de um gene. Sistemas semelhantes ao CRISPR-Cas9 são encontrados naturalmente em bactérias e ativados quando estas são infectadas por vírus. Idêntica/ DNA/ inativação; Complementar/ RNA/ativação; Idêntica/ RNA/ativação; Complementar/ RNA/ inativação. Complementar/ DNA/ inativação; Educational Performace Solution EPS ® - Alunos javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3126527.'); javascript:alert('Educational Performace Solution\n\nEPS: M%C3%B3dulo do Aluno\n\nAxiom Consultoria em Tecnologia da Informa%C3%A7%C3%A3o Ltda.') 21/11/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 1/5 FRANCISCA UILDILENE FREITAS SILVA 202003017132 EAD BRAGANÇA - PA RETORNAR À AVALIAÇÃO Disciplina: SDE4579 - PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Período: 2020.3 EAD (G) / AV Aluno: FRANCISCA UILDILENE FREITAS SILVA Matrícula: 202003017132 Data: 21/11/202019:45:04 Turma: 9011 ATENÇÃO 1. Veja abaixo, todas as suas respostas gravadas no nosso banco de dados. 2. Caso você queira voltar à prova clique no botão "Retornar à Avaliação". 1a Questão (Ref.: 202006134110) (IFF, Farroupilha-RS, 2016): O processo de extração e a purificação do DNA genômico compreende vários passos: Lise das células, extração de lipídeos e desoxiribonucleicos e precipitação do DNA. Lise das células, centrifugação e ressuspensão do DNA; Lise das células, extração das proteínas mais RNA e precipitação do DNA; Lise das células, extração de ácidos desoxiribonucleicos e precipitação do RNA; Quebra de lipídeos, precipitação do RNA e lise das proteínas; 2a Questão (Ref.: 202006134153) (INMETRO, 2010): A técnica de PCR (reação em cadeia de polimerase), a mais utilizada para amplificação (clonagem) do DNA in vitro, revolucionou o acesso a informações genéticas. Com relação a essa técnica, assinale a opção correta: Com a PCR, a enzima Taq polimerase é capaz de manter sua atividade mesmo nas altas temperaturas necessárias para desnaturar a molécula de DNA; Na PCR, os primers (iniciadores) se hibridam com moléculas de DNA fita dupla; A PCR necessita ser acompanhada de um método de purificação para separar o fragmento amplificado do restante do genoma. Com a PCR, a clonagem molecular necessita de 48 a 72 horas para ser executada; A PCR também pode ser aplicada na análise de proteínas; 3a Questão (Ref.: 202006926190) A técnica de eletroforese permite separar fragmentos de proteínas e ácidos nucléicos por tamanho e carga elétrica. Com base na figura abaixo, que representa uma corrida de eletroforese de DNA, marque a alternativa CORRETA: javascript:voltar_avaliacoes() javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3115265\n\nStatus da quest%C3%A3o: Liberada para Uso.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3115308\n\nStatus da quest%C3%A3o: Liberada para Uso.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3907345\n\nStatus da quest%C3%A3o: Liberada para Uso.'); 21/11/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 2/5 Os fragmentos menores de DNA migram mais rápido do que os fragmentos maiores, pois se aderem mais facilmente aos íons do tampão utilizado na eletroforese. A coloração é feita por um corante intercalante de DNA que tem afinidade com as ligações fosfodiéster da referida molécula. A migração das amostras ocorre no sentido do polo negativo (-) para o polo positivo (+), devido a carga negativa do fosfato localizado no nucleotídeo de DNA. A utilização do Marcador Molecular é indicada para auxiliar na estimativa da concentração dos fragmentos de DNA que aparecerem no gel. Os fragmentos maiores de DNA migram mais rápido do que os fragmentos menores, devido ao seu alto peso molecular. 4a Questão (Ref.: 202006140338) (Fiocruz, 2010): A técnica de PCR em tempo real permite ao usuário detectar, diferenciar variantes virais e quantificar ácidos nucléicos provenientes de uma infecção viral em uma única reação em tempo real, enquanto o PCR convencional basicamente permite apenas a detecção de ácidos nucléicos em uma única reação. De acordo com a frase acima, assinale a afirmativa correta: Está parcialmente errada, uma vez que não é possível diferenciar ácidos nucléicos no PCR em tempo real; Está parcialmente errada, uma vez que é possível quantificar em tempo real o PCR convencional; Está parcialmente errada, uma vez que não é possível quantificar ácidos nucléicos por PCR em tempo real. Está totalmente correta; Está parcialmente errada, uma vez que também é possível distinguir diferentes variantes virais no PCR convencional em uma única reação (por exemplo, PCR multiplex); 5a Questão (Ref.: 202006141616) (IF, TO, 2016): As técnicas de hibridação Northern Blotting, Southern Blotting e Western Blotting permitem estudar respectivamente: RNA, proteínas e DNA; DNA, RNA e proteínas; DNA, proteínas e RNA; Proteínas, RNA e DNA. RNA, DNA e proteínas; 6a Questão (Ref.: 202006142063) (Fiocruz, 2010): Com relação aos métodos de coloração de proteínas em gel, assinale a alternativa correta: javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3121493\n\nStatus da quest%C3%A3o: Liberada para Uso.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122771\n\nStatus da quest%C3%A3o: Liberada para Uso.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3123218\n\nStatus da quest%C3%A3o: Liberada para Uso.'); 21/11/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 3/5 A coloração por prata é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional acoplada à espectrometria de massa, em função de seu alto grau de sensibilidade; A coloração por prata deve ser evitada quando a intenção é submeter as proteínas separadas eletroforeticamente à detecção por espectometria de massa em função do alto teor de spots falsos positivos detectados após o tratamento com nitrato de prata; A coloração de Coomassie Blue é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional acoplada à espectrometria de massa, uma vez que as proteínas não se fixam de forma irreversível ao gel; A coloração por Coomassie Blue é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional, em função de seu alto grau de sensibilidade; A coloração por Coomassie Blue é a mais indicada apenas em situações onde a detecção das proteínas será realizada por meio da purificação e do sequenciamento manual dos spots de interesse, uma vez que, com esta técnica de coloração, são necessárias quantidades muito grandes de proteínas, o que inviabilizaria sua aplicação com métodos de detecção mais sensíveis. 7a Questão (Ref.: 202006141406) (Adaptado de CESPE, 2017): O projeto genoma, que tratou do sequenciamento das bases que compõem o genoma humano e da variação entre os indivíduos da espécie, trouxe benefícios diretos à saúde humana e de outros organismos vivos, além de melhorias na agropecuária, indústria farmacêutica, ciência forense, metodologia científica e no desenvolvimento de instrumentos de análise laboratorial e computacional, entre outros. Portanto, o projeto genoma humano não se restringiu apenas ao genoma humano. Acerca desse assunto, complete as lacunas do texto a seguir: "O conhecimento do genoma humano ajudou a consolidar a ideia da importância das ____________________ gênicas, que é a origem dos alelos, na promoção de ____________________ genéticas entre indivíduos de uma mesma espécie e na busca de homologias entre o genoma humano e os de outros organismos." Mutações/ variações; Nenhuma das alternativas acima. Frequências/ trocas; Frequências/ variações; Mutações/ trocas; 8a Questão (Ref.: 202006141470) (Adaptada de TJMA, 2004): A clonagem molecular tem demonstrado ser uma técnica excepcional para o isolamento de fragmentos de DNA específicos de um organismo. Os processos de clonagem e isolamento de tais fragmentos começam com a construção de bibliotecas de DNA, cDNA ou genômicas. Uma biblioteca de cDNA não apresenta íntrons porque: Não podem ser construídas a partir de genes; É construída a partir do mRNA maduro; Nenhuma das alternativas acima. Os introns são retirados in vitro depois da construção do cDNA, por ação de exonucleases; É construída a partir de DNA genômico; 9a Questão (Ref.: 202006141433) (Instituto AOCP, 2018, ITEP, RN, Perito Criminal): Marido entra na justiça para pedir teste de paternidade para comprovar se todos os 3 filhos que ele tem com sua esposa são mesmo dele. A partir de a figura a seguir, baseada nos marcadores genéticos compartilhados ou não por pai, mãe e filhos, avalie se algum dos 3 filhos realmente não é dele: javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122561\n\nStatus da quest%C3%A3o: Liberada para Uso.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122625\n\nStatus da quest%C3%A3o: Liberada para Uso.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3122588\n\nStatus da quest%C3%A3o: Liberada para Uso.'); 21/11/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 4/5 Filho 2 e 3 não são dele; Nenhum é filho dele; Filho 1 e3 não são dele; Todos são filhos dele. Filho 1 e 2 não são dele; 10a Questão (Ref.: 202006145374) (INEP, 2016): Desenvolvida recentemente, a técnica de edição de genoma denominada CRISPR/Cas9 mostra- se bastante promissora nas áreas de Biotecnologia e Medicina. Por engenharia genética, é possível direcionar o sistema CRISPR/Cas9 para clivar o DNA em um ponto específico dos genomas de vírus, de plantas, de fungos e de animais, inclusive de embriões humanos, o que tem gerado discussões a respeito dos aspectos éticos de sua utilização. (YANAGUI, K. Novas tecnologias, novos desafios. Ciência e Cultura, São Paulo, v. 68, n. 3, set. 2016 (adaptado).) Em relação às questões bioéticas envolvidas na edição genética, avalie as afirmações a seguir: I. No Brasil, não é permitido o uso de técnicas para a edição genética de embriões humanos; os estudos científicos nessa área devem ter como objetivo tratar e curar problemas de saúde e não alterar o genoma ou realizar clonagens; II. A despeito do caráter promissor da edição genética no tratamento de doenças graves, as intervenções feitas por meio da técnica de CRISPR/Cas9 em embriões podem ser passadas às gerações futuras, por esse motivo, a prática é considerada eugenista, o que ensejou a proibição de estudos desse tipo em embriões humanos em alguns países; III. Em alguns países, inclusive no Brasil, são permitidas por lei a manipulação e a modificação genética de embriões humanos para fins de pesquisa, entretanto, esses embriões devem ser descartados dentro do prazo de duas semanas. É correto o que se afirma em: II e III, apenas; I e II, apenas; I, apenas; I, II e III. III, apenas; javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 3126529\n\nStatus da quest%C3%A3o: Liberada para Uso.'); 21/11/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/ 5/5 Autenticação para a Prova On-line Caso queira FINALIZAR a avaliação, digite o código de 4 carateres impresso abaixo. ATENÇÃO: Caso finalize esta avaliação você não poderá mais modificar as suas respostas. KJHF Cód.: FINALIZAR Obs.: Os caracteres da imagem ajudam a Instituição a evitar fraudes, que dificultam a gravação das respostas. Período de não visualização da avaliação: desde 29/09/2020 até 02/12/2020. 26/11/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2566074&matr_integracao=202001169148 1/5 BIANCA DOS SANTOS ROCHA 202001169148 EAD SÃO LUIS - CENTRO - MA 1 ponto (IGP, 2008): Analise as afirmações abaixo sobre a estrutura e composição dos ácidos nucléicos. I Quatro aspectos principais definem a estrutura da molécula de DNA: a dupla-hélice, o diâmetro uniforme, o giro para a direita e o antiparalelismo. II Considerando a regra de Chargaff, A+G = T+C; já a razão A+T para G+C varia entre as espécies. III As ligações químicas existentes entre as bases nitrogenadas são de hidrogênio, já as ligações entre o açúcar e a base nitrogenada são do tipo fosfodiéster. IV Um nucleosídeo é composto por um açúcar e uma base nitrogenada, já um nucleotídeo é composto por um açúcar, uma base nitrogenada e um grupamento fosfato. Quais estão corretas? (Ref.: 202004301323) 1 ponto (PC, PI, 2018) - Em investigações criminais, alguns fios de cabelo, células da pele, sangue ou outros fluidos corporais podem ser deixados no local e o DNA recolhido a partir dessas amostras tem a capacidade de indicar a solução do crime. Muitas vezes a quantidade de DNA disponível para análise é limitada, contudo com a técnica de Reação em Cadeia de Polimerase (PCR), o menor vestígio de DNA encontrado pode ser amplificado, aumentando a quantidade de material e proporcionando o suficiente para traçar o perfil genético e assim garantir a análise. A respeito da técnica de PCR, assinale a opção correta: (Ref.: 202004301337) Lupa Calc. Notas VERIFICAR E ENCAMINHAR Disciplina: SDE4579 - PLATAF.MOL.AT.BIOL. Período Acad.: 2020.3 EAD (G) / AV Aluno: BIANCA DOS SANTOS ROCHA Matrícula: 202001169148 Turma: 9006 Prezado(a) Aluno(a), Responda a todas as questões com atenção. Somente clique no botão FINALIZAR PROVA ao ter certeza de que respondeu a todas as questões e que não precisará mais alterá-las. A prova será SEM consulta. O aluno poderá fazer uso, durante a prova, de uma folha em branco, para rascunho. Nesta folha não será permitido qualquer tipo de anotação prévia, cabendo ao aplicador, nestes casos, recolher a folha de rascunho do aluno. Valor da prova: 10 pontos. 1. Apenas a I e a II; Apenas a III e a IV; A I, a II, a III e a IV. Apenas a I, a II e a IV; Apenas a I, a II e a III; 2. As etapas utilizadas para realizar a PCR são a desnaturação, extensão (Taq polimerase) e anelamento javascript:voltar(); javascript:diminui(); javascript:aumenta(); javascript:calculadora_on(); javascript:anotar_on(); 26/11/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2566074&matr_integracao=202001169148 2/5 1 ponto A análise do DNA através da eletroforese é um procedimento de rotina em laboratórios de biotecnologia. Dados os fatores que influenciam a migração do DNA através do gel de agarose durante a eletroforese, I. Tamanho da molécula. II. Forma da molécula. III. Concentração da agarose. IV. Tampão de eletroforese. Verifica-se que está(ão) correto(s): (Ref.: 202005093403) 1 ponto A técnica de PCR (reação em cadeia de polimerase) em tempo real revolucionou o processo de quantificação de fragmentos de DNA. Ela realiza a quantificação desses ácidos nucleicos de maneira precisa e com maior reprodutividade. Assinale o fator que permite essa quantificação: (Ref.: 202005093427) 1 ponto (Adaptada de INCA, 2010): A respeito dos testes sorológicos, complete a lacuna a seguir: "_______________ é uma técnica sorológica que detecta a presença de anticorpos específicos contra o HIV." (Ref.: 202004316903) 1 ponto A espectrometria de massa é uma técnica utilizada para o estudo de massas de átomos, moléculas ou fragmentos de moléculas, desde que estes estejam eletricamente carregados. A respeito desse assunto, julgue as afirmações. I. Um espectrômetro de massas determina a massa de uma molécula ou átomo medindo a razão massa/carga dos íons gerados. (primers) nesta ordem; A PCR convencional permite a quantificação dos produtos por meio de fluorescência; Para realizar a PCR é necessário utilizar apenas o DNA a ser amplificado, Taq polimerase e nucleotídeos (dNTPs); Na PCR convencional, o resultado é comumente analisado por meio de uma eletroforese em gel de agarose ou de poliacrilamida; Atualmente, devem-se adicionar enzimas de polimerização a cada etapa de desnaturação. 3. D) IV, apenas. C) II e III, apenas. A) I, II, III e IV. E) I, apenas. B) I, II e III, apenas. 4. A fluorescência. O sequenciamento do DNA A eletroforese. O termociclador. Os marcadores STRs 5. Western Blot. Southern Blot; Northern Blot; PCR; Clonagem; 6. 26/11/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2566074&matr_integracao=202001169148 3/5 II. Os íons são gerados pela indução, perda ou ganho de carga por uma espécie eletricamente neutra. III. Uma vez formados, os íons são direcionados, por forças eletrostáticas, para dentro do analisador de massas, separados de acordo com suas razões massa/carga e finalmente detectados. Assinale a alternativa correta. (Ref.: 202005093497) 1 ponto (INSTITUTO AOCP, 2018): Preencha as lacunas e assinale a alternativa correta: "As duas técnicas mais importantes para o sequenciamento de DNA são o método ____________________ desenvolvido por Allan Maxam e Walter Gilbert, em 1977, e o método ____________________ de Fred Sanger e colaboradores, de 1978. Os dois métodos são baseados na produção de um conjunto de fitas simples de DNA que são separadas pelo princípio de eletroforese." (Ref.: 202004308636) 1 ponto (UFC, 2015): Classicamente, a clonagem de segmentos DNA a partir de qualquer organismo envolve cinco processos gerais. Assinale a alternativa que lista corretamenteesses cinco processos: (Ref.: 202004308685) 1 ponto (INEP, 2006): Testes de DNA para determinação de paternidade são hoje em dia realizados por meio da tecnologia de PCR (polymerase chain reaction, ou reação de polimerase em cadeia). Estes testes distinguem loci conhecidos como microssatélites. Em um desses testes foram observados os resultados ilustrados no esquema abaixo, que representa a migração eletroforética de uma análise de paternidade de uma criança ( F ), sua mãe ( M ) e o suposto pai (SP). Estão corretas apenas as afirmativas II e III Estão corretas todas as afirmativas Estão corretas apenas as afirmativas I e III Está correta apenas a afirmativa I Estão corretas apenas as afirmativas I e II 7. químico de degradação de bases / didesoxi ou terminação de cadeia; químico de depleção de bases / didesoxi ou terminação de cadeia; físico de degradação / desoxi ou terminação de cadeia; físico de depleção de bases / didesoxi de iniciação de cadeia. físico de depleção de bases / desoxi ou terminação de cadeia; 8. Extração e eletroforese de DNA, seleção de vetores de expressão, produção de uma molécula de DNA recombinante, transporte do DNA recombinante para a célula hospedeira, seleção da célula hospedeira que contém o DNA recombinante. Seleção do DNA recombinante, uso de vetores de clonagem, transformação da célula hospedeira, eletroforese de DNA e seleção da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; Clivagem do DNA, eletroforese em gel de agarose, ligação do DNA recombinante em um vetor de clonagem, transporte do DNA recombinante para uma célula hospedeira, seleção da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; Clivagem do DNA, seleção de vetores de clonagem, produção de uma molécula de DNA recombinante, transporte do DNA recombinante para a célula hospedeira, seleção da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; Seleção do DNA a ser clonado, transporte do DNA recombinante para a célula hospedeira, extração de DNA, Eletroforese em gel de agarose e identificação da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; 9. 26/11/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2566074&matr_integracao=202001169148 4/5 Analise as afirmações abaixo: I - PCR pode ser feito a partir de amostras com pouco DNA dos indivíduos, já que a técnica possibilita a amplificação de sequências específicas de DNA; II - O resultado revela que SP não deve ser o pai da criança, já que uma das bandas de DNA deste não é encontrada no DNA da criança; III - Microssatélites são regiões do genoma nas quais ocorrem repetições de sequências nucleotídicas e por isso cada locus pode resultar em variações de tamanho nos indivíduos testados. Está correto o que se afirma em: (Ref.: 202004308648) 1 ponto (Adaptado de UNIFESP, 2017): Complete as lacunas do texto a seguir, a respeito do sistema de defesa CRISPR-Cas9 de bactérias: O Sistema CRISPR-Cas9 foi desenvolvido em laboratório e é constituído de um RNA-guia (CRISPR) associado a uma enzima de restrição (Cas9). O RNA- guia é uma sequência curta de RNA sintético __________ à sequência de um determinado trecho de __________. Quando introduzido em células vivas, o CRISPR-Cas9 detecta a sequência de DNA complementar e a enzima corta o DNA em um ponto específico. Em seguida, o sistema de reparo do DNA é ativado, unindo novamente os segmentos que foram separados. Nesse processo, podem ocorrer alterações na sequência original, causando a __________ de um gene. Sistemas semelhantes ao CRISPR-Cas9 são encontrados naturalmente em bactérias e ativados quando estas são infectadas por vírus. (Ref.: 202004312589) II, somente; I, II e III. I e III, somente; I e II, somente; II e III, somente; 10. Complementar/ RNA/ inativação. Idêntica/ RNA/ativação; Complementar/ RNA/ativação; 26/11/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2566074&matr_integracao=202001169148 5/5 Complementar/ DNA/ inativação; Idêntica/ DNA/ inativação; VERIFICAR E ENCAMINHAR Legenda: Questão não respondida Questão não gravada Questão gravada javascript:abre_colabore(); 19/11/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2643368&matr_integracao=202002348801 1/7 HARRY CHELLY GUIMARAES NASS 202002348801 EAD CURITIBA - PR 1 ponto Para a extração de RNA/DNA, uma das etapas mais importante é a eliminação das proteínas durante o processo de purificação. Para a eliminação de proteínas na extração de RNA/DNA, assinale a afirmativa inadequada. (Ref.: 202006291081) Lupa Calc. Notas VERIFICAR E ENCAMINHAR Disciplina: SDE4579 - PLATAF.MOL.AT.BIOL. Período Acad.: 2020.3 EAD (G) / AV Aluno: HARRY CHELLY GUIMARAES NASS Matrícula: 202002348801 Turma: 9001 Prezado(a) Aluno(a), Responda a todas as questões com atenção. Somente clique no botão FINALIZAR PROVA ao ter certeza de que respondeu a todas as questões e que não precisará mais alterá-las. A prova será SEM consulta. O aluno poderá fazer uso, durante a prova, de uma folha em branco, para rascunho. Nesta folha não será permitido qualquer tipo de anotação prévia, cabendo ao aplicador, nestes casos, recolher a folha de rascunho do aluno. Valor da prova: 10 pontos. 1. Extrações com misturas de solventes orgânicos como fenol e clorofórmio por repetidas vezes. Solubilização em tampões de guanidina Digestão das amostras com a enzima proteinase K. Solubilização em tampões ácidos (pH menor que 3,5). javascript:voltar(); javascript:diminui(); javascript:aumenta(); javascript:calculadora_on(); javascript:anotar_on(); 19/11/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2643368&matr_integracao=202002348801 2/7 1 ponto (PC, PI, 2018) - Em investigações criminais, alguns fios de cabelo, células da pele, sangue ou outros fluidos corporais podem ser deixados no local e o DNA recolhido a partir dessas amostras tem a capacidade de indicar a solução do crime. Muitas vezes a quantidade de DNA disponível para análise é limitada, contudo com a técnica de Reação em Cadeia de Polimerase (PCR), o menor vestígio de DNA encontrado pode ser amplificado, aumentando a quantidade de material e proporcionando o suficiente para traçar o perfil genético e assim garantir a análise. A respeito da técnica de PCR, assinale a opção correta: (Ref.: 202005498956) 1 ponto Gabriela irá realizar a técnica de eletroforese para avaliar qualitativamente e quantitativa o RNA extraído de células bucais que será utilizado no seu projeto de mestrado. Porém, Gabriela tem dúvidas quanto ao príncipio e aplicação da técnicas. Marque a alternativa da melhor explicação que você daria a Gabriela. (Ref.: 202006291033) 1 ponto Precipitação salina. 2. A PCR convencional permite a quantificação dos produtos por meio de fluorescência; Para realizar a PCR é necessário utilizar apenas o DNA a ser amplificado, Taq polimerase e nucleotídeos (dNTPs); Atualmente, devem-se adicionar enzimas de polimerização a cada etapa de desnaturação. Na PCR convencional, o resultado é comumente analisado por meio de uma eletroforese em gel de agarose ou de poliacrilamida; As etapas utilizadas para realizar a PCR são a desnaturação, extensão (Taq polimerase) e anelamento (primers) nesta ordem; 3. A eletroforese é técnica que utiliza campo elétrico para separar moléculas de acordo com carga e peso molecular A eletroforese é uma técnica que utiliza corantes fluorescente como iodina para detectar e quantificar substâncias. A eletroforese é técnica que utiliza campo elétrico para separar moléculas de acordo com o peso molecular e afinidade. a) A eletroforese é uma técnica ótica que associa a quantidade de luz absorvida com a quantidade da substância na amostra. A eletroforese é uma técnica ótica que associa a quantidade de luz transmitida com a quantidade da substância na amostra. 19/11/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2643368&matr_integracao=202002348801 3/7 (IBFC, 2013): A técnicade PCR (reação em cadeia de polimerase) em tempo real revolucionou o processo de quantificação de fragmentos de DNA. Ela realiza a quantificação desses ácidos nucleicos de maneira precisa e com maior reprodutividade. Assinale o fator que permite essa quantificação: (Ref.: 202005662233) 1 ponto Considere a figura abaixo. 4. A fluorescência; O sequenciamento do DNA; O termociclador. Os marcadores STRs; A eletroforese; 5. 19/11/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2643368&matr_integracao=202002348801 4/7 As etapas apresentadas na figura correspondem à técnica de: (Ref.: 202006291095) PCR. Western blotting. 19/11/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2643368&matr_integracao=202002348801 5/7 1 ponto Na análise de proteínas empregando eletroforese bidimensional (2D), a focalização isoelétrica é realizada para: (Ref.: 202006291121) 1 ponto (Unesp, 2012): No sequenciamento utilizando o método de terminador de cadeia ou método dideóxi, a sequência obtida corresponde a: (Ref.: 202005663136) 1 ponto (UFC, 2015): Classicamente, a clonagem de segmentos DNA a partir de qualquer organismo envolve cinco processos gerais. Assinale a alternativa que lista corretamente esses cinco processos: (Ref.: 202005506304) Pareamento indireto de DNA. Southern blotting. ELISA indireto. 6. separar as proteínas pelo peso molecular agrupar as proteínas pela quantidade total de cargas positivas separar as proteínas pela quantidade total de cargas negativas. separar as proteínas de acordo com o pH onde a carga total de uma determinada proteína é nula. agrupar as proteínas de pI diferentes. 7. sequência de aminoácidos de proteínas codificadas a partir da sequência obtida; fita de DNA molde; sítios de restrição de endonucleases. RNA mensageiro; fita de DNA complementar; 8. Extração e eletroforese de DNA, seleção de vetores de expressão, produção de uma molécula de DNA recombinante, transporte do DNA recombinante para a célula hospedeira, seleção da célula hospedeira que contém o DNA recombinante. 19/11/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2643368&matr_integracao=202002348801 6/7 1 ponto (FGV, 2011): Os iniciadores (primers), usados para amplificar por PCR os microssatélites (STR), são desenhados de modo a hibridar-se (anelar-se) com o DNA a ser amplificado. Assinale a alternativa que indique o sítio da região polimórfica na qual os primers deverão se anelar: (Ref.: 202005663145) 1 ponto (2018, UNIFOR): A CRISPR-Cas9 (sigla em inglês para agrupados de curtas repetições palindrômicas regularmente interpaçadas) é uma nova e revolucionária técnica para a edição de genomas, que permite identificar genes de interesse, no DNA de qualquer espécie e modifica-lo. É normalmente composto por uma molécula de RNA e uma proteína e a combinação dessas duas moléculas consegue localizar a sequência de DNA de interesse dentro do núcleo da célula e a modifica. Fonte: http://ofuturodascoisas.com/crispr-revolucionou-edicao-dna-o-problema-e-que-nao-estamos-preparados-para- consequencias. Acesso em 12 set. 2017 (com adaptações). Assim, podemos dizer que o uso dessa tecnologia permite: (Ref.: 202005510212) Seleção do DNA a ser clonado, transporte do DNA recombinante para a célula hospedeira, extração de DNA, Eletroforese em gel de agarose e identificação da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; Clivagem do DNA, seleção de vetores de clonagem, produção de uma molécula de DNA recombinante, transporte do DNA recombinante para a célula hospedeira, seleção da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; Seleção do DNA recombinante, uso de vetores de clonagem, transformação da célula hospedeira, eletroforese de DNA e seleção da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; Clivagem do DNA, eletroforese em gel de agarose, ligação do DNA recombinante em um vetor de clonagem, transporte do DNA recombinante para uma célula hospedeira, seleção da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; 9. Na região intrônica das sequências polimórficas; Nas sequências que flanqueiam o microssatélite polimórfico; Na região promotora do microssatélite polimórfico. Qualquer uma das unidades repetitivas do microssatélite; Na região central do microssatélite polimórfico; 10. a modificação de sequências de DNA em células diferentes de um mesmo organismo de forma seletiva, uma vez que cada tipo celular de um mesmo organismo possui diferente coleção de genes; mudanças apenas na programação genética de um organismo, garantindo que não haja nenhuma alteração na expressão gênica e na produção de proteínas; 19/11/2020 EPS https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2643368&matr_integracao=202002348801 7/7 provocar mutações pontuais no genoma na tentativa de silenciar genes defeituosos ou consertá-los para tornar possível a cura de diversas doenças de origem genética; aumentar o número de genes e, consequentemente, o número de proteínas produzidas por uma célula, pois o tamanho do genoma é diretamente proporcional ao número de proteínas do organismo. a adição de novas sequências de DNA para acarretar o ganho de novas características positivas, haja vista quanto maior o tamanho do genoma, mais complexo o organismo; VERIFICAR E ENCAMINHAR Legenda: Questão não respondida Questão não gravada Questão gravada javascript:abre_colabore(); Disciplina: SDE4579 - PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Período: 2020.3 EAD (G) / AV Aluno: Matrícula: Data: 22/10/2020 00:16:37 Turma: 9011 ATENÇÃO 1. Veja abaixo, todas as suas respostas gravadas no nosso banco de dados. 2. Caso você queira voltar à prova clique no botão "Retornar à Avaliação". 1a Questão (Ref.: 202008149054) (IGP, 2008): Analise as afirmações abaixo sobre a estrutura e composição dos ácidos nucléicos. I Quatro aspectos principais definem a estrutura da molécula de DNA: a dupla- hélice, o diâmetro uniforme, o giro para a direita e o antiparalelismo. II Considerando a regra de Chargaff, A+G = T+C; já a razão A+T para G+C varia entre as espécies. III As ligações químicas existentes entre as bases nitrogenadas são de hidrogênio, já as ligações entre o açúcar e a base nitrogenada são do tipo fosfodiéster. IV Um nucleosídeo é composto por um açúcar e uma base nitrogenada, já um nucleotídeo é composto por um açúcar, uma base nitrogenada e um grupamento fosfato. Quais estão corretas? A I, a II, a III e a IV. Apenas a I, a II e a III; Apenas a I e a II; Apenas a I, a II e a IV; Apenas a III e a IV; 2a Questão (Ref.: 202008149064) (UFRJ, 2012): Para uma reação de PCR ocorrer corretamente, são necessários os seguintes componentes: javascript:alert('Código%20da%20questão:%203115261/n/nStatus%20da%20questão:%20Liberada%20para%20Uso.'); javascript:alert('Código%20da%20questão:%203115271/n/nStatus%20da%20questão:%20Liberada%20para%20Uso.'); uma polimerase de DNA termoestável, desoxirribonucleosídeos, um par de iniciadores e um molde de DNA; uma polimerase de DNA termolábil, desoxirribo-nucleotídeos trifosfatados, um iniciador e um molde de RNA; uma polimerase de DNA termoestável, desoxirribonucleotídeos trifosfatados, um par de iniciadores e um molde de DNA. uma polimerase de DNA termolábil, desoxirribonucleotídeos trifosfatados, um par de iniciadores e um molde de ácido nucleico; uma polimerase de DNA termoestável, desoxirribonucleotídeos trifosfatados, dois pares de iniciadores e um molde de ácido nucleico; 3a Questão (Ref.: 202008941134) A análise do DNA através da eletroforese é um procedimento de rotina em laboratórios de biotecnologia. Dados os fatores que influenciam a migração do DNA através do gel de agarose durante a eletroforese, I. Tamanho da molécula. II. Forma da molécula. III. Concentração da agarose. IV. Tampão de eletroforese.Verifica-se que está(ão) correto(s): B) I, II e III, apenas. D) IV, apenas. A) I, II, III e IV. E) I, apenas. C) II e III, apenas. 4a Questão (Ref.: 202008941158) A técnica de PCR (reação em cadeia de polimerase) em tempo real revolucionou o processo de quantificação de fragmentos de DNA. Ela realiza a quantificação desses ácidos nucleicos de maneira precisa e com maior reprodutividade. Assinale o fator que permite essa quantificação: A eletroforese. Os marcadores STRs O sequenciamento do DNA O termociclador. A fluorescência. javascript:alert('Código%20da%20questão:%203907341/n/nStatus%20da%20questão:%20Liberada%20para%20Uso.'); javascript:alert('Código%20da%20questão:%203907365/n/nStatus%20da%20questão:%20Liberada%20para%20Uso.'); 5a Questão (Ref.: 202008164634) (Adaptada de INCA, 2010): A respeito dos testes sorológicos, complete a lacuna a seguir: "_______________ é uma técnica sorológica que detecta a presença de anticorpos específicos contra o HIV." PCR; Clonagem; Southern Blot; Northern Blot; Western Blot. 6a Questão (Ref.: 202008941228) A espectrometria de massa é uma técnica utilizada para o estudo de massas de átomos, moléculas ou fragmentos de moléculas, desde que estes estejam eletricamente carregados. A respeito desse assunto, julgue as afirmações. I. Um espectrômetro de massas determina a massa de uma molécula ou átomo medindo a razão massa/carga dos íons gerados. II. Os íons são gerados pela indução, perda ou ganho de carga por uma espécie eletricamente neutra. III. Uma vez formados, os íons são direcionados, por forças eletrostáticas, para dentro do analisador de massas, separados de acordo com suas razões massa/carga e finalmente detectados. Assinale a alternativa correta. Estão corretas apenas as afirmativas II e III Estão corretas apenas as afirmativas I e III Estão corretas apenas as afirmativas I e II Está correta apenas a afirmativa I Estão corretas todas as afirmativas 7a Questão (Ref.: 202008156367) javascript:alert('Código%20da%20questão:%203130841/n/nStatus%20da%20questão:%20Liberada%20para%20Uso.'); javascript:alert('Código%20da%20questão:%203907435/n/nStatus%20da%20questão:%20Liberada%20para%20Uso.'); javascript:alert('Código%20da%20questão:%203122574/n/nStatus%20da%20questão:%20Liberada%20para%20Uso.'); (INSTITUTO AOCP, 2018): Preencha as lacunas e assinale a alternativa correta: "As duas técnicas mais importantes para o sequenciamento de DNA são o método ____________________ desenvolvido por Allan Maxam e Walter Gilbert, em 1977, e o método ____________________ de Fred Sanger e colaboradores, de 1978. Os dois métodos são baseados na produção de um conjunto de fitas simples de DNA que são separadas pelo princípio de eletroforese." físico de depleção de bases / didesoxi de iniciação de cadeia. químico de depleção de bases / didesoxi ou terminação de cadeia; físico de degradação / desoxi ou terminação de cadeia; físico de depleção de bases / desoxi ou terminação de cadeia; químico de degradação de bases / didesoxi ou terminação de cadeia; 8a Questão (Ref.: 202008313253) (Unesp, 2012): A obtenção de fragmentos de DNA contendo sequências complementares em suas extremidades é a primeira etapa a ser vencida no processo de clonagem de um gene. Esses fragmentos deverão ser ligados in vitro a vetores moleculares que se encarregarão de transportá-los para dentro das células e assim gerar clones. Um dos vetores de clonagem molecular comumente empregado são plasmídios, os quais se constituem de moléculas de: DNA circulares, dupla fita, incapazes de autorreplicação; DNA circulares, dupla fita, capazes de autorreplicação; DNA helicoidais, dupla fita, capazes de autorreplicação; RNA circulares, dupla fita, capazes de autorreplicação; DNA circulares, fita simples, incapazes de autorreplicação. 9a Questão (Ref.: 202008156379) (INEP, 2006): Testes de DNA para determinação de paternidade são hoje em dia realizados por meio da tecnologia de PCR (polymerase chain reaction, ou reação de polimerase em cadeia). Estes testes distinguem loci conhecidos como microssatélites. Em um desses testes foram observados os resultados ilustrados no esquema abaixo, que representa a migração eletroforética de uma análise de paternidade de uma criança ( F ), sua mãe ( M ) e o suposto pai (SP). javascript:alert('Código%20da%20questão:%203279460/n/nStatus%20da%20questão:%20Liberada%20para%20Uso.'); javascript:alert('Código%20da%20questão:%203122586/n/nStatus%20da%20questão:%20Liberada%20para%20Uso.'); Analise as afirmações abaixo: I - PCR pode ser feito a partir de amostras com pouco DNA dos indivíduos, já que a técnica possibilita a amplificação de sequências específicas de DNA; II - O resultado revela que SP não deve ser o pai da criança, já que uma das bandas de DNA deste não é encontrada no DNA da criança; III - Microssatélites são regiões do genoma nas quais ocorrem repetições de sequências nucleotídicas e por isso cada locus pode resultar em variações de tamanho nos indivíduos testados. Está correto o que se afirma em: I e II, somente; II e III, somente; I, II e III. II, somente; I e III, somente; 10a Questão (Ref.: 202008160320) (Adaptado de UNIFESP, 2017): Complete as lacunas do texto a seguir, a respeito do sistema de defesa CRISPR-Cas9 de bactérias: O Sistema CRISPR-Cas9 foi desenvolvido em laboratório e é constituído de um RNA-guia (CRISPR) associado a uma enzima de restrição (Cas9). O RNA-guia é javascript:alert('Código%20da%20questão:%203126527/n/nStatus%20da%20questão:%20Liberada%20para%20Uso.'); uma sequência curta de RNA sintético __________ à sequência de um determinado trecho de __________. Quando introduzido em células vivas, o CRISPR-Cas9 detecta a sequência de DNA complementar e a enzima corta o DNA em um ponto específico. Em seguida, o sistema de reparo do DNA é ativado, unindo novamente os segmentos que foram separados. Nesse processo, podem ocorrer alterações na sequência original, causando a __________ de um gene. Sistemas semelhantes ao CRISPR-Cas9 são encontrados naturalmente em bactérias e ativados quando estas são infectadas por vírus. Idêntica/ DNA/ inativação; Complementar/ RNA/ inativação. Complementar/ RNA/ativação; Idêntica/ RNA/ativação; Complementar/ DNA/ inativação; Disciplina: SDE4579 - PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Período: 2020.3 EAD (G) / AV Aluno: ROSI BITENCOURT Matrícula: 202001378111 Data: 21/10/2020 00:25:14 Turma: 9013 ATENÇÃO 1. Veja abaixo, todas as suas respostas gravadas no nosso banco de dados. 2. Caso você queira voltar à prova clique no botão "Retornar à Avaliação". 1a Questão (Ref.: 202005323322) Para a extração de RNA/DNA, uma das etapas mais importante é a eliminação das proteínas durante o processo de purificação. Para a eliminação de proteínas na extração de RNA/DNA, assinale a afirmativa inadequada. Digestão das amostras com a enzima proteinase K. Solubilização em tampões de guanidina Extrações com misturas de solventes orgânicos como fenol e clorofórmio por repetidas vezes. Solubilização em tampões ácidos (pH menor que 3,5). Precipitação salina. 2a Questão (Ref.: 202004531197) (PC, PI, 2018) - Em investigações criminais, alguns fios de cabelo, células da pele, sangue ou outros fluidos corporais podem ser deixados no local e o DNA recolhido a partir dessas amostras tem a capacidade de indicar a solução do crime. Muitas vezes a quantidade de DNA disponível para análise é limitada, contudo com a técnica de Reação em Cadeia de Polimerase (PCR), o menor vestígio de DNA encontrado podeser amplificado, aumentando a quantidade de material e proporcionando o suficiente para traçar o perfil genético e assim garantir a análise. A respeito da técnica de PCR, assinale a opção correta: Atualmente, devem-se adicionar enzimas de polimerização a cada etapa de desnaturação. As etapas utilizadas para realizar a PCR são a desnaturação, extensão (Taq polimerase) e anelamento (primers) nesta ordem; javascript:alert('Código da questão: 3907400/n/nStatus da questão: Liberada para Uso.'); javascript:alert('Código da questão: 3115275/n/nStatus da questão: Liberada para Uso.'); A PCR convencional permite a quantificação dos produtos por meio de fluorescência; Para realizar a PCR é necessário utilizar apenas o DNA a ser amplificado, Taq polimerase e nucleotídeos (dNTPs); Na PCR convencional, o resultado é comumente analisado por meio de uma eletroforese em gel de agarose ou de poliacrilamida; 3a Questão (Ref.: 202005323274) Gabriela irá realizar a técnica de eletroforese para avaliar qualitativamente e quantitativa o RNA extraído de células bucais que será utilizado no seu projeto de mestrado. Porém, Gabriela tem dúvidas quanto ao príncipio e aplicação da técnicas. Marque a alternativa da melhor explicação que você daria a Gabriela. a) A eletroforese é uma técnica ótica que associa a quantidade de luz absorvida com a quantidade da substância na amostra. A eletroforese é uma técnica que utiliza corantes fluorescente como iodina para detectar e quantificar substâncias. A eletroforese é uma técnica ótica que associa a quantidade de luz transmitida com a quantidade da substância na amostra. A eletroforese é técnica que utiliza campo elétrico para separar moléculas de acordo com carga e peso molecular A eletroforese é técnica que utiliza campo elétrico para separar moléculas de acordo com o peso molecular e afinidade. 4a Questão (Ref.: 202004537415) (Fiocruz, 2010): A técnica de PCR em tempo real permite ao usuário detectar, diferenciar variantes virais e quantificar ácidos nucléicos provenientes de uma infecção viral em uma única reação em tempo real, enquanto o PCR convencional basicamente permite apenas a detecção de ácidos nucléicos em uma única reação. De acordo com a frase acima, assinale a afirmativa correta: Está parcialmente errada, uma vez que é possível quantificar em tempo real o PCR convencional; Está parcialmente errada, uma vez que também é possível distinguir diferentes variantes virais no PCR convencional em uma única reação (por exemplo, PCR multiplex); javascript:alert('Código da questão: 3907352/n/nStatus da questão: Liberada para Uso.'); javascript:alert('Código da questão: 3121493/n/nStatus da questão: Liberada para Uso.'); Está parcialmente errada, uma vez que não é possível diferenciar ácidos nucléicos no PCR em tempo real; Está parcialmente errada, uma vez que não é possível quantificar ácidos nucléicos por PCR em tempo real. Está totalmente correta; 5a Questão (Ref.: 202005323336) Considere a figura abaixo. As etapas apresentadas na figura correspondem à técnica de: PCR. Western blotting. javascript:alert('Código da questão: 3907414/n/nStatus da questão: Liberada para Uso.'); Southern blotting. ELISA indireto. Pareamento indireto de DNA. 6a Questão (Ref.: 202004539140) (Fiocruz, 2010): Com relação aos métodos de coloração de proteínas em gel, assinale a alternativa correta: A coloração por Coomassie Blue é a mais indicada apenas em situações onde a detecção das proteínas será realizada por meio da purificação e do sequenciamento manual dos spots de interesse, uma vez que, com esta técnica de coloração, são necessárias quantidades muito grandes de proteínas, o que inviabilizaria sua aplicação com métodos de detecção mais sensíveis. A coloração por Coomassie Blue é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional, em função de seu alto grau de sensibilidade; A coloração por prata é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional acoplada à espectrometria de massa, em função de seu alto grau de sensibilidade; A coloração por prata deve ser evitada quando a intenção é submeter as proteínas separadas eletroforeticamente à detecção por espectometria de massa em função do alto teor de spots falsos positivos detectados após o tratamento com nitrato de prata; A coloração de Coomassie Blue é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional acoplada à espectrometria de massa, uma vez que as proteínas não se fixam de forma irreversível ao gel; 7a Questão (Ref.: 202004538483) (Adaptado de CESPE, 2017): O projeto genoma, que tratou do sequenciamento das bases que compõem o genoma humano e da variação entre os indivíduos da espécie, trouxe benefícios diretos à saúde humana e de outros organismos vivos, além de melhorias na agropecuária, indústria farmacêutica, ciência forense, metodologia científica e no desenvolvimento de instrumentos de análise laboratorial e computacional, entre outros. Portanto, o projeto genoma humano não se restringiu apenas ao genoma humano. Acerca desse assunto, complete as lacunas do texto a seguir: "O conhecimento do genoma humano ajudou a consolidar a ideia da importância das ____________________ gênicas, que é a origem dos alelos, na promoção de javascript:alert('Código da questão: 3123218/n/nStatus da questão: Liberada para Uso.'); javascript:alert('Código da questão: 3122561/n/nStatus da questão: Liberada para Uso.'); ____________________ genéticas entre indivíduos de uma mesma espécie e na busca de homologias entre o genoma humano e os de outros organismos." Mutações/ trocas; Frequências/ variações; Nenhuma das alternativas acima. Mutações/ variações; Frequências/ trocas; 8a Questão (Ref.: 202004538545) (UFC, 2015): Classicamente, a clonagem de segmentos DNA a partir de qualquer organismo envolve cinco processos gerais. Assinale a alternativa que lista corretamente esses cinco processos: Clivagem do DNA, eletroforese em gel de agarose, ligação do DNA recombinante em um vetor de clonagem, transporte do DNA recombinante para uma célula hospedeira, seleção da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; Seleção do DNA a ser clonado, transporte do DNA recombinante para a célula hospedeira, extração de DNA, Eletroforese em gel de agarose e identificação da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; Clivagem do DNA, seleção de vetores de clonagem, produção de uma molécula de DNA recombinante, transporte do DNA recombinante para a célula hospedeira, seleção da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; Seleção do DNA recombinante, uso de vetores de clonagem, transformação da célula hospedeira, eletroforese de DNA e seleção da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; Extração e eletroforese de DNA, seleção de vetores de expressão, produção de uma molécula de DNA recombinante, transporte do DNA recombinante para a célula hospedeira, seleção da célula hospedeira que contém o DNA recombinante. 9a Questão (Ref.: 202004538510) (Instituto AOCP, 2018, ITEP, RN, Perito Criminal): Marido entra na justiça para pedir teste de paternidade para comprovar se todos os 3 filhos que ele tem com sua esposa são mesmo dele. A partir de a figura a seguir, baseada nos marcadores genéticos compartilhados ou não por pai, mãe e filhos, avalie se algum dos 3 filhos realmente não é dele: javascript:alert('Código da questão: 3122623/n/nStatus da questão: Liberada para Uso.'); javascript:alert('Código da questão: 3122588/n/nStatus da questão: Liberada para Uso.'); Todos são filhos dele. Filho 2 e 3 não são dele; Nenhum é filho dele; Filho 1 e 2 não são dele;Filho 1 e 3 não são dele; 10a Questão (Ref.: 202004542451) (INEP, 2016): Desenvolvida recentemente, a técnica de edição de genoma denominada CRISPR/Cas9 mostra-se bastante promissora nas áreas de Biotecnologia e Medicina. Por engenharia genética, é possível direcionar o sistema CRISPR/Cas9 para clivar o DNA em um ponto específico dos genomas de vírus, de plantas, de fungos e de animais, inclusive de embriões humanos, o que tem gerado discussões a respeito dos aspectos éticos de sua utilização. (YANAGUI, K. Novas tecnologias, novos desafios. Ciência e Cultura, São Paulo, v. 68, n. 3, set. 2016 (adaptado).) Em relação às questões bioéticas envolvidas na edição genética, avalie as afirmações a seguir: javascript:alert('Código da questão: 3126529/n/nStatus da questão: Liberada para Uso.'); I. No Brasil, não é permitido o uso de técnicas para a edição genética de embriões humanos; os estudos científicos nessa área devem ter como objetivo tratar e curar problemas de saúde e não alterar o genoma ou realizar clonagens; II. A despeito do caráter promissor da edição genética no tratamento de doenças graves, as intervenções feitas por meio da técnica de CRISPR/Cas9 em embriões podem ser passadas às gerações futuras, por esse motivo, a prática é considerada eugenista, o que ensejou a proibição de estudos desse tipo em embriões humanos em alguns países; III. Em alguns países, inclusive no Brasil, são permitidas por lei a manipulação e a modificação genética de embriões humanos para fins de pesquisa, entretanto, esses embriões devem ser descartados dentro do prazo de duas semanas. É correto o que se afirma em: I, apenas; III, apenas; I e II, apenas; I, II e III. II e III, apenas; Disciplina: SDE4579 - PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Aluno: ATENÇÃO 1. Veja abaixo, todas as suas respostas gravadas no nosso banco de dados. 2. Caso você queira voltar à prova clique no botão "Retornar à Avaliação". 1a Questão (Ref.: 202006654282) (IFF, Farroupilha-RS, 2016): O processo de extração e a purificação do DNA genômico compreende vários passos: Lise das células, extração de ácidos desoxiribonucleicos e precipitação do RNA; Lise das células, extração de lipídeos e desoxiribonucleicos e precipitação do DNA. Lise das células, extração das proteínas mais RNA e precipitação do DNA; Quebra de lipídeos, precipitação do RNA e lise das proteínas; Lise das células, centrifugação e ressuspensão do DNA; 2a Questão (Ref.: 202006654325) (INMETRO, 2010): A técnica de PCR (reação em cadeia de polimerase), a mais utilizada para amplificação (clonagem) do DNA in vitro, revolucionou o acesso a informações genéticas. Com relação a essa técnica, assinale a opção correta: Com a PCR, a enzima Taq polimerase é capaz de manter sua atividade mesmo nas altas temperaturas necessárias para desnaturar a molécula de DNA; A PCR necessita ser acompanhada de um método de purificação para separar o fragmento amplificado do restante do genoma. A PCR também pode ser aplicada na análise de proteínas; Com a PCR, a clonagem molecular necessita de 48 a 72 horas para ser executada; Na PCR, os primers (iniciadores) se hibridam com moléculas de DNA fita dupla; 3a Questão (Ref.: 202007446362) A técnica de eletroforese permite separar fragmentos de proteínas e ácidos nucléicos por tamanho e carga elétrica. Com base na figura abaixo, que representa uma corrida de eletroforese de DNA, marque a alternativa CORRETA: javascript:alert('C%C3%B3digo%20da%20quest%C3%A3o:%203115265/n/nStatus%20da%20quest%C3%A3o:%20Liberada%20para%20Uso.'); javascript:alert('C%C3%B3digo%20da%20quest%C3%A3o:%203115308/n/nStatus%20da%20quest%C3%A3o:%20Liberada%20para%20Uso.'); javascript:alert('C%C3%B3digo%20da%20quest%C3%A3o:%203907345/n/nStatus%20da%20quest%C3%A3o:%20Liberada%20para%20Uso.'); Os fragmentos menores de DNA migram mais rápido do que os fragmentos maiores, pois se aderem mais facilmente aos íons do tampão utilizado na eletroforese. A migração das amostras ocorre no sentido do polo negativo (-) para o polo positivo (+), devido a carga negativa do fosfato localizado no nucleotídeo de DNA. Os fragmentos maiores de DNA migram mais rápido do que os fragmentos menores, devido ao seu alto peso molecular. A utilização do Marcador Molecular é indicada para auxiliar na estimativa da concentração dos fragmentos de DNA que aparecerem no gel. A coloração é feita por um corante intercalante de DNA que tem afinidade com as ligações fosfodiéster da referida molécula. 4a Questão (Ref.: 202006817569) (IBFC, 2013): A técnica de PCR (reação em cadeia de polimerase) em tempo real revolucionou o processo de quantificação de fragmentos de DNA. Ela realiza a quantificação desses ácidos nucleicos de maneira precisa e com maior reprodutividade. Assinale o fator que permite essa quantificação: A fluorescência; O sequenciamento do DNA; O termociclador. A eletroforese; Os marcadores STRs; 5a Questão (Ref.: 202006661788) (IF, TO, 2016): As técnicas de hibridação Northern Blotting, Southern Blotting e Western Blotting permitem estudar respectivamente: DNA, proteínas e RNA; RNA, DNA e proteínas; DNA, RNA e proteínas; Proteínas, RNA e DNA. RNA, proteínas e DNA; javascript:alert('C%C3%B3digo%20da%20quest%C3%A3o:%203278552/n/nStatus%20da%20quest%C3%A3o:%20Liberada%20para%20Uso.'); javascript:alert('C%C3%B3digo%20da%20quest%C3%A3o:%203122771/n/nStatus%20da%20quest%C3%A3o:%20Liberada%20para%20Uso.'); 6a Questão (Ref.: 202007446457) Na análise de proteínas empregando eletroforese bidimensional (2D), a focalização isoelétrica é realizada para: agrupar as proteínas de pI diferentes. separar as proteínas de acordo com o pH onde a carga total de uma determinada proteína é nula. separar as proteínas pela quantidade total de cargas negativas. separar as proteínas pelo peso molecular agrupar as proteínas pela quantidade total de cargas positivas 7a Questão (Ref.: 202006818472) (Unesp, 2012): No sequenciamento utilizando o método de terminador de cadeia ou método dideóxi, a sequência obtida corresponde a: RNA mensageiro; sítios de restrição de endonucleases. fita de DNA molde; fita de DNA complementar; sequência de aminoácidos de proteínas codificadas a partir da sequência obtida; 8a Questão (Ref.: 202006661642) (Adaptada de TJMA, 2004): A clonagem molecular tem demonstrado ser uma técnica excepcional para o isolamento de fragmentos de DNA específicos de um organismo. Os processos de clonagem e isolamento de tais fragmentos começam com a construção de bibliotecas de DNA, cDNA ou genômicas. Uma biblioteca de cDNA não apresenta íntrons porque: Não podem ser construídas a partir de genes; É construída a partir de DNA genômico; É construída a partir do mRNA maduro; Os introns são retirados in vitro depois da construção do cDNA, por ação de exonucleases; Nenhuma das alternativas acima. 9a Questão (Ref.: 202006818481) (FGV, 2011): Os iniciadores (primers), usados para amplificar por PCR os microssatélites (STR), são desenhados de modo a hibridar-se (anelar-se) com o DNA a ser amplificado. javascript:alert('C%C3%B3digo%20da%20quest%C3%A3o:%203907440/n/nStatus%20da%20quest%C3%A3o:%20Liberada%20para%20Uso.'); javascript:alert('C%C3%B3digo%20da%20quest%C3%A3o:%203279455/n/nStatus%20da%20quest%C3%A3o:%20Liberada%20para%20Uso.'); javascript:alert('C%C3%B3digo%20da%20quest%C3%A3o:%203122625/n/nStatus%20da%20quest%C3%A3o:%20Liberada%20para%20Uso.'); javascript:alert('C%C3%B3digo%20da%20quest%C3%A3o:%203279464/n/nStatus%20da%20quest%C3%A3o:%20Liberada%20para%20Uso.'); Assinale a alternativa que indique o sítio da região polimórfica na qual os primers deverãose anelar: Nas sequências que flanqueiam o microssatélite polimórfico; Na região promotora do microssatélite polimórfico. Na região central do microssatélite polimórfico; Qualquer uma das unidades repetitivas do microssatélite; Na região intrônica das sequências polimórficas; 10a Questão (Ref.: 202006665548) (2018, UNIFOR): A CRISPR-Cas9 (sigla em inglês para agrupados de curtas repetições palindrômicas regularmente interpaçadas) é uma nova e revolucionária técnica para a edição de genomas, que permite identificar genes de interesse, no DNA de qualquer espécie e modifica-lo. É normalmente composto por uma molécula de RNA e uma proteína e a combinação dessas duas moléculas consegue localizar a sequência de DNA de interesse dentro do núcleo da célula e a modifica. Fonte: http://ofuturodascoisas.com/crispr-revolucionou-edicao-dna-o-problema-e-que-nao- estamos-preparados-para-consequencias. Acesso em 12 set. 2017 (com adaptações). Assim, podemos dizer que o uso dessa tecnologia permite: mudanças apenas na programação genética de um organismo, garantindo que não haja nenhuma alteração na expressão gênica e na produção de proteínas; provocar mutações pontuais no genoma na tentativa de silenciar genes defeituosos ou consertá-los para tornar possível a cura de diversas doenças de origem genética; a modificação de sequências de DNA em células diferentes de um mesmo organismo de forma seletiva, uma vez que cada tipo celular de um mesmo organismo possui diferente coleção de genes; a adição de novas sequências de DNA para acarretar o ganho de novas características positivas, haja vista quanto maior o tamanho do genoma, mais complexo o organismo; aumentar o número de genes e, consequentemente, o número de proteínas produzidas por uma célula, pois o tamanho do genoma é diretamente proporcional ao número de proteínas do organismo. javascript:alert('C%C3%B3digo%20da%20quest%C3%A3o:%203126531/n/nStatus%20da%20quest%C3%A3o:%20Liberada%20para%20Uso.'); Disc.: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Aluno(a): DAIANA DA SILVA SIQUEIRA 202003444741 Acertos: 6,0 de 10,0 30/03/2021 Acerto: 0,0 / 1,0 A carioteca é a membrana celular presente, nos eucariotos, capaz de separar o núcleo do citoplasma, os procariotos não possuem carioteca. Marque a alternativa correta. O núcleo celular compartimentado dos eucariotos possibilitou um maior grau de complexidade destes organismos. O núcleo celular serve para que o RNAm sintetizado no citoplasma pelos ribossomos não seja degradado. A carioteca é responsável por separar o material genético dos organismos eucariontes, do restante do citoplasma. Desta forma todo o processo de transcrição e tradução é feito no núcleo e depois as proteínas são exportadas para o citoplasma. A ausência da carioteca torna os procariotos mais complexos, uma vez que não precisam gastar energia sintetizando uma membrana a extra. O núcleo celular em bactérias é importante para proteger dos bacteriófagos. Respondido em 30/03/2021 20:06:55 Explicação: A resposta correta é: O núcleo celular compartimentado dos eucariotos possibilitou um maior grau de complexidade destes organismos. Acerto: 1,0 / 1,0 O operon Lac tem como função principal: Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e lactose. Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e glicose. Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela inibição do metabolismo da galactose e lactose Transcrever um RNAm monocistrônico que irá ser traduzido em proteínas Questão1 a Questão2 a https://simulado.estacio.br/alunos/inicio.asp javascript:voltar(); responsáveis pela metabolização da galactose e lactose. Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela inibição do metabolismo da glicose. Respondido em 30/03/2021 20:34:39 Explicação: A resposta correta é: Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e lactose. Acerto: 1,0 / 1,0 Quanto à organização do material genético em células, é correto afirmar que: Células procarióticas, como Escherichia coli, contêm DNA em quantidade superior a uma célula humana, devido a um estado de torção denominado superenovelamento. As células procarióticas possuem um único cromossomo, o qual se condensa no interior e é denominado de nucleoide. Os plasmídeos ou elementos extracromossomais contêm genes essenciais que são importantes para as funções de sobrevivência da célula. Os transposons são feitos de DNA fita simples e possuem replicação própria independente do cromossomo. O plasmídeo é constituído por fita simples de DNA com configuração linear ou circular. Respondido em 30/03/2021 20:38:48 Explicação: A resposta correta é : As células procarióticas possuem um único cromossomo, o qual se condensa no interior e é denominado de nucleoide. Acerto: 1,0 / 1,0 Para selecionar uma amostra aleatória de tamanho n de uma população formada por N unidades, que são numeradas de 1 a N segundo uma certa ordem, escolhe-se aleatoriamente uma unidade entre as k primeiras unidades da população, onde k = N / n e seleciona-se cada k-ésima unidade da população em sequência. Esta técnica de amostragem denomina-se amostragem: Sistemática Não-probabilística Aleatória simples Probabilística Por etapas Respondido em 30/03/2021 20:43:50 Questão3 a Questão4 a Explicação: A resposta correta é: Sistemática Acerto: 0,0 / 1,0 Com relação à coleta, transporte, armazenamento e processamento de amostras de sangue para posterior extração de DNA, avalie as sentenças e assinale a alternativa INCORRETA: A amostra de sangue não precisa ser resfriada e pode ser transportada em temperatura ambiente por até 2 dias. O agente anticoagulantes preferencialmente utilizado é o EDTA ao invés da heparina. Tubos de vidro devem ser evitados. O rompimento das hemácias pode liberar o grupamento heme, este é um contaminante prejudicial. Portanto devemos separar o plasma. A amostra de sangue fresca deve ser imediatamente resfriada e mantida a 2-8°C até a extração do DNA. Respondido em 30/03/2021 20:19:52 Explicação: A resposta correta é: A amostra de sangue não precisa ser resfriada e pode ser transportada em temperatura ambiente por até 2 dias. Acerto: 1,0 / 1,0 O DNA (ácido desoxirribonucleico), material genético de seres vivos, é uma molécula de fita dupla, que pode ser extraída de forma caseira a partir de frutas, como morango ou banana amassados, com uso de detergente, de sal de cozinha, de álcool comercial e de uma peneira ou de um coador de papel. O papel do detergente nessa extração de DNA é: Promover lise mecânica do tecido para obtenção de DNA. Aglomerar o DNA em solução para que se torne visível. Romper as membranas celulares para liberação do DNA em solução. Emulsificar a mistura para promover a precipitação do DNA. Promover atividades enzimáticas para acelerar a extração do DNA. Respondido em 30/03/2021 20:48:40 Explicação: A resposta correta é: Romper as membranas celulares para liberação do DNA em solução. Questão5 a Questão6 a Acerto: 1,0 / 1,0 Em algumas situações, a obtenção de DNA a partir de RNA transcrito é importante, como, por exemplo, na construção de bibliotecas. Considerando os conceitos relacionados a essa estratégia e a figura acima, que mostra uma das possíveis estratégias para síntese de DNA a partir de RNA, assinale a opção correta. Na etapa 4, para que ocorra a reação, é suficiente a adição dos nucleosídios representados por A, U, C, G. A reação mostrada na etapa demonstra a desnaturação da fita de mRNA. O DNA obtido pelo método ilustradoé denominado tDNA. A reação mostrada na etapa 3 ilustra a atividade da enzima transcriptase reversa. A reação mostrada na etapa 4 ilustra a atividade da enzima DNA polimerase. Respondido em 30/03/2021 20:46:33 Explicação: A resposta correta é: A reação mostrada na etapa 4 ilustra a atividade da enzima DNA polimerase. Acerto: 0,0 / 1,0 No diagnóstico clínico-molecular, a reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real pode ser utilizada para a avaliação da carga viral ou bacteriana, para a determinação da resistência a antibióticos e, até mesmo, para o prognóstico de tumores malignos. A figura abaixo apresenta ciclos de amplificação de amostras por PCR em tempo real, sendo (A) uma amplificação de um determinado segmento gênico que identifica um determinado marcador tumoral em células neoplásicas e (B) uma amplificação do mesmo segmento gênico em células não neoplásicas. Questão7a Questão8 a A partir das informações apresentadas, conclui-se que: O maior Ct (26) é observado no início da fase exponencial de amplificação em células não neoplásicas ( B ), e indica maior expressão comparativamente às células neoplásicas ( B ), que apresentam Ct = 17, não sendo esta sequência- alvo um bom marcador tumoral. O aumento da fluorescência indica que a amplificação da sequência-alvo está ocorrendo, pois a cada ciclo, durante a desnaturação da dupla fita, ocorre liberação da fluorescência. o Ct (ciclo threshold) pode ser determinado pela intersecção da linha do limiar de detecção da reação threshold, com a linha da amplificação gênica de cada amostra. A análise comparativa das duas amostras deve ser realizada a partir da estabilização da amplificação, que ocorre na fase platô, sendo alcançada no ciclo 28 para a amostra A, e no ciclo 40, para a amostra B. A linha paralela ao eixo referente ao número de ciclos, na altura em que se inicia a fase exponencial da amplificação gênica, denominado threshold, representa falsos sinais positivos por contaminação das amostras por DNA genômico. Respondido em 30/03/2021 20:24:18 Explicação: A resposta correta é: o Ct (ciclo threshold) pode ser determinado pela intersecção da linha do limiar de detecção da reação threshold, com a linha da amplificação gênica de cada amostra. Acerto: 0,0 / 1,0 O sequenciamento de DNA revolucionou nosso conhecimento sobre o material genético e revelou que a maior parte dele não codifica nenhuma proteína. Com relação ao sequenciamento de DNA, assinale a alternativa correta. Os métodos de sequenciamento têm base na produção de fragmentos de DNA de comprimento crescente, que começam em um ponto comum e possuem todos os quatro tipos de nucleotídeos nas respectivas extremidades. Após a etapa de desnaturação do DNA, é colocado um primer na extremidade 5¿ de uma das cadeias e, com a ajuda de uma DNA polimerase, sintetiza-se a cadeia complementar por completo. Os nucleotídeos empregados nessa técnica são quimicamente modificados de Questão9 a forma que não apresentam um terminal hidroxila (3´-OH), impedindo a inserção de um novo nucleotídeo pela DNA polimerase. O método de Sanger revolucionou o sequenciamento de DNA pela não utilização de substâncias radioativas marcando os ddNTPs, e ficou conhecido como sequenciamento da segunda geração. Após o término da reação de sequenciamento, ela é submetida à eletroforese capilar. Todos os fragmentos recém-sintetizados, cada um terminado em um nucleotídeo diferente e cada um marcado com um diferente fluoróforo, são separados pelas respectivas cores. Respondido em 30/03/2021 20:26:33 Explicação: A resposta correta é: Os nucleotídeos empregados nessa técnica são quimicamente modificados de forma que não apresentam um terminal hidroxila (3´-OH), impedindo a inserção de um novo nucleotídeo pela DNA polimerase. Acerto: 1,0 / 1,0 Alguns processos biotecnológicos podem ser empregados na produção de bioderivados, como é o caso dos ensaios de hibridização. Qual nome é dado para o processo de hibridização em que o DNA é fixado e transferido para uma membrana de nitrocelulose ou nylon? Hibridização por microarray Western Blot Southern Blot Hibridização in situ Northern Blot Respondido em 30/03/2021 20:29:40 Explicação: A resposta correta é: Southern Blot Questão10 a javascript:abre_colabore('38403','220542499','4447619461'); 31/03/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=157394502&user_cod=2669695&matr_integracao=202002626941 1/6 Disc.: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Aluno(a): JEAN CLÁUDIO NOGUEIRA DA SILVA 202002626941 Acertos: 8,0 de 10,0 31/03/2021 Acerto: 1,0 / 1,0 A carioteca é a membrana celular presente, nos eucariotos, capaz de separar o núcleo do citoplasma, os procariotos não possuem carioteca. Marque a alternativa correta. O núcleo celular em bactérias é importante para proteger dos bacteriófagos. A ausência da carioteca torna os procariotos mais complexos, uma vez que não precisam gastar energia sintetizando uma membrana a extra. O núcleo celular serve para que o RNAm sintetizado no citoplasma pelos ribossomos não seja degradado. A carioteca é responsável por separar o material genético dos organismos eucariontes, do restante do citoplasma. Desta forma todo o processo de transcrição e tradução é feito no núcleo e depois as proteínas são exportadas para o citoplasma. O núcleo celular compartimentado dos eucariotos possibilitou um maior grau de complexidade destes organismos. Respondido em 31/03/2021 16:07:32 Explicação: A resposta correta é: O núcleo celular compartimentado dos eucariotos possibilitou um maior grau de complexidade destes organismos. Acerto: 0,0 / 1,0 O operon Lac tem como função principal: Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela inibição do metabolismo da galactose e lactose Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e glicose. Transcrever um RNAm monocistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e lactose. Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas Questão1 a Questão2 a https://simulado.estacio.br/alunos/inicio.asp javascript:voltar(); 31/03/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=157394502&user_cod=2669695&matr_integracao=202002626941 2/6 responsáveis pela inibição do metabolismo da glicose. Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e lactose. Respondido em 31/03/2021 17:42:40 Explicação: A resposta correta é: Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e lactose. Acerto: 1,0 / 1,0 Quanto à organização do material genético em células, é correto afirmar que: O plasmídeo é constituído por fita simples de DNA com configuração linear ou circular. Os plasmídeos ou elementos extracromossomais contêm genes essenciais que são importantes para as funções de sobrevivência da célula. As células procarióticas possuem um único cromossomo, o qual se condensa no interior e é denominado de nucleoide. Os transposons são feitos de DNA fita simples e possuem replicação própria independente do cromossomo. Células procarióticas, como Escherichia coli, contêm DNA em quantidade superior a uma célula humana, devido a um estado de torção denominado superenovelamento. Respondido em 31/03/2021 17:24:33 Explicação: A resposta correta é : As células procarióticas possuem um único cromossomo, o qual se condensa no interior e é denominado de nucleoide. Acerto: 1,0 / 1,0 Para selecionar uma amostra aleatória de tamanho n de uma população formada por N unidades, que são numeradas de 1 a N segundo uma certa ordem, escolhe-se aleatoriamente uma unidade entre as kprimeiras unidades da população, onde k = N / n e seleciona-se cada k-ésima unidade da população em sequência. Esta técnica de amostragem denomina-se amostragem: Aleatória simples Probabilística Não-probabilística Sistemática Por etapas Respondido em 31/03/2021 17:28:42 Questão3 a Questão4 a 31/03/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=157394502&user_cod=2669695&matr_integracao=202002626941 3/6 Explicação: A resposta correta é: Sistemática Acerto: 1,0 / 1,0 Com relação à coleta, transporte, armazenamento e processamento de amostras de sangue para posterior extração de DNA, avalie as sentenças e assinale a alternativa INCORRETA: O agente anticoagulantes preferencialmente utilizado é o EDTA ao invés da heparina. A amostra de sangue não precisa ser resfriada e pode ser transportada em temperatura ambiente por até 2 dias. Tubos de vidro devem ser evitados. O rompimento das hemácias pode liberar o grupamento heme, este é um contaminante prejudicial. Portanto devemos separar o plasma. A amostra de sangue fresca deve ser imediatamente resfriada e mantida a 2-8°C até a extração do DNA. Respondido em 31/03/2021 16:38:46 Explicação: A resposta correta é: A amostra de sangue não precisa ser resfriada e pode ser transportada em temperatura ambiente por até 2 dias. Acerto: 1,0 / 1,0 O DNA (ácido desoxirribonucleico), material genético de seres vivos, é uma molécula de fita dupla, que pode ser extraída de forma caseira a partir de frutas, como morango ou banana amassados, com uso de detergente, de sal de cozinha, de álcool comercial e de uma peneira ou de um coador de papel. O papel do detergente nessa extração de DNA é: Aglomerar o DNA em solução para que se torne visível. Emulsificar a mistura para promover a precipitação do DNA. Romper as membranas celulares para liberação do DNA em solução. Promover atividades enzimáticas para acelerar a extração do DNA. Promover lise mecânica do tecido para obtenção de DNA. Respondido em 31/03/2021 16:39:36 Explicação: A resposta correta é: Romper as membranas celulares para liberação do DNA em solução. Questão5 a Questão6 a 31/03/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=157394502&user_cod=2669695&matr_integracao=202002626941 4/6 Acerto: 1,0 / 1,0 Em algumas situações, a obtenção de DNA a partir de RNA transcrito é importante, como, por exemplo, na construção de bibliotecas. Considerando os conceitos relacionados a essa estratégia e a figura acima, que mostra uma das possíveis estratégias para síntese de DNA a partir de RNA, assinale a opção correta. O DNA obtido pelo método ilustrado é denominado tDNA. A reação mostrada na etapa 3 ilustra a atividade da enzima transcriptase reversa. A reação mostrada na etapa demonstra a desnaturação da fita de mRNA. A reação mostrada na etapa 4 ilustra a atividade da enzima DNA polimerase. Na etapa 4, para que ocorra a reação, é suficiente a adição dos nucleosídios representados por A, U, C, G. Respondido em 31/03/2021 16:44:46 Explicação: A resposta correta é: A reação mostrada na etapa 4 ilustra a atividade da enzima DNA polimerase. Acerto: 1,0 / 1,0 Ao se analisar a evolução das estratégias para determinação de identidade genética, que se tornaram um procedimento sensível e informativo, pode-se notar três fases: uma inicial, após a descrição de um marcador voltado ao polimorfismo genético em 1980, que deu origem às impressões digitais de DNA, com a aplicação de técnicas de polimorfismo de tamanho dos fragmentos de restrição - restriction fragment length polymorphism (RFLP) -; uma segunda fase de incorporação de novas técnicas, no final da década de 80 do século XX, como a reação em cadeia da polimerase (PCR), que permitiu um significativo aumento na sensibilidade dos métodos e a consequente identificação de indivíduos com amostras colhidas de fragmentos de unhas, goma de mascar etc.; e uma terceira etapa, mais recente, cuja ênfase foi a padronização metodológica e estatística e a geração de bancos de dados. Considerando as aplicações da PCR, assinale a opção correta. Uma das limitações da PCR é a impossibilidade de se amplificar diferentes sequências simultaneamente. A RT-qPCR permite a amplificação por meio da adição de aminoácidos a novas Questão7a Questão8 a 31/03/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=157394502&user_cod=2669695&matr_integracao=202002626941 5/6 fitas de polímero sintetizadas. O uso correto da PCR requer cuidados para evitar a desnaturação do DNA na etapa em que as fitas são separadas. Amplificação de conjuntos de repetições em tandem curtas (short tandem repeats) facilita a identificação de indivíduos. Ao se planejar um experimento para identificação de indivíduos, deve-se ter o cuidado de escolher sondas para qPCR em regiões que não contenham mutações. Respondido em 31/03/2021 16:49:12 Explicação: A resposta correta é: Amplificação de conjuntos de repetições em tandem curtas (short tandem repeats) facilita a identificação de indivíduos. Acerto: 0,0 / 1,0 O sequenciamento de DNA revolucionou nosso conhecimento sobre o material genético e revelou que a maior parte dele não codifica nenhuma proteína. Com relação ao sequenciamento de DNA, assinale a alternativa correta. O método de Sanger revolucionou o sequenciamento de DNA pela não utilização de substâncias radioativas marcando os ddNTPs, e ficou conhecido como sequenciamento da segunda geração. Após o término da reação de sequenciamento, ela é submetida à eletroforese capilar. Todos os fragmentos recém-sintetizados, cada um terminado em um nucleotídeo diferente e cada um marcado com um diferente fluoróforo, são separados pelas respectivas cores. Os métodos de sequenciamento têm base na produção de fragmentos de DNA de comprimento crescente, que começam em um ponto comum e possuem todos os quatro tipos de nucleotídeos nas respectivas extremidades. Após a etapa de desnaturação do DNA, é colocado um primer na extremidade 5¿ de uma das cadeias e, com a ajuda de uma DNA polimerase, sintetiza-se a cadeia complementar por completo. Os nucleotídeos empregados nessa técnica são quimicamente modificados de forma que não apresentam um terminal hidroxila (3´-OH), impedindo a inserção de um novo nucleotídeo pela DNA polimerase. Respondido em 31/03/2021 16:43:13 Explicação: A resposta correta é: Os nucleotídeos empregados nessa técnica são quimicamente modificados de forma que não apresentam um terminal hidroxila (3´-OH), impedindo a inserção de um novo nucleotídeo pela DNA polimerase. Acerto: 1,0 / 1,0 As técnicas de sequenciamento de Nova Geração (NGS) baseiam-se em uma amplificação clonal antes da reação de sequenciamento em si. No entanto, cada Questão9 a Questão10 a 31/03/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=157394502&user_cod=2669695&matr_integracao=202002626941 6/6 equipamento utiliza uma técnica diferente de amplificação clonal. Sobre estas técnicas, assinale a opção correta. A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador Illumina e consiste em uma emulsão de água em uma fase oleosa, formando gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem. A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador 454 (pirosequenciamento) e consiste em uma emulsão de água, em uma fase oleosa, formando gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem. Uma das técnicas utilizadas é a PCR em ponte, no qual as fitas de DNA são dispersas em uma placa, aleatoriamente, e a PCR realizada através de pareamento de bases com fitas de DNA presentes nesta placa; esta técnica é utilizada na metodologia do sequenciador 454 (pirosequenciamento). A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia dosequenciador Sanger e consiste em uma emulsão de água em uma fase oleosa, formando gotículas de óleo que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem. Uma das técnicas utilizadas é a PCR em ponte, no qual as fitas de DNA são dispersas em uma placa aleatoriamente e a PCR realizada através de pareamento de bases com fitas de DNA presentes nesta placa; esta técnica é utilizada na metodologia do sequenciador Sanger. Respondido em 31/03/2021 16:49:30 Explicação: A resposta correta é: A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador 454 (pirosequenciamento) e consiste em uma emulsão de água, em uma fase oleosa, formando gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem. javascript:abre_colabore('38403','220612064','4449321554'); Questão Acerto: 1,0 / 1,0 Considerando um trecho de uma molécula de DNA fita dupla, podemos afirmar que: Se existe 10% de adenina, logo este trecho também possui 10% de uracila. Se existe 25% de guanina, logo este trecho também possui 15% de timina. Se existe 35% de timina, logo este trecho também possui 15% de citosina. Se existe 10% de adenina, logo este trecho também possui 20% de timina. Se existe 20% de guanina, logo este trecho também possui 15% de timina. Respondido em 30/03/2021 20:36:32 Explicação: A reposta correta é :Se existe 35% de timina, logo este trecho também possui 15% de citosina. 2a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 Sobre transcrição e tradução em eucariotos é correto afirmar que: A tradução no núcleo e é realizada pela organela ribossomo, com o auxílio do RNAt A transcrição e a tradução ocorrem no núcleo. A transcrição do DNA em RNA é feita no citoplasma pela maquinaria de transcrição, um complexo proteico formado pela RNA polimerase e fatores de transcrição. O ribossomo é capas de transcrever a partir com auxílio do RNAt que leva o RNAm até ele. O RNAm maduro, formado por éxons, com o cap5¿ e a cauda poliA é endereçado para fora do núcleo para poder ser traduzido. Respondido em 30/03/2021 20:42:04 Explicação: A resposta correta é: O RNAm maduro, formado por éxons, com o cap5¿ e a cauda poliA é endereçado para fora do núcleo para poder ser traduzido. 3a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 Quanto à organização do material genético em células, é correto afirmar que: Células procarióticas, como Escherichia coli, contêm DNA em quantidade superior a uma célula humana, devido a um estado de torção denominado superenovelamento. Os plasmídeos ou elementos extracromossomais contêm genes essenciais que são importantes para as funções de sobrevivência da célula. As células procarióticas possuem um único cromossomo, o qual se condensa no interior e é denominado de nucleoide. Os transposons são feitos de DNA fita simples e possuem replicação própria independente do cromossomo. O plasmídeo é constituído por fita simples de DNA com configuração linear ou circular. Respondido em 30/03/2021 21:03:48 Explicação: A resposta correta é : As células procarióticas possuem um único cromossomo, o qual se condensa no interior e é denominado de nucleoide. 4a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 Após completar a extração do DNA de uma amostra de sangue não há como saber se a extração foi devidamente realizada a não ser que se faça um controle de qualidade do material extraído. Com relação ao controle de qualidade podemos afirmar que: É composto por três etapas: quantificação, coloração e validação. A espectrofotometria mede a quantidade de luz, na faixa de 260 nm, absorvida pelo DNA e RNA, desta forma é capaz de quantificar e identificar a pureza da amostra. Deve ser realizado a partir da observação, estabelecimento de hipóteses, análise, conclusões e divulgação de um relatório final. A etapa de quantificação apenas pode ser realizada com o uso da técnica de fluorometria. A eletroforese é feita para medir a integridade do extraído e tem como princípio diferenciar a solubilidade de cada componente. Respondido em 31/03/2021 08:00:21 Explicação: A resposta correta é: A espectrofotometria mede a quantidade de luz, na faixa de 260 nm, absorvida pelo DNA e RNA, desta forma é capaz de quantificar e identificar a pureza da amostra. 5a Questão Acerto: 0,0 / 1,0 Na extração de RNA todos os cuidados citados abaixo devem ser tomados exceto: O RNA deve ser rapidamente congelado em nitrogênio líquido. Uso de solução fenol/clorofórmio em pH ácido. Na extração de RNA usamos acetato de amônio para auxiliar a separação entra a fase orgânica e a aquosa. Todo o material deve ser RNAse free e lavado com soluções neutralizadoras de RNAses. É preferível o uso de um aparelho sonicador para a quebra das membranas celulares, ao invés do uso de detergentes. Respondido em 31/03/2021 08:00:27 Explicação: A resposta correta é: Na extração de RNA usamos acetato de amônio para auxiliar a separação entra a fase orgânica e a aquosa. 6a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 O DNA (ácido desoxirribonucleico), material genético de seres vivos, é uma molécula de fita dupla, que pode ser extraída de forma caseira a partir de frutas, como morango ou banana amassados, com uso de detergente, de sal de cozinha, de álcool comercial e de uma peneira ou de um coador de papel. O papel do detergente nessa extração de DNA é: Promover lise mecânica do tecido para obtenção de DNA. Emulsificar a mistura para promover a precipitação do DNA. Romper as membranas celulares para liberação do DNA em solução. Promover atividades enzimáticas para acelerar a extração do DNA. Aglomerar o DNA em solução para que se torne visível. Respondido em 31/03/2021 08:00:35 Explicação: A resposta correta é: Romper as membranas celulares para liberação do DNA em solução. 7a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 No diagnóstico clínico-molecular, a reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real pode ser utilizada para a avaliação da carga viral ou bacteriana, para a determinação da resistência a antibióticos e, até mesmo, para o prognóstico de tumores malignos. A figura abaixo apresenta ciclos de amplificação de amostras por PCR em tempo real, sendo (A) uma amplificação de um determinado segmento gênico que identifica um determinado marcador tumoral em células neoplásicas e (B) uma amplificação do mesmo segmento gênico em células não neoplásicas. A partir das informações apresentadas, conclui-se que: o Ct (ciclo threshold) pode ser determinado pela intersecção da linha do limiar de detecção da reação threshold, com a linha da amplificação gênica de cada amostra. O aumento da fluorescência indica que a amplificação da sequência-alvo está ocorrendo, pois a cada ciclo, durante a desnaturação da dupla fita, ocorre liberação da fluorescência. A análise comparativa das duas amostras deve ser realizada a partir da estabilização da amplificação, que ocorre na fase platô, sendo alcançada no ciclo 28 para a amostra A, e no ciclo 40, para a amostra B. A linha paralela ao eixo referente ao número de ciclos, na altura em que se inicia a fase exponencial da amplificação gênica, denominado threshold, representa falsos sinais positivos por contaminação das amostras por DNA genômico. O maior Ct (26) é observado no início da fase exponencial de amplificação em células não neoplásicas ( B ), e indica maior expressão comparativamente às células neoplásicas ( B ), que apresentam Ct = 17, não sendo esta sequência-alvo um bom marcador tumoral. Respondido em 31/03/2021 08:00:42 Explicação: A resposta correta é: o Ct (ciclo threshold) pode ser determinadopela intersecção da linha do limiar de detecção da reação threshold, com a linha da amplificação gênica de cada amostra. 8a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 Ao se analisar a evolução das estratégias para determinação de identidade genética, que se tornaram um procedimento sensível e informativo, pode-se notar três fases: uma inicial, após a descrição de um marcador voltado ao polimorfismo genético em 1980, que deu origem às impressões digitais de DNA, com a aplicação de técnicas de polimorfismo de tamanho dos fragmentos de restrição - restriction fragment length polymorphism (RFLP) -; uma segunda fase de incorporação de novas técnicas, no final da década de 80 do século XX, como a reação em cadeia da polimerase (PCR), que permitiu um significativo aumento na sensibilidade dos métodos e a consequente identificação de indivíduos com amostras colhidas de fragmentos de unhas, goma de mascar etc.; e uma terceira etapa, mais recente, cuja ênfase foi a padronização metodológica e estatística e a geração de bancos de dados. Considerando as aplicações da PCR, assinale a opção correta. A RT-qPCR permite a amplificação por meio da adição de aminoácidos a novas fitas de polímero sintetizadas. O uso correto da PCR requer cuidados para evitar a desnaturação do DNA na etapa em que as fitas são separadas. Amplificação de conjuntos de repetições em tandem curtas (short tandem repeats) facilita a identificação de indivíduos. Ao se planejar um experimento para identificação de indivíduos, deve-se ter o cuidado de escolher sondas para qPCR em regiões que não contenham mutações. Uma das limitações da PCR é a impossibilidade de se amplificar diferentes sequências simultaneamente. Respondido em 31/03/2021 08:00:53 Explicação: A resposta correta é: Amplificação de conjuntos de repetições em tandem curtas (short tandem repeats) facilita a identificação de indivíduos. 9a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 O desenvolvimento da engenharia genética permitiu a retirada de genes de uma espécie e a posterior introdução deles em outro indivíduo de espécie diferente. Com essa ferramenta em mãos, o homem foi capaz de reproduzir genes de interesse. COSTA, Marco Antônio F.; COSTA, Maria de Fátima B. Biossegurança de OGM: uma visão integrada. Rio de Janeiro: Publit, 2009, p. 154, com adaptações. Com base nos conceitos de organismos geneticamente modificados (OGMs), assinale a alternativa correta. Os OGMs são organismos cujo material genético (RNA ou DNA) tenha sido modificado por qualquer técnica. Os transgênicos são produzidos através da alteração de genes em organismos adultos, sendo a modificação genética transmitida de uma célula a outra através de transformação. Organismos que tiveram genes alterados apenas quanto à respectiva posição ou expressão são transgênicos O setor da saúde não apresenta qualquer tipo de questionamento em relação ao uso dos OGMs, considerando os inúmeros benefícios trazidos por eles para o setor. Os OGMs, na respectiva totalidade, são considerados transgênicos. Respondido em 31/03/2021 08:01:01 Explicação: A resposta correta é: Os OGMs são organismos cujo material genético (RNA ou DNA) tenha sido modificado por qualquer técnica. 10a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 As técnicas de sequenciamento de Nova Geração (NGS) baseiam-se em uma amplificação clonal antes da reação de sequenciamento em si. No entanto, cada equipamento utiliza uma técnica diferente de amplificação clonal. Sobre estas técnicas, assinale a opção correta. A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador Illumina e consiste em uma emulsão de água em uma fase oleosa, formando gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem. A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador Sanger e consiste em uma emulsão de água em uma fase oleosa, formando gotículas de óleo que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem. Uma das técnicas utilizadas é a PCR em ponte, no qual as fitas de DNA são dispersas em uma placa aleatoriamente e a PCR realizada através de pareamento de bases com fitas de DNA presentes nesta placa; esta técnica é utilizada na metodologia do sequenciador Sanger. A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador 454 (pirosequenciamento) e consiste em uma emulsão de água, em uma fase oleosa, formando gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem. Uma das técnicas utilizadas é a PCR em ponte, no qual as fitas de DNA são dispersas em uma placa, aleatoriamente, e a PCR realizada através de pareamento de bases com fitas de DNA presentes nesta placa; esta técnica é utilizada na metodologia do sequenciador 454 (pirosequenciamento). Respondido em 31/03/2021 08:01:12 Explicação: A resposta correta é: A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador 454 (pirosequenciamento) e consiste em uma emulsão de água, em uma fase oleosa, formando gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem. 01/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/ 1/6 Disc.: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Aluno(a): SAMUEL LIMA DOS SANTOS 201909198511 Acertos: 10,0 de 10,0 31/03/2021 Acerto: 1,0 / 1,0 A carioteca é a membrana celular presente, nos eucariotos, capaz de separar o núcleo do citoplasma, os procariotos não possuem carioteca. Marque a alternativa correta. A carioteca é responsável por separar o material genético dos organismos eucariontes, do restante do citoplasma. Desta forma todo o processo de transcrição e tradução é feito no núcleo e depois as proteínas são exportadas para o citoplasma. O núcleo celular serve para que o RNAm sintetizado no citoplasma pelos ribossomos não seja degradado. O núcleo celular compartimentado dos eucariotos possibilitou um maior grau de complexidade destes organismos. O núcleo celular em bactérias é importante para proteger dos bacteriófagos. A ausência da carioteca torna os procariotos mais complexos, uma vez que não precisam gastar energia sintetizando uma membrana a extra. Respondido em 01/04/2021 00:35:11 Explicação: A resposta correta é: O núcleo celular compartimentado dos eucariotos possibilitou um maior grau de complexidade destes organismos. Acerto: 1,0 / 1,0 O operon Lac tem como função principal: Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela inibição do metabolismo da glicose. Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela inibição do metabolismo da galactose e lactose Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e glicose. Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas Questão1 a Questão2 a https://simulado.estacio.br/alunos/inicio.asp javascript:voltar(); 01/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/ 2/6 responsáveis pela metabolização da galactose e lactose. Transcrever um RNAm monocistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e lactose. Respondido em 01/04/2021 00:34:02 Explicação: A resposta correta é: Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e lactose. Acerto: 1,0 / 1,0 Quanto à organização do material genético em células, é correto afirmar que: O plasmídeo é constituído por fita simples de DNA com configuração linear ou circular. Os plasmídeos ou elementos extracromossomaiscontêm genes essenciais que são importantes para as funções de sobrevivência da célula. As células procarióticas possuem um único cromossomo, o qual se condensa no interior e é denominado de nucleoide. Células procarióticas, como Escherichia coli, contêm DNA em quantidade superior a uma célula humana, devido a um estado de torção denominado superenovelamento. Os transposons são feitos de DNA fita simples e possuem replicação própria independente do cromossomo. Respondido em 01/04/2021 00:32:48 Explicação: A resposta correta é : As células procarióticas possuem um único cromossomo, o qual se condensa no interior e é denominado de nucleoide. Acerto: 1,0 / 1,0 Para selecionar uma amostra aleatória de tamanho n de uma população formada por N unidades, que são numeradas de 1 a N segundo uma certa ordem, escolhe-se aleatoriamente uma unidade entre as k primeiras unidades da população, onde k = N / n e seleciona-se cada k-ésima unidade da população em sequência. Esta técnica de amostragem denomina-se amostragem: Probabilística Aleatória simples Por etapas Sistemática Não-probabilística Respondido em 01/04/2021 00:32:29 Questão3 a Questão4 a 01/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/ 3/6 Explicação: A resposta correta é: Sistemática Acerto: 1,0 / 1,0 Com relação à coleta, transporte, armazenamento e processamento de amostras de sangue para posterior extração de DNA, avalie as sentenças e assinale a alternativa INCORRETA: O rompimento das hemácias pode liberar o grupamento heme, este é um contaminante prejudicial. Portanto devemos separar o plasma. A amostra de sangue não precisa ser resfriada e pode ser transportada em temperatura ambiente por até 2 dias. Tubos de vidro devem ser evitados. A amostra de sangue fresca deve ser imediatamente resfriada e mantida a 2-8°C até a extração do DNA. O agente anticoagulantes preferencialmente utilizado é o EDTA ao invés da heparina. Respondido em 01/04/2021 00:32:09 Explicação: A resposta correta é: A amostra de sangue não precisa ser resfriada e pode ser transportada em temperatura ambiente por até 2 dias. Acerto: 1,0 / 1,0 O DNA (ácido desoxirribonucleico), material genético de seres vivos, é uma molécula de fita dupla, que pode ser extraída de forma caseira a partir de frutas, como morango ou banana amassados, com uso de detergente, de sal de cozinha, de álcool comercial e de uma peneira ou de um coador de papel. O papel do detergente nessa extração de DNA é: Aglomerar o DNA em solução para que se torne visível. Emulsificar a mistura para promover a precipitação do DNA. Promover lise mecânica do tecido para obtenção de DNA. Romper as membranas celulares para liberação do DNA em solução. Promover atividades enzimáticas para acelerar a extração do DNA. Respondido em 01/04/2021 00:31:33 Explicação: A resposta correta é: Romper as membranas celulares para liberação do DNA em solução. Questão5 a Questão6 a 01/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/ 4/6 Acerto: 1,0 / 1,0 Em algumas situações, a obtenção de DNA a partir de RNA transcrito é importante, como, por exemplo, na construção de bibliotecas. Considerando os conceitos relacionados a essa estratégia e a figura acima, que mostra uma das possíveis estratégias para síntese de DNA a partir de RNA, assinale a opção correta. A reação mostrada na etapa 4 ilustra a atividade da enzima DNA polimerase. Na etapa 4, para que ocorra a reação, é suficiente a adição dos nucleosídios representados por A, U, C, G. A reação mostrada na etapa 3 ilustra a atividade da enzima transcriptase reversa. A reação mostrada na etapa demonstra a desnaturação da fita de mRNA. O DNA obtido pelo método ilustrado é denominado tDNA. Respondido em 01/04/2021 00:31:08 Explicação: A resposta correta é: A reação mostrada na etapa 4 ilustra a atividade da enzima DNA polimerase. Acerto: 1,0 / 1,0 No diagnóstico clínico-molecular, a reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real pode ser utilizada para a avaliação da carga viral ou bacteriana, para a determinação da resistência a antibióticos e, até mesmo, para o prognóstico de tumores malignos. A figura abaixo apresenta ciclos de amplificação de amostras por PCR em tempo real, sendo (A) uma amplificação de um determinado segmento gênico que identifica um determinado marcador tumoral em células neoplásicas e (B) uma amplificação do mesmo segmento gênico em células não neoplásicas. Questão7a Questão8 a 01/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/ 5/6 A partir das informações apresentadas, conclui-se que: O maior Ct (26) é observado no início da fase exponencial de amplificação em células não neoplásicas ( B ), e indica maior expressão comparativamente às células neoplásicas ( B ), que apresentam Ct = 17, não sendo esta sequência- alvo um bom marcador tumoral. A análise comparativa das duas amostras deve ser realizada a partir da estabilização da amplificação, que ocorre na fase platô, sendo alcançada no ciclo 28 para a amostra A, e no ciclo 40, para a amostra B. O aumento da fluorescência indica que a amplificação da sequência-alvo está ocorrendo, pois a cada ciclo, durante a desnaturação da dupla fita, ocorre liberação da fluorescência. A linha paralela ao eixo referente ao número de ciclos, na altura em que se inicia a fase exponencial da amplificação gênica, denominado threshold, representa falsos sinais positivos por contaminação das amostras por DNA genômico. o Ct (ciclo threshold) pode ser determinado pela intersecção da linha do limiar de detecção da reação threshold, com a linha da amplificação gênica de cada amostra. Respondido em 01/04/2021 00:30:23 Explicação: A resposta correta é: o Ct (ciclo threshold) pode ser determinado pela intersecção da linha do limiar de detecção da reação threshold, com a linha da amplificação gênica de cada amostra. Acerto: 1,0 / 1,0 O sequenciamento de DNA revolucionou nosso conhecimento sobre o material genético e revelou que a maior parte dele não codifica nenhuma proteína. Com relação ao sequenciamento de DNA, assinale a alternativa correta. Após o término da reação de sequenciamento, ela é submetida à eletroforese capilar. Todos os fragmentos recém-sintetizados, cada um terminado em um nucleotídeo diferente e cada um marcado com um diferente fluoróforo, são separados pelas respectivas cores. O método de Sanger revolucionou o sequenciamento de DNA pela não utilização de substâncias radioativas marcando os ddNTPs, e ficou conhecido como sequenciamento da segunda geração. Questão9 a 01/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/ 6/6 Após a etapa de desnaturação do DNA, é colocado um primer na extremidade 5¿ de uma das cadeias e, com a ajuda de uma DNA polimerase, sintetiza-se a cadeia complementar por completo. Os métodos de sequenciamento têm base na produção de fragmentos de DNA de comprimento crescente, que começam em um ponto comum e possuem todos os quatro tipos de nucleotídeos nas respectivas extremidades. Os nucleotídeos empregados nessa técnica são quimicamente modificados de forma que não apresentam um terminal hidroxila (3´-OH), impedindo a inserção de um novo nucleotídeo pela DNA polimerase. Respondido em 01/04/2021 00:29:53 Explicação: A resposta correta é: Os nucleotídeos empregados nessa técnica são quimicamente modificados de forma que não apresentam um terminal hidroxila (3´-OH), impedindo a inserção de um novo nucleotídeo pela DNA polimerase. Acerto: 1,0 / 1,0 Alguns processos biotecnológicos podem ser empregados na produção de bioderivados, como é o caso dos ensaios de hibridização. Qual nome é dado para o processo de hibridização em que o DNA é fixado e transferido para uma membrana de nitrocelulose ou nylon? Hibridização in situ Northern Blot Southern Blot Western Blot Hibridização por microarray Respondido em 31/03/202122:34:56 Explicação: A resposta correta é: Southern Blot Questão10 a javascript:abre_colabore('38403','220670687','4450370057'); 1 O operon Lac tem como função principal: Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e lactose. Transcrever um RNAm monocistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e lactose. Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela inibição do metabolismo da galactose e lactose Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e glicose. Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela inibição do metabolismo da glicose. Respondido em 02/04/2021 15:48:07 Explicação: A resposta correta é: Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e lactose. 2a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 Considerando um trecho de uma molécula de DNA fita dupla, podemos afirmar que: Se existe 20% de guanina, logo este trecho também possui 15% de timina. Se existe 10% de adenina, logo este trecho também possui 20% de timina. Se existe 10% de adenina, logo este trecho também possui 10% de uracila. Se existe 25% de guanina, logo este trecho também possui 15% de timina. Se existe 35% de timina, logo este trecho também possui 15% de citosina. Respondido em 03/04/2021 22:13:04 Explicação: A reposta correta é :Se existe 35% de timina, logo este trecho também possui 15% de citosina. 3a Acerto: 1,0 / 1,0 Questão Quanto à organização do material genético em células, é correto afirmar que: Os transposons são feitos de DNA fita simples e possuem replicação própria independente do cromossomo. Os plasmídeos ou elementos extracromossomais contêm genes essenciais que são importantes para as funções de sobrevivência da célula. As células procarióticas possuem um único cromossomo, o qual se condensa no interior e é denominado de nucleoide. O plasmídeo é constituído por fita simples de DNA com configuração linear ou circular. Células procarióticas, como Escherichia coli, contêm DNA em quantidade superior a uma célula humana, devido a um estado de torção denominado superenovelamento. Respondido em 02/04/2021 16:00:08 Explicação: A resposta correta é : As células procarióticas possuem um único cromossomo, o qual se condensa no interior e é denominado de nucleoide. 4a Questão Acerto: 0,0 / 1,0 Após completar a extração do DNA de uma amostra de sangue não há como saber se a extração foi devidamente realizada a não ser que se faça um controle de qualidade do material extraído. Com relação ao controle de qualidade podemos afirmar que: É composto por três etapas: quantificação, coloração e validação. Deve ser realizado a partir da observação, estabelecimento de hipóteses, análise, conclusões e divulgação de um relatório final. A etapa de quantificação apenas pode ser realizada com o uso da técnica de fluorometria. A espectrofotometria mede a quantidade de luz, na faixa de 260 nm, absorvida pelo DNA e RNA, desta forma é capaz de quantificar e identificar a pureza da amostra. A eletroforese é feita para medir a integridade do extraído e tem como princípio diferenciar a solubilidade de cada componente. Respondido em 02/04/2021 16:10:40 Explicação: A resposta correta é: A espectrofotometria mede a quantidade de luz, na faixa de 260 nm, absorvida pelo DNA e RNA, desta forma é capaz de quantificar e identificar a pureza da amostra. 5a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 Com relação à coleta, transporte, armazenamento e processamento de amostras de sangue para posterior extração de DNA, avalie as sentenças e assinale a alternativa INCORRETA: O agente anticoagulantes preferencialmente utilizado é o EDTA ao invés da heparina. A amostra de sangue não precisa ser resfriada e pode ser transportada em temperatura ambiente por até 2 dias. Tubos de vidro devem ser evitados. A amostra de sangue fresca deve ser imediatamente resfriada e mantida a 2-8°C até a extração do DNA. O rompimento das hemácias pode liberar o grupamento heme, este é um contaminante prejudicial. Portanto devemos separar o plasma. Respondido em 02/04/2021 16:13:35 Explicação: A resposta correta é: A amostra de sangue não precisa ser resfriada e pode ser transportada em temperatura ambiente por até 2 dias. 6a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 O DNA (ácido desoxirribonucleico), material genético de seres vivos, é uma molécula de fita dupla, que pode ser extraída de forma caseira a partir de frutas, como morango ou banana amassados, com uso de detergente, de sal de cozinha, de álcool comercial e de uma peneira ou de um coador de papel. O papel do detergente nessa extração de DNA é: Romper as membranas celulares para liberação do DNA em solução. Promover lise mecânica do tecido para obtenção de DNA. Emulsificar a mistura para promover a precipitação do DNA. Promover atividades enzimáticas para acelerar a extração do DNA. Aglomerar o DNA em solução para que se torne visível. Respondido em 02/04/2021 16:15:41 Explicação: A resposta correta é: Romper as membranas celulares para liberação do DNA em solução. 7a Questão Acerto: 0,0 / 1,0 A Biotecnologia trabalha predominantemente manipulando material genético de seres vivos; para a maioria dos organismos, o material genético é a molécula de DNA. Acerca da estrutura da molécula de DNA, assinale a opção correta. Em uma cadeia de DNA, os nucleotídeos se ligam aos açúcares e fosfatos por pontes de hidrogênio. O açúcar contido na molécula de DNA é a ribose. As duas fitas que compõem a molécula de DNA são ligadas por pontes de hidrogênio entre suas bases nitrogenadas. O DNA é composto por quatro tipos de bases nitrogenadas: adenina, citosina, timina e uracila. Há complementaridade entre as bases nitrogenadas adenina e timina e entre guanina e uracila. Respondido em 02/04/2021 16:21:14 Explicação: A resposta correta é: As duas fitas que compõem a molécula de DNA são ligadas por pontes de hidrogênio entre suas bases nitrogenadas. 8a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 SNPs são empregados amplamente para a identificação humana e possuem diferenças relevantes. A análise dos SNPs também pode estar associada aos fenótipos individuais, havendo uma possibilidade futura de identificação de traços físicos como, por exemplo, a cor da íris. Os SNPs são: Homozigotos Polimorfismos de nucleotídeo único; uma variação na sequência de DNA Sequências presentes somente no DNA mitocondrial Heterozigotos Elementos repetitivos do genoma nuclear Respondido em 02/04/2021 16:21:56 Explicação: A resposta correta é: Polimorfismos de nucleotídeo único; uma variação na sequência de DNA. 9a Questão Acerto: 0,0 / 1,0 As técnicas de sequenciamento de Nova Geração (NGS) baseiam-se em uma amplificação clonal antes da reação de sequenciamento em si. No entanto, cada equipamento utiliza uma técnica diferente de amplificação clonal. Sobre estas técnicas, assinale a opção correta. Uma das técnicas utilizadas é a PCR em ponte, no qual as fitas de DNA são dispersas em uma placa, aleatoriamente, e a PCR realizada através de pareamento de bases com fitas de DNA presentes nesta placa; esta técnica é utilizada na metodologia do sequenciador 454 (pirosequenciamento). A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador 454 (pirosequenciamento) e consiste em uma emulsão de água, em uma faseoleosa, formando gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem. Uma das técnicas utilizadas é a PCR em ponte, no qual as fitas de DNA são dispersas em uma placa aleatoriamente e a PCR realizada através de pareamento de bases com fitas de DNA presentes nesta placa; esta técnica é utilizada na metodologia do sequenciador Sanger. A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador Illumina e consiste em uma emulsão de água em uma fase oleosa, formando gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem. A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador Sanger e consiste em uma emulsão de água em uma fase oleosa, formando gotículas de óleo que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem. Respondido em 02/04/2021 16:24:00 Explicação: A resposta correta é: A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador 454 (pirosequenciamento) e consiste em uma emulsão de água, em uma fase oleosa, formando gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem. 10a Questão Acerto: 0,0 / 1,0 A hibridização in situ é uma ferramenta diagnóstica de doenças genéticas, como a distrofia muscular de Duchenne, e infecciosas, como a infecção por papilomavírus humano (HPV) em colo uterino. Sobre as técnicas de hibridização in situ, é incorreto afirmar que: São feitas em tecidos e células fixadas e permeabilizadas, para preservação das estruturas celulares e entrada das sondas, respectivamente; Utilizam sondas de anticorpos, capazes de reconhecer a sequência-alvo; As sondas podem ser marcadas com enzimas, fluoróforos e radioatividade; Exigem leitura através de microscópios especializados. Permite a identificação com precisão do local na célula ou tecido em que a sequência-alvo está; Respondido em 02/04/2021 16:29:14 Explicação: A resposta correta é: Utilizam sondas de anticorpos, capazes de reconhecer a sequência-alvo; 18/09/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2599245&matr_integracao=202001570837 1/6 Disc.: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Aluno(a): JÉSSUA SUÉD REY DA ROSA 202001570837 Acertos: 10,0 de 10,0 18/09/2020 Acerto: 1,0 / 1,0 São exemplos de ácidos nucleicos: Proteínas e lipídios; Timina e uracila. Adenina e guanina; DNA e RNA; Monossacarídeos e dissacarídeos; Respondido em 18/09/2020 22:52:43 Explicação: As demais alternativas fornecem exemplos de outras macromoléculas ou bases nitrogenadas. Acerto: 1,0 / 1,0 (Fiocruz, 2010): Sobre a utilização da técnica de PCR com a finalidade de diagnóstico molecular, analise as afirmativas a seguir. I. Uma vez que na reação de PCR se utiliza uma DNA Polimerase dependente de DNA, somente os vírus cujo genoma é constituído por DNA podem ser detectados pela técnica de PCR. II. É possível detectar microorganismos diferentes em uma mesma reação de PCR, desde que se utilize na reação pares de iniciadores específicos para cada microorganismo que se queira detectar. III. A utilização da técnica de PCR para diagnóstico molecular terá sempre e somente caráter qualitativo. Assinale: se somente a afirmativa I estiver correta; se todas as afirmativas estiverem corretas. se somente a afirmativa III estiver correta; se somente as afirmativas I e II estiverem corretas; se somente a afirmativa II estiver correta; Respondido em 18/09/2020 23:13:13 Questão1 a Questão2 a https://simulado.estacio.br/alunos/inicio.asp javascript:voltar(); 18/09/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2599245&matr_integracao=202001570837 2/6 Explicação: É possível detectarmos patógenos cujo genoma seja RNA através de RT-PCR, ou seja, transcrição reversa acoplada à PCR. Também podemos quantificar o nosso alvo através da PCR em tempo real ou, indiretamente, mensurar aproximadamente a sua quantidade através de gel de agarose, reagente Low mass e sistema de coloração adequado para análise dos amplicons. Acerto: 1,0 / 1,0 (Polícia Científica, PE, 2016): A respeito de eletroforese, uma metodologia amplamente empregada para separação, isolamento, análise e manipulação dos ácidos nucleicos, assinale a opção correta: A eletroforese em gel de agarose é usada para separar proteínas de tamanhos diferentes, que podem ser detectadas por fluorescência; A eletroforese consiste na migração das partículas de uma solução coloidal sob a influência de um campo magnético onde a polaridade negativa atrai as moléculas; A identificação dos fragmentos amplificados de DNA não pode ser realizada em gel de poliacrilamida; Os ácidos nucleicos possuem uma carga geral total positiva, devido aos seus grupamentos fosfato do arcabouço e, consequentemente, quando aplicados em um gel de agarose ou poliacrilamida, migram em direção ao ânodo. A quantificação de DNA em gel de agarose é uma técnica de menor precisão, comparada a eletroforese em acrilamida, sendo utilizada como instrumento para averiguação de êxito na etapa de extração; Respondido em 18/09/2020 22:59:42 Explicação: A eletroforese em gel de agarose destina-se apenas a ácidos nucleicos, enquanto a eletroforese em gel de poliacrilamida pode ser empregada para ácidos nucleicos e proteínas. Na técnica de eletroforese, graças à aplicação de campo elétrico, as partículas são induzidas a migrar no polímero. O movimento das partículas é determinado em função da repulsão do pólo negativo uma vez que, em função dos seus respectivos grupamentos fosfato, o DNA possui cargas semelhante. Acerto: 1,0 / 1,0 (INCA, 2014): Qual afirmação descreve com precisão o processo de PCR? A reação de PCR requer um tipo especial de enzima de restrição; O peso molecular do fragmento de DNA não é diagnóstico de especificidade de um PCR; Os produtos de PCR são inibidores da reação em cadeia da polimerase; É necessário um par de primers para a amplificação de um fragmento de DNA; A reação de PCR amplifica geometricamente um fragmento de DNA. Respondido em 18/09/2020 23:02:37 Explicação: Os produtos de uma etapa da reação de PCR servem como substrato para as etapas subsequentes. Não é necessário utilizar enzima de restrição para essa metodologia. O uso de pesos moleculares auxilia na deteção de amplificações inespecíficas. A amplificação é considerada exponencial. Acerto: 1,0 / 1,0 Considerando os princípios das técnicas de hibridização e suas aplicações dentro da biologia molecular, assinale a alternativa correta: A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão Questão3 a Questão4 a Questão5 a 18/09/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2599245&matr_integracao=202001570837 3/6 gênica é o Southern Blotting; Não existe técnica de hibridização capaz de avaliar expressão gênica. A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é o Western Blotting; A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é o Northern Blotting; Southern, Northern e Western Blotting podem ser utilizadas para estudos envolvendo expressão gênica; Respondido em 18/09/2020 23:04:47 Explicação: A técnica de Northern blot corresponde a uma técnica de hibridização de moléculas de RNA com sondas de oligonucleotídeos marcadas. Trata-se de uma metodologia útil, portanto, na detecção de RNA mensageiro (RNAm), nos estudos de expressão gênica, na avaliação da degradação de RNA e splicing, por exemplo. Acerto: 1,0 / 1,0 (Fiocruz, 2010): Com relação aos métodos de coloração de proteínas em gel, assinale a alternativa correta: A coloração de Coomassie Blue é a mais indicada para análise de eletroforesebidimensional acoplada à espectrometria de massa, uma vez que as proteínas não se fixam de forma irreversível ao gel; A coloração por Coomassie Blue é a mais indicada apenas em situações onde a detecção das proteínas será realizada por meio da purificação e do sequenciamento manual dos spots de interesse, uma vez que, com esta técnica de coloração, são necessárias quantidades muito grandes de proteínas, o que inviabilizaria sua aplicação com métodos de detecção mais sensíveis. A coloração por Coomassie Blue é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional, em função de seu alto grau de sensibilidade; A coloração por prata é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional acoplada à espectrometria de massa, em função de seu alto grau de sensibilidade; A coloração por prata deve ser evitada quando a intenção é submeter as proteínas separadas eletroforeticamente à detecção por espectometria de massa em função do alto teor de spots falsos positivos detectados após o tratamento com nitrato de prata; Respondido em 18/09/2020 23:06:20 Explicação: A coloração por prata é mais sensível que a coloração por Coomassie blue; entretanto, seu emprego em espectrometria de massa requer cautela, em função da ligação cruzada de proteínas. Acerto: 1,0 / 1,0 (Adaptada de CESPE, 2013): Considerando que o esquema abaixo apresenta o sequenciamento de DNA, processo responsável por uma verdadeira revolução nas ciências biológicas, avalie o gel abaixo: Questão6 a Questão7 a 18/09/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2599245&matr_integracao=202001570837 4/6 Pelo perfil apresentado no gel, a ordem correta de bases nitrogenadas do fragmento sequenciado é: 5´-ATGGCA-3´ 5´-TACCGT-3´ 5´-TGCCAT-3´ Nenhuma das alternativas acima. 5´-ACGGTA-3´ Respondido em 18/09/2020 23:05:06 Explicação: Para elucidar a ordem das bases nitrogenadas, o gel deve ser lido de baixo para cima, ou seja, do menor fragmento para o maior fragmento. Além disso, o resultado respeita o sentido 5´-3´ de polimerização. Acerto: 1,0 / 1,0 (UFAM, 2016): Quando comparada com a clonagem molecular em células hospedeiras, a PCR possui muitas vantagens. Sob essa perspectiva, qual das alternativas a seguir é incorreta? A PCR é uma técnica muito versátil e, atualmente, proporciona a amplificação de até 20 Kb de DNA. Na clonagem, utilizando-se vetores plasmidiais, pode haver limitações quanto ao tamanho do inserto a ser clonado; Velocidade do procedimento: a PCR pode durar algumas horas, enquanto o procedimento de clonagem molecular é realizado em um ou mais dias; Por ser um processo automatizado, a PCR é mais simples de ser conduzida; A PCR pode ser utilizada para amplificar DNA de material degradado, muito útil em investigações forenses. A PCR gera fragmentos de DNA bem maiores que na clonagem molecular, além de possuir uma fidelidade mais alta no processo; Respondido em 18/09/2020 23:06:27 Explicação: Um produto de PCR, após amplificação, pode ser clonado em vetor. O parâmetro "tamanho do inserto" pode ser ajustado de acordo com os diferentes vetores de clonagem possíveis, adequados para menores ou maiores Questão8 a 18/09/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2599245&matr_integracao=202001570837 5/6 extensões. O ensaio da PCR não está livre de incorporação de erros, uma vez que a enzima está submetida a vários ciclos de oscilação de temperatura em um curto espaço de tempo. Acerto: 1,0 / 1,0 (PUC-Rio, 2015): A figura abaixo representa o resultado de um teste de paternidade. Este teste baseia-se na identificação de marcadores genéticos compartilhados ou não por pai, mãe e filhos. Considerando a figura, não é correto afirmar que: III é irmão biológico de I; IV e I são irmãos gêmeos monozigóticos. II não é filho deste pai; V não pode ser filho biológico deste casal; I é filho biológico do casal; Respondido em 18/09/2020 23:10:28 Explicação: V pode ser filho biológico do casal, dado que metade das suas bandas apresentam compatibilidade com a mãe e, a outra metade, compatibilidade com o pai. Acerto: 1,0 / 1,0 (Adaptado de UNIFESP, 2017): Considere uma infecção hipotética de uma bactéria por um vírus patogênico. Supondo que no DNA viral exista a sequência de bases nitrogenadas CCCTATAGGG, qual será a sequência de bases no RNA-guia associado à Cas9 bacteriana? CCCTATAGGG; CCCUAUAGGG; GGGAUAUCCC; GGGATATCCC; CCCTCTCGGG. Respondido em 18/09/2020 23:09:05 Explicação: A sequência de bases do RNA-guia associado deve ser complementar ao DNA que será inativado. Questão9 a Questão10 a 18/09/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2599245&matr_integracao=202001570837 6/6 javascript:abre_colabore('38403','205483153','4099373603'); 28/09/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2533318&matr_integracao=201909198511 1/5 Disc.: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Aluno(a): SAMUEL LIMA DOS SANTOS 201909198511 Acertos: 9,0 de 10,0 21/09/2020 Acerto: 0,0 / 1,0 Identifique as principais etapas do protocolo de extração de ácidos nucleicos: Lise celular, Hidratação, Precipitação e Purificação; Hidratação, Purificação, Lise celular e Precipitação. Precipitação, lise celular, purificação e Hidratação. Lise celular, Purificação, Precipitação e Hidratação; Hidratação, Lise celular, Purificação e Precipitação; Respondido em 21/09/2020 18:30:57 Explicação: A extração de ácidos nucleicos envolve etapas sequenciais de ruptura celular e exposição do ácido nucleico, seguida da purificação do material de interesse com a remoção de contaminantes. Em seguida, realiza-se a precipitação do alvo e consequente hidratação do mesmo. Acerto: 1,0 / 1,0 (POLÍCIA CIENTÍFICA, PE, 2016) - Acerca da reação em cadeia da polimerase (PCR), assinale a opção correta: Os iniciadores são pequenos fragmentos sintéticos de DNA de fita dupla, usualmente com extremidade 3'-OH, e complementares à sequência do segmento de DNA de interesse; A reação de PCR é dependente da atividade de cópia de fragmentos de DNA, catalisada pela enzima DNA sintetase; PCR é a tecnologia por meio da qual são produzidos bilhões de cópias de fragmentos de DNA. Os fragmentos do DNA amplificado pela PCR são chamados amplicons e podem ser tipificados usando-se diferentes métodos. O último passo da PCR, a polimerização, é a excisão da fita de DNA no sentido 3'→5', começando no primeiro nucleotídeo do primer iniciador incorporado; A enzima termoestável direciona o posicionamento dos precursores de DNA ― dNTP ― iniciando a síntese de novas fitas de DNA. A temperatura ideal para a polimerização varia entre 25 ºC e 45 ºC; Respondido em 21/09/2020 18:31:51 Explicação: A enzima é chamada DNA polimerase. Os iniciadores são moléculas fita-simples com a extremidade 3´OH livre, complementares às bordas do fragmento de interesse. A fita de DNA molde lida no sentido 3´--> 5´ não é Questão1 a Questão2 a https://simulado.estacio.br/alunos/inicio.asp javascript:voltar(); 28/09/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2533318&matr_integracao=201909198511 2/5 removida após a polimerização/extensão da fita nascente no sentido 5´ --> 3´ na última etapa de um ciclo de PCR. Na ciclagem subsequente, esse DNA hídrido será desnaturado, disponibilizando ambas as fitas como molde para novas reações de polimerização. O estabelecimento dos dNTPs a serem incorporados pela enzima termoestável se dá pela fita de DNA molde, em função da complementariedade de bases. A temperatura ideal de polimerização varia entre 50-55°C. Acerto: 1,0 / 1,0 (Polícia Científica, PE, 2016): A respeito de eletroforese, uma metodologia amplamente empregada para separação, isolamento, análise e manipulação dos ácidos nucleicos, assinale a opção correta: A quantificação de DNA em gel de agaroseé uma técnica de menor precisão, comparada a eletroforese em acrilamida, sendo utilizada como instrumento para averiguação de êxito na etapa de extração; A eletroforese em gel de agarose é usada para separar proteínas de tamanhos diferentes, que podem ser detectadas por fluorescência; Os ácidos nucleicos possuem uma carga geral total positiva, devido aos seus grupamentos fosfato do arcabouço e, consequentemente, quando aplicados em um gel de agarose ou poliacrilamida, migram em direção ao ânodo. A eletroforese consiste na migração das partículas de uma solução coloidal sob a influência de um campo magnético onde a polaridade negativa atrai as moléculas; A identificação dos fragmentos amplificados de DNA não pode ser realizada em gel de poliacrilamida; Respondido em 21/09/2020 18:35:04 Explicação: A eletroforese em gel de agarose destina-se apenas a ácidos nucleicos, enquanto a eletroforese em gel de poliacrilamida pode ser empregada para ácidos nucleicos e proteínas. Na técnica de eletroforese, graças à aplicação de campo elétrico, as partículas são induzidas a migrar no polímero. O movimento das partículas é determinado em função da repulsão do pólo negativo uma vez que, em função dos seus respectivos grupamentos fosfato, o DNA possui cargas semelhante. Acerto: 1,0 / 1,0 (Fiocruz, 2010) - Assinale a afirmativa incorreta: Na metodologia de PCR em Tempo - Real, a utilização de sondas marcadas com fluoróforos permite a realização de reações multiplex; É a curva de dissociação obtida ao final da corrida de PCR em Tempo - Real que permite a verificação da especificidade da amplificação obtida; A técnica de PCR em Tempo - Real é mais sensível que a técnica de PCR convencional. A metodologia de PCR em Tempo - Real é a única metodologia de PCR quantitativo existente; Na metodologia de PCR em Tempo - Real, quanto maior for a quantidade de DNA alvo presente em uma dada amostra um menor número de ciclos de PCR será necessário para se obter uma quantidade de fluorescência a partir desta dada amostra acima do ruído de fundo do aparelho (Ct); Respondido em 21/09/2020 18:35:33 Explicação: A metodologia de PCR digital corresponde a um avanço da metodologia de PCR em tempo real, permitindo a quantificação de ácidos nucleicos com grande sensibilidade e dispensando a necessidade de curva-padrão. Acerto: 1,0 / 1,0 Considerando os princípios das técnicas de hibridização e suas aplicações dentro da biologia molecular, assinale a alternativa correta: Questão3 a Questão4 a Questão5 a 28/09/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2533318&matr_integracao=201909198511 3/5 Southern, Northern e Western Blotting podem ser utilizadas para estudos envolvendo expressão gênica; A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é o Northern Blotting; A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é o Western Blotting; Não existe técnica de hibridização capaz de avaliar expressão gênica. A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é o Southern Blotting; Respondido em 21/09/2020 18:38:34 Explicação: A técnica de Northern blot corresponde a uma técnica de hibridização de moléculas de RNA com sondas de oligonucleotídeos marcadas. Trata-se de uma metodologia útil, portanto, na detecção de RNA mensageiro (RNAm), nos estudos de expressão gênica, na avaliação da degradação de RNA e splicing, por exemplo. Acerto: 1,0 / 1,0 (Policia Cientifica, PR, 2017): A espectrometria de massa é uma técnica utilizada para o estudo de massas de átomos, moléculas ou fragmentos de moléculas, desde que estes estejam eletricamente carregados. A respeito desse assunto, julgue as afirmações. I. Um espectrômetro de massas determina a massa de uma molécula ou átomo medindo a razão massa/carga dos íons gerados; II. Os íons são gerados pela indução, perda ou ganho de carga por uma espécie eletricamente neutra; III. Uma vez formados, os íons são direcionados, por forças eletrostáticas, para dentro do analisador de massas, separados de acordo com suas razões massa/carga e finalmente detectados. Assinale a alternativa correta: Estão corretas apenas as afirmativas II e III; Estão corretas todas as afirmativas; Estão corretas apenas as afirmativas I e III; Estão corretas apenas as afirmativas I e II; Está correta apenas a afirmativa I. Respondido em 21/09/2020 18:57:54 Explicação: Todas as alternativas estão corretas. Acerto: 1,0 / 1,0 Questão6 a Questão7 a 28/09/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2533318&matr_integracao=201909198511 4/5 (Adaptado de CESPE, 2018): Complete as lacunas do texto a seguir, a respeito do projeto genoma (humano e outros) e às estratégias de sequenciamento disponíveis: "No projeto genoma humano, foi empregado o método de Sanger, que adicionava ____________________ modificados, os didesoxirribonucleotídeos, para ____________________ o crescimento de um fragmento de DNA em replicação pela ____________________." Primers/ impedir/ DNA polimerase; Nucleotídeos/ estimular/ RNA polimerase; Primers/ estimular/ RNA polimerase; Nucleotídeos/ delimitar/ DNA ligase. Nucleotídeos/ impedir/ DNA polimerase; Respondido em 21/09/2020 18:55:46 Explicação: O método de Sanger se baseia na interrupção da cadeia nucleotídica em crescimento pela DNA polimerase, através da incorporação de nucleotídeos modificados, os quais não permitem ligações químicas. Acerto: 1,0 / 1,0 (Unesp, 2012): A obtenção de fragmentos de DNA contendo sequências complementares em suas extremidades é a primeira etapa a ser vencida no processo de clonagem de um gene. Esses fragmentos deverão ser ligados in vitro a vetores moleculares que se encarregarão de transportá-los para dentro das células e assim gerar clones. Um dos vetores de clonagem molecular comumente empregado são plasmídios, os quais se constituem de moléculas de: DNA circulares, dupla fita, incapazes de autorreplicação; DNA circulares, dupla fita, capazes de autorreplicação; DNA helicoidais, dupla fita, capazes de autorreplicação; DNA circulares, fita simples, incapazes de autorreplicação. RNA circulares, dupla fita, capazes de autorreplicação; Respondido em 21/09/2020 18:56:49 Explicação: A capacidade de autoreplicação do plasmídeo faz com que essa molécula de DNA circular dupla-fita seja excelente para a produção de clones. Acerto: 1,0 / 1,0 (FGV, 2011): Os iniciadores (primers), usados para amplificar por PCR os microssatélites (STR), são desenhados de modo a hibridar-se (anelar-se) com o DNA a ser amplificado. Assinale a alternativa que indique o sítio da região polimórfica na qual os primers deverão se anelar: Na região promotora do microssatélite polimórfico. Na região intrônica das sequências polimórficas; Nas sequências que flanqueiam o microssatélite polimórfico; Qualquer uma das unidades repetitivas do microssatélite; Na região central do microssatélite polimórfico; Respondido em 21/09/2020 19:01:30 Questão8 a Questão9 a 28/09/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2533318&matr_integracao=201909198511 5/5 Explicação: As análises dos polimorfismos presentes em microssatélites consistem nas reações de PCR dessas regiões. Portanto, é necessário delimitar a extensão do fragmento a ser estudado por meio de iniciadores que o flanqueiem. Acerto: 1,0 / 1,0 (Enade, 2016): Desenvolvida recentemente, a técnica de edição de genoma denominada CRISPR/Cas9 mostra-se bastante promissora nas áreas de Biotecnologia e Medicina. Por engenharia genética, é possível direcionar o sistema CRISPR/Cas9 para clivar o DNA em um ponto específico dos genomas de vírus, de plantas, de fungos e de animais, inclusive de embriões humanos, o que tem gerado discussões a respeito dos aspectos éticos de sua utilização. (YANAGUI, K. Novas tecnologias, novos desafios. Ciência e Cultura, SãoPaulo, v. 68, n. 3, set. 2016 (adaptado)). Em relação às questões bioéticas envolvidas na edição genética, avalie as afirmações a seguir. I. No Brasil, não é permitido o uso de técnicas para a edição genética de embriões humanos; os estudos científicos nessa área devem ter como objetivo tratar e curar problemas de saúde e não alterar o genoma ou realizar clonagens; II. A despeito do caráter promissor da edição genética no tratamento de doenças graves, as intervenções feitas por meio da técnica de CRISPR/Cas9 em embriões podem ser passadas às gerações futuras, por esse motivo, a prática é considerada eugenista, o que ensejou a proibição de estudos desse tipo em embriões humanos em alguns países; III. Em alguns países, inclusive no Brasil, são permitidas por lei a manipulação e a modificação genética de embriões humanos para fins de pesquisa, entretanto, esses embriões devem ser descartados dentro do prazo de duas semanas. É correto o que se afirma em: I, II e III. I, apenas; I e II, apenas; III, apenas; II e III, apenas; Respondido em 21/09/2020 19:01:04 Explicação: No Brasil, a legislação veta qualquer experimento que envolva a manipulação genética de embriões humanos. A Lei de Biossegurança (11.105/2005) proíbe em seu artigo 6, inciso III, a ¿engenharia genética em célula germinal humana, zigoto humano e embrião humano¿. Questão10 a javascript:abre_colabore('38403','205779969','4106573604'); Disc.: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Aluno(a): ROSI BITENCOURT 202001378111 Acertos: 10,0 de 10,0 19/09/2020 1a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 São exemplos de ácidos nucleicos: DNA e RNA; Adenina e guanina; Timina e uracila. Monossacarídeos e dissacarídeos; Proteínas e lipídios; Respondido em 19/09/2020 04:26:01 Explicação: As demais alternativas fornecem exemplos de outras macromoléculas ou bases nitrogenadas. 2a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 (Fiocruz, 2010): Sobre a utilização da técnica de PCR com a finalidade de diagnóstico molecular, analise as afirmativas a seguir. I. Uma vez que na reação de PCR se utiliza uma DNA Polimerase dependente de DNA, somente os vírus cujo genoma é constituído por DNA podem ser detectados pela técnica de PCR. II. É possível detectar microorganismos diferentes em uma mesma reação de PCR, desde que se utilize na reação pares de iniciadores específicos para cada microorganismo que se queira detectar. III. A utilização da técnica de PCR para diagnóstico molecular terá sempre e somente caráter qualitativo. Assinale: se somente as afirmativas I e II estiverem corretas; se somente a afirmativa I estiver correta; se todas as afirmativas estiverem corretas. se somente a afirmativa II estiver correta; se somente a afirmativa III estiver correta; Respondido em 19/09/2020 04:26:39 Explicação: É possível detectarmos patógenos cujo genoma seja RNA através de RT-PCR, ou seja, transcrição reversa acoplada à PCR. Também podemos quantificar o nosso alvo através da PCR em tempo real ou, indiretamente, mensurar aproximadamente a sua quantidade através de gel de agarose, reagente Low mass e sistema de coloração adequado para análise dos amplicons. https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_avaliacao_parcial_resultado.asp?cod_hist_prova=205490356&cod_prova=4099522759&f_cod_disc= 3a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 (Polícia Científica, PE, 2016): A respeito de eletroforese, uma metodologia amplamente empregada para separação, isolamento, análise e manipulação dos ácidos nucleicos, assinale a opção correta: A quantificação de DNA em gel de agarose é uma técnica de menor precisão, comparada a eletroforese em acrilamida, sendo utilizada como instrumento para averiguação de êxito na etapa de extração; A eletroforese consiste na migração das partículas de uma solução coloidal sob a influência de um campo magnético onde a polaridade negativa atrai as moléculas; Os ácidos nucleicos possuem uma carga geral total positiva, devido aos seus grupamentos fosfato do arcabouço e, consequentemente, quando aplicados em um gel de agarose ou poliacrilamida, migram em direção ao ânodo. A eletroforese em gel de agarose é usada para separar proteínas de tamanhos diferentes, que podem ser detectadas por fluorescência; A identificação dos fragmentos amplificados de DNA não pode ser realizada em gel de poliacrilamida; Respondido em 19/09/2020 04:28:03 Explicação: A eletroforese em gel de agarose destina-se apenas a ácidos nucleicos, enquanto a eletroforese em gel de poliacrilamida pode ser empregada para ácidos nucleicos e proteínas. Na técnica de eletroforese, graças à aplicação de campo elétrico, as partículas são induzidas a migrar no polímero. O movimento das partículas é determinado em função da repulsão do pólo negativo uma vez que, em função dos seus respectivos grupamentos fosfato, o DNA possui cargas semelhante. 4a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 (INCA, 2014): Qual afirmação descreve com precisão o processo de PCR? A reação de PCR amplifica geometricamente um fragmento de DNA. Os produtos de PCR são inibidores da reação em cadeia da polimerase; O peso molecular do fragmento de DNA não é diagnóstico de especificidade de um PCR; A reação de PCR requer um tipo especial de enzima de restrição; É necessário um par de primers para a amplificação de um fragmento de DNA; Respondido em 19/09/2020 04:29:32 Explicação: Os produtos de uma etapa da reação de PCR servem como substrato para as etapas subsequentes. Não é necessário utilizar enzima de restrição para essa metodologia. O uso de pesos moleculares auxilia na deteção de amplificações inespecíficas. A amplificação é considerada exponencial. 5a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 Considerando os princípios das técnicas de hibridização e suas aplicações dentro da biologia molecular, assinale a alternativa correta: A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é o Southern Blotting; Não existe técnica de hibridização capaz de avaliar expressão gênica. A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é o Western Blotting; Southern, Northern e Western Blotting podem ser utilizadas para estudos envolvendo expressão gênica; A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é o Northern Blotting; Respondido em 19/09/2020 04:30:51 Explicação: A técnica de Northern blot corresponde a uma técnica de hibridização de moléculas de RNA com sondas de oligonucleotídeos marcadas. Trata-se de uma metodologia útil, portanto, na detecção de RNA mensageiro (RNAm), nos estudos de expressão gênica, na avaliação da degradação de RNA e splicing, por exemplo. 6a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 (Fiocruz, 2010): Com relação aos métodos de coloração de proteínas em gel, assinale a alternativa correta: A coloração por prata deve ser evitada quando a intenção é submeter as proteínas separadas eletroforeticamente à detecção por espectometria de massa em função do alto teor de spots falsos positivos detectados após o tratamento com nitrato de prata; A coloração por prata é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional acoplada à espectrometria de massa, em função de seu alto grau de sensibilidade; A coloração por Coomassie Blue é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional, em função de seu alto grau de sensibilidade; A coloração de Coomassie Blue é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional acoplada à espectrometria de massa, uma vez que as proteínas não se fixam de forma irreversível ao gel; A coloração por Coomassie Blue é a mais indicada apenas em situações onde a detecção das proteínas será realizada por meio da purificação e do sequenciamento manual dos spots de interesse,uma vez que, com esta técnica de coloração, são necessárias quantidades muito grandes de proteínas, o que inviabilizaria sua aplicação com métodos de detecção mais sensíveis. Respondido em 19/09/2020 04:34:09 Explicação: A coloração por prata é mais sensível que a coloração por Coomassie blue; entretanto, seu emprego em espectrometria de massa requer cautela, em função da ligação cruzada de proteínas. 7a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 (Adaptada de CESPE, 2013): Considerando que o esquema abaixo apresenta o sequenciamento de DNA, processo responsável por uma verdadeira revolução nas ciências biológicas, avalie o gel abaixo: Pelo perfil apresentado no gel, a ordem correta de bases nitrogenadas do fragmento sequenciado é: 5´-ACGGTA-3´ 5´-ATGGCA-3´ Nenhuma das alternativas acima. 5´-TACCGT-3´ 5´-TGCCAT-3´ Respondido em 19/09/2020 04:33:26 Explicação: Para elucidar a ordem das bases nitrogenadas, o gel deve ser lido de baixo para cima, ou seja, do menor fragmento para o maior fragmento. Além disso, o resultado respeita o sentido 5´-3´ de polimerização. 8a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 (UFAM, 2016): Quando comparada com a clonagem molecular em células hospedeiras, a PCR possui muitas vantagens. Sob essa perspectiva, qual das alternativas a seguir é incorreta? A PCR pode ser utilizada para amplificar DNA de material degradado, muito útil em investigações forenses. Velocidade do procedimento: a PCR pode durar algumas horas, enquanto o procedimento de clonagem molecular é realizado em um ou mais dias; A PCR é uma técnica muito versátil e, atualmente, proporciona a amplificação de até 20 Kb de DNA. Na clonagem, utilizando-se vetores plasmidiais, pode haver limitações quanto ao tamanho do inserto a ser clonado; Por ser um processo automatizado, a PCR é mais simples de ser conduzida; A PCR gera fragmentos de DNA bem maiores que na clonagem molecular, além de possuir uma fidelidade mais alta no processo; Respondido em 19/09/2020 04:34:16 Explicação: Um produto de PCR, após amplificação, pode ser clonado em vetor. O parâmetro "tamanho do inserto" pode ser ajustado de acordo com os diferentes vetores de clonagem possíveis, adequados para menores ou maiores extensões. O ensaio da PCR não está livre de incorporação de erros, uma vez que a enzima está submetida a vários ciclos de oscilação de temperatura em um curto espaço de tempo. 9a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 (PUC-Rio, 2015): A figura abaixo representa o resultado de um teste de paternidade. Este teste baseia-se na identificação de marcadores genéticos compartilhados ou não por pai, mãe e filhos. Considerando a figura, não é correto afirmar que: III é irmão biológico de I; V não pode ser filho biológico deste casal; I é filho biológico do casal; II não é filho deste pai; IV e I são irmãos gêmeos monozigóticos. Respondido em 19/09/2020 04:38:10 Explicação: V pode ser filho biológico do casal, dado que metade das suas bandas apresentam compatibilidade com a mãe e, a outra metade, compatibilidade com o pai. 10a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 (Adaptado de UNIFESP, 2017): Considere uma infecção hipotética de uma bactéria por um vírus patogênico. Supondo que no DNA viral exista a sequência de bases nitrogenadas CCCTATAGGG, qual será a sequência de bases no RNA-guia associado à Cas9 bacteriana? GGGAUAUCCC; CCCUAUAGGG; CCCTATAGGG; GGGATATCCC; CCCTCTCGGG. Respondido em 19/09/2020 04:39:20 Explicação: A sequência de bases do RNA-guia associado deve ser complementar ao DNA que será inativado. Disc.: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Acertos: 10,0 de 10,0 23/09/2020 Acerto: 1,0 / 1,0 São exemplos de ácidos nucleicos: Adenina e guanina; DNA e RNA; Proteínas e lipídios; Monossacarídeos e dissacarídeos; Timina e uracila. Respondido em 23/09/2020 15:16:11 Explicação: As demais alternativas fornecem exemplos de outras macromoléculas ou bases nitrogenadas. Acerto: 1,0 / 1,0 (Fiocruz, 2010): Sobre a utilização da técnica de PCR com a finalidade de diagnóstico molecular, analise as afirmativas a seguir. I. Uma vez que na reação de PCR se utiliza uma DNA Polimerase dependente de DNA, somente os vírus cujo genoma é constituído por DNA podem ser detectados pela técnica de PCR. II. É possível detectar microorganismos diferentes em uma mesma reação de PCR, desde que se utilize na reação pares de iniciadores específicos para cada microorganismo que se queira detectar. III. A utilização da técnica de PCR para diagnóstico molecular terá sempre e somente caráter qualitativo. Assinale: se somente a afirmativa II estiver correta; se todas as afirmativas estiverem corretas. se somente a afirmativa I estiver correta; se somente a afirmativa III estiver correta; se somente as afirmativas I e II estiverem corretas; Respondido em 23/09/2020 15:22:19 Explicação: É Questão1a Questão2a https://simulado.estacio.br/alunos/inicio.asp javascript:voltar(); É possível detectarmos patógenos cujo genoma seja RNA através de RT-PCR, ou seja, transcrição reversa acoplada à PCR. Também podemos quantificar o nosso alvo através da PCR em tempo real ou, indiretamente, mensurar aproximadamente a sua quantidade através de gel de agarose, reagente Low mass e sistema de coloração adequado para análise dos amplicons. Acerto: 1,0 / 1,0 (Polícia Científica, PE, 2016): A respeito de eletroforese, uma metodologia amplamente empregada para separação, isolamento, análise e manipulação dos ácidos nucleicos, assinale a opção correta: A eletroforese em gel de agarose é usada para separar proteínas de tamanhos diferentes, que podem ser detectadas por fluorescência; A identificação dos fragmentos amplificados de DNA não pode ser realizada em gel de poliacrilamida; A quantificação de DNA em gel de agarose é uma técnica de menor precisão, comparada a eletroforese em acrilamida, sendo utilizada como instrumento para averiguação de êxito na etapa de extração; A eletroforese consiste na migração das partículas de uma solução coloidal sob a influência de um campo magnético onde a polaridade negativa atrai as moléculas; Os ácidos nucleicos possuem uma carga geral total positiva, devido aos seus grupamentos fosfato do arcabouço e, consequentemente, quando aplicados em um gel de agarose ou poliacrilamida, migram em direção ao ânodo. Respondido em 23/09/2020 15:34:36 Explicação: A eletroforese em gel de agarose destina-se apenas a ácidos nucleicos, enquanto a eletroforese em gel de poliacrilamida pode ser empregada para ácidos nucleicos e proteínas. Na técnica de eletroforese, graças à aplicação de campo elétrico, as partículas são induzidas a migrar no polímero. O movimento das partículas é determinado em função da repulsão do pólo negativo uma vez que, em função dos seus respectivos grupamentos fosfato, o DNA possui cargas semelhante. Acerto: 1,0 / 1,0 (INCA, 2014): Qual afirmação descreve com precisão o processo de PCR? A reação de PCR requer um tipo especial de enzima de restrição; A reação de PCR amplifica geometricamente um fragmento de DNA. O peso molecular do fragmento de DNA não é diagnóstico de especificidade de um PCR; Os produtos de PCR são inibidores da reação em cadeia da polimerase; É necessário um par de primers para a amplificação de um fragmento de DNA; Respondido em 23/09/2020 15:35:18 Explicação: Os produtos de uma etapa da reação de PCR servem como substrato para as etapas subsequentes. Não é necessário utilizar enzima de restrição para essa metodologia. O uso de pesos moleculares auxilia na deteção de amplificações inespecíficas. A amplificação é considerada exponencial. Acerto: 1,0 / 1,0 Considerando os princípios das técnicas de hibridização e suas aplicações dentro da biologia molecular, assinale a alternativa correta: A técnica dehibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é o Western Blotting; Não existe técnica de hibridização capaz de avaliar expressão gênica. A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é o Questão3a Questão4a Questão5a Southern Blotting; Southern, Northern e Western Blotting podem ser utilizadas para estudos envolvendo expressão gênica; A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é o Northern Blotting; Respondido em 23/09/2020 15:39:04 Explicação: A técnica de Northern blot corresponde a uma técnica de hibridização de moléculas de RNA com sondas de oligonucleotídeos marcadas. Trata-se de uma metodologia útil, portanto, na detecção de RNA mensageiro (RNAm), nos estudos de expressão gênica, na avaliação da degradação de RNA e splicing, por exemplo. Acerto: 1,0 / 1,0 (Adaptada de UFTM, 2016): A eletroforese é uma técnica muito utilizada nos laboratórios de bioquímica, com a finalidade de acompanhar a purificação, a expressão e isolamento de proteínas para análise por espectrometria de massa ou determinar a massa molecular (Mr) da proteína. Analise as afirmações abaixo e escolha a alternativa correta: A eletroforese desnaturante separa as proteínas com relação à sua carga e forma. A separação eletroforética de proteínas é comumente realizada empregando-se géis de agarose, os quais possuem alta capacidade de resolução. Eletroforese descreve a migração de uma partícula carregada sob influência de um campo elétrico. Nenhuma das alternativas acima. Em um gel SDS-PAGE as proteínas com maior massa molecular (Mr) são encontradas na parte inferior do gel. Respondido em 23/09/2020 16:10:41 Explicação: Os géis de agarose são preferencialmente utilizados para análises de ácidos nucleicos. A eletroforese desnaturante confere às proteínas carga negativa, fazendo com que a separação ocorra apenas pela diferença de peso molecular. As proteínas de maior peso molecular ficam atrasadas na trama do gel, ocupando posições superiores. Acerto: 1,0 / 1,0 (Adaptado de CESPE, 2018): Complete as lacunas do texto a seguir, a respeito do projeto genoma (humano e outros) e às estratégias de sequenciamento disponíveis: "No projeto genoma humano, foi empregado o método de Sanger, que adicionava ____________________ modificados, os didesoxirribonucleotídeos, para ____________________ o crescimento de um fragmento de DNA em replicação pela ____________________." Primers/ estimular/ RNA polimerase; Nucleotídeos/ estimular/ RNA polimerase; Nucleotídeos/ impedir/ DNA polimerase; Questão6a Questão7a Nucleotídeos/ delimitar/ DNA ligase. Primers/ impedir/ DNA polimerase; Respondido em 23/09/2020 15:49:26 Explicação: O método de Sanger se baseia na interrupção da cadeia nucleotídica em crescimento pela DNA polimerase, através da incorporação de nucleotídeos modificados, os quais não permitem ligações químicas. Acerto: 1,0 / 1,0 (UFAM, 2016): A clonagem molecular é caracterizada pela produção de muitas cópias de um fragmento de DNA alvo (amplificação), por meio da tecnologia do DNA recombinante. Sobre essa técnica, são feitas as seguintes afirmativas: I. Um vetor de clonagem molecular pode conter mais de um marcador de seleção; II. A região do gene repórter deve conter sítios de restrição enzimática para clonagem; III. Em uma placa de Petri, o número de clones recombinantes não excede o número de clones não recombinantes; IV. Uma das características exigidas para a clonagem molecular é que as células utilizadas como hospedeiras sejam organismos não patogênicos; Assinale a alternativa correta: Somente as afirmativas I e III estão corretas; Somente as afirmativas II e III estão corretas; Somente as afirmativas I,II e IV estão corretas; Todas as afirmativas estão corretas. Somente as afirmativas I, II e III estão corretas; Respondido em 23/09/2020 15:51:53 Explicação: O processo de clonagem pressupõe a existência de falhas nos processos de clonagem em vetor e transformação em organismos competentes. Dessa forma, as concentrações de vetor com inserto e bactéria são otimizadas de forma a otimizar a produção de clones recombinantes. Acerto: 1,0 / 1,0 (PUC-Rio, 2015): A figura abaixo representa o resultado de um teste de paternidade. Este teste baseia-se na identificação de marcadores genéticos compartilhados ou não por pai, mãe e filhos. Considerando a figura, não é correto afirmar que: IV e I são irmãos gêmeos monozigóticos. Questão8a Questão9a III é irmão biológico de I; V não pode ser filho biológico deste casal; II não é filho deste pai; I é filho biológico do casal; Respondido em 23/09/2020 15:55:01 Explicação: V pode ser filho biológico do casal, dado que metade das suas bandas apresentam compatibilidade com a mãe e, a outra metade, compatibilidade com o pai. Acerto: 1,0 / 1,0 (2018, UNIFOR): A CRISPR-Cas9 (sigla em inglês para agrupados de curtas repetições palindrômicas regularmente interpaçadas) é uma nova e revolucionária técnica para a edição de genomas, que permite identificar genes de interesse, no DNA de qualquer espécie e modifica-lo. É normalmente composto por uma molécula de RNA e uma proteína e a combinação dessas duas moléculas consegue localizar a sequência de DNA de interesse dentro do núcleo da célula e a modifica. Fonte: http://ofuturodascoisas.com/crispr-revolucionou-edicao-dna-o-problema-e-que-nao-estamos-preparados-para- consequencias. Acesso em 12 set. 2017 (com adaptações). Assim, podemos dizer que o uso dessa tecnologia permite: a modificação de sequências de DNA em células diferentes de um mesmo organismo de forma seletiva, uma vez que cada tipo celular de um mesmo organismo possui diferente coleção de genes; aumentar o número de genes e, consequentemente, o número de proteínas produzidas por uma célula, pois o tamanho do genoma é diretamente proporcional ao número de proteínas do organismo. provocar mutações pontuais no genoma na tentativa de silenciar genes defeituosos ou consertá-los para tornar possível a cura de diversas doenças de origem genética; a adição de novas sequências de DNA para acarretar o ganho de novas características positivas, haja vista quanto maior o tamanho do genoma, mais complexo o organismo; mudanças apenas na programação genética de um organismo, garantindo que não haja nenhuma alteração na expressão gênica e na produção de proteínas; Respondido em 23/09/2020 15:55:25 Explicação: Em decorrência da mudança da sequência de bases do DNA, pode-se conseguir a inibição do funcionamento de certo gene deletério (ou de efeito indesejado), bem como pode-se pensar em tornar um gene defeituoso funcional e, dessa forma, curar determinada doença de origem genética. Questão10a javascript:abre_colabore('38403','206118213','4116766042'); 19/09/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2774684&matr_integracao=202003571911 1/5 Disc.: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Aluno(a): RAFAEL CARDOSO BARRETO 202003571911 Acertos: 8,0 de 10,0 19/09/2020 Acerto: 1,0 / 1,0 São exemplos de ácidos nucleicos: Proteínas e lipídios; DNA e RNA; Timina e uracila. Monossacarídeos e dissacarídeos; Adenina e guanina; Respondido em 19/09/2020 18:52:49 Explicação: As demais alternativas fornecem exemplos de outras macromoléculas ou bases nitrogenadas. Acerto: 1,0 / 1,0 (Fiocruz, 2006): São elementos necessários na técnica de amplificação de DNA através da reação da polimerase em cadeia (PCR): DNA molde, Taq polimerase, primers, dNTPs e endonucleases; DNA molde, Taq polimerase, primers, dNTPs, etanol e termociclador; DNA molde, Taq polimerase, primers, dNTPs e termociclador; DNA molde, DNA polimerase, primers, dNTPs, endonucleases e termociclador; DNA molde, Taq polimerase, primers, dNTPs, endonucleases e termociclador; Respondido em 19/09/2020 18:58:50 Explicação: As endonucleases são enzimas de restrição utilizadas nas técnicas declonagem molecular. O etanol é utilizado no processo de extração de ácido nucleico, antes da técnica de PCR. DNA polimerase ou Taq DNA polimerase são a mesma enzima. Acerto: 1,0 / 1,0 Questão1 a Questão2 a 3a https://simulado.estacio.br/alunos/inicio.asp javascript:voltar(); 19/09/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2774684&matr_integracao=202003571911 2/5 (Adaptada de UFMG, 2013) - Em relação à espectrofotometria, é incorreto afirmar que: a absorvância é a capacidade de uma substância em absorver ou transmitir radiação; a espectrofotometria permite estimar a concentração de soluções. a energia é transmitida por ondas eletromagnéticas que são caracterizadas pela frequência e comprimento de onda; a luz visível para o olho humano é a região do espectro eletromagnético com comprimento de onda entre 390 e 780 nm; a espectrofotometria é a medida da intensidade da luz em comprimentos de onda selecionados; Respondido em 19/09/2020 19:07:43 Explicação: Absorbância e transmitância são conceitos não sinônimos e inversamente proporcionais; isto é, quanto maior a absorbância, menor a transmitância, e vice-versa. Acerto: 1,0 / 1,0 (INCA, 2014): Um oligonucleotídeo de DNA curto utilizado para amplificação por PCR é adequadamente chamado de: inserto; polimerase; sonda; vetor. primer; Respondido em 19/09/2020 19:05:05 Explicação: As sondas são utilizadas para a detecção de ácidos nucleicos. Insertos correspondem a pequenos fragmentos de DNA os quais são clonados em plasmídeos ou vetores, utilizados para a transferência de material genético. A polimerase é a enzima responsável pela amplificação do ácido nucleico. Acerto: 1,0 / 1,0 (IF, TO, 2016): As técnicas de hibridação Northern Blotting, Southern Blotting e Western Blotting permitem estudar respectivamente: Proteínas, RNA e DNA. DNA, RNA e proteínas; RNA, DNA e proteínas; DNA, proteínas e RNA; RNA, proteínas e DNA; Respondido em 19/09/2020 19:06:01 Explicação: Blotting significa a transferência de macromoléculas, sejam elas ácidos nucleicos ou proteínas, de um gel de eletroforese para a superfície de uma membrana. Em função das moléculas de interesse, existem três variações de técnicas blotting: Southern Blot (DNA), Northern Blot (RNA) e Western Blot (proteínas). Questão Questão4 a Questão5 a 19/09/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2774684&matr_integracao=202003571911 3/5 Acerto: 0,0 / 1,0 (Unesp, 2012): A eletroforese em gel de poliacrilamida desnaturante (contendo Dodecil Sulfato de Sódio ou SDS) é uma técnica bastante utilizada em laboratório de biologia molecular para separação de proteínas. Assim, é correto afirmar que, na eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) para separação de proteínas: a velocidade da migração dessa proteína no gel não sofre ação da concentração do gel de poliacrilamida; as proteínas sempre migrarão para o polo negativo quando realizada a pH 8,6; quanto maior a carga negativa da proteína mais rápido ocorrerá a migração no gel; as proteínas sempre migrarão para o polo positivo quando realizada a pH 8,6; as proteínas maiores migrarão mais rápido que as proteínas menores. Respondido em 19/09/2020 19:24:30 Explicação: O SDS é um detergente aniônico que irá conferir carga elétrica negativa às proteínas. Dessa forma, durante a eletroforese, as proteínas migrarão em direção ao polo positivo de acordo com seus respectivos pesos moleculares. Acerto: 0,0 / 1,0 (Adaptada de CESPE, 2018): Complete as lacunas do texto a seguir, a respeito do projeto genoma (humano e outros) e às estratégias de sequenciamento disponíveis: "As técnicas de sequenciamento genômico se baseiam na _______________ da dupla fita de _______________ em moléculas de fita simples." Transcrição/ DNA; Transcrição/RNA; Tradução/RNA; Nenhuma das alternativas acima. Tradução/ DNA; Respondido em 19/09/2020 19:11:00 Explicação: As técnicas de sequenciamento visam elucidar a ordem das bases nitrogenadas que compõem as moléculas de DNA. Acerto: 1,0 / 1,0 (FIOCRUZ, 2010): Plasmídeos são moléculas circulares de DNA encontrados em bactérias. Elas são utilizadas como vetores para a clonagem de genes e, portanto fundamentais para o estudo de genes. Sobre as características típicas encontradas em plasmídeos utilizados para clonagem, assinale a alternativa incorreta: O plasmídeo usualmente tem um sítio para anelamento de iniciadores de PCR para sequenciamento M13 próximo a sítio de inserção. O plasmídeo precisa ter um marcador de seleção que confere resistência a bactéria a um antibiótico específico; Questão6 a Questão7 a Questão8 a 19/09/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2774684&matr_integracao=202003571911 4/5 O plasmídeo precisa ter uma origem de replicação, que permite a multiplicação independente do DNA bacteriano; O plasmídeo precisa ter mais de 10.000 pb de forma que seja estável na bactéria; O plasmídeo usualmente tem sítio múltiplo de clonagem que permite a utilização de várias enzimas de restrição durante a clonagem; Respondido em 19/09/2020 19:26:58 Explicação: Os plasmídeos são vetores ideais para insertos de DNA menores. Acerto: 1,0 / 1,0 (UEL, 2017): O teste de DNA abaixo foi solicitado por uma mulher que queria confirmar a paternidade dos filhos. Ela levou ao laboratório amostras de cabelos dela, do marido, dos dois filhos e de um outro homem que poderia ser o pai. Os resultados obtidos estão mostrados na figura abaixo: A partir dos resultados podemos obter as seguintes conclusões, exceto: o filho 2 não é dessa mãe; o filho 1 é do outro homem; o marido e o outro homem não são irmãos. o filho 2 é do marido; o filho 1 compartilha metade de seu material genético com a mãe; Respondido em 19/09/2020 19:30:17 Explicação: Não podemos excluir a maternidade nesse caso, pois metade das bandas do filho 2 apresenta compatibilidade com a mãe em questão. Acerto: 1,0 / 1,0 (UNIFESP, 2017): Por que a alteração na sequência de DNA provocada pelo CRISPR-Cas9 pode inativar um gene? Questão9 a Questão10 a 19/09/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2774684&matr_integracao=202003571911 5/5 CRISPR-Cas9 é incapaz de inativar um gene. Porque o RNA transcrito a partir dessa sequência também será alterado; Porque o DNA alterado não será transcrito; Porque o RNA transcrito não será traduzido; Porque o RNA transcrito tem uma meia vida menor do que o RNA original; Respondido em 19/09/2020 19:13:13 Explicação: De acordo com o dogma da biologia molecular, a alteração na sequência de DNA implicará na alteração do RNA transcrito. Consequentemente, a proteína traduzida a partir desse RNAm pode não ser funcional, ou seja, o gene pode ser inativado. javascript:abre_colabore('38403','205547406','4100687398'); 15/10/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2684634&matr_integracao=202002770571 1/7 Disc.: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Aluno(a): CRISTIANE SILVA PITA 202002770571 Acertos: 9,0 de 10,0 15/10/2020 Acerto: 0,0 / 1,0 Na técnica de extração de ácidos nucleicos (DNA/RNA), quais os reagentes que podem ser utilizados? DNAse Proteinase K Fenol e clorofórmio; Detergente Etanol 70% e isopropanol; Respondido em 15/10/2020 23:13:30 Explicação: Todos os ítens listados podem ser utilizados para viabilizar a técnica de extração de acidos nucleicos. Acerto: 1,0 / 1,0 (Fiocruz, 2006): São elementos necessários na técnica de amplificação de DNA através da reação da polimerase em cadeia (PCR): DNA molde, Taq polimerase, primers, dNTPs e termociclador; DNA molde, Taq polimerase, primers, dNTPs, etanol e termociclador; DNA molde, DNA polimerase, primers, dNTPs, endonucleases e termociclador; DNA molde, Taq polimerase, primers, dNTPs, endonucleases e termociclador; DNA molde, Taq polimerase, primers, dNTPs e endonucleases;Respondido em 15/10/2020 23:14:56 Explicação: As endonucleases são enzimas de restrição utilizadas nas técnicas de clonagem molecular. O etanol é utilizado no processo de extração de ácido nucleico, antes da técnica de PCR. DNA polimerase ou Taq DNA polimerase são a mesma enzima. Questão1 a Questão2 a https://simulado.estacio.br/alunos/inicio.asp javascript:voltar(); 15/10/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2684634&matr_integracao=202002770571 2/7 Acerto: 1,0 / 1,0 (SESAU, RO, 2017) - Técnica baseada na separação de partículas em um determinado gel de acordo com sua massa e carga. Pode ser utilizada para separação de diversas moléculas orgânicas, como lipoproteínas, proteínas, RNA e DNA. A técnica de separação descrita no texto é denominada: cromatografia. centrifugação; filtração; floculação; eletroforese; Respondido em 15/10/2020 23:15:13 Explicação: As demais técnicas citadas não envolvem a utilização de campo elétrico para a separação das partículas em função de seus respectivos pesos moleculares. Acerto: 1,0 / 1,0 PCR em tempo real é uma inovação tecnológica derivada da PCR que tem se difundido rapidamente nos laboratórios de biotecnologia. Dadas as afirmativas sobre a PCR em tempo real, I. Permite quantificar os fragmentos de DNA amplificados durante a fase exponencial da reação em cadeia da polimerase. II. Apresenta um detector de fluorescência para o monitoramento da reação ao longo dos ciclos de amplificação. III. Permite a investigação de alterações genéticas e dos níveis de expressão dos genes. IV. Utiliza uma análise eletroforética para a detecção dos produtos da reação. Verifica-se que está(ão) correta(s): B) I e IV, apenas. A) II, apenas. E) I, II, III e IV. D) I, II e III, apenas. C) III e IV, apenas. Respondido em 15/10/2020 23:17:59 Explicação: A qPCR faz a quantificação do material genético em tempo real, não necessitando de processamento eletroforético pós-PCR Acerto: 1,0 / 1,0 Questão3 a Questão4 a Questão5 a 15/10/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2684634&matr_integracao=202002770571 3/7 Considerando os princípios das técnicas de hibridização e suas aplicações dentro da biologia molecular, assinale a alternativa correta: A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é o Southern Blotting; A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é o Northern Blotting; Não existe técnica de hibridização capaz de avaliar expressão gênica. Southern, Northern e Western Blotting podem ser utilizadas para estudos envolvendo expressão gênica; A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é o Western Blotting; Respondido em 15/10/2020 23:22:52 Explicação: A técnica de Northern blot corresponde a uma técnica de hibridização de moléculas de RNA com sondas de oligonucleotídeos marcadas. Trata-se de uma metodologia útil, portanto, na detecção de RNA mensageiro (RNAm), nos estudos de expressão gênica, na avaliação da degradação de RNA e splicing, por exemplo. Acerto: 1,0 / 1,0 (Adaptada de UERJ, 2015): A eletroforese foi realizada pela primeira vez em 1937, por Arne Tiselius, trabalho que lhe rendeu um prêmio Nobel. Desde então, variações dessa técnica têm sido usadas na prática analítica. A técnica que separa proteínas de acordo com seus pontos isoelétricos e suas massas moleculares é conhecida como: eletroforese capilar; zimografia; cromatografia líquida; Nenhuma das alternativas acima. eletroforese bidimensional; Respondido em 15/10/2020 23:20:53 Explicação: A corrida eletroforética tem duas dimensões, por isso, é chamada bidimensional. Na primeira dimensão, as proteínas são separadas de acordo com seus pontos isoelétricos. Na segunda dimensão, as mesmas são separadas de acordo com as suas massas moleculares. Acerto: 1,0 / 1,0 (Adaptada de CESPE, 2013): Considerando que o esquema abaixo apresenta o sequenciamento de DNA, processo responsável por uma verdadeira revolução nas ciências biológicas, avalie o gel abaixo: Questão6 a Questão7 a 15/10/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2684634&matr_integracao=202002770571 4/7 Pelo perfil apresentado no gel, a ordem correta de bases nitrogenadas do fragmento sequenciado é: 5´-ACGGTA-3´ 5´-TACCGT-3´ 5´-ATGGCA-3´ 5´-TGCCAT-3´ Nenhuma das alternativas acima. Respondido em 15/10/2020 23:23:13 Explicação: Para elucidar a ordem das bases nitrogenadas, o gel deve ser lido de baixo para cima, ou seja, do menor fragmento para o maior fragmento. Além disso, o resultado respeita o sentido 5´-3´ de polimerização. Acerto: 1,0 / 1,0 (FIOCRUZ, 2010): São características de um bom vetor de clonagem, um plasmídeo que contém as seguintes características, exceto: possuir replicação independente do DNA genômico da célula. Alem disso, eles devem ser facilmente introduzidos em bactérias que não os contenham por meio de métodos químicos ou métodos físicos de transformação. presença de sítios únicos de clivagem para enzimas de restrição. O conjunto destes sítios é denominado de Sítio Múltiplo de Clonagem (SMC) e é o local onde o inserto é incorporado ao vetor de clonagem; presença dos mesmos sinais de início de transcrição e de tradução entre procariotos e eucariotos; presença de uma origem de replicação, ou seja, uma seqüência de DNA Questão8 a 15/10/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2684634&matr_integracao=202002770571 5/7 que permita que o vetor seja replicado na célula hospedeira; presença de um gene que codifica um produto que permita a distinção entre a célula com plasmídio de uma célula sem plasmídio, como por exemplo, um gene para resistência a antibióticos; Respondido em 15/10/2020 23:26:55 Explicação: Os sinais de início de transcrição e tradução são diferentes entre procariotos e eucariotos. Acerto: 1,0 / 1,0 (FMTM, MG): Dois homens, P-I e P-II, disputam a paternidade de uma criança C, filha da mulher M. Diante disso, foi pedido o exame de DNA dos envolvidos. O resultado do teste revelou os seguintes padrões: Acerca dos resultados obtidos foram feitas as seguintes afirmações: I. P-II pode ser o pai da criança, pois há maior quantidade de faixas coincidentes com o padrão da criança; II. as faixas de números 3, 9, 10, 14, e 17 correspondem ao DNA que a criança recebeu da mãe; Questão9 a 15/10/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2684634&matr_integracao=202002770571 6/7 III. não é possível excluir a possibilidade de P-I ser o pai da criança. Está correto o contido apenas em: I e II; II; II e III. I e III; I; Respondido em 15/10/2020 23:25:39 Explicação: É possível excluir a paternidade de P-I à medida em que, após excluir as bandas que têm correspondência com a mãe, P-I e a criança não possuem bandas compatíveis. Acerto: 1,0 / 1,0 (Adaptado de UNIFESP, 2017): Considere uma infecção hipotética de uma bactéria por um vírus patogênico. Supondo que no DNA viral exista a sequência de bases nitrogenadas CCCTATAGGG, qual será a sequência de bases no RNA-guia associado à Cas9 bacteriana? GGGAUAUCCC; CCCUAUAGGG; GGGATATCCC; CCCTATAGGG; CCCTCTCGGG. Respondido em 15/10/2020 23:26:00 Explicação: A sequência de bases do RNA-guia associado deve ser complementar ao DNA que será inativado. Questão10 a javascript:abre_colabore('38403','210078212','4214740001'); 15/10/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2684634&matr_integracao=202002770571 7/7 Disc.: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Aluno(a): GILVANIA SOUZA CAMILO 202003284521 Acertos: 10,0 de 10,0 15/10/2020 1a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 A respeito da quantificação de DNA utilizando espectofotometria, marque a alternativa INCORRETA. Na espectrofotometria quanto maior for a absorção de luzpela amostra, maior a concentração de DNA na amostra. Quando a razão das leituras no comprimento 260nm/280nm estão baixas (abaixo de 1,4 aproximadamente) podemos sugerir uma boa qualidade da extração ácido nucleico (alta pureza). A quantificação de DNA por espectrofotometria é realizada por medição da quantidade de luz absorvida pelo DNA em solução no comprimento de onda de 260 nm. A técnica é capaz de determinar as concentrações médias dos ácidos nucléicos DNA ou RNA presentes em uma amostra, bem como sua pureza. O benefício da utilização de análise por espectrofotometria é a capacidade de determinar a pureza da amostra usando o cálculo de razão das leituras no 260 nm/ 280 nm. Respondido em 15/10/2020 22:53:41 Explicação: Quando a razão das leituras no 260 nm/ 280 nm é abaixo de 1,4 podemos sugerir a presença de proteínas ou outros contaminantes na amostra de ácido nucleico. 2a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 A reação em cadeia da polimerase (PCR) tem como base a: degradação do DNA. termorreação para hidratação do DNA. amplificação de moléculas de RNA. identificação de proteínas. amplificação de moléculas de DNA. Respondido em 15/10/2020 23:08:31 https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_avaliacao_parcial_resultado.asp?cod_hist_prova=210051321&cod_prova=4213333138&f_cod_disc= Explicação: PCR é uma técnica de amplificação do DNA que permite a detecção de moléculas e sequências de nucleotideo alvo 3a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 (Polícia Científica, PE, 2016): A respeito de eletroforese, uma metodologia amplamente empregada para separação, isolamento, análise e manipulação dos ácidos nucleicos, assinale a opção correta: A quantificação de DNA em gel de agarose é uma técnica de menor precisão, comparada a eletroforese em acrilamida, sendo utilizada como instrumento para averiguação de êxito na etapa de extração; Os ácidos nucleicos possuem uma carga geral total positiva, devido aos seus grupamentos fosfato do arcabouço e, consequentemente, quando aplicados em um gel de agarose ou poliacrilamida, migram em direção ao ânodo. A eletroforese em gel de agarose é usada para separar proteínas de tamanhos diferentes, que podem ser detectadas por fluorescência; A eletroforese consiste na migração das partículas de uma solução coloidal sob a influência de um campo magnético onde a polaridade negativa atrai as moléculas; A identificação dos fragmentos amplificados de DNA não pode ser realizada em gel de poliacrilamida; Respondido em 15/10/2020 22:22:36 Explicação: A eletroforese em gel de agarose destina-se apenas a ácidos nucleicos, enquanto a eletroforese em gel de poliacrilamida pode ser empregada para ácidos nucleicos e proteínas. Na técnica de eletroforese, graças à aplicação de campo elétrico, as partículas são induzidas a migrar no polímero. O movimento das partículas é determinado em função da repulsão do pólo negativo uma vez que, em função dos seus respectivos grupamentos fosfato, o DNA possui cargas semelhante. 4a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 (INCA, 2014): Qual afirmação descreve com precisão o processo de PCR? A reação de PCR requer um tipo especial de enzima de restrição; A reação de PCR amplifica geometricamente um fragmento de DNA. É necessário um par de primers para a amplificação de um fragmento de DNA; O peso molecular do fragmento de DNA não é diagnóstico de especificidade de um PCR; Os produtos de PCR são inibidores da reação em cadeia da polimerase; Respondido em 15/10/2020 22:23:21 Explicação: Os produtos de uma etapa da reação de PCR servem como substrato para as etapas subsequentes. Não é necessário utilizar enzima de restrição para essa metodologia. O uso de pesos moleculares auxilia na deteção de amplificações inespecíficas. A amplificação é considerada exponencial. 5a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 (Unesp, 2012): Um clone de cDNA para um gene humano que codifica uma proteína amilase foi marcado com radioatividade e utilizado em um experimento de Southern blotting. Nesse experimento, o DNA genômico de Ratos Wistar foi digerido com a enzima de restrição Eco RI e três fragmentos de DNA foram observados na análise de Southern blotting. Quando os pesquisadores realizaram os mesmos experimentos com outra linhagem de ratos, foi observada a ausência de fragmentos na análise de Western blotting, mesmo após estes experimentos terem sido repetidos três vezes. Podemos concluir corretamente que: na linhagem de ratos Wistar a região do DNA que codifica a proteína amilase contém dois sítios de restrição para a enzima Eco RI e, após a digestão com essa enzima, são gerados três fragmentos que sofreram hibridação com o clone de cDNA. Na outra linhagem de ratos, a ausência de fragmentos sugere que esses animais não têm a capacidade de produzir essa enzima amilase, pois essa sequência de DNA pode ter sido perdida ou deletada; esses resultados mostram que existem três sítios de restrição para a enzima Eco RI no DNA genômico dos ratos Wistar, gerando, portanto, três fragmentos de tamanhos diferentes na análise de Southern blotting. Na outra linhagem de ratos, a presença de apenas um sítio de restrição para essa enzima (Eco RI) gera um fragmento muito grande, o qual não é capaz de se hibridizar com o clone de cDNA e, portanto, não é possível ser detectado pela análise de Southern blotting; esses resultados demonstram que, na linhagem de ratos Wistar, existe um sítio de restrição para a enzima Eco RI na sequência da proteína amilase e, portanto, são observados três fragmentos com tamanhos diferentes que sofreram hibridação com o clone de cDNA. Na outra linhagem de ratos, a ausência de fragmentos demonstra a falta de sítios de restrição para a enzima Eco RI na proteína amilase desses animais, indicando, portanto, que o gene da amilase está deletado por mutação no DNA desses animais. os resultados da análise de Southern blotting com os ratos Wistar demonstram que há o reconhecimento de sítios de restrição pela enzima Eco RI na sequência de DNA do gene que codifica a proteína amilase. Entretanto, a ausência de fragmentos na outra linhagem de camundongo analisada é certamente resultado de erros metodológicos na aplicação dessas análises, pois este seria um resultado improvável; esses resultados demonstram que o DNA dos ratos Wistar contém dois ou mais sítios de restrição para a enzima Eco RI e, após a digestão com essa enzima, são gerados três fragmentos de tamanhos diferentes. Na outra linhagem de ratos, a ausência de fragmentos fornece prova de que esses animais sofreram mutações na sequência de DNA que codifica a proteína amilase e essa sequência não é mais reconhecida pela enzima de restrição Eco RI, portanto não são observados fragmentos na análise de Southern blotting; Respondido em 15/10/2020 23:05:42 Explicação: O número de sítios de restrição cliváveis pela enzima Eco RI para o gene analisado irá implicar na quantidade de fragmentos encontrados. Um sítio de restrição gera dois fragmentos, dois sítios de restrição gera três fragmentos e, assim sucessivamente. Na outra linhagem de ratos, a ausência de bandas no Western Blot sinaliza a ausência da proteína (amilase) que seria codificada pelo seu respectivo gene codificante. 6a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 (Policia Cientifica, PR, 2017): A espectrometria de massa é uma técnica utilizada para o estudo de massas de átomos, moléculas ou fragmentos de moléculas, desde que estes estejam eletricamente carregados. A respeito desse assunto, julgue as afirmações. I. Um espectrômetro de massas determina a massa de uma molécula ou átomo medindo a razão massa/carga dos íons gerados; II. Os íons são gerados pela indução,perda ou ganho de carga por uma espécie eletricamente neutra; III. Uma vez formados, os íons são direcionados, por forças eletrostáticas, para dentro do analisador de massas, separados de acordo com suas razões massa/carga e finalmente detectados. Assinale a alternativa correta: Está correta apenas a afirmativa I. Estão corretas apenas as afirmativas I e III; Estão corretas apenas as afirmativas I e II; Estão corretas apenas as afirmativas II e III; Estão corretas todas as afirmativas; Respondido em 15/10/2020 22:31:04 Explicação: Todas as alternativas estão corretas. 7a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 (Adaptado de CESPE, 2018): Complete as lacunas do texto a seguir, a respeito do projeto genoma (humano e outros) e às estratégias de sequenciamento disponíveis: "No projeto genoma humano, foi empregado o método de Sanger, que adicionava ____________________ modificados, os didesoxirribonucleotídeos, para ____________________ o crescimento de um fragmento de DNA em replicação pela ____________________." Primers/ impedir/ DNA polimerase; Primers/ estimular/ RNA polimerase; Nucleotídeos/ delimitar/ DNA ligase. Nucleotídeos/ impedir/ DNA polimerase; Nucleotídeos/ estimular/ RNA polimerase; Respondido em 15/10/2020 22:33:42 Explicação: O método de Sanger se baseia na interrupção da cadeia nucleotídica em crescimento pela DNA polimerase, através da incorporação de nucleotídeos modificados, os quais não permitem ligações químicas. 8a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 (UFAM, 2016): A clonagem molecular é caracterizada pela produção de muitas cópias de um fragmento de DNA alvo (amplificação), por meio da tecnologia do DNA recombinante. Sobre essa técnica, são feitas as seguintes afirmativas: I. Um vetor de clonagem molecular pode conter mais de um marcador de seleção; II. A região do gene repórter deve conter sítios de restrição enzimática para clonagem; III. Em uma placa de Petri, o número de clones recombinantes não excede o número de clones não recombinantes; IV. Uma das características exigidas para a clonagem molecular é que as células utilizadas como hospedeiras sejam organismos não patogênicos; Assinale a alternativa correta: Todas as afirmativas estão corretas. Somente as afirmativas I,II e IV estão corretas; Somente as afirmativas II e III estão corretas; Somente as afirmativas I e III estão corretas; Somente as afirmativas I, II e III estão corretas; Respondido em 15/10/2020 22:34:52 Explicação: O processo de clonagem pressupõe a existência de falhas nos processos de clonagem em vetor e transformação em organismos competentes. Dessa forma, as concentrações de vetor com inserto e bactéria são otimizadas de forma a otimizar a produção de clones recombinantes. 9a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 (UEL, 2017): O teste de DNA abaixo foi solicitado por uma mulher que queria confirmar a paternidade dos filhos. Ela levou ao laboratório amostras de cabelos dela, do marido, dos dois filhos e de um outro homem que poderia ser o pai. Os resultados obtidos estão mostrados na figura abaixo: A partir dos resultados podemos obter as seguintes conclusões, exceto: o filho 1 compartilha metade de seu material genético com a mãe; o filho 2 não é dessa mãe; o marido e o outro homem não são irmãos. o filho 2 é do marido; o filho 1 é do outro homem; Respondido em 15/10/2020 22:36:41 Explicação: Não podemos excluir a maternidade nesse caso, pois metade das bandas do filho 2 apresenta compatibilidade com a mãe em questão. 10a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 (Enade, 2016): Desenvolvida recentemente, a técnica de edição de genoma denominada CRISPR/Cas9 mostra-se bastante promissora nas áreas de Biotecnologia e Medicina. Por engenharia genética, é possível direcionar o sistema CRISPR/Cas9 para clivar o DNA em um ponto específico dos genomas de vírus, de plantas, de fungos e de animais, inclusive de embriões humanos, o que tem gerado discussões a respeito dos aspectos éticos de sua utilização. (YANAGUI, K. Novas tecnologias, novos desafios. Ciência e Cultura, São Paulo, v. 68, n. 3, set. 2016 (adaptado)). Em relação às questões bioéticas envolvidas na edição genética, avalie as afirmações a seguir. I. No Brasil, não é permitido o uso de técnicas para a edição genética de embriões humanos; os estudos científicos nessa área devem ter como objetivo tratar e curar problemas de saúde e não alterar o genoma ou realizar clonagens; II. A despeito do caráter promissor da edição genética no tratamento de doenças graves, as intervenções feitas por meio da técnica de CRISPR/Cas9 em embriões podem ser passadas às gerações futuras, por esse motivo, a prática é considerada eugenista, o que ensejou a proibição de estudos desse tipo em embriões humanos em alguns países; III. Em alguns países, inclusive no Brasil, são permitidas por lei a manipulação e a modificação genética de embriões humanos para fins de pesquisa, entretanto, esses embriões devem ser descartados dentro do prazo de duas semanas. É correto o que se afirma em: III, apenas; I e II, apenas; I, apenas; I, II e III. II e III, apenas; Respondido em 15/10/2020 22:38:50 Explicação: No Brasil, a legislação veta qualquer experimento que envolva a manipulação genética de embriões humanos. A Lei de Biossegurança (11.105/2005) proíbe em seu arti go 6, inciso III, a ¿engenharia genética em célula germinal humana, zigoto humano e embrião humano¿. 08/10/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2883639&matr_integracao=202005030721 1/5 Disc.: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Aluno(a): INELI CONTE 202005030721 Acertos: 9,0 de 10,0 08/10/2020 Acerto: 0,0 / 1,0 O processo de extração do DNA tem como objetivo isolar os ácidos nucleico dos demais componentes celulares. Baseado neste processo marque a alternativa incorreta. Substâncias com ação de precipitação são utilizadas para remoção dos lipídios da amostra A precipitação final do DNA pode ser realizada com etanol ou álcool isopropílico. Na etapa de purificação do DNA são utilizadas substâncias que fazem a remoção de carboidratos e proteínas presente nas amostras, isolando apenas o DNA A primeira etapa da extração é a lise de membranas onde são utilizados substância com ação de um detergente. Durante a extração do DNA é necessária fazer a remoção de outros componentes como proteínas, lipídeos e RNA. Respondido em 08/10/2020 02:24:42 Explicação: Substâncias com ação de DETERGENTES são utilizadas para remoção dos lipídios da amostra. Acerto: 1,0 / 1,0 A técnica de PCR (reação em cadeia da DNA polimerase) é utilizada com o objetivo de se obter várias cópias (amplificação) de um fragmento específico de DNA. Entretanto, um dos problemas que pode ocorrer durante a PCR é a amplificação inesperada de fragmento(s) inespecífico(s). Dados os fatores que influenciam nesse tipo de problema, I. Sequência de nucleotídeos dos primers. II. Temperatura de anelamento dos primers. III. Concentração do DNA template. IV. Concentração dos primers. Verifica-se que está(ão) correto(s): C) III e IV, apenas. B) II e III, apenas. D) I, II e IV, apenas. A) I, apenas. Questão1 a Questão2 a https://simulado.estacio.br/alunos/inicio.asp javascript:voltar(); 08/10/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2883639&matr_integracao=202005030721 2/5 E) I, II, III e IV. Respondido em 08/10/2020 03:30:06 Explicação: Todos os fatores influenciam. Acerto: 1,0 / 1,0 (Adaptada de IF, RN, 2017) - Entre as técnicas usadas na biotecnologia: Nenhuma das alternativas acima. a biobalística usa microprojéteis revestidos com DNA para identificar trechos que serepetem no DNA; na técnica do DNA recombinante, utilizam-se as endonucleases e a Taq polimerase para unir as duas fitas de DNA; a eletroforese é usada para separar fragmentos de DNA de tamanhos diferentes a partir de corrente elétrica; na reação em cadeia da polimerase (PCR), utiliza-se a DNA helicase para separar as fitas de DNA a 94° C; Respondido em 08/10/2020 02:29:02 Explicação: Na técnica de PCR, promovemos a desnaturação das fitas de DNA através de processo térmico, e não enzimático. Na técnica de DNA recombinante, além de endonucleases, utilizamos as DNA ligases para promover o restabelecimento das ligações químicas. A biobalística corresponde a uma estratégia de transferência gênica/transformação de organismos. Acerto: 1,0 / 1,0 (Fiocruz, 2010) - Assinale a afirmativa incorreta: Na metodologia de PCR em Tempo - Real, quanto maior for a quantidade de DNA alvo presente em uma dada amostra um menor número de ciclos de PCR será necessário para se obter uma quantidade de fluorescência a partir desta dada amostra acima do ruído de fundo do aparelho (Ct); Na metodologia de PCR em Tempo - Real, a utilização de sondas marcadas com fluoróforos permite a realização de reações multiplex; A técnica de PCR em Tempo - Real é mais sensível que a técnica de PCR convencional. A metodologia de PCR em Tempo - Real é a única metodologia de PCR quantitativo existente; É a curva de dissociação obtida ao final da corrida de PCR em Tempo - Real que permite a verificação da especificidade da amplificação obtida; Respondido em 08/10/2020 02:34:56 Explicação: A metodologia de PCR digital corresponde a um avanço da metodologia de PCR em tempo real, permitindo a quantificação de ácidos nucleicos com grande sensibilidade e dispensando a necessidade de curva-padrão. Acerto: 1,0 / 1,0 (UFRJ, 2013): Selecione a opção que contém as etapas necessárias para execução do protocolo de Western blotting: Questão3 a Questão4 a Questão5 a 08/10/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2883639&matr_integracao=202005030721 3/5 Imobilização em coluna de afinidade, eluição com tampão glicina, neutralização do eluato, dot blot. Transferência de proteínas do gel para membrana; bloqueio da membrana; incubação com anticorpo primário; incubação com anticorpo secundário; revelação. Desnaturação de proteínas; incubação com anticorpo primário; incubação com anticorpo secundário; revelação. Cromatografia de afinidade; incubação com anticorpo primário; incubação com anticorpo secundário; revelação. Transferência do DNA do gel para membrana; incubação com sonda hibridizadora radioativa; revelação. Respondido em 08/10/2020 02:37:09 Explicação: É necessária a transferência das proteínas para uma membrana, onde as reações antígeno x anticorpo se processarão. Colunas de afinidade não são necessárias nesse procedimento. Acerto: 1,0 / 1,0 (Unesp, 2012): A eletroforese em gel de poliacrilamida desnaturante (contendo Dodecil Sulfato de Sódio ou SDS) é uma técnica bastante utilizada em laboratório de biologia molecular para separação de proteínas. Assim, é correto afirmar que, na eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) para separação de proteínas: as proteínas sempre migrarão para o polo negativo quando realizada a pH 8,6; a velocidade da migração dessa proteína no gel não sofre ação da concentração do gel de poliacrilamida; as proteínas maiores migrarão mais rápido que as proteínas menores. quanto maior a carga negativa da proteína mais rápido ocorrerá a migração no gel; as proteínas sempre migrarão para o polo positivo quando realizada a pH 8,6; Respondido em 08/10/2020 02:37:50 Explicação: O SDS é um detergente aniônico que irá conferir carga elétrica negativa às proteínas. Dessa forma, durante a eletroforese, as proteínas migrarão em direção ao polo positivo de acordo com seus respectivos pesos moleculares. Acerto: 1,0 / 1,0 Com relação ao sequenciamento de DNA, método Sanger, assinale a alternativa correta. O método de Sanger revolucionou o sequenciamento de DNA pela utilização de substâncias radioativas marcando os ddNTPs Após a etapa de desnaturação do DNA, é colocado um primer na extremidade 5' de uma das cadeias e, com a ajuda de uma DNA polimerase, sintetiza-se a cadeia complementar. Os nucleotídeos empregados nessa técnica são quimicamente modificados de forma que não apresentam um terminal hidroxila (3-OH), impedindo a inserção de um novo nucleotídeo pela DNA polimerase. Após o término da reação de sequenciamento, ela é submetida à eletroforese capilar. Todos os fragmentos recém-sintetizados, cada um terminado em um nucleotídeo diferente e cada um marcado com um diferente fluoróforo, são separados pelas respectivas cores. Os métodos de sequenciamento têm base na produção de fragmentos de DNA de comprimento crescente, que começam em um ponto comum e possuem todos os quatro tipos de nucleotídeos marcados nas extremidades. Respondido em 08/10/2020 03:26:00 Questão6 a Questão7 a 08/10/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2883639&matr_integracao=202005030721 4/5 Explicação: Os nucleotídeos empregados nessa técnica são os didesoxinucleotídeos que são quimicamente modificados por não apresentarem um terminal hidroxila (3-OH), impedindo a inserção de um novo nucleotídeo pela DNA polimerase. Acerto: 1,0 / 1,0 Na clonagem, "células competentes" são: C) o processo de eletroporação. A) a marca comercial da estirpe empregada. B) a fase de crescimento da estirpe. D) sinônimo de "células transformadas" as alternativas "c" e "d" estão corretas Respondido em 08/10/2020 03:26:45 Explicação: Células competentes ou células transformadas são aquelas que adquiriram o plasmídeo contendo o gene alvo. Acerto: 1,0 / 1,0 Na figura precedente é apresentado um padrão de polimorfismos de DNA obtido em exame de paternidade após eletroforese em gel de poliacrilamida. Com base nos dados da criança, da mãe e de três homens ¿ os supostos pais ¿, assinale a opção correta. O resultado do teste não permite distinguir se o homem 2 ou o homem 3 é o pai biológico da criança. O homem 3 é o pai biológico da criança. O homem 2 é o pai biológico da criança. Não é possível determinar a paternidade da criança com base no padrão apresentado. O homem 1 é o pai biológico da criança. Questão8 a Questão9 a 08/10/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2883639&matr_integracao=202005030721 5/5 Respondido em 08/10/2020 02:45:42 Explicação: Apartir da análise de bandas é possível concluir que o homem 2 é o pai da criança. Acerto: 1,0 / 1,0 (UNIFESP, 2017): Por que a alteração na sequência de DNA provocada pelo CRISPR-Cas9 pode inativar um gene? Porque o DNA alterado não será transcrito; Porque o RNA transcrito a partir dessa sequência também será alterado; Porque o RNA transcrito não será traduzido; CRISPR-Cas9 é incapaz de inativar um gene. Porque o RNA transcrito tem uma meia vida menor do que o RNA original; Respondido em 08/10/2020 02:43:49 Explicação: De acordo com o dogma da biologia molecular, a alteração na sequência de DNA implicará na alteração do RNA transcrito. Consequentemente, a proteína traduzida a partir desse RNAm pode não ser funcional, ou seja, o gene pode ser inativado. Questão10 a javascript:abre_colabore('38403','208188376','4157260065'); Impresso por Mary, CPF 558.778.932-20 para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 22/08/2020 19:09:59 Disc.: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Acertos: 8 , 0 de 10,0 05/09/2019 1a Questão ( R ef .: 201915163119) Acerto: 1,0 / 1, 0 São exemplos de ácidos nucleicos : Proteínas e lipídios ; Monossacarídeos e dissacarídeos; DNA e RNA; Timina e uracila.Adenina e guanina; Respondido em 05/09/2019 10:21:38 2a Questão ( R ef .: 201915163131) Acerto: 1,0 / 1, 0 Identifique as principais etapas do protocolo de extração de ácidos nucleicos: Precipitação, lise celular, purificação e Hidratação. Lise celular, Purificação, Precipitação e Hidratação; Hidratação, Lise celular, Purificação e Precipitação; Lise celular, Hidratação, Precipitação e Purificação; Hidratação, Purificação, Lise celular e Precipitação. Respondido em 05/09/2019 10:22:27 3a Questão ( R ef .: 201915163139) Acerto: 1,0 / 1, 0 (PC, PI , 2018) - Em investigações criminais , alguns fios de cabelo, células da pele, sangue ou outros fluidos corporais podem ser deixados no local e o DNA recolhido a partir dessas amostras tem a capacidade de indicar a solução do crime. Muitas vezes a quantidade de DNA disponível para análise é limitada, contudo com a técnica de Reação em Cadeia de Polimerase (PCR), o menor vestígio de DNA encontrado pode ser amplificado, aumentando a quantidade de material e proporcionando o suficiente para traçar o perfil genético e assim garantir a análise. A respeito da técnica de PCR, assinale a opção correta: Na PCR convencional, o resultado é comumente analisado por meio de uma eletroforese em gel de agarose ou de poliacrilamida; As etapas util izadas para realizar a PCR são a desnaturação, extensão (Taq polimerase) e anelamento (primers) nesta ordem; A PCR convencional permite a quantificação dos produtos por meio de fluorescência; Para realizar a PCR é necessário utilizar apenas o DNA a ser amplificado, Taq polimerase e nucleotídeos (dNTPs); Atualmente, devem-se adicionar enzimas de polimerização a cada etapa de desnaturação. Respondido em 05/09/2019 10:23:14 4a Questão ( R ef .: 201915163169) Acerto: 1,0 / 1, 0 (Fiocruz, 2010): A retrotranscrição de RNA genômico viral em moléculas de DNA complementar para a sua detecção por técnica de PCR é denominada: microscopia ótica; RT -PCR; PCR em tempo real; sequenciamento. Imunoperoxidase; Respondido em 05/09/2019 10:25:25 Impresso por Mary, CPF 558.778.932-20 para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 22/08/2020 19:09:59 5a Questão ( R ef .: 201915159827) Acerto: 0,0 / 1, 0 (SESAU, RO, 2017) - Técnica baseada na separação de partículas em um determinado gel de acordo com sua massa e carga. Pode ser utilizada para separação de diversas moléculas orgânicas, como lipoproteínas , proteínas, RNA e DNA . A técnica de separação descrita no texto é denominada: cromatografia. centrifugação; filtração; floculação; eletroforese; Respondido em 05/09/2019 10:26:22 6a Questão ( R ef .: 201915160148) Acerto: 1,0 / 1, 0 (Adaptada de UFMG, 2013) - Em relação à espectrofotometria, é incorreto afirmar que: a espectrofotometria permite estimar a concentração de soluções. a luz visível para o olho humano é a região do espectro eletromagnético com comprimento de onda entre 390 e 780 nm; a espectrofotometria é a medida da intensidade da luz em comprimentos de onda selecionados; a absorvância é a capacidade de uma substância em absorver ou transmitir radiação; a energia é transmitida por ondas eletromagnéticas que são caracterizadas pela frequência e comprimento de onda; Respondido em 05/09/2019 10:27:30 7a Questão ( Re f .: 201915169363) Acerto: 1,0 / 1, 0 (Fiocruz, 2010) - Assinale a afirmativa incorreta: É a curva de dissociação obtida ao final da corrida de PCR em Tempo - Real que permite a verificação da especificidade da amplificação obtida; Na metodologia de PCR em Tempo - Real, quanto maior for a quantidade de DNA alvo presente em uma dada amostra um menor número de ciclos de PCR será necessário para se obter uma quantidade de fluorescência a partir desta dada amostra acima do ruído de fun do aparelho do (Ct); A técnica de PCR em Tempo - Real é mais sensível que a técnica de PCR convencional. A metodologia de PCR em Tempo - Real é a única metodologia de PCR quantitativo existente; Na metodologia de PCR em Tempo - Real, a utilização de sondas marcadas com fluoróforos permite a realização de reações multiplex; Respondido em 05/09/2019 10:28:26 8a Questão ( R ef .: 201915169345) Acerto: 1,0 / 1, 0 (PC, DF, 2012) - O propósito da PCR é fazer um número imenso de cópias de um determinado fragmento gênico, cujo tamanho pode variar de poucos pares de base até milhares de pares de base. A PCR é constituída de três ciclos. Assinale a alternativa que apresenta esses c iclos : fase de desnaturação, fase de captação e fase de extensão. fase de desnaturação, fase de hibridização e fase de fixação ou anelamento; fase de desnaturação, fase de extensão ou anelamento e fase de fixação; fase de desnaturação, fase de hibridização ou anelamento e fase de extensão; fase de desnaturação, fase de fixação e fase de hibridização ou anelamento; Respondido em 05/09/2019 10:29:55 9a Questão ( R ef .: 201915170633) Acerto: 1,0 / 1, 0 (FGV, 2010): Num estudo para verificar se a espécie "A" de bactéria apresenta e expressa um gene similar ao gene tox da espécie "B", seria correto afirmar que: a obtenção de um produto de PCR amplificado a partir de iniciadores para t ox da espécie "B" comprova a presença de um gene t ox sendo expresso na espécie "A"; uma hibridação tipo South ern -blot com sonda t ox marcada empregando amostras de DNA total da espécie "A", indicaria que de fato este gene é Impresso por Mary, CPF 558.778.932-20 para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 22/08/2020 19:09:59 expresso na espécie "A"; uma hibridação tipo Southern-blot com sonda tox marcada com DNA total, indicaria que um DNA similar a este gene está presente em "A" sem informação sobre transcrição ou tradução do mesmo; uma hibridação tipo North ern-blot com sonda t ox marcada empregando amostras de RNA total da espécie "A", indicaria que de fato este gene é traduzido na espécie "A"; uma hibridação tipo Wes tern -blot com sonda t ox marcada empregandoamostras de DNA total da espécie "A", indicaria que um DNA similar a este gene está presente no genoma da espécie "A". Respondido em 05/09/2019 10:30:42 10a Questão ( R ef .: 201915170630) Acerto: 0,0 / 1, 0 Considerando os princípios das técnicas de hibridização e suas aplicações dentro da biologia molecular, assinale a alternativa correta: Não existe técnica de hibridização capaz de avaliar expressão gênica. A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é o Northern Blotting; Southern, Northern e Western Blotting podem ser ut il iz a da s para estudos envolvendo expressão gênica; A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é o Southern Blotting; A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é o Western Blotting; Disc.: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Aluno( a Acertos: 1 0 ,0 de 10,0 05/09/2019 1a Questão ( R ef .: 201915163121) Acerto: 1,0 / 1, 0 Na técnica de extração de ácidos nucleicos (DNA/RNA), quais os reagentes que podem ser utilizados? Etanol 70% e isopropanol; Partículas de sílica e tiocianato de guanidina; Fenol e clorofórmio; Todas as alternativas estão corretas; Todas as alternativas estão erradas. Respondido em 05/09/2019 10:49:12 2a Questão ( Re f .: 201915163123) Acerto: 1,0 / 1, 0 (SESAU, 2010): O RNA difere quimicamente do DNA por apresentar: ribonucleotídeos e possuir as bases timina e uracila; ribonucleotídeos e por possuir a base uracila; desoxirribonucleotídeos e por possuir a base timina; desoxirribonucleotídeos e possuir a base uracila; ribonucleotídeos e possuir a base timina. Respondido em 05/09/2019 10:49:35 Impresso por Mary, CPF 558.778.932-20 para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 22/08/2020 19:09:59 3a Questão ( R ef .: 201915163176) Acerto: 1,0 / 1, 0 (POLÍCIA CIENTÍFICA , PE, 2016) - Acerca da reação em cadeia da polimerase (PCR), assinale a opção correta: Os iniciadores são pequenos fragmentos sintéticos de DNA de fita dupla, usualmente com extremidade 3'-OH, e complementares à sequência do segmento de DNA de interesse; A enzima termoestável direciona o posicionamento dos precursores de DNA ― dNTP ― iniciando a síntese de novas fitas de DNA . A temperatura ideal para a polimerização varia entre 25 ºC e 45 ºC; A reação de PCR é dependente da atividade de cópia de fragmentos de DNA , catalisada pela enzima DNA sintetase; O último passo da PCR, a polimerização, é a excisão da fita de DNA no sentido 3'→5', começando no primeiro nucleotídeo do primer iniciador incorporado; PCR é a tecnologia por meio da qual são produzidos bilhões de cópias de fragmentos de DNA. Os fragmentos do DNA amplificado pela PCR são chamados amplicons e podem ser tipificados usando-se diferentes métodos. Respondido em 05/09/2019 10:53:53 4a Questão ( R ef .: 201915163135) Acerto: 1,0 / 1, 0 (UFRJ, 2012): Para uma reação de PCR ocorrer corretamente, são necessários os seguintes componentes: uma polimerase de DNA termoestável, desoxirribonucleotídeos trifosfatados, um par de iniciadores e um molde de DNA. uma polimerase de DNA termolábil, desoxirribonucleotídeos trifosfatados, um par de iniciadores e um molde de ácido nucleico; uma polimerase de DNA termolábil, desoxirribo-nucleotídeos trifos fatados, um iniciador e um molde de RNA; uma polimerase de DNA termoestável, desoxirribonucleosídeos , um par de iniciadores e um molde de DNA; uma polimerase de DNA termoestável, desoxirribonucleotídeos trifos fatados, dois pares de iniciadores e um molde de ácido nucleico; Respondido em 05/09/2019 10:55:13 5a Questão ( R ef .: 201915159829) Acerto: 1,0 / 1, 0 (P refeitura de Barra Mansa, RJ, 2010) - Eletroforese em gel é uma técnica de separação de moléculas que envolve a migração de partículas em um determinado gel durante a aplicação de uma diferença de potencial. Em relação à eletroforese em gel é correto afirmar que: após a eletroforese em gel, os fragmentos de DNA normalmente são corados com brometo de etídeo, que possui afinidade pelo DNA e fluoresce (torna-se visível) vivamente em contato com a luz infra-vermelha. as moléculas são separadas de acordo com o seu tamanho, as de menor massa situam-se na porção superior do gel e as de maior massa na porção inferior; as moléculas são separadas de acordo com o seu tamanho, as de maior massa situam-se na porção superior do gel e as de menor massa na região inferior; Na migração do DNA em um gel de agarose, sendo o DNA negativamente carregado, ele é atraído pelo eletrodo negativo; na migração do DNA em um gel de agarose, sendo o DNA positivamente carregado, ele é atraído pelo eletrodo negativo; Respondido em 05/09/2019 10:56:26 6a Questão ( R ef .: 201915159830) Acerto: 1,0 / 1, 0 (Adaptada de IF, RN, 2017) - Entre as técnicas usadas na biotecnologia: a eletroforese é usada para separar fragmentos de DNA de tamanhos diferentes a partir de corrente elétrica; na reação em cadeia da polimerase (PCR), utiliza-se a DNA helicase para separar as fitas de DNA a 94° C; a biobalística usa microprojéteis revestidos com DNA para identificar trechos que se repetem no DNA; na técnica do DNA recombinante, utilizam-se as endonucleases e a Taq polimerase para unir as duas fitas de DNA; Nenhuma das alternativas acima. Respondido em 05/09/2019 10:57:46 7a Questão ( R ef .: 201915169351) Acerto: 1,0 / 1, 0 (UFES, 2015): Considere as seguintes afirmações sobre a reação em cadeia da DNA polimerase (PCR): Impresso por Mary, CPF 558.778.932-20 para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 22/08/2020 19:09:59 I . Segmentos específicos de DNA podem ser facilmente amplificados a milhões de cópias . II. A PCR pode ser utilizada em medicina forense e diagnósticos clínicos. Produtos da reação de PCR podem ser usados em clonagem.III. A PCR utiliza uma DNA-polimerase termoestável, porque, para cada etapa de amplificação, o DNA de fita dupla deve ser desnaturado pelo calor. É correto o que se afirma em: I , II e III . I apenas; II apenas; II e III apenas; I e II apenas; Respondido em 05/09/2019 10:59:49 8a Questão ( R ef .: 201915169353) Acerto: 1,0 / 1, 0 (INCA, 2014): Qual afirmação descreve com precisão o processo de PCR? Os produtos de PCR são inibidores da reação em cadeia da polimerase; O peso molecular do fragmento de DNA não é diagnóstico de especificidade de um PCR; É necessário um par de primers para a amplificação de um fragmento de DNA; A reação de PCR requer um tipo especial de enzima de restrição; A reação de PCR amplifica geometricamente um fragmento de DNA. Respondido em 05/09/2019 10:59:24 9a Questão ( R ef .: 201915170631) Acerto: 1,0 / 1, 0 (Adaptada de UFG, 2017): A identificação e quantificação de moléculas específicas em células e tecidos pode ser realizada pela interação antígeno- anticorpo. Qual metodologia utiliza dessa interação para identificação molecular? espect ro fo to metria ; espectrometria de massa; Nenhuma das alternativas acima. Western Blot; qRT-PC R; Respondido em 05/09/2019 11:01:10 10a Questão ( R ef .: 201915178705) Acerto: 1,0 / 1, 0 (Adaptada de INCA, 2010): A respeito dos testes sorológicos, complete a lacuna a seguir: "_________ ______ é uma técnica sorológica que detecta a presença de anticorpos específicos contra o HIV." Northern Blot; Southern Blot; PC R; Clonagem; Western Blot. Impresso por Mary, CPF 558.778.932-20 para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 22/08/2020 19:09:59 Disc.: Aluno( a) : Acertos: 1 0 ,0 de 10,0 05/09/2019 1a Questão ( R ef .: 201915162941) Acerto: 1,0 / 1, 0 São exemplos de ácidos nucleicos: DNA e RNA; Adenina e guanina; Proteínas e lipídios; Monossacarídeos e dissacarídeos; Timina e uracila. Respondido em 05/09/2019 11:05:59 2a Questão ( R ef .: 201915162953) Acerto: 1,0 / 1, 0 Identifique as principais etapas do protocolo de extração de ácidos nucleicos: Precipitação, lise celular, purificação e Hidratação. Hidratação, Lise celular, Purificação e Precipitação; Hidratação, Purificação, Lise celular e Precipitação. Lise celular, Purificação, Precipitação e Hidratação; Lise celular, Hidratação, Precipitação e Purificação; Respondido em 05/09/2019 11:07:49 3a Questão ( R ef .: 201915162965) Acerto: 1,0 / 1, 0 (Fiocruz, 2010): Sobre a utilização da técnica de PCR com a finalidade de diagnóstico molecular, analise as afirmativas a seguir. I . Uma vez que na reação de PCR se utiliza uma DNA Polimerase dependente de DNA, somente os vírus cujo genoma é constituído por DNA podem ser detectados pela técnica de PCR. II. É possível detectar microorganismos diferentes em uma mesma reação de PCR, desde que se utilize na reação pares de iniciadores específicos para cada microorganismo que se queira detectar. III. A utilização da técnica de PCR para diagnóstico molecular terá sempre e somente caráter qualitativo. As si nal e : se somente as afirmativas I e II estiverem corretas; se todas as afirmativas estiverem corretas . se somente a afirmativa II estiver correta; se somente a afirmativa I estiver correta; se somente a afirmativa III estiver correta; Respondido em 05/09/2019 11:09:20 4a Questão ( R ef .: 201915162994) Acerto: 1,0 / 1, 0 (INMETRO, 2010): A técnica de PCR (reação em cadeia de polimerase), a mais utilizada para amplificação (clonagem) do DNA in vitro, revolucionou o acesso a informações genéticas. Com relação a essa técnica, assinale a opção correta: Na PCR, os primers (iniciadores) se hibridam com moléculas de DNA fita dupla; Com a PCR, a enzima Taq polimerase é capaz de manter sua atividade mesmo nas altas temperaturas necessárias para desnaturar a molécula Impresso por Mary, CPF 558.778.932-20 para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 22/08/2020 19:09:59 de DNA; Com a PCR, a clonagem molecular necessita de 48 a 72 horas para ser executada; A PCR também pode ser aplicada na análise de proteínas; A PCR necessita ser acompanhada de um método de purificação para separar o fragmento amplificado do restante do genoma. Respondido em 05/09/2019 11:09:48 5a Questão ( R ef .: 201915162903) Acerto: 1,0 / 1, 0 (Polícia Científica, PE, 2016): A respeito de eletroforese, uma metodologia amplamente empregada para separação, isolamento, análise e manipulação dos ácidos nucleicos, assinale a opção correta: A quantificação de DNA em gel de agarose é uma técnica de menor precisão, comparada a eletroforese em acrilamida, sendo utilizada como instrumento para averiguação de êxito na etapa de extração; Os ácidos nucleicos possuem uma carga geral total positiva, devido aos seus grupamentos fosfato do arcabouço e, consequenteme nte, quando aplicados em um gel de agarose ou poliac rilamida, migram em direção ao ânodo. A eletroforese em gel de agarose é usada para separar proteínas de tamanhos diferentes, que podem ser detectadas por fluorescência; A identificação dos fragmentos amplificados de DNA não pode ser realizada em gel de poliacrilamida; A eletroforese consiste na migração das partículas de uma solução coloidal sob a influência de um campo magnético onde a polaridade negativa atrai as moléculas; Respondido em 05/09/2019 11:12:22 6a Questão ( R ef .: 201915162940) Acerto: 1,0 / 1, 0 (FIOCRUZ, 2010) - Analise as afirmativas a seguir: I . A eletroforese em gel é uma técnica de separação de moléculas que envolve a migração de partículas em um determinado gel durante a aplicação de uma diferença de potencial. II. A eletroforese em gel é utilizada para separar proteínas e moléculas de DNA e RNA. III. Existem vários tipos de eletroforese em gel para analisar proteínas durante o processo de purificação. Entre elas, estão a eletroforese em gel de poliacrilamidacontendo dodecil de sódio sulfatado (SDS-PAGE), a eletroforese em gel de poliacrilamida não desnaturante (Native PAGE) e o gel em duas dimensões. Assinale: se apenas as afirmativas I e III estiverem corretas . se apenas a afirmativa I estiver correta; se apenas a afirmativa II estiver correta; se apenas as afirmativas I e II estiverem corretas; se apenas a afirmativa III estiver correta; Respondido em 05/09/2019 11:13:01 7a Questão ( R ef .: 201915169163) Acerto: 1,0 / 1, 0 (INCA, 2014): Um oligonucleotídeo de DNA curto utilizado para amplificação por PCR é adequadamente chamado de: polimerase; primer; sonda; vetor. inserto; Respondido em 05/09/2019 11:13:56 8a Questão ( R ef .: 201915169179) Acerto: 1,0 / 1, 0 (Fiocruz, 2010): A técnica de PCR em tempo real permite ao usuário detectar, diferenciar variantes virais e quantificar ácidos nucléicos provenientes de Impresso por Mary, CPF 558.778.932-20 para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 22/08/2020 19:09:59 uma infecção viral em uma única reação em tempo real, enquanto o PCR convencional basicamente permite a penas a detecção de ácidos nucléicos em uma única reação. De acordo com a frase acima, assinale a afirmativa correta: Está totalmente correta; Está parcialmente errada, uma vez que é possível quantificar em tempo real o PCR convencional; Está parcialmente errada, uma vez que também é possível distinguir diferentes variantes virais no PCR convencional em uma única reação (por exemplo, PCR multiplex); Está parcialmente errada, uma vez que não é possível diferenciar ácidos nucléicos no PCR em tempo real; Está parcialmente errada, uma vez que não é possível quantificar ácidos nucléicos por PCR em tempo real. Respondido em 05/09/2019 11:13:43 9a Questão ( R ef .: 201915170455) Acerto: 1,0 / 1, 0 (FGV, 2010): Num estudo para verificar se a espécie "A" de bactéria apresenta e expressa um gene similar ao gene t ox da espécie "B", seria correto afirmar que: uma hibridação tipo North ern-blot com sonda t ox marcada empregando amostras de RNA total da espécie "A", indicaria que de fato este gene é traduzido na espécie "A"; uma hibridação tipo Sou th ern -blot com sonda tox marcada com DNA total, indicaria que um DNA similar a este gene está presente em "A" sem informação sobre transcrição ou tradução do mesmo; uma hibridação tipo Southern-blot com sonda tox marcada empregando amostras de DNA total da espécie "A", indicaria que de fato este gene é expresso na espécie "A"; a obtenção de um produto de PCR amplificado a partir de iniciadores para t ox da espécie "B" comprova a presença de um gene t ox sendo expresso na espécie "A"; uma hibridação tipo Wes tern -blot com sonda t ox marcada empregando amostras de DNA total da espécie "A", indicaria que um DNA similar a este gene está presente no genoma da espécie "A". Respondido em 05/09/2019 11:18:23 10a Questão ( R ef .: 201915170452) Acerto: 1,0 / 1, 0 Considerando os princípios das técnicas de hibridização e suas aplicações dentro da biologia molecular, assinale a alternativa correta: A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é o Southern Blotting; A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é o Northern Blotting; A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é o Western Blotting; Não existe técnica de hibridização capaz de avaliar expressão gênica. Southern, Northern e Western Blotting podem ser utilizadas para estudos envolvendo expressão gênica; 04/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=27078624&user_cod=2804605&matr_integracao=202004000781 1/6 Disc.: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Aluno(a): CAMILLA DE OLIVEIRA GOMES MONTEIRO 202004000781 Acertos: 10,0 de 10,0 04/04/2021 Acerto: 1,0 / 1,0 O operon Lac tem como função principal: Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela inibição do metabolismo da glicose. Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e lactose. Transcrever um RNAm monocistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e lactose. Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e glicose. Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela inibição do metabolismo da galactose e lactose Respondido em 04/04/2021 23:15:37 Explicação: A resposta correta é: Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e lactose. Acerto: 1,0 / 1,0 Considerando um trecho de uma molécula de DNA fita dupla, podemos afirmar que: Se existe 20% de guanina, logo este trecho também possui 15% de timina. Se existe 10% de adenina, logo este trecho também possui 20% de timina. Se existe 35% de timina, logo este trecho também possui 15% de citosina. Se existe 10% de adenina, logo este trecho também possui 10% de uracila. Se existe 25% de guanina, logo este trecho também possui 15% de timina. Respondido em 04/04/2021 23:15:49 Questão1 a Questão2 a https://simulado.estacio.br/alunos/inicio.asp javascript:voltar(); 04/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=27078624&user_cod=2804605&matr_integracao=202004000781 2/6 Explicação: A reposta correta é :Se existe 35% de timina, logo este trecho também possui 15% de citosina. Acerto: 1,0 / 1,0 Quanto à organização do material genético em células, é correto afirmar que: Células procarióticas, como Escherichia coli, contêm DNA em quantidade superior a uma célula humana, devido a um estado de torção denominado superenovelamento. O plasmídeo é constituído por fita simples de DNA com configuração linear ou circular. Os transposons são feitos de DNA fita simples e possuem replicação própria independente do cromossomo. As células procarióticas possuem um único cromossomo, o qual se condensa no interior e é denominado de nucleoide. Os plasmídeos ou elementos extracromossomais contêm genes essenciais que são importantes para as funções de sobrevivência da célula. Respondido em 04/04/2021 23:16:03 Explicação: A resposta correta é : As células procarióticas possuem um único cromossomo, o qual se condensa no interior e é denominado de nucleoide. Acerto: 1,0 / 1,0 Na extração de RNA todos os cuidados citados abaixo devem ser tomados exceto: Na extração de RNA usamos acetato de amônio para auxiliar a separação entra a fase orgânica e a aquosa. O RNA deve ser rapidamente congelado em nitrogênio líquido. Todo o materialdeve ser RNAse free e lavado com soluções neutralizadoras de RNAses. É preferível o uso de um aparelho sonicador para a quebra das membranas celulares, ao invés do uso de detergentes. Uso de solução fenol/clorofórmio em pH ácido. Respondido em 04/04/2021 23:17:11 Explicação: A resposta correta é: Na extração de RNA usamos acetato de amônio para auxiliar a separação entra a fase orgânica e a aquosa. Questão3 a Questão4 a 04/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=27078624&user_cod=2804605&matr_integracao=202004000781 3/6 Acerto: 1,0 / 1,0 Com relação à coleta, transporte, armazenamento e processamento de amostras de sangue para posterior extração de DNA, avalie as sentenças e assinale a alternativa INCORRETA: Tubos de vidro devem ser evitados. O rompimento das hemácias pode liberar o grupamento heme, este é um contaminante prejudicial. Portanto devemos separar o plasma. A amostra de sangue fresca deve ser imediatamente resfriada e mantida a 2-8°C até a extração do DNA. O agente anticoagulantes preferencialmente utilizado é o EDTA ao invés da heparina. A amostra de sangue não precisa ser resfriada e pode ser transportada em temperatura ambiente por até 2 dias. Respondido em 04/04/2021 23:16:39 Explicação: A resposta correta é: A amostra de sangue não precisa ser resfriada e pode ser transportada em temperatura ambiente por até 2 dias. Acerto: 1,0 / 1,0 O DNA (ácido desoxirribonucleico), material genético de seres vivos, é uma molécula de fita dupla, que pode ser extraída de forma caseira a partir de frutas, como morango ou banana amassados, com uso de detergente, de sal de cozinha, de álcool comercial e de uma peneira ou de um coador de papel. O papel do detergente nessa extração de DNA é: Promover lise mecânica do tecido para obtenção de DNA. Promover atividades enzimáticas para acelerar a extração do DNA. Emulsificar a mistura para promover a precipitação do DNA. Romper as membranas celulares para liberação do DNA em solução. Aglomerar o DNA em solução para que se torne visível. Respondido em 04/04/2021 23:17:29 Explicação: A resposta correta é: Romper as membranas celulares para liberação do DNA em solução. Acerto: 1,0 / 1,0 SNPs são empregados amplamente para a identificação humana e possuem diferenças relevantes. A análise dos SNPs também pode estar associada aos fenótipos individuais, havendo uma possibilidade futura de identificação de traços físicos como, por exemplo, a cor da íris. Os SNPs são: Questão5a Questão6 a Questão7 a 04/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=27078624&user_cod=2804605&matr_integracao=202004000781 4/6 Sequências presentes somente no DNA mitocondrial Homozigotos Polimorfismos de nucleotídeo único; uma variação na sequência de DNA Heterozigotos Elementos repetitivos do genoma nuclear Respondido em 04/04/2021 23:18:59 Explicação: A resposta correta é: Polimorfismos de nucleotídeo único; uma variação na sequência de DNA. Acerto: 1,0 / 1,0 No diagnóstico clínico-molecular, a reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real pode ser utilizada para a avaliação da carga viral ou bacteriana, para a determinação da resistência a antibióticos e, até mesmo, para o prognóstico de tumores malignos. A figura abaixo apresenta ciclos de amplificação de amostras por PCR em tempo real, sendo (A) uma amplificação de um determinado segmento gênico que identifica um determinado marcador tumoral em células neoplásicas e (B) uma amplificação do mesmo segmento gênico em células não neoplásicas. A partir das informações apresentadas, conclui-se que: O aumento da fluorescência indica que a amplificação da sequência-alvo está ocorrendo, pois a cada ciclo, durante a desnaturação da dupla fita, ocorre liberação da fluorescência. O maior Ct (26) é observado no início da fase exponencial de amplificação em células não neoplásicas ( B ), e indica maior expressão comparativamente às células neoplásicas ( B ), que apresentam Ct = 17, não sendo esta sequência- alvo um bom marcador tumoral. o Ct (ciclo threshold) pode ser determinado pela intersecção da linha do limiar de detecção da reação threshold, com a linha da amplificação gênica de cada amostra. A análise comparativa das duas amostras deve ser realizada a partir da estabilização da amplificação, que ocorre na fase platô, sendo alcançada no ciclo 28 para a amostra A, e no ciclo 40, para a amostra B. A linha paralela ao eixo referente ao número de ciclos, na altura em que se inicia a fase exponencial da amplificação gênica, denominado threshold, representa Questão8 a 04/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=27078624&user_cod=2804605&matr_integracao=202004000781 5/6 falsos sinais positivos por contaminação das amostras por DNA genômico. Respondido em 04/04/2021 23:18:18 Explicação: A resposta correta é: o Ct (ciclo threshold) pode ser determinado pela intersecção da linha do limiar de detecção da reação threshold, com a linha da amplificação gênica de cada amostra. Acerto: 1,0 / 1,0 O desenvolvimento da engenharia genética permitiu a retirada de genes de uma espécie e a posterior introdução deles em outro indivíduo de espécie diferente. Com essa ferramenta em mãos, o homem foi capaz de reproduzir genes de interesse. COSTA, Marco Antônio F.; COSTA, Maria de Fátima B. Biossegurança de OGM: uma visão integrada. Rio de Janeiro: Publit, 2009, p. 154, com adaptações. Com base nos conceitos de organismos geneticamente modificados (OGMs), assinale a alternativa correta. Os OGMs são organismos cujo material genético (RNA ou DNA) tenha sido modificado por qualquer técnica. Organismos que tiveram genes alterados apenas quanto à respectiva posição ou expressão são transgênicos O setor da saúde não apresenta qualquer tipo de questionamento em relação ao uso dos OGMs, considerando os inúmeros benefícios trazidos por eles para o setor. Os OGMs, na respectiva totalidade, são considerados transgênicos. Os transgênicos são produzidos através da alteração de genes em organismos adultos, sendo a modificação genética transmitida de uma célula a outra através de transformação. Respondido em 04/04/2021 23:20:37 Explicação: A resposta correta é: Os OGMs são organismos cujo material genético (RNA ou DNA) tenha sido modificado por qualquer técnica. Acerto: 1,0 / 1,0 A hibridização in situ é uma ferramenta diagnóstica de doenças genéticas, como a distrofia muscular de Duchenne, e infecciosas, como a infecção por papilomavírus humano (HPV) em colo uterino. Sobre as técnicas de hibridização in situ, é incorreto afirmar que: São feitas em tecidos e células fixadas e permeabilizadas, para preservação das estruturas celulares e entrada das sondas, respectivamente; Permite a identificação com precisão do local na célula ou tecido em que a sequência-alvo está; As sondas podem ser marcadas com enzimas, fluoróforos e radioatividade; Questão9 a Questão10 a 04/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=27078624&user_cod=2804605&matr_integracao=202004000781 6/6 Exigem leitura através de microscópios especializados. Utilizam sondas de anticorpos, capazes de reconhecer a sequência-alvo; Respondido em 04/04/2021 23:19:31 Explicação: A resposta correta é: Utilizam sondas de anticorpos, capazes de reconhecer a sequência-alvo; javascript:abre_colabore('38403','221048307','4457745484'); 01/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=6769656&user_cod=2732398&matr_integracao=202003366293 1/6 Define-se genoma como o conjunto de todo o material genético de uma espécie, que, na maioria dos casos, são as moléculas de DNA. Durante muito tempo, especulou-se sobre a possível relação entre o tamanho do genoma ¿ medido pelo número de pares de bases (pb) ¿, o número de proteínas produzidas e a complexidade doorganismo. As primeiras respostas começam a aparecer e já deixam claro que essa relação não existe, como mostra a tabela abaixo. PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Lupa Calc. SDE4579_202003366293_ESM Aluno: SHEYLLA CUNHA DE ANDRADE NUNES Matr.: 202003366293 Disc.: PLATAF.MOL.AT.BIOL. 2021.1 - F (G) / EX Prezado (a) Aluno(a), Você fará agora seu TESTE DE CONHECIMENTO! Lembre-se que este exercício é opcional, mas não valerá ponto para sua avaliação. O mesmo será composto de questões de múltipla escolha. Após responde cada questão, você terá acesso ao gabarito comentado e/ou à explicação da mesma. Aproveite para se familiarizar com este modelo de questões que será usado na sua AV e AVS. INTRODUÇÃO À BIOLOGIA MOLECULAR 1. a produção de proteínas não está vinculada à molécula de DNA. o conjunto de genes de um organismo define o seu DNA. o tamanho do genoma não é diretamente proporcional ao número de proteínas produzidas pelo organismo. quanto mais complexo o organismo, maior o tamanho de seu genoma. genomas com mais de um bilhão de pares de bases são encontrados apenas nos seres vertebrados. Explicação: javascript:voltar(); javascript:voltar(); javascript:diminui(); javascript:aumenta(); javascript:calculadora_on(); 01/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=6769656&user_cod=2732398&matr_integracao=202003366293 2/6 (IDECAN, 2016) Sobre os dois tipos de cromatina, um dos componentes encontrados no núcleo, analise as afirmativas a seguir. I. A eucromatina é elétron‐densa, aparece como grânulos grosseiros e é bem visível no microscópio óptico. II. A heterocromatina é inativa porque nela a hélice dupla de DNA está muito compactada, o que impede a transcrição dos genes. III. A heterocromatina aparece granulosa e clara entre os grumos de eucromatina. IV. Na eucromatina, o filamento de DNA não está condensado e tem condições de transcrever genes. A eucromatina significa cromatina ativa, sendo mais abundante nas células que estão produzindo muitas proteínas. Estão corretas apenas as afirmativas: No operon lac durante o controle da expressão genética em procariotos, se a lactose estiver presente, acontece: (2012 - FUNCAB) O DNA é uma longa estrutura presente em nossas células. Para caber Não existe relação direta entre o tamanho do genoma e quantidade de proteína, uma vez que um organismo pode apresentar um longo genoma e poucas proteínas codificadas (ex: Rattus novergicus) devido a grande quantidade de sequencias de DNA que não são genes. 2. I, III e V. I, II e IV. II, III e IV. I e II II, IV e V. Explicação: A heterocromática é conhecida como a cromatina densa, pois ela apresenta-se de forma densa e granulosa e desta forma encontra-se inativa, não permitindo a transcrição dos genes. Já a eucromatina é conhecida como frouxa e desta forma os seus genes não estão condensados sendo acessíveis a transcrição. 3. a lactose se liga ao óperon lactose, o que atrai RNA polimerase e em seguida, inicia a transcrição dos genes necessários. a lactose se liga ao repressor, alterando a sua forma para que não se ligue ao operador e RNA polimerase comece a transcrição dos genes necessários a partir do promotor. a lactose se liga ao repressor, alterando a sua forma para que possa se ligar ao operador e os genes estruturais não são expressos. a lactose se liga ao lacO, alterando a sua forma para que possa se ligar ao operador e iniciar a transcrição dos genes necessários. a lactose se liga à RNA polimerase, que então se liga ao promotor e transcreve os genes necessários. Explicação: O operon lac só é ativado na presença de lactose, pois a mesma se liga ao repressor do operon - que impede a sua transcrição- deixando seus genes acessíveis a transcrição. 4. 01/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=6769656&user_cod=2732398&matr_integracao=202003366293 3/6 no núcleo, o DNA utiliza algumas estratégias, como a formação de nucleossomo. Pode- se afirmar que um nucleossomo é: A respeito dos elementos de inserção conhecidos como transposons marque a opção correta sobre os transposons bacterianos. (CESPE, 2016) No método de extração orgânica do DNA: uma parte do DNA que codifica uma proteína. um cromossomo no estágio final de empacotamento. uma longa fita de DNA com diversos genes. uma proteína que tem a capacidade de se ligar ao DNA. uma estrutura com um núcleo octamérico de histonas, no qual o ADN se enrola duas vezes. Explicação: O nucleossomo é o primeiro estágio de compactação do DNA de eucariotos. Essa estrutura é formada pelo enrolamento de 146 nucleotídeos em um octâmero de proteínas (histonas) 5. Transposons compostos são formados por duas sequências de inserção em suas extremidades. Os transposons de sequência de inserção são aqueles que não contêm os genes responsáveis pelo próprio mecanismo de transposição (transposases) Os inserção de transposons bacterianos geralmente não levam a mudanças fenotípicas nas bactérias. Os transposons complexos são os únicos que não possuem pequenas sequências indicando o local de corte pela transposase. Os transposons são pequenas sequências de RNA que serão inseridas de forma aleatória no DNA do organismo hospedeiro, formando novos trechos de genoma. Explicação: Os transposons são segmentos de DNA que possuem a capacidade de mudar sua localização devido a transposase. Os transposon classificados como compostos levam este nome por possuir duas sequencias de inserção. ISOLAMENTO DE ÁCIDOS NUCLEICOS 6. ocorre interação específica entre fosfatos carregados negativamente do acido nucleico e moléculas carregadas positivamente na superfície do substrato sólido. as proteínas são desnaturadas, utilizando-se proteases, e removidas com solventes orgânicos como fenol, ou com uma mistura de 1:1 de fenol e clorofórmio. ocorre a ligação reversível do DNA a superfície sólida/grânulo/partícula magnética, que tenha sido revestida com anticorpo de ligação ao DNA. o DNA purificado é eluído por extração com etanol. o DNA adsorve especificamente membranas/superfícies/ /partículas de sílica em presença de certos sais e em um determinado pH. Explicação: Na extração orgânica a combinação de fenol clorofórmio é utilizada para desnaturação e remoção das proteínas contaminantes. 01/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=6769656&user_cod=2732398&matr_integracao=202003366293 4/6 Sobre o desenho experimental, marque a alternativa correta. Diego está iniciando sua vida profissional como técnico de laboratório em um laboratório molecular. Sua chefe, a biomédica Lais, solicitou que ele corresse um gel para que juntos pudessem analisar o resultado da PCR. Para realizar essa metodologia Diego confeccionou: 7. Uma pesquisa científica pode ser desenvolvida sem o estabelecimento de uma hipótese. A hipótese nula de uma pesquisa confirma a relação de causa-efeito. Grupos controle, variáveis dependentes e independentes são fatores secundários para pesquisa cientifica experimental, apenas para pesquisa científica não experimental. A pesquisa experimental tem como finalidade testar hipóteses que dizem respeito à convicção do pesquisador, envolvendo grupos de controle, seleção aleatória e manipulação de variáveis. A pesquisa científica experimental não busca ajudar um pesquisador a determinar o efeito causal entre dois fatores. Explicação: Na pesquisa experimental são organizados experimentos para testar a hipótese do pesquisador a respeito de um determinado fenômeno. Observa-se a relação de causa e efeito. AMPLIFICAÇÃO IN VITRO DE DNA 8. Uma membrana de nitrocelulose onde ocorrerá a corrida dos fragmentos de acordo com a carga e tamanho. A visualização dos fragmentos se dá em luz UV após a associação com intercalante de DNA. um gel de gelatina onde ocorrerá a separação de fragmentos genômicos de acordo com o tamanho e a velocidade de migração emdireção ao polo negativo. Os fragmentos podem ser visualizados em luz UV após a adição do brometo de etidio no gel. um gel de gelatina para fazer transferência do DNA para uma membrana de nitrocelulose onde ocorrerá a separação de fragmentos genômicos de acordo com a velocidade e carga. um gel de agarose onde ocorrerá a separação de fragmentos genômicos de acordo com com tamanho e carga. Os fragmentos podem ser visualizados em luz UV após a adição do brometo de etidio no gel. um gel de agarose que servirá de matriz para corrida dos fragmentos de diferentes tamanhos de acordo com tamanho e carga. Estes fragmentos são fluorescentes e podem ser visualizados no microscópio após a corrida. Explicação: A eletroforese é uma etapa pós PCR necessária para visualização da amplificação dos fragmentos alvos. Para que ela ocorra é necessário que a amostra seja adicionada a uma matriz (gel agarose), onde os fragmentos serão separados por uma corrente elétrica de acordo com seu tamanho e carga. Após a corrida é adicionado ao gel um intercalante de DNA para que os fragmentos possam ser visualizados ao receberem luz UV. 01/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=6769656&user_cod=2732398&matr_integracao=202003366293 5/6 A PCR é a técnica mais utilizada em laboratórios que oferecem o diagnóstico molecular. Para uma reação de PCR ocorrer corretamente, são necessários os seguintes componentes: Sequenciamento de nova geração, conhecido também como NGS ou sequenciamento profundo de ácidos nucleicos, é um termo geral utilizado para descrever uma série de tecnologias modernas de sequenciamento. Sobre esta tecnologia é correto afirmar que: 9. uma polimerase de DNA termolábil, desoxirribonucleotídeos trifosfatados, um par de iniciadores e um molde de ácido nucleico; uma polimerase de DNA termoestável, desoxirribonucleotídeos trifosfatados, dois pares de iniciadores e um molde de ácido nucleico; uma polimerase de DNA termoestável, desoxirribonucleosídeos, um par de iniciadores e um molde de DNA; uma polimerase de DNA termolábil, desoxirribo-nucleotídeos trifosfatados, um iniciador e um molde de RNA; uma polimerase de DNA termoestável, desoxirribonucleotídeos trifosfatados, um par de iniciadores e um molde de DNA. Explicação: A PCR necessita de uma polimerase de DNA termoestável pois a reação atinge altas temperaturas, desoxirribonucleotídeos trifosfatados que serão adicionados a cadeia de DNA em formação; um par de iniciadores, no qual cada iniciador se ligara uma fita de DNA molde para que a reação aconteça. SEQUENCIAMENTO, CLONAGEM E TÉCNICAS DE HIBRIDIZAÇÃO 10. Apesar dos inúmeros avanços gerados pelas técnicas de sequenciamento de nova geração, ainda é tecnicamente impossível utilizá-las para analisar os genes que estão sendo expressos em um determinado tecido ou condição. Uma das maiores vantagens das tecnologias de sequenciamento de nova geração é o fato de que as sequências obtidas geralmente são longas, contendo, ao menos, 1 kilobases. As tecnologias recentes de sequenciamento de ácidos nucleicos permitem sequenciar tanto DNA como RNA de forma mais rápida e barata do que anteriormente era conseguido com o sequenciamento de Sanger e, por conta disto, estão revolucionando os estudos de genomas e a biologia molecular. Uma das restrições ao uso do sequenciamento de nova geração é a necessidade de serem utilizadas amostras grandes com alta concentração de ácidos nucleicos. Illumina (Solexa), 454 (Roche) e Ion Torrent (Próton/PGM) são sequenciadores de nova geração que realizam o sequenciamento direto tanto de DNA quanto de RNA. Explicação: Os novos sequenciadores como ilumina e RNAseq permitem o sequenciamento rápido, barato e de longas sequências de DNA e RNA, respectivamente. Não Respondida Não Gravada Gravada INTRODUÇÃO À BIOLOGIA MOLECULAR 1. (IDECAN, 2016) Sobre os dois tipos de cromatina, um dos componentes encontrados no núcleo, analise as afirmativas a seguir. I. A eucromatina é elétron‐densa, aparece como grânulos grosseiros e é bem visível no microscópio óptico. II. A heterocromatina é inativa porque nela a hélice dupla de DNA está muito compactada, o que impede a transcrição dos genes. III. A heterocromatina aparece granulosa e clara entre os grumos de eucromatina. IV. Na eucromatina, o filamento de DNA não está condensado e tem condições de transcrever genes. A eucromatina significa cromatina ativa, sendo mais abundante nas células que estão produzindo muitas proteínas. Estão corretas apenas as afirmativas: I, III e V. I, II e IV. I e II II, IV e V. II, III e IV. Explicação: A heterocromática é conhecida como a cromatina densa, pois ela apresenta-se de forma densa e granulosa e desta forma encontra-se inativa, não permitindo a transcrição dos genes. Já a eucromatina é conhecida como frouxa e desta forma os seus genes não estão condensados sendo acessíveis a transcrição. 2. (2013 - VUNESP) Análise a figura. https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio_ensineme.asp https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio_ensineme.asp Pode-se afirmar corretamente que a figura representa o mecanismo de splicing alternativo. translocação cromossômica. tradução. recombinação homóloga. metilação do DNA. Explicação: O splicing alternativo é um mecanismo de regulação gênica pós transcricional em que durante o splicing os genes podem ser ¿emendados¿ de maneiras diferentes codificando diferentes produtos. 3. Define-se genoma como o conjunto de todo o material genético de uma espécie, que, na maioria dos casos, são as moléculas de DNA. Durante muito tempo, especulou-se sobre a possível relação entre o tamanho do genoma ¿ medido pelo número de pares de bases (pb) ¿, o número de proteínas produzidas e a complexidade do organismo. As primeiras respostas começam a aparecer e já deixam claro que essa relação não existe, como mostra a tabela abaixo. https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio_ensineme.asp o tamanho do genoma não é diretamente proporcional ao número de proteínas produzidas pelo organismo. quanto mais complexo o organismo, maior o tamanho de seu genoma. genomas com mais de um bilhão de pares de bases são encontrados apenas nos seres vertebrados. o conjunto de genes de um organismo define o seu DNA. a produção de proteínas não está vinculada à molécula de DNA. Explicação: Não existe relação direta entre o tamanho do genoma e quantidade de proteína, uma vez que um organismo pode apresentar um longo genoma e poucas proteínas codificadas (ex: Rattus novergicus) devido a grande quantidade de sequencias de DNA que não são genes. 4. Com relação às proteínas regulatórias é correto afirmar que: apenas se ligam aos sítios regulatórios de um promotor quando combinados com moléculas indutoras de origem proteica. incluem ativadores transcricionais que se ligam em sítios ativadores quando combinados com uma molécula indutora não protéica. sempre se ligam aos sítios regulatórios de um promotor para ativar ou reprimir diretamente a tradução de um gene ou óperon. excluem as proteínas repressoras. atuam para substituir a RNA polimerase na ativação da expressão gênica. Explicação: O mecanismo de expressão gênica pode necessitar de moléculas ativadores que se ligam aos sítios ativadores dos genes, permitindo assim sua transcrição. ISOLAMENTO DE ÁCIDOS NUCLEICOS 5. Sobre as etapas da extração do DNA marque a alternativa correta. https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio_ensineme.asp https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio_ensineme.asp A segunda etapa é a precipitação do DNA após lavagens sequenciais com soluções alcoólicas e centrifugaçãoA primeira etapa da extração tem por objetivo inativar nucleases e retirar outras proteínas contaminantes. A segunda etapa do processo é a lise das membranas lipídicas. A terceira etapa pode consistir na remoção do RNA A primeira etapa da extração tem por objetivo fazer a lise das membranas celulares utilizando fenol-clorofórmio. Explicação: A primeira etapa da extração consiste na ruptura da membrana; segunda etapa remoção de proteínas e inativação de DNAse, terceira etapa remoção de RNA e a última etapa é a eluição. AMPLIFICAÇÃO IN VITRO DE DNA 6. (AOCP, 2016) A técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) é amplamente utilizada em estudos de biologia molecular e diagnósticos de doenças. Qual é o papel do primer em uma PCR? O primer rompe as pontes de hidrogênio do DNA permitindo a hibridização dos desoxirribonicleotídeos ao DNA e iniciando a duplicação do DNA. primer auxilia na separação das fitas de DNA, permitindo a ligação da DNA polimerase e aumentando a fita de DNA que está sendo duplicada. O primer hibridiza-se à fita de DNA original, permitindo que a DNA polimerase adicione os desoxirribonucleotídeos à extremidade 3'. O primer auxilia a DNA gira-se a formar "bolhas de replicação" permitindo a duplicação de ambas as fitas de DNA simultaneamente. Os fragmentos de Okazaki são ligados a partir da ação do primer que auxilia a DNA liga-se a encontrar os fragmentos e ligá-los em uma fita única. Explicação: O primer é um elemento essencial na reação de PCR, visto que a polimerase não tem a capacidade de inserir o primeiro nucleotídeo da cadeia em formação e necessita de uma extremidade 3¿ OH livre. 7. (UPENET/IAUPE, 2017) Para se fazer uma reação em cadeia de polimerase (PCR), o gene de interesse precisa ter sido clonado e amplificado em bactérias, pois é necessário conhecer os primers, que serão utilizados na amplificação do DNA in vitro. O seu laboratório utiliza a PCR convencional e a em tempo real para estudar a carga amostral de vírus do tabaco. No entanto, você precisa validar os primers mediante PCR convencional. No seu primeiro experimento, houve contaminação do controle negativo e o aparecimento https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio_ensineme.asp https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio_ensineme.asp de bandas inespecíficas. No segundo experimento, você obteve sucesso, ao aumentar a temperatura de melting e controlar o uso de reagentes. Agora a PCR em tempo real poderá ser utilizada, reduzindo o tempo de investigação. Sobre isso, analise as proposições a seguir: I. A sequência e a concentração adequada do iniciador são primordiais para a especificidade e eficiência da PCR, se ele for mal concebido poderá resultar em pouco ou nenhum produto, por causa de amplificação inespecífica, bem como a formação de dímeros de iniciadores. II. Na PCR convencional, pode ocorrer contaminação por transferência de reagentes, dispositivos de pipetagem, superfícies de laboratório, material biológico dos próprios pesquisadores, ocasionando resultados falsos. III. A temperatura de melting (Tm) de uma molécula de DNA, na qual metade das moléculas é de cadeia simples e a outra de cadeia dupla, independe do seu tamanho, porém depende da composição de nucleotídeos, visto que produtos amplificados ricos em guanina e citosina precisam de menor Tm, visto terem apenas duas pontes de hidrogênio e, por isso, é mais fácil haver desnaturação e renaturação. IV. A PCR em tempo real permite a amplificação, detecção e quantificação do DNA em duas etapas, minimiza o risco de contaminação, contudo confere menor precisão e reprodutibilidade, quando comparada à PCR convencional. Estão CORRETAS, apenas: II, III e IV. I e II. I, III e IV. II e III. III e IV. Explicação: A especificidade da PCR convencional depende diretamente dos primers utilizados e a contaminação pode ocorrer por pequenos descuidos de pipetagem e contaminação com contato superfície contaminada com amplicons ou amostra biológica. SEQUENCIAMENTO, CLONAGEM E TÉCNICAS DE HIBRIDIZAÇÃO 8. Juliana, é biomédica e ingressou no mestrado para trabalhar com biologia molecular. Seu projeto engloba a identificação de sequências específicas do genoma bacteriano correlacionado com mecanismos de virulência. Para detectar estas sequências ela deve recorrer a técnicas moleculares de hibridização. Que técnica que você sugeriria para ela? https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio_ensineme.asp PCR Western Blotting Nothern Blotting Clonagem molecular Southern Blotting Explicação: Southern Blotting é uma técnica molecular que serve para verificar se uma determinada sequência de DNA está ou não presente em uma amostra analisada. 9. (INPI - 2006) Considerando os princípios da clonagem molecular, assinale a opção correta. O plasmídeo é um tipo de vetor capaz de se comportar como um cromossomo de levedura. Bactérias selvagens são aquelas que receberam o DNA recombinante, portanto possuem um genoma diferente da bactéria parental. Nos experimentos de clonagem molecular, são utilizadas enzimas de restrição capazes de restaurar a estrutura linear dos plasmídeos. Nos experimentos de clonagem molecular, são utilizadas enzimas de restrição capazes de restaurar a estrutura anelar de plasmídeos. As técnicas de clonagem molecular envolvem a introdução de DNA exógeno em um organismo hospedeiro. Explicação: A clonagem é uma técnica na qual o DNA exógeno é inserido em um vetor e incorporado em uma bactéria ou célula eucariota para replicação. 10. (IADES - 2016) Com relação ao sequenciamento de DNA, assinale a alternativa correta. Os nucleotídeos empregados nessa técnica são quimicamente modificados de forma que não apresentam um terminal hidroxila (3¿-OH), impedindo a inserção de um novo nucleotídeo pela DNA polimerase. Os métodos de sequenciamento têm base na produção de fragmentos de DNA de comprimento crescente, que começam em um ponto comum e possuem todos os quatro tipos de nucleotídeos nas respectivas extremidades. O método de Sanger revolucionou o sequenciamento de DNA pela não utilização de substâncias radioativas marcando os ddNTPs, e ficou conhecido como sequenciamento da segunda geração. Após o término da reação de sequenciamento, ela é submetida à eletroforese capilar. Todos os fragmentos recém-sintetizados, cada um terminado em um nucleotídeo https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio_ensineme.asp https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio_ensineme.asp diferente e cada um marcado com um diferente fluoróforo, são separados pelas respectivas cores. Após a etapa de desnaturação do DNA, é colocado um primer na extremidade 5¿ de uma das cadeias e, com a ajuda de uma DNA polimerase, sintetiza-se a cadeia complementar. Explicação: No método de Sanger, a adição de ddNTPs a cadeia em formação leva a interrupção da síntese de DNA gerando fragmentos de tamanhos diversos INTRODUÇÃO À BIOLOGIA MOLECULAR 1. (2013 - VUNESP) Análise a figura. Pode-se afirmar corretamente que a figura representa o mecanismo de tradução. translocação cromossômica. metilação do DNA. recombinação homóloga. splicing alternativo. Explicação: O splicing alternativo é um mecanismo de regulação gênica pós transcricional em que durante o splicing os genes podem ser ¿emendados¿ de maneiras diferentes codificando diferentes produtos. SEQUENCIAMENTO, CLONAGEM E TÉCNICAS DE HIBRIDIZAÇÃO 2. Juliana, é biomédica e ingressou no mestrado para trabalhar com biologia molecular. Seu projeto engloba a identificaçãode sequências específicas do genoma bacteriano correlacionado com mecanismos de virulência. Para detectar estas sequências ela deve recorrer a técnicas moleculares de hibridização. Que técnica que você sugeriria para ela? https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio_ensineme.asp https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio_ensineme.asp Nothern Blotting Western Blotting Clonagem molecular PCR Southern Blotting Explicação: Southern Blotting é uma técnica molecular que serve para verificar se uma determinada sequência de DNA está ou não presente em uma amostra analisada. (FAU, 2018) Na coleta e transporte de amostras para testes moleculares com fins diagnósticos, deve-se considerar a amostra potencialmente contaminada e utilizar precauções de biossegurança. No caso de amostra de aspirada de medula óssea utiliza- se uma seringa com EDTA, e a equipe responsável pelo processamento deve ser avisada assim que a amostra chegar ao laboratório. Para a extração de DNA, o aspirado de medula óssea deve: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS SDE4579_202003461458_ESM Aluno: GABRIELA OZOTÉRIO SANTOS RIBEIRO Matr.: 202003461458 Disc.: PLATAF.MOL.AT.BIOL. 2021.1 - F (G) / EX Prezado (a) Aluno(a), Você fará agora seu TESTE DE CONHECIMENTO! Lembre-se que este exercício é opcional, mas não valerá ponto para sua avaliação. O mesmo será composto de questões de múltipla escolha. Após responde cada questão, você terá acesso ao gabarito comentado e/ou à explicação da mesma. Aproveite para se familiarizar com este modelo de questões que será usado na sua AV e AVS. INTRODUÇÃO À BIOLOGIA MOLECULAR 1. Ser armazenada com solução tamponada (pH 7,4) e após 2 horas ser centrifugada para eliminação de debris. Ser congelada rapidamente em nitrogênio líquido antes de ser congelada a -70ºC ou inferior, podendo ser mantida assim por até 12 meses. Ser congelada a -20ºC após a coleta sem a necessidade de remoção de eritrócitos, pois o heme liberado dos eritrócitos ajuda na preservação da amostra. Ser armazenado temporariamente por até 72 horas a 2 e 8ºC, antes do processamento. Se o armazenamento for por tempo superior, deve-se remover os eritrócitos e congelar a -20ºC (por até vários meses). Ser mantidas a temperatura ambiente até a análise do material. Eventualmente o material deverá ser aquecido a 37ºC para manter a viabilidade das células e não provocar a hemólise. Explicação: Para garantir a integridade do material que será utilizado para extração do DNA é necessário mantê-lo sobre refrigeração (geladeira) se o armazenamento for curto. Caso o armazenamento for longo deve-se congelá-lo em freezer -20ºC para garantir a integridade celular e do DNA ISOLAMENTO DE ÁCIDOS NUCLEICOS javascript:voltar(); javascript:voltar(); (NUCEPI, 2012) A técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) é uma ferramenta que permite variações metodológicas nos laboratórios de perícia criminal. Nesse sentido, a Nested-PCR utiliza dois pares de iniciadores (primers) com o objetivo de: (UPENET/IAUPE, 2017) Para se fazer uma reação em cadeia de polimerase (PCR), o gene de interesse precisa ter sido clonado e amplificado em bactérias, pois é necessário conhecer os primers, que serão utilizados na amplificação do DNA in vitro. O seu laboratório utiliza a PCR convencional e a em tempo real para estudar a carga amostral de vírus do tabaco. No entanto, você precisa validar os primers mediante PCR convencional. No seu primeiro experimento, houve contaminação do controle negativo e o aparecimento de bandas inespecíficas. No segundo experimento, você obteve sucesso, ao aumentar a temperatura de melting e controlar o uso de reagentes. Agora a PCR em tempo real poderá ser utilizada, reduzindo o tempo de investigação. Sobre isso, analise as proposições a seguir: I - A sequência e a concentração adequada do iniciador são primordiais para a especificidade e eficiência da PCR, se ele for mal concebido poderá resultar em pouco ou nenhum produto, por causa de amplificação inespecífica, bem como a formação de dímeros de iniciadores. II - Na PCR convencional, pode ocorrer contaminação por transferência de reagentes, dispositivos de pipetagem, superfícies de laboratório, material biológico dos próprios pesquisadores, ocasionando resultados falsos. III - A temperatura de melting (Tm) de uma molécula de DNA, na qual metade das moléculas é de cadeia simples e a outra de cadeia dupla, independe do seu tamanho, porém depende da composição de nucleotídeos, visto que produtos amplificados ricos em guanina e citosina precisam de menor Tm, visto terem apenas duas pontes de hidrogênio e, por isso, é mais fácil haver desnaturação e renaturação. IV - A PCR em tempo real permite à amplificação, detecção e quantificação do DNA em duas etapas, minimiza o risco de contaminação, contudo confere menor precisão e reprodutibilidade, quando comparada à PCR convencional. Estão CORRETAS, apenas: 2. diminuir o consumo de nucleotídeos durante a reação. inibir a amplificação de produtos inespecíficos. diminuir o número de ciclos de amplificação. aumentar a quantidade do produto amplificado. evitar a degradação do produto amplificado. Explicação: O nested PCR é uma variação da PCR convencional utilizada no intuito de aumentar a especificidade da amplificação. Ela consiste na amplificação de um fragmento especifico utilizando mais de um par de primers, sendo um par anelado mais externamente a sequência alvo e um interno ¿pegando¿ somente a sequência alvo. 3. II e III. I, III e IV. III e IV. II, III e IV. I e II. (CESPE-2010 adaptada) A técnica de PCR (reação em cadeia de polimerase), a mais utilizada para amplificação (clonagem) do DNA in vitro, revolucionou o acesso a informações genéticas. Com relação a essa técnica, pode-se afirmar que: No operon lac durante o controle da expressão genética em procariotas, se a lactose estiver presente, acontece: (CESPE, 2016 - adaptada) A respeito de eletroforese, uma metodologia amplamente empregada para separação, isolamento, análise e manipulação dos ácidos nucleicos, assinale a opção correta. Explicação: A PCR convencional é mais propensa a contaminação do que a PCR em tempo real, pois existem mais etapas de pipetagem, transferência de produtos e o processamento dos resultados pós PCR. A eficácia da PCR depende diretamente do primer, uma vez que ele garante a especificidade da reação. 4. A PCR necessita ser acompanhada de um método de purificação para separar o fragmento amplificado do restante do genoma. Na PCR, os primers (iniciadores) se hibridam com moléculas de DNA fita dupla. A PCR também pode ser aplicada na análise de proteínas. Com a PCR, a enzima Taq polimerase é capaz de manter sua atividade mesmo nas altas temperaturas necessárias para desnaturar a molécula de DNA. Com a PCR, a clonagem molecular necessita de 48 a 72 horas para ser executada. Explicação: Na amplificação do DNA in vitro, chamada de reação em cadeia da polimerase (em inglês, polymerase chain reaction ¿ PCR), a abertura do DNA em fitas simples é feita através de calor. Para isso, utilizamos uma enzima termorresistente chamada de Taq polimerase. Além disso, usamos pequenas sequências de nucleotídeos em fitas simples e complementares à sequência-alvo do DNA a ser amplificado. Essas sequências sintéticas são chamadas de iniciadores ou oligonucleotídeos (oligo = poucos), algo em torno de 20 nucleotídeos, que, em inglês, são chamados de primers. 5. a lactose se liga à RNA polimerase, que então se liga ao promotor e transcreve os genes necessários. a lactose se liga ao repressor, alterando a sua forma para que não se ligue ao operador e RNA polimerase comece a transcrição dos genes necessários a partir do promotor. a lactose se liga ao lacO, alterando a sua forma para que possa se ligar ao operador e iniciar a transcrição dos genes necessários. a lactosese liga ao óperon lactose, o que atrai RNA polimerase e em seguida, inicia a transcrição dos genes necessários. a lactose se liga ao repressor, alterando a sua forma para que possa se ligar ao operador e os genes estruturais não são expressos. Explicação: O operon lac só é ativado na presença de lactose, pois a mesma se liga ao repressor do operon - que impede a sua transcrição- deixando seus genes acessíveis a transcrição. 6. (IF- Farroupilha, 2016) O processo de extração e a purificação do DNA genômico compreende vários passos: Diego está iniciando sua vida profissional como técnico de laboratório em um laboratório molecular. Sua chefe, a biomédica Lais, solicitou que ele corresse um gel para que juntos pudessem analisar o resultado da PCR. Para realizar essa metodologia Diego confeccionou: A eletroforese consiste na migração das partículas de uma solução coloidal sob a influência de um campo magnético onde a polaridade negativa atrai as moléculas. A quantificação de DNA em gel de agarose ou acrilamida é uma técnica de menor precisão, comparada a fluorimetria sendo utilizada como instrumento para averiguação de êxito na etapa de extração. Os ácidos nucleicos possuem uma carga geral total positiva, devido aos seus grupamentos fosfato do arcabouço e, consequentemente, quando aplicados em um gel de agarose ou poliacrilamida, migram em direção ao ânodo. A identificação dos fragmentos amplificados de DNA não pode ser realizada em gel de poliacrilamida. A eletroforese em gel de agarose é usada para separar proteínas de tamanhos diferentes, que podem ser detectadas por fluorescência. Explicação: A fluorimetria é uma técnica quantitativa e altamente específica para quantificação de ácidos nucleicos pois os fluorocromos se ligam especificamente as moléculas de DNA ou RNA permitindo a contabilização, diferente do que acontece na eletroforese onde a quantificação é obtida por uma comparação da emissão de fluorescência da molécula alvo e de uma amostra de concentração conhecida, ou seja é feita de maneira indireta. 7. Lise das células, extração de lipídeos e desoxiribonucleicos e precipitação do DNA. Lise das células, centrifugação e ressuspensão do DNA. Lise das células, extração das proteínas mais RNA e precipitação do DNA. Quebra de lipídeos, precipitação do RNA e lise das proteínas. Lise das células, extração de ácidos desoxiribonucleicos e precipitação do RNA. Explicação: Para que ocorra o isolamento do DNA é necessário primeiramente promover a ruptura do envoltório celular e nuclear com a quebra de lípideos para expor os conteúdo ao plasma. Após esse processo é necessário fazer a remoção de moléculas contaminantes que se encontram naquele meio: proteínas, carboidratos e RNA. Por conseguinte é necessitário precipitar esse DNA no intuito de coletá-lo de forma especifica e garantir pureza da extração. AMPLIFICAÇÃO IN VITRO DE DNA 8. um gel de gelatina onde ocorrerá a separação de fragmentos genômicos de acordo com o tamanho e a velocidade de migração em direção ao polo negativo. Os fragmentos podem ser visualizados em luz UV após a adição do brometo de etidio no gel. Uma membrana de nitrocelulose onde ocorrerá a corrida dos fragmentos de acordo com a carga e tamanho. A visualização dos fragmentos se dá em luz UV após a associação com intercalante de DNA. (INPI - 2006) Considerando os princípios da clonagem molecular, assinale a opção correta. Juliana, é biomédica e ingressou no mestrado para trabalhar com biologia molecular. Seu projeto engloba a identificação de sequências específicas do genoma bacteriano correlacionado com mecanismos de virulência. Para detectar estas sequências ela deve recorrer a técnicas moleculares de hibridização. Que técnica que você sugeriria para ela? um gel de gelatina para fazer transferência do DNA para uma membrana de nitrocelulose onde ocorrerá a separação de fragmentos genômicos de acordo com a velocidade e carga. um gel de agarose onde ocorrerá a separação de fragmentos genômicos de acordo com com tamanho e carga. Os fragmentos podem ser visualizados em luz UV após a adição do brometo de etidio no gel. um gel de agarose que servirá de matriz para corrida dos fragmentos de diferentes tamanhos de acordo com tamanho e carga. Estes fragmentos são fluorescentes e podem ser visualizados no microscópio após a corrida. Explicação: A eletroforese é uma etapa pós PCR necessária para visualização da amplificação dos fragmentos alvos. Para que ela ocorra é necessário que a amostra seja adicionada a uma matriz (gel agarose), onde os fragmentos serão separados por uma corrente elétrica de acordo com seu tamanho e carga. Após a corrida é adicionado ao gel um intercalante de DNA para que os fragmentos possam ser visualizados ao receberem luz UV. SEQUENCIAMENTO, CLONAGEM E TÉCNICAS DE HIBRIDIZAÇÃO 9. Nos experimentos de clonagem molecular, são utilizadas enzimas de restrição capazes de restaurar a estrutura anelar de plasmídeos. As técnicas de clonagem molecular envolvem a introdução de DNA exógeno em um organismo hospedeiro. Nos experimentos de clonagem molecular, são utilizadas enzimas de restrição capazes de restaurar a estrutura linear dos plasmídeos. O plasmídeo é um tipo de vetor capaz de se comportar como um cromossomo de levedura. Bactérias selvagens são aquelas que receberam o DNA recombinante, portanto possuem um genoma diferente da bactéria parental. Explicação: A clonagem é uma técnica na qual o DNA exógeno é inserido em um vetor e incorporado em uma bactéria ou célula eucariota para replicação. 10. Western Blotting Clonagem molecular Southern Blotting PCR Nothern Blotting Explicação: Southern Blotting é uma técnica molecular que serve para verificar se uma determinada sequência de DNA está ou não presente em uma amostra analisada. Não Respondida Não Gravada Gravada Exercício inciado em 02/04/2021 09:56:33. 01/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=6769656&user_cod=2739462&matr_integracao=202003444741 1/5 Com relação às proteínas regulatórias é correto afirmar que: (CESPE, 2013) A regulação da expressão gênica resulta em respostas fisiológicas bastante variadas nos diversos organismos, como o desaparecimento da cauda em girinos e a utilização de determinados tipos de açúcares (carboidratos) em bactérias. Acerca desse assunto, assinale a opção correta. PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Lupa Calc. SDE4579_202003444741_ESM Aluno: DAIANA DA SILVA SIQUEIRA Matr.: 202003444741 Disc.: PLATAF.MOL.AT.BIOL. 2021.1 - F (G) / EX Prezado (a) Aluno(a), Você fará agora seu TESTE DE CONHECIMENTO! Lembre-se que este exercício é opcional, mas não valerá ponto para sua avaliação. O mesmo será composto de questões de múltipla escolha. Após responde cada questão, você terá acesso ao gabarito comentado e/ou à explicação da mesma. Aproveite para se familiarizar com este modelo de questões que será usado na sua AV e AVS. INTRODUÇÃO À BIOLOGIA MOLECULAR 1. atuam para substituir a RNA polimerase na ativação da expressão gênica. sempre se ligam aos sítios regulatórios de um promotor para ativar ou reprimir diretamente a tradução de um gene ou óperon. incluem ativadores transcricionais que se ligam em sítios ativadores quando combinados com uma molécula indutora não protéica. excluem as proteínas repressoras. apenas se ligam aos sítios regulatórios de um promotor quando combinados com moléculas indutoras de origem proteica. Explicação: O mecanismo de expressão gênica pode necessitar de moléculas ativadores que se ligam aos sítios ativadores dos genes, permitindo assim sua transcrição. 2. O sistema operon trp (triptofano) pode ser ativado em humanos por uma dieta rica em triptofano, como, por exemplo, o consumo da carne de peru A acetilação e a desacetilação de histonas são processos que influenciam no controle javascript:voltar(); javascript:voltar();javascript:diminui(); javascript:aumenta(); javascript:calculadora_on(); 01/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=6769656&user_cod=2739462&matr_integracao=202003444741 2/5 Em relação aos genomas bacterianos podemos afirmar que: É um componente DESNECESSÁRIO para a síntese in vitro da primeira fita de cDNA: da expressão gênica. A acetilação, em geral, promove a transcrição de genes e desacetilação a inibe Metilações podem ocorrer tanto no DNA quanto em histonas, promovidas pela ação de uma mesma enzima. Em ambos os casos, o resultado é a diminuição da transcrição do gene localizado naquela parte do DNA Em bactérias, um exemplo de controle da expressão gênica é o exercido pelo operon lac, que é ativado quando a lactose presente no meio induz a ligação de um coativador à região promotora do gene da lactase A associação do DNA com proteínas chamadas histonas não exerce papel regulatório sobre a transcrição de genes em eucariotos, mas sim, na manutenção da integridade do material genético Explicação: O processo de regulação gênica em eucariotos é complexo e pode ser realizado de diferentes formas, uma delas é acetilação e desacetilação de histonas que promove respectivamente a ativação e inibição de genes. 3. eles apresentam pelo menos um cromossomo, podendo ser circular ou linear, com uma origem de replicação e uma região de término cada. o menor genoma tem um tamanho de 580 mil pares de bases ou 470 genes, além de elementos móveis extracromossomais. eles apresentam pelo menos um cromossomo circular, com uma origem de replicação e uma região de término cada, e elementos móveis extracromossomais. eles apresentam pelo menos um cromossomo, podendo ser circular ou linear, com uma origem de replicação e uma região de término cada, regiões intergênicas, além de elementos móveis extracromossomais. eles apresentam apenas um cromossomo, uma origem de replicação e uma região de término, além de elementos móveis extracromossomais. Explicação: O genoma bacteriano é constituído por um ou mais cromossomos que podem lineares ou circulares, além de apresentar genes extracromossomomiais encontrados em plasmídeos. ISOLAMENTO DE ÁCIDOS NUCLEICOS 4. DNA polimerase RNA-dependente. Tampão. Molde. nucleotídeo. DNA polimerase DNA-dependente Explicação: A DNA polimerase DNA-dependente usa DNA como molde para confecção de novas fitas de DNA, ela é utilizada no processo de replicação de DNA in vivo ou in vitro. 01/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=6769656&user_cod=2739462&matr_integracao=202003444741 3/5 A seleção da população de uma pesquisa experimental é um importante passo para estudo, uma vez que a seleção dos participantes deve ser condizente com a hipótese a ser testada. A respeito dessa seleção, marque a opção correta: Qual das características a seguir é correta em relação à enzima DNA polimerase usada durante a reação de PCR? Gabriela irá realizar a técnica de eletroforese para avaliar qualitativamente e quantitativa o RNA extraído de células bucais que será utilizado no seu projeto de mestrado. Porém, Gabriela tem dúvidas quanto ao princípio e aplicação das técnicas. Marque a alternativa da melhor explicação que você daria a Gabriela. 5. A amostragem não probabilística ocorre quando a probabilidade da seleção de cada participante não é conhecida, a seleção da amostra depende do julgamento do pesquisador ou conveniência. A amostragem ao acaso ocorre quando os indivíduos são selecionados aleatoriamente, ou seja, de forma não probabilística. Existem basicamente 2 tipos de amostragem: probabilística e ao acaso. Na amostragem probabilística, são selecionados participantes da população com maior probabilidade de serem selecionados devido a características intrínsecas do indivíduo. Exemplos de amostragem não probabilística são amostragem aleatória e amostragem sistemática. Explicação: Na amostragem não probabilística não se sabe a probabilidade de um indivíduo ser selecionado, desta forma os critérios estabelecidos serão do pesquisador como julgamento ou conveniência. 6. Baixa fidelidade Resistência ao calor Capacidade de degradar cadeias de oligonucleotídeos Aceitação apenas de nucleotídeos difosfatos Desnaturação a 37 ºC Explicação: Assim como a replicação de DNA em um organismo, a PCR requer uma enzima DNA polimerase que faça novas fitas de DNA usando as existentes como moldes. A DNA polimerase tipicamente usada na PCR é chamada de Taq polimerase, em homenagem à bactéria resistente ao calor da qual ela foi isolada (Thermus aquaticus). T. aquaticus vive em fontes termais e de água quente. Sua DNA polimerase é bastante estável ao calor e é mais ativa à 70 °C (temperatura em que as DNA polimerases humanas ou de E. coli seriam disfuncionais). Essa estabilidade ao calor torna a Taq polimerase ideal para PCRs. Como estudado, a alta temperatura é usada repetidamente na PCR para desnaturar o DNA molde, isto é, separar suas fitas. 7. A eletroforese é uma técnica que utiliza corantes fluorescente como iodina para detectar e quantificar substâncias. A eletroforese é técnica que utiliza campo elétrico para separar moléculas de acordo com o peso molecular e afinidade. A eletroforese é técnica que utiliza campo elétrico para separar moléculas de acordo com carga e peso molecular A eletroforese é uma técnica ótica que associa a quantidade de luz transmitida com 01/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=6769656&user_cod=2739462&matr_integracao=202003444741 4/5 Para realizar técnicas em biologia molecular, é primordial a realização da quantificação dos ácidos nucleicos recém extraído. Sobre o procedimento de quantificação, marque a alternativa CORRETA: A coleta e o armazenamento de amostras destinadas as técnicas de biologia molecular devem ser realizadas com muito cuidado devido ao alto risco de degradação das moléculas de ácidos nucleicos. A respeito destes processos marque a alternativa CORRETA. a quantidade da substância na amostra. A eletroforese é uma técnica ótica que associa a quantidade de luz absorvida com a quantidade da substância na amostra. Explicação: A eletroforese é técnica que utiliza campo elétrico para separar moléculas de acordo com carga e peso molecular 8. A espectrofotometria é o método de análises magnética que se baseia na medida quantitativa da absorção da luz pelas soluções, onde a concentração na solução da substância absorvente é proporcional à quantidade de luz absorvida. A fluorometria é uma técnica sensível de quantificação que se baseia na detecção de luz emitida pelas moléculas fluorogênicas. Na espectrofotometria, o comprimento de onda usado para leitura é de 280nm. A fluorometria é um método menos sensível que a espectrofotometria para quantificação e apesar disso ela possui mais baixo custo. A eletroforese quantitativa é um método de alta precisão quantitativa que é baseado na corrida do ácido nucleico de acordo com sua massa molecular e ph. Explicação: A fluorometria utiliza substancia fluorogênicas para quantificar moléculas de ácidos nucleicos 9. Para amostras de sangue e de medula as amostras destinadas a extração do RNA devem ser armazenadas em freezer -70ºC; A coleta de tecido proveniente de biopsia pode ser realizada por qualquer profissional de saúde Independente do tipo de amostra, a coleta de espécimes clínicos destinados a extração de DNA e RNA devem ser realizadas com estabilizadores. Não há necessidade de transportar as amostras coletas em caixas isotérmicas com gelo seco. As amostras de tecido destinadas a extração do DNA devem obrigatoriamente ser armazenadas em nitrogênio líquido. Explicação: O RNA por ser uma molécula de fita única, é mais instável do que o DNA necessitando de temperaturas mais baixas de armazenamento para evitar degradação. 01/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=6769656&user_cod=2739462&matr_integracao=2020034447415/5 (IADES - 2016) Com relação ao sequenciamento de DNA, assinale a alternativa correta. SEQUENCIAMENTO, CLONAGEM E TÉCNICAS DE HIBRIDIZAÇÃO 10. O método de Sanger revolucionou o sequenciamento de DNA pela não utilização de substâncias radioativas marcando os ddNTPs, e ficou conhecido como sequenciamento da segunda geração. Após o término da reação de sequenciamento, ela é submetida à eletroforese capilar. Todos os fragmentos recém-sintetizados, cada um terminado em um nucleotídeo diferente e cada um marcado com um diferente fluoróforo, são separados pelas respectivas cores. Os métodos de sequenciamento têm base na produção de fragmentos de DNA de comprimento crescente, que começam em um ponto comum e possuem todos os quatro tipos de nucleotídeos nas respectivas extremidades. Após a etapa de desnaturação do DNA, é colocado um primer na extremidade 5¿ de uma das cadeias e, com a ajuda de uma DNA polimerase, sintetiza-se a cadeia complementar. Os nucleotídeos empregados nessa técnica são quimicamente modificados de forma que não apresentam um terminal hidroxila (3¿-OH), impedindo a inserção de um novo nucleotídeo pela DNA polimerase. Explicação: No método de Sanger, a adição de ddNTPs a cadeia em formação leva a interrupção da síntese de DNA gerando fragmentos de tamanhos diversos Não Respondida Não Gravada Gravada Exercício inciado em 02/03/2021 16:14:46. 02/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=13539312&user_cod=2800661&matr_integracao=202003632341 1/6 No operon lac durante o controle da expressão genética em procariotos, se a lactose estiver presente, acontece: Define-se genoma como o conjunto de todo o material genético de uma espécie, que, na maioria dos casos, são as moléculas de DNA. Durante muito tempo, especulou-se sobre a possível relação entre o tamanho do genoma ¿ medido pelo número de pares de bases (pb) ¿, o número de proteínas produzidas e a complexidade do organismo. As primeiras respostas começam a aparecer e já deixam claro que essa relação não existe, como mostra a tabela abaixo. PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Lupa Calc. SDE4579_202003632341_ESM Aluno: MARY HILDEBRANDT Matr.: 202003632341 Disc.: PLATAF.MOL.AT.BIOL. 2021.1 - F (G) / EX Prezado (a) Aluno(a), Você fará agora seu TESTE DE CONHECIMENTO! Lembre-se que este exercício é opcional, mas não valerá ponto para sua avaliação. O mesmo será composto de questões de múltipla escolha. Após responde cada questão, você terá acesso ao gabarito comentado e/ou à explicação da mesma. Aproveite para se familiarizar com este modelo de questões que será usado na sua AV e AVS. INTRODUÇÃO À BIOLOGIA MOLECULAR 1. a lactose se liga ao lacO, alterando a sua forma para que possa se ligar ao operador e iniciar a transcrição dos genes necessários. a lactose se liga ao repressor, alterando a sua forma para que possa se ligar ao operador e os genes estruturais não são expressos. a lactose se liga ao repressor, alterando a sua forma para que não se ligue ao operador e RNA polimerase comece a transcrição dos genes necessários a partir do promotor. a lactose se liga à RNA polimerase, que então se liga ao promotor e transcreve os genes necessários. a lactose se liga ao óperon lactose, o que atrai RNA polimerase e em seguida, inicia a transcrição dos genes necessários. Explicação: O operon lac só é ativado na presença de lactose, pois a mesma se liga ao repressor do operon - que impede a sua transcrição- deixando seus genes acessíveis a transcrição. 2. javascript:voltar(); javascript:voltar(); javascript:diminui(); javascript:aumenta(); javascript:calculadora_on(); 02/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=13539312&user_cod=2800661&matr_integracao=202003632341 2/6 (IDECAN, 2016) Sobre os dois tipos de cromatina, um dos componentes encontrados no núcleo, analise as afirmativas a seguir. I. A eucromatina é elétron‐densa, aparece como grânulos grosseiros e é bem visível no microscópio óptico. II. A heterocromatina é inativa porque nela a hélice dupla de DNA está muito compactada, o que impede a transcrição dos genes. III. A heterocromatina aparece granulosa e clara entre os grumos de eucromatina. IV. Na eucromatina, o filamento de DNA não está condensado e tem condições de transcrever genes. A eucromatina significa cromatina ativa, sendo mais abundante nas células que estão produzindo muitas proteínas. Estão corretas apenas as afirmativas: (CESPE, 2013) A regulação da expressão gênica resulta em respostas fisiológicas o conjunto de genes de um organismo define o seu DNA. o tamanho do genoma não é diretamente proporcional ao número de proteínas produzidas pelo organismo. genomas com mais de um bilhão de pares de bases são encontrados apenas nos seres vertebrados. a produção de proteínas não está vinculada à molécula de DNA. quanto mais complexo o organismo, maior o tamanho de seu genoma. Explicação: Não existe relação direta entre o tamanho do genoma e quantidade de proteína, uma vez que um organismo pode apresentar um longo genoma e poucas proteínas codificadas (ex: Rattus novergicus) devido a grande quantidade de sequencias de DNA que não são genes. 3. I, III e V. I, II e IV. I e II II, III e IV. II, IV e V. Explicação: A heterocromática é conhecida como a cromatina densa, pois ela apresenta-se de forma densa e granulosa e desta forma encontra-se inativa, não permitindo a transcrição dos genes. Já a eucromatina é conhecida como frouxa e desta forma os seus genes não estão condensados sendo acessíveis a transcrição. 4. 02/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=13539312&user_cod=2800661&matr_integracao=202003632341 3/6 bastante variadas nos diversos organismos, como o desaparecimento da cauda em girinos e a utilização de determinados tipos de açúcares (carboidratos) em bactérias. Acerca desse assunto, assinale a opção correta. Em relação aos genomas bacterianos podemos afirmar que: A seleção da população de uma pesquisa experimental é um importante passo para estudo, uma vez que a seleção dos participantes deve ser condizente com a hipótese a ser testada. A respeito dessa seleção, marque a opção correta: A associação do DNA com proteínas chamadas histonas não exerce papel regulatório sobre a transcrição de genes em eucariotos, mas sim, na manutenção da integridade do material genético O sistema operon trp (triptofano) pode ser ativado em humanos por uma dieta rica em triptofano, como, por exemplo, o consumo da carne de peru Em bactérias, um exemplo de controle da expressão gênica é o exercido pelo operon lac, que é ativado quando a lactose presente no meio induz a ligação de um coativador à região promotora do gene da lactase Metilações podem ocorrer tanto no DNA quanto em histonas, promovidas pela ação de uma mesma enzima. Em ambos os casos, o resultado é a diminuição da transcrição do gene localizado naquela parte do DNA A acetilação e a desacetilação de histonas são processos que influenciam no controle da expressão gênica. A acetilação, em geral, promove a transcrição de genes e desacetilação a inibe Explicação: O processo de regulação gênica em eucariotos é complexo e pode ser realizado de diferentes formas, uma delas é acetilação e desacetilação de histonas que promove respectivamente a ativação e inibição de genes. 5. eles apresentam pelo menos um cromossomo, podendo ser circular ou linear, com uma origem de replicação e uma região de término cada, regiões intergênicas, além de elementos móveis extracromossomais. eles apresentam pelo menos um cromossomo circular, com uma origem de replicação e uma região de término cada, e elementos móveis extracromossomais. o menor genoma tem um tamanho de 580 mil pares de bases ou 470 genes, além de elementos móveis extracromossomais. eles apresentam apenas um cromossomo, uma origem de replicação e uma região de término, alémde elementos móveis extracromossomais. eles apresentam pelo menos um cromossomo, podendo ser circular ou linear, com uma origem de replicação e uma região de término cada. Explicação: O genoma bacteriano é constituído por um ou mais cromossomos que podem lineares ou circulares, além de apresentar genes extracromossomomiais encontrados em plasmídeos. ISOLAMENTO DE ÁCIDOS NUCLEICOS 6. A amostragem não probabilística ocorre quando a probabilidade da seleção de cada participante não é conhecida, a seleção da amostra depende do julgamento do 02/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=13539312&user_cod=2800661&matr_integracao=202003632341 4/6 A coleta e o armazenamento de amostras destinadas as técnicas de biologia molecular devem ser realizadas com muito cuidado devido ao alto risco de degradação das moléculas de ácidos nucleicos. A respeito destes processos marque a alternativa CORRETA. Gabriela irá realizar a técnica de eletroforese para avaliar qualitativamente e quantitativa o RNA extraído de células bucais que será utilizado no seu projeto de mestrado. Porém, Gabriela tem dúvidas quanto ao princípio e aplicação das técnicas. Marque a alternativa da melhor explicação que você daria a Gabriela. pesquisador ou conveniência. Exemplos de amostragem não probabilística são amostragem aleatória e amostragem sistemática. Existem basicamente 2 tipos de amostragem: probabilística e ao acaso. Na amostragem probabilística, são selecionados participantes da população com maior probabilidade de serem selecionados devido a características intrínsecas do indivíduo. A amostragem ao acaso ocorre quando os indivíduos são selecionados aleatoriamente, ou seja, de forma não probabilística. Explicação: Na amostragem não probabilística não se sabe a probabilidade de um indivíduo ser selecionado, desta forma os critérios estabelecidos serão do pesquisador como julgamento ou conveniência. 7. Não há necessidade de transportar as amostras coletas em caixas isotérmicas com gelo seco. Para amostras de sangue e de medula as amostras destinadas a extração do RNA devem ser armazenadas em freezer -70ºC; As amostras de tecido destinadas a extração do DNA devem obrigatoriamente ser armazenadas em nitrogênio líquido. Independente do tipo de amostra, a coleta de espécimes clínicos destinados a extração de DNA e RNA devem ser realizadas com estabilizadores. A coleta de tecido proveniente de biopsia pode ser realizada por qualquer profissional de saúde Explicação: O RNA por ser uma molécula de fita única, é mais instável do que o DNA necessitando de temperaturas mais baixas de armazenamento para evitar degradação. 8. A eletroforese é uma técnica que utiliza corantes fluorescente como iodina para detectar e quantificar substâncias. A eletroforese é uma técnica ótica que associa a quantidade de luz transmitida com a quantidade da substância na amostra. A eletroforese é técnica que utiliza campo elétrico para separar moléculas de acordo com o peso molecular e afinidade. A eletroforese é uma técnica ótica que associa a quantidade de luz absorvida com a quantidade da substância na amostra. A eletroforese é técnica que utiliza campo elétrico para separar moléculas de acordo com carga e peso molecular 02/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=13539312&user_cod=2800661&matr_integracao=202003632341 5/6 (UPENET/IAUPE, 2017) Para se fazer uma reação em cadeia de polimerase (PCR), o gene de interesse precisa ter sido clonado e amplificado em bactérias, pois é necessário conhecer os primers, que serão utilizados na amplificação do DNA in vitro. O seu laboratório utiliza a PCR convencional e a em tempo real para estudar a carga amostral de vírus do tabaco. No entanto, você precisa validar os primers mediante PCR convencional. No seu primeiro experimento, houve contaminação do controle negativo e o aparecimento de bandas inespecíficas. No segundo experimento, você obteve sucesso, ao aumentar a temperatura de melting e controlar o uso de reagentes. Agora a PCR em tempo real poderá ser utilizada, reduzindo o tempo de investigação. Sobre isso, analise as proposições a seguir: I. A sequência e a concentração adequada do iniciador são primordiais para a especificidade e eficiência da PCR, se ele for mal concebido poderá resultar em pouco ou nenhum produto, por causa de amplificação inespecífica, bem como a formação de dímeros de iniciadores. II. Na PCR convencional, pode ocorrer contaminação por transferência de reagentes, dispositivos de pipetagem, superfícies de laboratório, material biológico dos próprios pesquisadores, ocasionando resultados falsos. III. A temperatura de melting (Tm) de uma molécula de DNA, na qual metade das moléculas é de cadeia simples e a outra de cadeia dupla, independe do seu tamanho, porém depende da composição de nucleotídeos, visto que produtos amplificados ricos em guanina e citosina precisam de menor Tm, visto terem apenas duas pontes de hidrogênio e, por isso, é mais fácil haver desnaturação e renaturação. IV. A PCR em tempo real permite a amplificação, detecção e quantificação do DNA em duas etapas, minimiza o risco de contaminação, contudo confere menor precisão e reprodutibilidade, quando comparada à PCR convencional. Estão CORRETAS, apenas: Os alimentos transgênicos resultam de um processo de modificação molecular por meio das técnicas de engenharia genética. A obtenção de plantas transgênicas passa por três etapas: obtenção do gene que deve ser incorporado em um vetor para se processar a Explicação: A eletroforese é técnica que utiliza campo elétrico para separar moléculas de acordo com carga e peso molecular AMPLIFICAÇÃO IN VITRO DE DNA 9. III e IV. I, III e IV. II, III e IV. I e II. II e III. Explicação: A especificidade da PCR convencional depende diretamente dos primers utilizados e a contaminação pode ocorrer por pequenos descuidos de pipetagem e contaminação com contato superfície contaminada com amplicons ou amostra biológica. SEQUENCIAMENTO, CLONAGEM E TÉCNICAS DE HIBRIDIZAÇÃO 10. 02/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=13539312&user_cod=2800661&matr_integracao=202003632341 6/6 transformação; introdução do gene na planta receptora; e regeneração da célula em uma nova planta, por meio da cultura de tecidos. I - Os plasmídeos bacterianos são utilizados como vetores de clonagem do gene de interesse para a transformação genética em plantas. II - Os plasmídeos são dependentes do DNA cromossômico para replicação, sendo frequentemente manipulados no processo de transformação gênica. III - Para ser um bom vetor de clonagem, um plasmídeo deve possuir origem de replicação, sítios de clivagem para endonucleases de restrição e um gene que codifique resistência a um antibiótico. É correto o que se afirmar em: II, apenas. II e III, apenas. I e III, apenas. I, apenas. I, II e III. Explicação: Os plasmídeos são moléculas de DNA circular que replicam independentemente e que são utilizadas como vetores de clonagem molecular. Não Respondida Não Gravada Gravada Exercício inciado em 02/04/2021 02:32:24. 08/03/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=40617936&user_cod=2669695&matr_integracao=202002626941 1/4 Na técnica de extração de ácidos nucleicos (DNA/RNA), quais os reagentes que podem ser utilizados? (FIOCRUZ, 2010) Em relação aos genomas bacterianos podemos afirmar que: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Lupa Calc. SDE4579_A1_202002626941_V1 Aluno: JEAN CLÁUDIO NOGUEIRA DA SILVA Matr.: 202002626941 Disc.: PLATAF.MOL.AT.BIOL. 2021.1 - F (G) / EX Prezado (a) Aluno(a), Você fará agora seu TESTE DE CONHECIMENTO! Lembre-se que este exercício é opcional, mas não valerá ponto para sua avaliação. O mesmo será composto de questões de múltipla escolha. Após responde cada questão, você terá acesso ao gabarito comentado e/ouà explicação da mesma. Aproveite para se familiarizar com este modelo de questões que será usado na sua AV e AVS. INTRODUÇÃO À BIOLOGIA MOLECULAR 1. DNAse Detergente Fenol e clorofórmio; Proteinase K Etanol 70% e isopropanol; Explicação: Todos os ítens listados podem ser utilizados para viabilizar a técnica de extração de acidos nucleicos. 2. A) eles apresentam apenas um cromossomo, uma origem de replicação e uma região de término, além de elementos móveis extracromossomais. C) eles apresentam pelo menos um cromossomo circular, com uma origem de replicação e uma região de término cada, e elementos móveis extracromossomais. D) eles apresentam pelo menos um cromossomo, podendo ser circular ou linear, com uma origem de replicação e uma região de término cada, regiões intergênicas, além de elementos móveis extracromossomais. E) o menor genoma tem um tamanho de 580 mil pares de bases ou 470 genes, além de elementos móveis extracromossomais. B) eles apresentam pelo menos um cromossomo, podendo ser circular ou linear, com uma origem de replicação e uma região de término cada. javascript:voltar(); javascript:voltar(); javascript:diminui(); javascript:aumenta(); javascript:calculadora_on(); 08/03/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=40617936&user_cod=2669695&matr_integracao=202002626941 2/4 (SESAU, 2010): O RNA difere quimicamente do DNA por apresentar: São exemplos de ácidos nucleicos: (IBFC, 2013, Perito Criminal/ Biologia): O DNA (ácido desoxirribonucléico) é constituído por uma longa fita dupla de nucleotídeos. O sequenciamento de DNA é um processo que determina a ordem desses nucleotídeos. A fita dupla é formada pelo pareamento das bases. Desta forma, referente ao pareamento desses nucleotídeos, não é correto afirmar: A respeito da quantificação de DNA utilizando espectofotometria, marque a alternativa INCORRETA. 3. ribonucleotídeos e possuir as bases timina e uracila; desoxirribonucleotídeos e possuir a base uracila; ribonucleotídeos e por possuir a base uracila; ribonucleotídeos e possuir a base timina. desoxirribonucleotídeos e por possuir a base timina; Explicação: Desoxirribonucleotídeos e a base nitrogenada timina são encontrados apenas no DNA. 4. Monossacarídeos e dissacarídeos; Timina e uracila. DNA e RNA; Adenina e guanina; Proteínas e lipídios; Explicação: As demais alternativas fornecem exemplos de outras macromoléculas ou bases nitrogenadas. 5. A guanina se pareia com citosina; A guanina se pareia com adenina. As bases dos nucleotídeos são adenina (A), timina (T), guanina (G) e citosina (C); A sequência desse pareamento é responsável pelas características genéticas do homem e de todos os seres vivos; Adenina se pareia com timina; Explicação: O pareamento nucleotídico de guanina é feito única e exclusivamente com citosina. 6. 08/03/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=40617936&user_cod=2669695&matr_integracao=202002626941 3/4 Identifique as principais etapas do protocolo de extração de ácidos nucleicos: O processo de extração do DNA tem como objetivo isolar os ácidos nucleico dos demais componentes celulares. Baseado neste processo marque a alternativa incorreta. Quando a razão das leituras no comprimento 260nm/280nm estão baixas (abaixo de 1,4 aproximadamente) podemos sugerir uma boa qualidade da extração ácido nucleico (alta pureza). Na espectrofotometria quanto maior for a absorção de luz pela amostra, maior a concentração de DNA na amostra. A técnica é capaz de determinar as concentrações médias dos ácidos nucléicos DNA ou RNA presentes em uma amostra, bem como sua pureza. O benefício da utilização de análise por espectrofotometria é a capacidade de determinar a pureza da amostra usando o cálculo de razão das leituras no 260 nm/ 280 nm. A quantificação de DNA por espectrofotometria é realizada por medição da quantidade de luz absorvida pelo DNA em solução no comprimento de onda de 260 nm. Explicação: Quando a razão das leituras no 260 nm/ 280 nm é abaixo de 1,4 podemos sugerir a presença de proteínas ou outros contaminantes na amostra de ácido nucleico. 7. Lise celular, Hidratação, Precipitação e Purificação; Precipitação, lise celular, purificação e Hidratação. Hidratação, Purificação, Lise celular e Precipitação. Hidratação, Lise celular, Purificação e Precipitação; Lise celular, Purificação, Precipitação e Hidratação; Explicação: A extração de ácidos nucleicos envolve etapas sequenciais de ruptura celular e exposição do ácido nucleico, seguida da purificação do material de interesse com a remoção de contaminantes. Em seguida, realiza-se a precipitação do alvo e consequente hidratação do mesmo. 8. A primeira etapa da extração é a lise de membranas onde são utilizados substância com ação de um detergente. Durante a extração do DNA é necessária fazer a remoção de outros componentes como proteínas, lipídeos e RNA. Substâncias com ação de precipitação são utilizadas para remoção dos lipídios da amostra A precipitação final do DNA pode ser realizada com etanol ou álcool isopropílico. Na etapa de purificação do DNA são utilizadas substâncias que fazem a remoção de carboidratos e proteínas presente nas amostras, isolando apenas o DNA Explicação: Substâncias com ação de DETERGENTES são utilizadas para remoção dos lipídios da amostra. Não Respondida Não Gravada Gravada 04/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=27078624&user_cod=2706545&matr_integracao=202003097608 1/6 (2012 - FUNIVERSA) Uma nova proposta para estimativa de idade da vítima, que não está ainda em uso, é a avaliação de modificadores epigenéticas. Todos os tecidos de um organismo são afetados pela idade, e esse processo aparentemente está associado a modificações epigenéticas. Trabalho recente com avaliação do perfil de metilação de DNA de determinados genes em diferentes tecidos mostrou que há o que está sendo chamado de ¿assinatura epigenética de idade¿. Com a continuação desses estudos, é provável que, no futuro, seja possível extrapolar a idade de uma vítima pela análise do perfil epigenético de tecidos específicos. Koch C. M. e Wagner W. Epigenetic-aging- signature to determine age in different tissues. 2011 (com adaptações). As modificações epigenéticas descritas no texto estão, portanto, diretamente relacionadas a idade e, quando presentes em um gene, espera-se que ocorra o(a) Define-se genoma como o conjunto de todo o material genético de uma espécie, que, na maioria dos casos, são as moléculas de DNA. Durante muito tempo, especulou-se sobre PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Lupa Calc. SDE4579_202003097608_ESM Aluno: CLEIA FERNANDES DA SILVA Matr.: 202003097608 Disc.: PLATAF.MOL.AT.BIOL. 2021.1 - F (G) / EX Prezado (a) Aluno(a), Você fará agora seu TESTE DE CONHECIMENTO! Lembre-se que este exercício é opcional, mas não valerá ponto para sua avaliação. O mesmo será composto de questões de múltipla escolha. Após responde cada questão, você terá acesso ao gabarito comentado e/ou à explicação da mesma. Aproveite para se familiarizar com este modelo de questões que será usado na sua AV e AVS. INTRODUÇÃO À BIOLOGIA MOLECULAR 1. aumento da taxa de reparo no gene. produção constitutiva do gene. silenciamento do gene. aumento da taxa de transcrição do gene. mutação no gene. Explicação: O silenciamento de genes é um mecanismo epigenético que pode acarretado pela metilação do DNA. 2. javascript:voltar(); javascript:voltar(); javascript:diminui(); javascript:aumenta(); javascript:calculadora_on(); 04/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=27078624&user_cod=2706545&matr_integracao=202003097608 2/6 a possível relação entre o tamanho do genoma