Baixe o app para aproveitar ainda mais
Prévia do material em texto
APOSTILA DE AULAS PRÁTICAS DE BIOQUÍMICA A maior parte das atividades no dia-a-dia de um Bioquímico se desenvolve no laboratório, local adequado para o trabalho de identificação, separação e determinação da quantidade de substâncias bem como, da preparação e obtenção de novas substâncias. Resultados tais que podem ser utilizados para uma série de estudos, entre estes, para a pesquisa de uma doença. Assim, faz-se necessário que tenhamos pelo menos uma idéia de como é um laboratório, como nele trabalhamos, os cuidados que devemos ter e a aparelhagem básica nele existente. SEGURANÇA NO LABORATÓRIO. O laboratório é um recinto construído especialmente para a execução de experiências. Ele deve apresentar instalações de água, gás e eletricidade e deve ser muito bem ventilado e iluminado. A palavra laboratório provem da união de duas palavras latinas: labor = trabalho + oratorium = lugar de reflexão. Assim, o laboratório é um local de muito trabalho e muita concentração. Um laboratório pode tornar-se um lugar muito perigoso, devido ao uso inadequado dos materiais e equipamentos nele existentes. Por isso, é importante que se conheça algumas normas de segurança. A maior parte dos acidentes que podem ocorrer em um laboratório é provocada pelo desconhecimento das seguintes regras básicas de segurança: a) não colocar livros, sacolas, ferramentas, etc., sobre as bancadas ou bancos; b) não comer, beber ou fumar; lave bem as mãos ao deixar o recinto. c) não correr; manter os acessos desimpedidos; d) manter o local sempre limpo e organizado; e) fechar gavetas e armários logo após o uso. f) usar sempre um avental (jaleco) longo e de mangas longas, feito de algodão, pois fibras sintéticas são altamente inflamáveis. Não use saias, bermudas ou calçados abertos. Pessoas que tenham cabelos longos devem mantê-los presos enquanto estiverem no laboratório. Quando for necessário proteger os olhos, é conveniente usar óculos de proteção. Para proteção das mãos, ao trabalhar com produtos corrosivos, devem-se usar luvas de borracha. É muito perigoso o manuseio de alguns produtos químicos, como inflamáveis (éter, álcool), cancerígenos (benzeno), tóxicos (amônia) e venenosos (cianeto de potássio, sulfato cúprico). Para alertar as pessoas que trabalham nos laboratórios, é conveniente que os produtos contenham símbolos de identificação que seguem normas mundiais. O manuseio de produtos químicos deve ser sempre muito cuidadoso e, para maior segurança, devem-se seguir algumas regras: a) não pegue produtos químicos com as mãos; b) utilize uma espátula limpa para retirar produtos químicos sólidos dos frascos; lave a espátula e guarde-a imediatamente após utilizá-la; retirar dos frascos apenas a quantidade exata de reagente que irá utilizar; feche os frascos imediatamente após o uso; cuide para não trocar as rolhas dos frascos dos reagentes.; c) não prove o "sabor" de nenhum produto químico, a não ser que haja orientação para isso; d) Feche com cuidado as torneiras de gás, evitando o seu escapamento. e) Não deixe o bico de Bunsen acesso com a chama forte, quando não estiver em uso. f) Não trabalhar com substâncias inflamáveis próximo a bico de gás aceso. 1 g) Certificar-se que a pipeta que está limpa, antes de utilizá-la; Nunca pipete líquidos com a boca. Para a sucção de líquidos utilize bulbos de borracha. h) não pegue com as mãos equipamentos ou vidrarias que foram submetidos a um aquecimento e que ainda podem estar quentes; caso isto seja necessário, o faça com luvas de isolamento térmico. i) não use aparelhos de vidro quebrados ou rachados; j) limpe quaisquer respingos imediatamente, caso ocorram; l) lave as mãos logo após cada experiência; m) em caso de acidentes, procure o responsável pelo laboratório. n) Limpe seu local de trabalho ao finalizar a prática. o) Ao ser designado para trabalhar em um determinado laboratório, é imprescindível o conhecimento da localização dos acessórios de segurança. Acessórios de segurança Quando estiver trabalhando em um laboratório, você deve: 1. Localizar os extintores de incêndio e, verificar a que tipo pertencem e que tipo de fogo podem apagar. 2. Localizar as saídas de emergência. 3. Localizar a caixa de primeiros socorros a verificar os tipos de medicamentos existentes a sua utilização. 4. Localizar a chave geral de eletricidade do laboratório e aprender a desligá-la. 5. Localizar o cobertor antifogo. 6. Localizar o lava-olhos mais próximo a verificar se está funcionando Adequadamente. 7. Localizar o chuveiro a verificar se este está funcionando adequadamente. 2 ACIDENTES Qualquer acidente deverá ser comunicado imediatamente ao professor, que orientará o melhor procedimento para resolver o problema. Os acidentes mais comuns estão listados abaixo, acompanhados da melhor forma como encaminha-los: 1. Corte ou ferimento, mesmo leve, deverá ser lavado a desinfetado. 2. Queimadura pequena, produzida por fogo ou material quente, deverá ser tratada com pomada apropriada (picrato de butesin), com vaselina ou com ácido pícrico. 3. Queimadura com ácidos deverá ser lavada com muita água e em seguida com solução diluída de bicarbonato de sódio. 4. Queimadura com álcali (bases) deverá ser lavada com muita água e em seguida com solução diluída de acido acético (vinagre). 5. Ingestão de ácidos - tomar leite de magnésia e procurar um médico. 6. Intoxicação com gases ou vapores - respirar profundamente ao ar livre e procurar um médico. 7. Em qualquer situação, PROCURE MANTER A CALMA. EQUIPAMENTOS BÁSICOS DE LABORATÓRIO As atividades de laboratório exigem por parte dos alunos e professores não só o conhecimento das peças e aparelhos utilizados como também o emprego correto de cada um deles. Portanto, antes de mais nada, é necessário que se observe bem cada uma das peças, memorize sua forma e conheça sua utilidade. Apresentamos a seguir o desenho e a função dos equipamentos mais utilizados no curso de bioquímica: 1) Tubo de ensaio: utilizado principalmente para efetuar reações químicas em pequena escala. 2) Pipeta: equipamento calibrado para medida precisa de volume de líquidos. Existem dois tipos de pipeta: pipeta graduada e volumétrica. A primeira é utilizada para escoar volumes variáveis e a segunda para escoar volumes fixos de líquidos. 3 3) Erlenmeyer: frasco utilizado para aquecer líquidos ou para efetuar titulações. 4) Béquer ou Becher: recipiente com ou sem graduação, utilizado para o preparo de soluções, aquecimento de líquidos, dissoluções de substâncias e medidas grosseiras de volume 5) Cilindro graduado ou proveta: frasco com graduações, destinado a medidas aproximadas de volume de líquidos. 6) Balão volumétrico: São usados para medir com precisão um determinado volume de líquido. Cada um desses balões apresenta uma graduação definida. 4 7) Almofariz e pistilo: Utilizados para a trituração de diferentes materiais. 8) Bastão de vidro: usado para agitação e transferência de líquidos. 9) Suporte ou estante: para tubos de ensaio 10) Pinça de madeira: utilizada para segurar tubos de ensaio, principalmente durante o aquecimento. 11) Kitasato: É utilizado no processo de filtração a vácuo. 5 12) Suporte universal: usado para sustentação de peças 13) Argola: usada como suporte para funil de vidro ou tela metálica. Prende-se ao suporte através de uma mufa. 14) Mufa: usada para prender outras peças ao suporte 15) Funil: utilizado para transferência de líquidos de um frasco para outro ou para efetuar filtrações simples. 16) Funil de Büchner: Acoplado ao kitasato e provido de papel de filtro, é utilizado em filtrações a vácuo. 6 17) Garra: presa ao suporte através da mufa: serve pare segurar várias outras peças. 18) Pró-pipete, pêra, embolo de borracha 19) 1. Bico de Bunsen: fonte de calor destinada ao aquecimento de materiais não inflamáveis. 2. Tela de amianto: tela metálica contendo amianto, utilizada para distribuir uniformementeo calor durante o aquecimento de recipientes de vidro. 3. Tripé: Usado como suporte, principalmente de telas de amianto. 20) Placa de aquecimento e agitação: Utilizado para aquecimento e/ou agitação de líquidos. 21) Espátula: É usada comumente para transferir sólidos de pequenas quantidades. 7 22) Pipeta Pasteur: É usada comumente para transferir líquidos de pequenas quantidades. 23) Pipetador automático: É usada comumente para transferir de forma precisa, volumes pequenos de líquidos. 24) Centrífuga: Utilizado para separação de substâncias baseadas em sua densidade. 25) Pissete: Utilizado para armazenar diferentes líquidos. 8 MEDIDAS DE VOLUME: Nas aulas práticas do curso de bioquímica os equipamentos mais utilizados para medidas de volume de líquidos são: pipeta e proveta. Em qualquer dos equipamentos, a medida de volume é feita comparando-se o nível do liquido com os traços marcados na superfície dos recipientes. A leitura do nível dos líquidos transparentes deve ser feita na parte inferior do menisco, estando a linha de visão do observador perpendicular à escala graduada, para evitar erro de paralaxe. TÉCNICA DE UTILIZAÇÃO DE PIPETAS: As pipetas são equipamentos que fornecem medidas precisas de volume, a 20° C, e são utilizadas para líquidos não tóxicos, não voláteis e não corrosivos. Nunca pipete um líquido com a boca!!! Existem equipamentos (bulbos de borracha) que auxiliam na transferência de líquidos com a pipeta. 9 RELATÓRIO: AULA PRÁTICA 01 Componentes do Grupo: 1) _______________________________________ 2) _______________________________________ 3) _______________________________________ 4) _______________________________________ 5) _______________________________________ 1) Desenhe e cite a função das seguintes vidrarias: a) erlenmeyer b) pipeta graduada c) becher d) proveta e) tripé de ferro e tela de amianto f) balão volumétrico g) tubos de ensaio 2) Qual deve ser sua atitude quando houver: a) Queimadura por ácidos: b) Queimadura por bases 3) Você está trabalhando em grupo com seus colegas, o bico de bunsen está aceso, quando um vazamento de gás provoca um incêndio, derretendo a mangueira de gás e queimando um dos seus colegas. Descreva, em ordem, as atitudes que você tomaria. 4) Cite as vantagens e desvantagens do uso da proveta em relação ao uso da pipeta, para se medir volumes de líquidos. 5) Descreva a forma correta de se realizar a técnica de pipetagem. Como se pipeta 3 mL de um líquido em uma pipeta graduada de 5 mL e, como se pipeta 2 mL de um líquido em uma pipeta graduada de 2 mL, descreva. 10
Compartilhar