COLORACAO GRAM

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TÉCNICA DE COLORAÇÃO DE GRAM 
 
OBJETIVOS DA AULA 
 
- Aprender a técnica da coloração de Gram. 
- Aprender o fundamento da coloração de Gram. 
- Comparar a estrutura da parede celular das bactérias Gram-positivas e Gram- 
negativas. 
 
PROCEDIMENTO 
 
- Fazer um esfregaço de cada cultura bacteriana, fixar pela chama, esperar esfriar, corar pela 
técnica de coloração de Gram. 
 
FIXAÇÃO 
 
- Fixar o esfregaço, “cortando” lentamente a chama por 3 vezes, a fim de que o material fique 
bem aderente à lâmina. A fixação é sempre feita do lado contrário ao esfregaço bacteriano. 
 
TÉCNICA DE COLORAÇÃO DE GRAM 
 
- Fazer um esfregaço bem homogêneo, fixar pelo calor e esperar esfriar; 
- Cobrir com cristal violeta e deixar agir por 1 minuto; 
- Lavar rapidamente em água; 
- Cobrir com solução de lugol por 1 minuto; 
- Lavar em água corrente; 
- Descorar pelo álcool absoluto (aproximadamente 15 segundos); 
- Corar com fucsina por 30 segundos; 
- Lavar em água, secar e observar em objetiva de imersão. 
 
RESULTADO 
- Células Gram-positivas: roxo escuro. 
- Células Gram-negativas: avermelhadas (rosadas). 
 
 
REFERÊNCIAS 
 
Jorge, Antonio Olavo Cardoso. Microbiologia e Imunologia Oral. Rio de Janeiro: Elsevier, 
2012. 384p. 
Jorge, Antonio Olavo Cardoso. Microbiologia Atividades Práticas. São Paulo: Santos Livraria 
e Editora. 1ª Edição 1997 e 2ª Edição 2001. 146p. 
Nome: __________________________________________________________ Data: ____/____/____ 
Curso: ____________________________ 
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RELATÓRIO 
 
1) Esquematizar os preparados observados: 
 
a) bactérias Gram-positivas b) bactérias Gram-negativas 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
2) Qual a finalidade da fixação do esfregaço na lâmina? 
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3) Explique o mecanismo da coloração de Gram. 
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