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Relatório de aulas práticas de Bioquímica Metabólica. Apresenta introdução à farmacologia (farmacocinética, farmacodinâmica, posologia, fármacos originais vs genéricos) e dois experimentos: cromatografia em papel com espinafre (materiais, procedimento e identificação de pigmentos) e análise do perfil de dissolução da glibenclamida (preparo de curva padrão e teste de dissolução).

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UNIVERSIDADE PAULISTA – UNIP
RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS
CURSO: Biomedicina DISCIPLINA: BIOQUÍMICA METABOLICA 
NOME DO ALUNO: Caroline Maria Bruneto 
R.A: 2117468 POLO: Zona Norte _ Vila Maria
INTRODUÇÃO :
A farmacologia é a ciência que estuda a utilização, aplicação e efeitos no organismo de substâncias utilizadas com intenção terapeuta ou profilática .
A Farmacocinética estuda as ações de um medicamento a medida que ele passa pelo organismo. 
A Farmacodinâmica estuda o mecanismo de ação das drogas que levam alteração Bioquímica e Fisiológica do organismo. 
A Posologia é o estudo das doses , o efeito desejado , o efeito terapêutico, o efeito adverso e o efeito tóxico. 
O princípio ativo de um medicamento são a base para que esse medicamento possa fazer efeito sobre o corpo. Existe o remédio original e o genérico. 
Os medicamentos de referência, também conhecidos como “ de marca” por terem marca comercial bem conhecida. São aqueles que possuem eficácia e segurança cientificamente comprovadas. 
Os medicamentos genéricos são produzidos por outros laboratórios e comercializado pelo nome oficial. 
A atuação de um profissional de Biomedicina na farmacologia consiste na realização de estudos sobre os efeitos dos fármacos no organismo humano e suas interações com outras substâncias. 
REFERÊNCIAS BIOGRÁFICAS
● https://www.blog faculdadeserradourada.com.br
● httsp://www.educamaisbrasil.com.br
● https://manipulação.com.br
● https://emais.estadao.com.br
● https://Pfizer.com.br 
●Nery , C.G.PIANETTI , G, A PIRES , M.A.S. , CAMPOS , L.M.M. , SOARES , C.D.V. teste de dissolução para avaliação de liberação de glibenclamida em Comprimidos 
AULA 01 : CROMATOGRAFIA EM PAPEL
OBJETIVO 
Conhecemos as diferenças substâncias por cromatografia. Os tipos de cromatografia e sua aplicação no isolamento dos princípios ativos do Espinafre.MATERIAIS:
● Folha de espinafre 
● Etanol absoluto acondicionado em pipeta 
● Béquer de 50 ML
● Papel de filtro Tiras de 5 cm X 20 cm
● Macerador ( almofariz + pistilo ) 
● Funil + Papel de filtro
● Filme Plástico 
PROCEDIMENTO
Realizamos o experimento de Cromatografia com Espinafre e Etanol.
 O resíduo do espinafre com Etanol filtrado já estava preparado pela equipe do laboratório .
Inserimos quantidade do resíduo de espinafre no Bequer. 
Mergulhamos a tira de papel filtro e deixamos imersa por 0,5 cm
Aguardamos o extrato subir até a Extensão do filtro de papel em 10 que 15 minutos, retiramos o papel do Béquer 
Deixamos o papel filtro secar.
 Tivemos o resultado abaixo 
ANÁLISE : 
● VERDE : sem separação 
● AMARELADA : Clorofila B
● VERDE ESCURA : Clorofila A
● FAIXA AMARELA: Xantofila
● ÚLTIMA FAIXA : Carotino 
DISCUSSÃO 
A Cromatografia permite a separação, identificação e a determinação de componentes químicos em amostras complexas, e em extratos vegetais. 
Na cromoterapia em papel utiliza uma tira de papel que absorve 22% de água. É essa água que funciona como Fase Estacionária líquida que interage coma fase móvel. 
A água se mistura com as substâncias polares (carga) , Clorofila interage com a água , as substâncias hidrofílicas interagem muito com a água e aparecem primeiro (FE _ Fase Estacionária)
AULA 02 ROTEIRO 1 : ANÁLISE DO PERFIL DE DISSOLUÇÃO DA GLIBENCLAMIDA 
OBJETIVO 
Comparamos pela análise do perfil de dissolução, a intercambialidade de medicamentos genéricos de Glibenclamida 5mg em relação ao medicamento de referência Daonil ( glibenclamida 5mg , Sanofi-Anentis)
 
MATERIAL
 ● Balança Milesimal 
● Glibenclamida apresentado aproximadamente 100% de pureza
● Tampão Fosfato 0,1 mol/ L pH 7,3
● Metanol 100%
● Comprimidos de Daonil ( glibenclamida 5mg , Sanofi-Aventis) , e de glibenclamida 5 mg , genéricos , de diferentes marcas ( duas marcas , pode-se , alternativamente, utilizar o medicamento similar) 
● Agitador magnético com aquecimento 
● PHmetro 
● Espectrofotômetro ultravioleta/ visível 
 
Modelo de curvas perfis de dissolução 
PROCEDIMENTO 
1) PREPARO DA CURVA PADRÃO DE GLIBENCLAMIDA 
● Pesar 62,5mg de glibenclamida padrão e diluir em Metanol em volume final de 250ml;
● Preparar soluções de 1, 0.5 , 0.25 , 0.125 , 0.0625 , mg/ML a partir da solução padrão, em volume final de 10ml cada.
● Determinar a absorbância das amostras a partir da leitura, em espectrômetro, no comprimento de onda de 225 nm . Plotar em gráfico concentração versus absorbância .
2) TESTE DE PERFIL DE DISSOLUÇÃO:
● Acondicionar 6 Comprimidos inteiros do medicamento Daonil ( Sanofi-Aventis) em um tamiz plástico, o que corresponde a 30mg de princípio ativo. Fazer o mesmo com os medicamentos genéricos/similares. 
● Mergulhar os Comprimidos em Bequer contendo 250ml de solução de Tampão Fosfato com ph 7,3 imerso em banho-Maria ( um Bequer para cada medicamento- Total 3 Bequers ) .
 Manter na temperatura a 41 oC.
● Coletar alíquotas de 2ml de cada uma das amostras Nos tempos 15,30,45 e 60 min. , filtrar.
● Adicionar em cubeta de de quartzo e realizar a medida da absorbância, por espectrofometria ,a 225 nm.CUBETA DE QUARTZO 
ESPECTRÔMETRO 
● Comparar os resultados obtidos coma curva padrão de glibenclamida . 
DISCUSSÃO 
Identificamos a Intercambialidade do medicamento Original e do Genérico . 
Através do perfil de dissolução, é possível estimar a quantidade de glibenclamida disponível para absorção. 
A glibenclamida apresenta baixa solubilidade em água, o que resulta em baixa liberação deste fármaco. 
AULA 03 ROTEIRO 01: DETERMINAÇÃO DA PRESENÇA DE ÁCIDO SALICILICO EM COMPRIMIDOS DE ÁCIDO ACETISALICILICO DE DIFERENTES PROCEDÊNCIAS 
OBJETIVO 
Determinar a presença de Ácido salicílico em Comprimidos de Ácido acetilsalicílico :
● De referência (Aspirina) , similares ( AAS , Melhoral) e genéricos ( de diferentes laboratórios).
● Armazenados em cartelas íntegras e violadas e mantidas em diferentes condições de temperatura e umidade. 
MATERIAL
● Ácido Salicílico 
● Comprimido de Aspirina 500mg
● Comprimido de Aspirina 500mg
● Comprimido de Ácido Acetilsalicilico 500mg similar marca 1
● Comprimido de Ácido Acetilsalicilico 500mg similar marca 2
● Comprimido de Acetilsalicílico 500mg genérico laboratório 1
● Comprimido de Acetilsalicílico 500mg genérico laboratório 2
● Comprimido de Acetilsalicílico 500mg genérico laboratório 3
● Cloreto Férrico 1% 
● Água em pisseta
● Béquer de 15 ML
● Pipeta Pasteur
● Pipeta de 5ml
● Bastão de vidro
 
 
 
PROCEDIMENTO 
 O preparo da curva padrão de Ácido Salicílico em balança analítica, adicionado solude Ácido Férrico (FeCl3) a 1% até o volume final de 20 ml. 
Essa solução deve ser utilizada para o preparo da curva padrão de Ácido Salicílico, nas seguintes concentrações: 1mg/ml, 05mg/ml, 0,25mg/ml, 0,125mg/ml, 0,0675mg/ml e 0,03375mg/ml ( diluição 1:1) .
Preparar 10ml de cada uma das soluções acima e acondicionar cada solução em um Béquer de 15ml.
Macerado :
· 1 comprimido de Aspirina mantido dentro da caixa lacrada em local seco;
· 1 comprimido de Aspirina mantido dentro da cartela em local úmido 
· 1 comprimido de Aspirina mantido fora da cartela em local úmido 
· 1 comprimido de cada um dos Comprimidos genéricos 
· Cada comprimido macerado deve ser transferido para um Béquer de 15ml e 10ml de Cloreto Férrico 1% devem ser adicionados a cada amostra de comprimido macerado.
· Após homogeneização com bastão de vidro , comparar a coloração de cada amostra com a curva padrão de Ácido Salicílico. 
Acrescentar o Cloreto Férrico 1%
Genérico: tom roxo
Melhoral similar 1: alaranjado 
AAS Similar 2: marron 
DISCUSSÃO 
Identificamos a alteração de cor na presença de Ácido salicílico, quanto mais a presença de Ácido salicílico, a cor fica Roxa .
O Ácido salicílico em comprimido em excesso pode apresentar irritação na mucosa e gastrite. 
O AAS ( Ácido Acetilsalicílico) é utilizado como antipirético ,analgésico e anti-inflamatório .
Para a Detecção de Ácido salicílico nas amostras,foi utilizado o Cloreto Férrico (FeCl3) que forma o complexo tri-quelado com o Ácido salicílico. 
AULA 03 ROTEIRO 02: DETERMINAÇÃO DA EXCREÇÃO DO ÁCIDO SALICÍLICO PELA URINA 
OBJETIVO 
Determinar a excreção de Ácido salicílico pela urina.
MATERIAL 
● Tubos de Ensaio 
● Comprimidos de Ácido acetilsalicílico 500mg
● Coletor de Urina 
● Cloreto Férrico a 10%
● Estante
● Pipeta Pasteur 
● Fita de ph
PROCEDIMENTO 
● Identificamos 3 Tubos de Ensaio
● Urina 1 , 2 e 3 ( 2ml) em cada Tubo de ensaio 
● Adicionado nos 3 tubos 6 gotas de cloreto Férrico a 10%
● Com a fita de pH, determinamos o pH de cada amostra de urina. 
Urina 01 Normal : 4 Ácido Urina 02 Batisada : 3 Ácido Urina 03Aluno: 3 Ácido 
DISCUSSÃO 
Identificamos 3 Tubos de Ensaio com urina para identificação do ácido salicílico. O Ácido salicílico é metabolizado no fígado e eliminado em 2 a 3hs.
AULA 04 ROTEIRO 01: VERIFICAÇÃO DA INFLUÊNCIA DO pH E DO pKA NA IONIZAÇÃO DE FARMACOS 
OBJETIVO 
Observar a influência do pH nas relações das concentrações de formas ionizadas e não ionizadas de três fármacos, o Ácido acetilsalicílico, de caráter ácido ( pKa = 5) e o paracetamol, ácido muito fraco , considerado de caráter neutro (pKa = 10) .MATERIAL 
● Tubos de Ensaio
● Placas de sílica com indicador de fluorescência 
● Capilares 
● Estante 
● Equipamento com a luz ultravioleta 
● Ácido acetilsalicílico 
● Paracetamol 
● HCI pH 1 
● Tampão Na2HP04 / NaH2PO4 pH 8 ( misturar 1ml de solução de NaH2PO4 0,2mol/Le 19ml de solução de NaH2PO4 0,2mol/L e 19ml de solução de Na2HPO4 0,2 mol/L )
● Acetato de etila 
PROCEDIMENTO 
Separamos 4 Tubos de Ensaio e numeramos (1 a 4) . O tubo 1 e 2 3 gramas de AAS ; Tubos 3 e 4 2gramas de PARACETAMOL .
Conforme tabela abaixo:
	TUBO
	FARMACO ( GRAMA)
	HCL 
	TAMPÃO 
FOSFATO
	ACETATO
DE ETILA
	01
	AAS 3gramas
	30 ML
	-
	30 ML
	02
	AAS 3gramas
	-
	30 ML
	30 ML
	03
	PC 2 gramas
	30ML
	-
	30 ML
	04
	PC 2 gramas
	-
	30 ML
	30 ML
Em Tubos de Ensaio adicionado as amostras de Ácido acetilsalicílico (AAS) E Paracetamol (PC) ; as soluções de pH 1 e 8 e o solvente . 
Agitamos e depois deixamos em repouso até a separação das fases aquosa e orgânica. 
Com o auxílio de um capilar ,Separamos gota iguais de cada fase do 4 tubos em uma placa de sílica. 
Aguardamos secar e observamos a placa sob a luz ultravioleta. 
DISCUSSÃO 
Comparamos as concentrações de um fármaco nas fases orgânicas que estabeleceram uma biofase com soluções aquosas de diferentes pHs, é possível verificar em que pH o fármaco está menos ionizado. 
AULA 04 ROTEIRO 02: SIMULAÇÃO DO PROCESSO DE ABSORÇÃO DO CETOCONAZOL: A IMPORTÂNCIA DA SOLUBILIZACAO NO MEIO BIOLÓGICO 
OBJETIVO 
Demonstrar que a solubilidade do cetoconazol no estômago é etapa importante do seu processo de absorção. MATERIAIS 
● Tubos de Ensaio 
● Água Destilada 
● Pera para pipetagem
● pipeta 5ml
● Pipeta 1ml
● Pipeta 100ml
● Balão 100ml
● Estante
● Espectrofotômero Ultravioleta 246nm
● Cetaconazol
● Éter etílico 
● Hidróxido de sódio 1 mol/L
● Ácido Clorídrico 1 mol/L
PROCEDIMENTO 
Pensamos 3 amostras de 10mg de cetoconazol e transferido para 3 Tubos de Ensaio 
Tubo 01: com auxílio da pipeta graduada de 5ml , adicionado 3ml de água Destilada. Adicionado com o auxílio da pipeta Graduada 3ml de éter etílico 
Tubo 02: acionado 3ml de solução de Ácido Clorídrico 1mol/L e 3ml de éter etílico. 
Tubo 03: adicionado 1ml de solução de Ácido Clorídrico e após a dissolução, adicionado 3ml de éter etílico. Fim adicionado 2ml de solução de hidróxido de sódio 1 mol/L.
 Fechamos os 3 Tubos e Agitamos por cerca de 30 segundos, colocamos os tubos em porta tubos e desenroscado a tampa para a liberação do vapor do éter. 
DISCUSSÃO 
A água e o éter simulam a biofase. O tubo 01 corresponde a situação em que o pH do estômago foi elevado por alguma razão.

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