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UNIVERSIDADE PAULISTA – UNIP RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS CURSO: Biomedicina DISCIPLINA: BIOQUÍMICA METABOLICA NOME DO ALUNO: Caroline Maria Bruneto R.A: 2117468 POLO: Zona Norte _ Vila Maria INTRODUÇÃO : A farmacologia é a ciência que estuda a utilização, aplicação e efeitos no organismo de substâncias utilizadas com intenção terapeuta ou profilática . A Farmacocinética estuda as ações de um medicamento a medida que ele passa pelo organismo. A Farmacodinâmica estuda o mecanismo de ação das drogas que levam alteração Bioquímica e Fisiológica do organismo. A Posologia é o estudo das doses , o efeito desejado , o efeito terapêutico, o efeito adverso e o efeito tóxico. O princípio ativo de um medicamento são a base para que esse medicamento possa fazer efeito sobre o corpo. Existe o remédio original e o genérico. Os medicamentos de referência, também conhecidos como “ de marca” por terem marca comercial bem conhecida. São aqueles que possuem eficácia e segurança cientificamente comprovadas. Os medicamentos genéricos são produzidos por outros laboratórios e comercializado pelo nome oficial. A atuação de um profissional de Biomedicina na farmacologia consiste na realização de estudos sobre os efeitos dos fármacos no organismo humano e suas interações com outras substâncias. REFERÊNCIAS BIOGRÁFICAS ● https://www.blog faculdadeserradourada.com.br ● httsp://www.educamaisbrasil.com.br ● https://manipulação.com.br ● https://emais.estadao.com.br ● https://Pfizer.com.br ●Nery , C.G.PIANETTI , G, A PIRES , M.A.S. , CAMPOS , L.M.M. , SOARES , C.D.V. teste de dissolução para avaliação de liberação de glibenclamida em Comprimidos AULA 01 : CROMATOGRAFIA EM PAPEL OBJETIVO Conhecemos as diferenças substâncias por cromatografia. Os tipos de cromatografia e sua aplicação no isolamento dos princípios ativos do Espinafre.MATERIAIS: ● Folha de espinafre ● Etanol absoluto acondicionado em pipeta ● Béquer de 50 ML ● Papel de filtro Tiras de 5 cm X 20 cm ● Macerador ( almofariz + pistilo ) ● Funil + Papel de filtro ● Filme Plástico PROCEDIMENTO Realizamos o experimento de Cromatografia com Espinafre e Etanol. O resíduo do espinafre com Etanol filtrado já estava preparado pela equipe do laboratório . Inserimos quantidade do resíduo de espinafre no Bequer. Mergulhamos a tira de papel filtro e deixamos imersa por 0,5 cm Aguardamos o extrato subir até a Extensão do filtro de papel em 10 que 15 minutos, retiramos o papel do Béquer Deixamos o papel filtro secar. Tivemos o resultado abaixo ANÁLISE : ● VERDE : sem separação ● AMARELADA : Clorofila B ● VERDE ESCURA : Clorofila A ● FAIXA AMARELA: Xantofila ● ÚLTIMA FAIXA : Carotino DISCUSSÃO A Cromatografia permite a separação, identificação e a determinação de componentes químicos em amostras complexas, e em extratos vegetais. Na cromoterapia em papel utiliza uma tira de papel que absorve 22% de água. É essa água que funciona como Fase Estacionária líquida que interage coma fase móvel. A água se mistura com as substâncias polares (carga) , Clorofila interage com a água , as substâncias hidrofílicas interagem muito com a água e aparecem primeiro (FE _ Fase Estacionária) AULA 02 ROTEIRO 1 : ANÁLISE DO PERFIL DE DISSOLUÇÃO DA GLIBENCLAMIDA OBJETIVO Comparamos pela análise do perfil de dissolução, a intercambialidade de medicamentos genéricos de Glibenclamida 5mg em relação ao medicamento de referência Daonil ( glibenclamida 5mg , Sanofi-Anentis) MATERIAL ● Balança Milesimal ● Glibenclamida apresentado aproximadamente 100% de pureza ● Tampão Fosfato 0,1 mol/ L pH 7,3 ● Metanol 100% ● Comprimidos de Daonil ( glibenclamida 5mg , Sanofi-Aventis) , e de glibenclamida 5 mg , genéricos , de diferentes marcas ( duas marcas , pode-se , alternativamente, utilizar o medicamento similar) ● Agitador magnético com aquecimento ● PHmetro ● Espectrofotômetro ultravioleta/ visível Modelo de curvas perfis de dissolução PROCEDIMENTO 1) PREPARO DA CURVA PADRÃO DE GLIBENCLAMIDA ● Pesar 62,5mg de glibenclamida padrão e diluir em Metanol em volume final de 250ml; ● Preparar soluções de 1, 0.5 , 0.25 , 0.125 , 0.0625 , mg/ML a partir da solução padrão, em volume final de 10ml cada. ● Determinar a absorbância das amostras a partir da leitura, em espectrômetro, no comprimento de onda de 225 nm . Plotar em gráfico concentração versus absorbância . 2) TESTE DE PERFIL DE DISSOLUÇÃO: ● Acondicionar 6 Comprimidos inteiros do medicamento Daonil ( Sanofi-Aventis) em um tamiz plástico, o que corresponde a 30mg de princípio ativo. Fazer o mesmo com os medicamentos genéricos/similares. ● Mergulhar os Comprimidos em Bequer contendo 250ml de solução de Tampão Fosfato com ph 7,3 imerso em banho-Maria ( um Bequer para cada medicamento- Total 3 Bequers ) . Manter na temperatura a 41 oC. ● Coletar alíquotas de 2ml de cada uma das amostras Nos tempos 15,30,45 e 60 min. , filtrar. ● Adicionar em cubeta de de quartzo e realizar a medida da absorbância, por espectrofometria ,a 225 nm.CUBETA DE QUARTZO ESPECTRÔMETRO ● Comparar os resultados obtidos coma curva padrão de glibenclamida . DISCUSSÃO Identificamos a Intercambialidade do medicamento Original e do Genérico . Através do perfil de dissolução, é possível estimar a quantidade de glibenclamida disponível para absorção. A glibenclamida apresenta baixa solubilidade em água, o que resulta em baixa liberação deste fármaco. AULA 03 ROTEIRO 01: DETERMINAÇÃO DA PRESENÇA DE ÁCIDO SALICILICO EM COMPRIMIDOS DE ÁCIDO ACETISALICILICO DE DIFERENTES PROCEDÊNCIAS OBJETIVO Determinar a presença de Ácido salicílico em Comprimidos de Ácido acetilsalicílico : ● De referência (Aspirina) , similares ( AAS , Melhoral) e genéricos ( de diferentes laboratórios). ● Armazenados em cartelas íntegras e violadas e mantidas em diferentes condições de temperatura e umidade. MATERIAL ● Ácido Salicílico ● Comprimido de Aspirina 500mg ● Comprimido de Aspirina 500mg ● Comprimido de Ácido Acetilsalicilico 500mg similar marca 1 ● Comprimido de Ácido Acetilsalicilico 500mg similar marca 2 ● Comprimido de Acetilsalicílico 500mg genérico laboratório 1 ● Comprimido de Acetilsalicílico 500mg genérico laboratório 2 ● Comprimido de Acetilsalicílico 500mg genérico laboratório 3 ● Cloreto Férrico 1% ● Água em pisseta ● Béquer de 15 ML ● Pipeta Pasteur ● Pipeta de 5ml ● Bastão de vidro PROCEDIMENTO O preparo da curva padrão de Ácido Salicílico em balança analítica, adicionado solude Ácido Férrico (FeCl3) a 1% até o volume final de 20 ml. Essa solução deve ser utilizada para o preparo da curva padrão de Ácido Salicílico, nas seguintes concentrações: 1mg/ml, 05mg/ml, 0,25mg/ml, 0,125mg/ml, 0,0675mg/ml e 0,03375mg/ml ( diluição 1:1) . Preparar 10ml de cada uma das soluções acima e acondicionar cada solução em um Béquer de 15ml. Macerado : · 1 comprimido de Aspirina mantido dentro da caixa lacrada em local seco; · 1 comprimido de Aspirina mantido dentro da cartela em local úmido · 1 comprimido de Aspirina mantido fora da cartela em local úmido · 1 comprimido de cada um dos Comprimidos genéricos · Cada comprimido macerado deve ser transferido para um Béquer de 15ml e 10ml de Cloreto Férrico 1% devem ser adicionados a cada amostra de comprimido macerado. · Após homogeneização com bastão de vidro , comparar a coloração de cada amostra com a curva padrão de Ácido Salicílico. Acrescentar o Cloreto Férrico 1% Genérico: tom roxo Melhoral similar 1: alaranjado AAS Similar 2: marron DISCUSSÃO Identificamos a alteração de cor na presença de Ácido salicílico, quanto mais a presença de Ácido salicílico, a cor fica Roxa . O Ácido salicílico em comprimido em excesso pode apresentar irritação na mucosa e gastrite. O AAS ( Ácido Acetilsalicílico) é utilizado como antipirético ,analgésico e anti-inflamatório . Para a Detecção de Ácido salicílico nas amostras,foi utilizado o Cloreto Férrico (FeCl3) que forma o complexo tri-quelado com o Ácido salicílico. AULA 03 ROTEIRO 02: DETERMINAÇÃO DA EXCREÇÃO DO ÁCIDO SALICÍLICO PELA URINA OBJETIVO Determinar a excreção de Ácido salicílico pela urina. MATERIAL ● Tubos de Ensaio ● Comprimidos de Ácido acetilsalicílico 500mg ● Coletor de Urina ● Cloreto Férrico a 10% ● Estante ● Pipeta Pasteur ● Fita de ph PROCEDIMENTO ● Identificamos 3 Tubos de Ensaio ● Urina 1 , 2 e 3 ( 2ml) em cada Tubo de ensaio ● Adicionado nos 3 tubos 6 gotas de cloreto Férrico a 10% ● Com a fita de pH, determinamos o pH de cada amostra de urina. Urina 01 Normal : 4 Ácido Urina 02 Batisada : 3 Ácido Urina 03Aluno: 3 Ácido DISCUSSÃO Identificamos 3 Tubos de Ensaio com urina para identificação do ácido salicílico. O Ácido salicílico é metabolizado no fígado e eliminado em 2 a 3hs. AULA 04 ROTEIRO 01: VERIFICAÇÃO DA INFLUÊNCIA DO pH E DO pKA NA IONIZAÇÃO DE FARMACOS OBJETIVO Observar a influência do pH nas relações das concentrações de formas ionizadas e não ionizadas de três fármacos, o Ácido acetilsalicílico, de caráter ácido ( pKa = 5) e o paracetamol, ácido muito fraco , considerado de caráter neutro (pKa = 10) .MATERIAL ● Tubos de Ensaio ● Placas de sílica com indicador de fluorescência ● Capilares ● Estante ● Equipamento com a luz ultravioleta ● Ácido acetilsalicílico ● Paracetamol ● HCI pH 1 ● Tampão Na2HP04 / NaH2PO4 pH 8 ( misturar 1ml de solução de NaH2PO4 0,2mol/Le 19ml de solução de NaH2PO4 0,2mol/L e 19ml de solução de Na2HPO4 0,2 mol/L ) ● Acetato de etila PROCEDIMENTO Separamos 4 Tubos de Ensaio e numeramos (1 a 4) . O tubo 1 e 2 3 gramas de AAS ; Tubos 3 e 4 2gramas de PARACETAMOL . Conforme tabela abaixo: TUBO FARMACO ( GRAMA) HCL TAMPÃO FOSFATO ACETATO DE ETILA 01 AAS 3gramas 30 ML - 30 ML 02 AAS 3gramas - 30 ML 30 ML 03 PC 2 gramas 30ML - 30 ML 04 PC 2 gramas - 30 ML 30 ML Em Tubos de Ensaio adicionado as amostras de Ácido acetilsalicílico (AAS) E Paracetamol (PC) ; as soluções de pH 1 e 8 e o solvente . Agitamos e depois deixamos em repouso até a separação das fases aquosa e orgânica. Com o auxílio de um capilar ,Separamos gota iguais de cada fase do 4 tubos em uma placa de sílica. Aguardamos secar e observamos a placa sob a luz ultravioleta. DISCUSSÃO Comparamos as concentrações de um fármaco nas fases orgânicas que estabeleceram uma biofase com soluções aquosas de diferentes pHs, é possível verificar em que pH o fármaco está menos ionizado. AULA 04 ROTEIRO 02: SIMULAÇÃO DO PROCESSO DE ABSORÇÃO DO CETOCONAZOL: A IMPORTÂNCIA DA SOLUBILIZACAO NO MEIO BIOLÓGICO OBJETIVO Demonstrar que a solubilidade do cetoconazol no estômago é etapa importante do seu processo de absorção. MATERIAIS ● Tubos de Ensaio ● Água Destilada ● Pera para pipetagem ● pipeta 5ml ● Pipeta 1ml ● Pipeta 100ml ● Balão 100ml ● Estante ● Espectrofotômero Ultravioleta 246nm ● Cetaconazol ● Éter etílico ● Hidróxido de sódio 1 mol/L ● Ácido Clorídrico 1 mol/L PROCEDIMENTO Pensamos 3 amostras de 10mg de cetoconazol e transferido para 3 Tubos de Ensaio Tubo 01: com auxílio da pipeta graduada de 5ml , adicionado 3ml de água Destilada. Adicionado com o auxílio da pipeta Graduada 3ml de éter etílico Tubo 02: acionado 3ml de solução de Ácido Clorídrico 1mol/L e 3ml de éter etílico. Tubo 03: adicionado 1ml de solução de Ácido Clorídrico e após a dissolução, adicionado 3ml de éter etílico. Fim adicionado 2ml de solução de hidróxido de sódio 1 mol/L. Fechamos os 3 Tubos e Agitamos por cerca de 30 segundos, colocamos os tubos em porta tubos e desenroscado a tampa para a liberação do vapor do éter. DISCUSSÃO A água e o éter simulam a biofase. O tubo 01 corresponde a situação em que o pH do estômago foi elevado por alguma razão.