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CLASSIFICAÇÃO DOS MEIOS DE CULTURA Quanto ao estado físico; Quanto à composição; Quanto à capacidade seletiva e diferenciação. 1. QUANTO AO ESTADO FÍSICO (CONSISTÊNCIA). Líquido ou caldo: sem ágar, para crescimento de microrganismos em culturas puras. Semissólido: com pouco ágar, para analisar motilidade bacteriana e fermentação de açúcares. Sólido: com ágar, para obter colônias isoladas, antibiograma e assimilação de açúcares. Ágar = agente solidificante composto por polissacarídeo, obtido a partir de alga marinha. 2. COMPOSIÇÃO Meios simples: possuem componentes essenciais, para crescimento de microrganismos pouco exigentes. Meios enriquecidos: meios simples + substâncias de enriquecimento, utilizados para o crescimento de microrganismos fastidiosos. 3. CAPACIDADE SELETIVA E DIFERENCIAÇÃO Meios seletivos: favorecem o desenvolvimento de determinados microrganismos, mas inibem a proliferação de outros, devido à adição de substâncias inibidoras, determinados nutrientes, pH, pressão osmótica, entre outros. Meios diferenciais: contêm substâncias que indicam determinadas características bacterianas. Meios seletivos diferenciais: utilizados para isolamento e identificação presuntiva de bactérias, com as características evidenciadas através das formas e cores. MEIOS DE CULTURA UTILIZADOS Caldo BHI (brain heart infusion): meio de cultura líquido, rico, indicado para o desenvolvimento de microrganismos exigentes. Placa ágar sangue: não seletivo, enriquecido e diferencial, que indica se uma bactéria é hemolítica ou não. Placa ágar MacConkey: meio seletivo diferencial, seleciona bactérias gram-negativas. Placa ágar nutriente: suporta o crescimento de uma ampla gama de organismos não fastidiosos. Placa ágar batata dextrose (PDA): promove o crescimento de bolores e leveduras; contém amido (nutriente para o fungo). COLORAÇÃO DE GRAM Sem a coloração, as bactérias, no microscópio, ficam transparentes. A diferenciação das bactérias é feita através das diferenças da parede celular. Corante violeta genciana: se deposita no citoplasma das bactérias -> cor violeta/azul/roxo. Lugol (mordente): substância que se liga ao corante para reforçar a coloração, possui iodo -> cor violeta/azul/roxo. Lavagem com solvente (acetona ou álcool): diferencia as bactérias pela parede celular. Gram positiva: não sofre descoloração por conta da camada grossa de peptídeoglicanos -> cor violeta/azul/roxo. Gram negativa: sofre descoloração por conta da camada fina de peptídeoglicanos e da membrana externa de lipídios que são retirados pelo solvente -> fica transparente. Corante fucsina: incorpora em bactérias gram- negativas -> cor vermelha/rosa.
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