Slides CQ Unidade II - VÍDEO 3

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Profa. Dra. Daniela Cristina de Medeiros Araújo
CONTROLE DE 
QUALIDADE E GESTÃO 
NA INDÚSTRIA 
FARMACÊUTICA
UNIDADE II
ENSAIOS DE QUALIDADE PARA FORMAS FARMACÊUTICAS 
LÍQUIDAS E SEMISSÓLIDAS E METODOLOGIAS ANALÍTICAS
Introdução
Nesta aula, iremos abordar a segunda parte das metodologias
analíticas utilizadas nos testes de controle de qualidade de medicamentos.
As metodologias analíticas descritas na farmacopeia brasileira
podem ser divididas em métodos químicos, métodos cromatográficos,
métodos espectrofotométricos e métodos espectrométricos.
METODOLOGIAS ANALÍTICAS – PARTE 2
• MÉTODOS ESPECTROFOTOMÉTRICOS
A espectrofotometria de absorção pode ser utilizada para
quantificação e/ou identificação de compostos.
Essas técnicas estão fundamentadas na absorção da energia
eletromagnética por moléculas, dependendo da estrutura e concentração
dessas moléculas.
A espectrofotometria de absorção pode ser ultravioleta, visível ou
infravermelho, dependendo do intervalo de frequência da radiação
eletromagnética aplicada.
Métodos Espectrofotométricos
• A radiação eletromagnética se propaga por ondas ou fluxo de
partículas (fótons), apresentando regiões de comprimento de onda
característico. O comprimento de onda normalmente é expresso em
micrômetros (µm) ou nanômetros (nm). Para o infravermelho, é comum
que a radiação eletromagnética seja expressa em número de onda
(cm-1).
Métodos Espectrofotométricos
Tabela 3. Comprimento de onda de interesse para a espectrofotometria 
Região Comprimento de onda 
Ultravioleta (UV) 100 – 380 nm 
Visível (VIS) 380 – 780 nm 
Infravermelho próximo (NIR) 780 – 2500 nm (13300 – 4000 cm-1) 
Infravermelho médio (MIR) 4 – 25 µm (2500 – 400 cm-1) 
Infravermelho distante 25 – 300 µm (400 – 33 cm-1) 
Fonte: Adaptado de ANVISA, 2019. 
Métodos Espectrofotométricos
• Ultravioleta/Visível (UV/Vis)
“A absorção de luz por uma substância na região do ultravioleta/visível
depende da estrutura eletrônica da molécula. Através da incidência de
energia sobre a amostra, obtém-se um espectro que origina um gráfico de
absorbância ou transmitância versus comprimento de onda (ou frequência).
A intensidade dos picos pode ser alterada dependendo da concentração da
substância. Esta análise pode ser utilizada para identificação e
doseamento de substâncias” (ANVISA, 2004, p. 38).
Métodos Espectrofotométricos
• Infravermelho (IV)
“A espectrofotometria no infravermelho (IV) é uma técnica utilizada em
grande escala para identificação de compostos, sendo um método sensível
e rápido, permitindo detectar sua identidade por comparação com
substâncias químicas padronizadas. Em contraste com os poucos picos
observados na região do UV/Vis, o espectro na região do infravermelho
fornece várias bandas de absorção gerando um conjunto de informações
sobre a estrutura química da substância analisada” (ANVISA, 2004, p. 38).
Métodos Espectrofotométricos
Espectrofotômetro UV-VIS
Métodos Espectrométricos
• A espectrometria de massas é uma técnica analítica que visa a identificar
moléculas de interesse pela verificação da sua massa e caracterização da
estrutura química.
• Esta técnica consiste na ionização da molécula em campo magnético, por
feixe de elétrons, causando fragmentação da sua estrutura. Com essa
ionização, os fragmentos adquirem carga e são detectados por laca
metálica sensível ao íon (coletor de íons). A detecção gera um sinal, que
aparece no espectro de massas na forma de pico.
Métodos Espectrométricos
• Na técnica de ionização por impacto de elétrons, comumente a mais
usada, um espectrômetro de massas bombardeia moléculas na fase
vapor com um feixe de elétrons de alta energia e registra o resultado do
impacto dos elétrons como um espectro de íons separados na base da
razão massa/carga (m/z).
Métodos Espectrométricos
• Na técnica de ionização por eletrospray, a amostra pode ser líquida ou
sólida e é injetada no sistema na forma de spray. O feixe de elétrons
atravessa o spray e ioniza as moléculas. A vantagem é que é possível
controlar a energia de ionização, gerando maior número de íons
moleculares.
Métodos Espectrométricos
Os espectrômetros de massas utilizados para elucidação de estruturas
podem ser classificados segundo o método de separação dos íons em:
- Deflexão em campo magnético.
- Espectrômetro de massas de quadrupolo.
- Tempo de voo.
- MS/MS (espectrômetro de massas em sequência).
Métodos Espectrométricos
• No método de deflexão em campo magnético, a amostra (na forma de
gás) entra na câmara de ionização, onde é bombardeada por um feixe de
elétrons. Os íons positivos produzidos atravessam a fenda de aceleração
e entram no tubo analisador, um tubo de metal, curvo, mantido sob vácuo
com o coletor de íons no final. Um campo magnético age sobre todo o
sistema, levando a uma maior ou menor movimentação, dependendo da
relação m/z do íon. O espectro de massas gerado auxilia na identificação
do composto. O pico com maior razão massa/carga costuma ser o pico do
íon molecular (molécula sem um elétron).
Métodos Espectrométricos
• No espectrômetro de massas de quadrupolo, os íons são direcionados
para passar entre 4 barras de metal. As barras capturam os íons e liberam
de acordo com a razão massa/carga, de forma sequencial. A separação
ocorre por padrão de oscilação.
Métodos Espectrométricos
• No espectrômetro de massas de tempo de voo (TOF), a amostra é
colocada em um tubo e mede-se o tempo de voo dentro desse tubo, que
será diferente dependendo da razão m/z. A diferença de potencial dentro
do tubo faz com que os íons migrem até colidirem com o analisador, que
transforma em um sinal elétrico que é amplificado, e os dados são
tratados.
Métodos Espectrofotométricos
Espectrômetro de massa
CONSIDERAÇÕES FINAIS
Nesta unidade, foram abordadas metodologias analíticas
utilizadas nos testes de controle de qualidade de medicamentos.
Vimos os métodos espectrofotométricos e espectrométricos.