Biologia Molecular AS IV (2)

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PERGUNTA 1
 Sobre a utilização da Técnica de PCR com a finalidade de diagnóstico molecular, considere
as assertivas a seguir Verdadeiras (V) ou Falsas (F):
I - Uma vez que na reação de PCR se utiliza uma DNA Polimerase dependente de DNA,
somente os vírus cujo genoma é constituído por DNA podem ser detectados pela Técnica de
PCR, não havendo qualquer outra possibilidade.
II - Como a detecção das moléculas de DNA geradas é feita em tempo real, não é necessária
a utilização de outros métodos de detecção após a reação, como a corrida eletroforética.
III - É possível detectar microorganismos diferentes em uma mesma reação de PCR, desde
que sejam utilizados na reação pares de oligonucleotídeos iniciadores específicos para cada
micro-organismo que se queira detectar.
IV - A técnica baseia-se na réplica de uma reação de PCR normal, mas com uma sonda
específica para o DNA viral molde que, quando dissociada pela ação da Taq polimerase,
libera fluorescência que é detectada por um laser à medida que a Taq polimerase sintetiza
novas moléculas de DNA.
V - Uma das grandes desvantagens da metodologia é a baixa especificidade.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
I-F, II-V, III-F, IV-F,
V-F.
I-F, II-V, III-V, IV-V,
V-F.
I-V, II-V, III-V, IV-V,
V-F.
I-F, II-V, III-V, IV-V,
V-V.
I, F, II-F, III-V, IV-F,
V-F.
0,25 pontos
PERGUNTA 2
 O método de Sanger baseia-se em uma reação de sequenciamento com utilização de
didesoxinucleotídeos (ddNTPs) marcados com fluorescência, além de dNTPs.
Assinale a alternativa CORRETA:
A reação, diferentemente da PCR, não necessita de um oligonucleotídeo iniciador,
usando uma mistura de nucleotídeos (dNTPs) e didesoxinucleotídeos (ddNTPs). A
leitura da sequência é realizada de cima para baixo no gel de poliacrilamida
(sentido 5’-3’ da fita nascente).
A reação é realizada com dois oligonucleotídeos iniciadores e uma mistura de
nucleotídeos dNTPs e ddNTPs, na qual os ddNTPs encontram-se em maior
quantidade do que os dNTPs.
A reação é realizada com apenas um oligonucleotídeo iniciador e uma mistura de
nucleotídeos (dNTPs) e didesoxinucleotídeos (ddNTPs), na qual os dNTPs
encontram-se em maior quantidade do que os ddNTPs e a leitura da sequência no
gel de poliacrilamida é feita de baixo para cima (sentido 5’-3’ da fita nascente).
A reação é realizada com dois oligonucleotídeos iniciadores e uma mistura de
nucleotídeos (dNTPs) e didesoxinucleotídeos (ddNTPs), na qual os ddNTPs
encontram-se em maior quantidade do que os dNTPs e a leitura da sequência é
realizada de cima para baixo no gel de poliacrilamida (sentido 5’-3’ da fita
nascente).
A reação é realizada com apenas um oligonucleotídeo iniciador e uma mistura de
nucleotídeos terminadores que interrompem a polimerização (dNTPs). A leitura da
sequência é realizada de cima para baixo no gel de poliacrilamida (sentido 5’-3’ da
fita nascente).
0,25 pontos
PERGUNTA 3
 (Adaptada do ENADE Biomedicina 2019) Um laboratório dispõe de um plasmídeo contendo
oncogene e um RNA de interferência específico para um gene supressor de tumor. Após a
transfecção do plasmídeo e do RNAi, a proliferação celular é avaliada pela contagem do
número de células.
A partir disso, avalie as asserções a seguir:
I. A transfecção do plasmídio contendo o oncogene inibirá a proliferação, enquanto a
transfecção do RNAi estimulará a proliferação da célula cancerosa.
II. A expressão do oncogene fará com que o ciclo celular seja ativado, enquanto o RNAi
inibirá a expressão do gene supressor de tumor, promovendo a ativação desregulada do ciclo
celular pela perda do ponto de controle e proliferação.
Assinale a alternativa CORRETA:
As asserções I e II são verdadeiras, e a II condiz como uma justificativa para a I.
As asserções I e II são verdadeiras, mas a II não condiz como uma justificativa
correta da I.
A asserção I é falsa, e a II é verdadeira.
A asserção I é verdadeira, e a II é falsa.
As asserções I e II falsas.
0,25 pontos
PERGUNTA 4
 Em relação ao sistema CRISPR-Cas9, é CORRETO AFIRMAR que:
Possibilita quantificar a quantidade de RNA e fazer uma análise da expressão gênica.
Amplifica uma região específica do DNA gerando milhares de cópias.
É uma resposta na qual os siRNAs levam à degradação do complexo RISC.
Corresponde a pequenas moléculas de RNA associadas a uma enzima de restrição,
com capacidade de reconhecer e clivar sequências específicas de DNA exógeno.
Cliva o DNA em sequências palíndromes podendo formar extremidades coesivas e
cegas.