ESQUEMA 1 PARA CONTAGEM TOTAL

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ESQUEMA 1 PARA CONTAGEM TOTAL 
CQB – Contagem do nº total de microrganismos mesofílicos e pesquisa de microrganismos patogênicos. 
Preparação 
para uso 
ORAL 
Aquosa 
Não - Aquosa 
Ex: Solução, 
Xarope, 
Suspensão 
Ex: Comprimidos, 
cápsulas 
Limites estão na 
Farma. Bras. 5ª 
edição. Pág 252, 
Tabela1 
Patógenos Fungos/Leveduras 
............................. 
Bac. Aerobias 
 
102 = 100 UFC g/mL 
103 = 100 UFC g/mL .......................... 
101 = 10 UFC g/mL 
102 = 100 UFC g/mL Ausência E. coli g/mL 
Ausência E. coli g/mL 
Obs. Para este produto 
nunca se deve diluir além 
de 10-1 . Pois em 10-2 o 
crescimento de 1 colônia 
já é reprovação do lote. 
 
 
 
Amostra do Lote 
Início/Meio/Fim 
≥ 10 g ou mL 
ou 
Assepsia das 
amostras antes 
da abertura. 
Ex: alcool 70% 
ou Cl. 
Benzalcônico 
0,25%. Por 20-
30 min. 
90 mL 
= 10-1 
Obs. Para sólidos 
Balança. 
 
 
 
 
Obs. Para líquidos 
proveta. 
 
 
 Caldo Caseína 
Soja (Caldo 
Casoy) com 
Neutralizante. 
Ex: Lecetina de 
Soja + 
Polisorbato de 
Sódio 
Obs. Para sólidos 
ou tritura em gral 
estéril ou mexer. 
Ter espátula e 
pinça estéreis. 
 
 
 
Obs. Para sólidos 
ou desintegra em 
banho-maria a 45-
50 C°. (Tempo = 
depende do 
revestimento do 
produto. 
 
 
 
PATÓGENOS 
CONTAGEM 
ESQUEMA 2 
PATÓGENOS 
PARA CONTAGEM: 
Controle NEGATIVO 
*1 Placa TSA e 1 placa AS 
abertas na cabine biológica e 
não manipuladas. Incubadas 
junto com as amostras. 
 
Controle POSITIVO 
* Não se aplica devido a 
realização do método de 
promoção de crescimento de 
Meios de Cultura. 
 
 1 
Opção 1 
Opção 2 
Victor Melo
Victor Melo
Victor Melo
Victor Melo
Victor Melo
pq duas opcoes??
quais diluicoes usar?
2 
OPÇÃO 1 
Como você valida este método para 
o seu produto farmacêutico, você já 
sabe se a diluição escolhida 
SOMADO a presença do 
neutralizante químico no meio é 
suficiente. 
Justificativa para se fazer a análise 
de apenas uma diluição. 
1 mL suspensão 10-1 p/ 1 placa TSA 
1 mL suspensão 10-1 p/ 1 placa TSA 
Duplicata 
1 mL suspensão 10-1 p/ 1 placa SA 
1 mL suspensão 10-1 p/ 1 placa SA 
Duplicata 
Incubar 
30-35 °C / 5 dias 
Incubar 
20-25 °C / 7 dias 
Bact. 
Fung/Lev 
 
Resultado é uma média: 
. . 
. . 
. . 
. 
P1 P2 
P3 P4 
4 2 
1 
zero 
Todas 10-1 
Resultado: 
 
4 + 2 = 6 ÷ 2 = 3 
3 está a 10-1
3x10= 30 UFC g/mL 
Bactérias 
Resultado: 
 
1+ 0 =1 
1 ÷ 2 = 0,5 
Não existe 12 colônia, então o resultado é 1. 1 
está em 10-1 , logo 1x10 = 10 UFC g/mL. 
Fungos/ Leveduras 
Victor Melo
isso significa q vc so faz todos as diluicoes uma vez, valida e ja diz qual diluicao vc vai sempre usar?
3 
OPÇÃO 2 
10-1 
1 mL + 9mL tampão( pH 7,2) = 
1 mL p/ 1 placa TSA = 
 
1 mL p/ 1 placa AS = 
10-2 
10-1 
10-1 
1 mL p/ 1 placa TSA = 
 
1 mL p/ 1 placa AS = 
10-2 
10-2 
} 
Incubar 
30-35 °C / 5 dias 
Incubar 
20-25 °C / 7 dias 
Duplicatas 
Resultado é uma média : 
 
 
 
 
4 = 4 x10 = 40 
1 = 1x100= 100 
Ʃ = 140 ÷ 2 = 70 UFC g/mL 
Bactérias 
. . 
. . 
. 
10-1 
 
10-2 
 
Resultado é uma média : 
 
 
 
 
 
1 x10 = 10 
Ʃ = 10 ÷ 2 = 5 UFC g/mL 
Fungos/Leveduras 
. 
10-1 
 
10-2 
 
Métodos: 
A) Filtração p/ membrana 
B) Contagem em placas 
C) Método do Nº mais provável 
 
Método de profundidade 
Método de superfície 
Placa estéril + 1 mL produto 
teste + 15- 20 mL meio TSA 
ou AS aquecido 45-50 °C 
Homogeneizar com 
movimentos em 8