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CLONAGEM E TRANSGENICOS Docente Francisco Jr. Mestrado em Reprodução Assistida Clonagem • Várias São as técnicas de clonagem, destacando se a clonagem a partir de óvulos não fecundados • Separação das células de um embrião no seu estágio inicial de multiplicação celular, • Substituição do núcleo de um óvulo por outro proveniente de uma célula de um indivíduo já existente (utilização da técnica de transferência nuclear). Segundo alguns especialistas não trata-se propriamente de clonagem Separação das células de um embrião • Resulta na produção de novos indivíduos exactamente iguais, e compartilham do mesmo material genético (DNA), sendo originado da divisão do óvulo fecundado Transferência de nucléo • Remoção do corpo polar e a cromatina da segunda metafase (com adição de um inibidor do citoesqueleto) no Oocito receptor • Remoção da zona pelucida do embrião dador para permitir a exposição e separação das celulas • Fusão das celulas e do citoblasto recorrendo a uma corrente electrica Transferência de nucléo • Os embriões clonados são em seguida transferidos aos oviductos da femea receptora e com ele adiciona-se meios de cultura para o desenvolvimento do embrião clonado A ovelha “Dolly” 1. Colhe-se um óvulo de um animal e retira-se o núcleo por sucção 2. Colhe-se um tecido (Glandula mamaria) do dador, e retira-se o núcleo de uma célula, depois da transformação em célula tronco 3. Insere-se o núcleo doado no óvulo enucleado e com uma descarga eléctrica fundem-se os dois, simulando uma fecundação do óvulo 4. De seguida in vitro permite-se o desenvolvimento de células embrionarias 5. Implanta-se o ovo num útero,seguindo-se o rumo de uma gravidez • normal. Tudo parecia correr bem, tendo Dolly dado à luz doiscordeiros, mas em 1999 apareceram sintomas de envelhecimento precoce Eficiência das tecnologias de clonagem animal • As taxas de sobrevivência dos descendentes clonados e de concepção são bastante baixos comparando com a fertilização natural – Cerca de 20% dos animais clonados atinge a idade adulta • Os embriões clonados tem poucas celulas normais comparativamente aos embriões normais – Informações recentes indicam que os clones de bovinos, suinos, coelhos e ratos tem cerca de 9%, 19%, 43% e 55% de células normais respectivamente • Serão necessários mais estudos de genética molecular para perceber os mecanismos de (re)programação nuclear VANTAGENS • Produção de tecidos ou orgãos para transplantções e isso reduz o risco de rejeições. Pois o individuo tera acesso a um orgao feito dos tecidos do seu proprio organismo • Alguns cientistas acreditam no uso da tecnologia clonagem animal para a produção de celulas terapeuticas e proteinas farmaceuticas • Existe muito cepticismo e debates neste campo de clonagens para sua aplicação em humanos VANTAGENS • Obtenção de manadas de animais com: – Produção uniforme (carne, leite, ovos,entre outros) – Animais com caracteristicas de saude e requisitos nutricionais uniformes e de acordo com um certo ambiente – Obtenção de animais a baixo custo – Animais com uma caracteristica genetica especifica (ex: animais produtores de leite com ou sem caseina) – Melhor preservação do material genetico por via de congelação de tecidos comparativamente a IA Producao de Transgenicos • Os alimentos transgênicos são modificados geneticamente em laboratórios com o objectivo de conseguir melhorar a qualidade do produto. • Os genes de plantas e animais são manipulados e muitas vezes combinados. • Os organismos geneticamente modificados, depois da fase laboratorial, são implantados na agricultura ou na pecuária O termo “transgênico” surge quando os cientistas, no inicio dos anos 1980, descobrem a possibilidade de incorporação de um gene estranho num genoma de um outro organismo Cont. • Técnicas que incluem DNA recombinante, introdução directa num ser vivo o material hereditário de outra espécie,. Cont. 1. Isolamento do DNA genómico; 2. Desenho dos primers; 3. Amplificação por PCR; 4. Digestão enzimática do DNA do vector e do fragmento; 5. Ligação do fragmento ao vector DNA recombinante; 6. Introdução do DNA recombinante nas células hospedeiras - transformação; 7. Selecção e identificação dos clones recombinantes Vantagens • Possibilidade da incorporação de genes que não poderiam ser obtidos naturalmente, • Rapidez e eficiência com que um gene é implantado, sem a necessidade de cruzamentos entre os seres envolvidos • Beneficio na agricultura devido às características que podem ser implantadas em plantas para o consumo humano, como: 1) A resistência a doenças e a pesticidas, necessitam menos agroquimicos, o que seria uma melhoria tanto para o meio ambiente como para a saúde humana e 2) Maior valor nutricional • Ate a próxima aula
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