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BIOTECNOLOGIA DA REPRODUÇA O SISTEMA REPRODUTOR MASCULINO Bovinos: escroto, cordão espermático, testículos, epidídimo, ducto deferente, uretra, glândulas genitais acessórias, pênis. RESFRIAMENTO O resfriamento do sêmen é feito em temperatura positiva de aproximadamente +5ºC. O sêmen resfriado tem viabilidade de até 96 horas, dependendo da preparação, diluição, etc. CRIOPRESERVAÇÃO Armazenamento em nitrogênio líquido em temperatura negativa de -196ºC. A redução da temperatura reduz o metabolismo celular, conservando por períodos indeterminados e permitindo a retomada do desenvolvimento celular normal. Principal vantagem: intercâmbio de material genético sem a necessidade de transportar animais. DILUIÇÃO DO SÊMEN Têm como objetivo proteger os espermatozoides e elevar ao máximo o volume do ejaculado. Diluentes são indicados tanto para congelamento, como também para resfriamento do sêmen. Características de diluentes: pressão osmótica compatível com os espermatozoides, pH similar ao sêmen (6,8 a 7,2), composição adequada de elementos minerais e nutrientes, substancia capaz de neutralizar microrganismos e produtos tóxicos, e elementos que estabilizem sistemas enzimáticos, membranas e que confiram proteção contra choque térmico (crioprotetores). Composição de diluentes: nutrientes (da energia aos espermatozoides); tampões (impedem mudanças prejudiciais de pH); substancias iônicas e não iônicas (fazem manutenção da osmolaridade); antibióticos (impedem a proliferação microbiana); subst. (proteção de choque T ºC) e crioprotetores (impedem lesões das membranas e organelas no congelamento). CRIOPROTETORES Lipoproteínas/macromoléculas que protegem os espermatozoides no momento do congelamento/descongelamento, impedindo lesões das membranas e organelas. Diminuem o tamanho e formação de cristais, estabiliza a estrutura das proteínas da membrana. As lipoproteínas mais utilizadas são leite e gema de ovo e essas coram o sêmen de branco ou amarelo. CÁLCULO DE DILUIDOR DE VOLUME Volume= 7 ml Motilidade= 80% Concentração=1 x 10nona sptz/ml (obs.: nona é o número de zeros após o número, portanto 9 zeros) 1) Nº sptz totais – 7 x 1 x 10nona = 7x10nona sptz 2) Nº Sptz viáveis – 80% 7 x 10nona = 5,6 x 10nona 3) Dose inseminante: Bovinos 20.000.000 – 0,25ml 30 a 40.000.000 – 0,5ml Nº de doses = 5,6x10nona / 2x10sétima = 280 doses 4) Volume da palheta – 0,25ml Volume total de sêmen = 0,25x280(volume total) = 70ml Se utilizarmos 7ml de sêmen, usaremos 63ml de diluidor. SEXAGEM DE ESPERMATOZOIDES O sexo é determinado pelo cromossomo: XY (macho) e XX (fêmea). As diferenças de espermatozoides X e Y são: peso, tamanho, densidade, cargas elétricas de superfície e efeitos diferenciais de pH. Morfologicamente são considerados idênticos. No núcleo, as diferenças são: tamanho dos cromossomos e conteúdo do DNA. Cromossomo X é maior e carrega mais DNA, já o cromossomo Y é menor. Metodologias para sexagem: Separação pelas diferenças nos cromossomos 1) Citometria de Fluxo (diferença pelo tamanho de DNA); 2) Centrifugação em gradiente de densidade – pesos e densidades diferentes entre os cromossomos X e Y. Vantagens da sexagem: Maior eficiência produtiva; Escolha do sexo; Novas oportunidades; Bem estar (fêmeas primíparas). Desvantagens da sexagem: Custo de implantação; Custo por dose; Precisão; Eficácia (fertilidade reduzida); Sêmen fresco (variação individual). ANDROLOGIA O exame andrológico completo se fundamenta na avaliação de todos os fatores que contribuem para a função reprodutiva normal do reprodutor: - Características dos espermatozoides Concentração Vigor Turbilhonamento - Característica do sêmen Coloração Volume Gel Coleta Anatomia do sistema reprodutor Posicionamento Glândulas anexas Parâmetro de CE INSEMINAÇÃO ARTIFICIAL Vantagens da IA: • Melhoramento genético (é a intenção, mas pode não ocorrer). • Maximização da utilização do macho (aumento de descendentes de 1 reprodutor); • Maior controle reprodutivo/zootécnico • Prevenção de Acidentes; • Cruzamento entre raças; • Descendentes de touros mortos; • Menor custo em relação à monta natural; • Redução da dificuldade de partos; • Controle sanitário. Desvantagens da IA: • Falta de mão de obra especializada. • Aplicação da técnica de forma incorreta. Na escolha do animal para a inseminação artificial, são considerados: ECC (escore de condição corporal, nutrição, sanidade, estro e ginecológico). Os equipamentos utilizados são: Botijão criogênico; Sêmen; Luva palpação; Bainha francesa; Aplicador; Termômetro; Cortador de palheta; Pinça; Papel toalha; Garrafa térmica e recipiente isotérmico. Procedimento de IA: a. “Limpeza” do reto b. Limpeza externa c. Agua a 36ºC d. Retirada do sêmen do botijão e. Descongelamento f. Montagem do aplicador g. Palpação da cérvix. O muco deve ser semelhante à clara de ovo. h. Introdução do aplicador pela vulva – passagem pela cérvix – IA. O aplicador deve estar seco, pois água é espermicida.
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