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ORIENTAÇÃO DE ESTUDO PARA A PROVA BIMESTRAL (MICROBIOLOGIA GERALBIOMEDICINA) TÓPICO 1 • POSTULADOS DE KOCH R: É fazer testes em cobaias e tentar reproduzir o mesmo sintoma a partir de um agente suspeito. 1° o patogeno suspeito é isolado em cultura pura . 2° celulas de um animal saudavel deve reproduzir os mesmos sintomas da doença inicial. 3° o patogeno suspeito deve ser reisolada em cultura pura. 4° se estabelece um patogeno especifico como a causa da doença. É um processo para estabelecer a relação entre microrganismo e doença • AULA PRÁTICA 1 (BIOSSEGURANÇA). NB1 – agentes de baixo risco individual e coletivo, nunca descritos como causadores de doenças. Ex: Lactobacillus, micrococcus etc. NB2 – agentes associados com doença humana com pouco risco para os profissionais. Ex: staphylococcus aureus, salmonella, aviaria, etc. NB3 - agentes indigenos/exoticos associados a doença humana causadores de graves enfermidades. Ex: aids, febre amarela, tuberculose, etc. NB4 – agentes perigosos/exoticos que causam graves doenças para o homem, elevado risco para os profissionais do laboratorio. Ex: ebola, peste aviaria, virus da aftosa, etc. TÓPICO 2 • BIOFILME: CONCEITO E ESTRUTURAS CELULARES BACTERIANAS ASSOCIADAS À ADESÃO; O biofilme é um agrupamento de microrganismos sob uma superficie em forma de residuo, visiveis a olho nu, conseguem viver em comunidade, podem ser vistos em ralos, ceramicas, banheiros, mucosa etc, as bacterias associadas a essa adesao as fibrias e o pili (pelos) servem para aderir os microrganismos a ela, podem ser eles algas, bacterias, fungos, protozoarios, etc. • PAREDE CELULAR: COMPOSIÇÃO QUÍMICA, DIFERENÇAS ENTRE BACTÉRIAS GRAM NEGATIVAS E POSITIVAS, ESPORULAÇÃO; Bacterias de gram positivo tem parede celular mais espessa formadas por peptideoglicado e acido teicoicos, as de gram negativo possuem a parede mais fina formada por fosfolipideos e polisacarideos. Esporulação das bacterias é quando ela cria uma parede e resistente em todo o citoplasma suspendendo assim sua atividade metabolica para sua sobrevivencia. • AULA PRÁTICA 2 (TÉCNICAS BÁSICAS EM MICROBIOLOGIA) E AULA PRÁTICA 3 (COLORAÇÃO DE GRAM). - Gram positivo coloração violeta - Gram negativo coloraçao vermelha - Preparacao gram - Cultura mista X pura - Esterelizaçoes - Praticas assepticas - Postulado de koch - Isolamento de micro. - Parede celular - Etapas do Gram TÓPICO 3 • CARACTERÍSTICAS DOS FUNGOS/DIFERENÇAS EM RELAÇÃO ÀS BACTÉRIAS: UNICELULARES E PLURICELULARES, EUCARIONTES, COMPOSIÇÃO DA PAREDE CELULAR (QUITINA); - Os fungos apesar de serem semelhantes as bacterias muita das vezes, suas diferenças sao tamanho pois os fungos sao maiores que as bacterias, sua estrutura como parede celular, os fungos podem ser uni ou pluricelulares, sao eucariontes e tem formato oval ou circular, - e as bacterias procariontes, podem ser circulares, em formas de bacilos ou espiral, arranjos de diferentes formas, a parede celular das celulas gram ( + ) sao mais espessas formadas por peptideoglicano e acido teicoico e as gram ( - ) polissacarideos e fosfolipideos. • DIMORFISMO FÚNGICO; Um fungo dimorfico pode se apresentar de duas formas, se submetidos a 25°c viram fungos com filamentos (mofo), porem esse mesmo fungo se exposto a 37°c vira levedura, muitos exemplos de fungos dimorficos são patogenicos, ou seja, pode causar micose que evoluem com certa gravidade. • AULA PRÁTICA 4 E 5 (MICROCULTIVO/CULTIVO EM LÂMINA). Formas: cocos e bacilos Reação do gram (+) roxo, (-) vermelho Arranjo: streptococus, staphylococus - Observaçao microscopica de fungos – meio de cultura agar saboraud com cloranfenicol TÓPICO 5 • FATORES QUE INFLUENCIAM O CRESCIMENTO DE MICRORGANISMOS IN VITRO (EM LABORATÓRIO): • NUTRIENTES (MEIOS DE CULTURA), TEMPERATURA E ATMOSFERA GASOSA: - Temperatura 37°C - Atmosfera gasosa - Nutrientes ( meios de cultura) - Proteinas (peptonas), carboidratos (monossacarideos) e minerais ( sais). - Bacterias e fungos MEIOS DE CULTURA ENRIQUECIDO E SELETIVOS; TEMPERATURA: PSICRÓFILOS, MESÓFILOS E TERMÓFILOS; - Meios de cultura: Agar sangue, agar saboraud, agar manitol e agar maccnkey - PSICROFILOS: são microrganismos que desenvolvem em baixas temperaturas (ate 20°C) o melhor entre 10°C e 15°C, ex: pseudomonas sp. - MESÓFILOS: Sao micro que se desenvolvem engtre 25°C a 40°C ( maioria dos fungos patogenicos em humanos). - TERMOFILOS: sao os micro que se desenvolve entre 40°C ate 85°C. ATMOSFERA GASOSA: AERÓBIO, ANAERÓBIO, MICROAERÓBIO E FACULTATIVO. - Aerobio: crescem na presença de oxigenio - Anaerobio: nao crescem na presença de oxigenio - Microserobio: - Facultativo: micro. Que se desenvolvem tanto na presenta quanto na ausencia de microrganismos PQ AS ANAEROBIAS NAO SOBREVIVEM QUANDO EXPOSTAS AO OXIGENIO??? R: NAO PRODUZ ENZIMAS CAPAZES DE DEGRADAR OS RADICAIS LIVRES NA CELULA. • AULAS PRÁTICAS 6 E 7: MEIOS DE CULTURA ÁGAR SANGUE, ÁGAR SABOURAUD C/ CLO, ÁGAR MANITOL E ÁGAR MACCONKEY. - AGAR SANGUE: qualquer microrganismo cresce nele, altamente nutritivo, pelo fato de que tudo cresce nele as vezes se torna dificil separar as colonias. ele permite reconhecer propriedades hemoliticas do microrganismo, quebra de globulos vermelhos, virulencia gerar alguma dano ao hospedeiro. - Agar Saboraud: meio seletivo para FUNGO (Cloranfenitol) antibiotico, assim as bacterias não crescem, podendo assim vizualizar os fungos, caso cresca significa que ela é resistente aquele antibiotico. Obs: A candida é um fungo unicelular. - Agar Manitol: meio de cultura para gram (+) com grande consentração de cloreto de sodio - Nacl (7,5 a 10%),que impedem outras bacterias de crescerem. meio de cultura do staphylococus aureus. - Agar Macconkey: meio seletivo para gram (-) com corante (cristal violeta) 1mg/L, que inibe as gram (+) de crescerem.
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