Identificação de Fungos

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13/09/2021
Micologia e 
Virologia
Identificação das características 
microscópicas de fungos causadores 
de micoses cutâneas e micoses 
superficiais oportunistas
Pedro Mareti Maçaira Fígaro
 Aprender a identificar através do
microscópio, fungos causadores
de micoses cutâneas e micoses
superficiais oportunistas
Vamos para a 
prática!
Identificação de fungos e coloração
Proposta da Aula Prática:
1. Identificação ao microscópio de fungos causadores de micoses cutâneas 
e micoses superficiais oportunistas
Materiais para a Aula Prática
 Trichophyton mentagrophytes
 Trichophyton rubrum
 Microsporum canis
 Microsporum gypseum
 Aspergillus fumigatus
 Penicillium
Distúrbios das barreiras 
Antibioticoterapia 
Cateteres intravasculares 
Diálises 
Queimaduras, 
úlceras, 
trauma, cirurgias 
Alteração do pH
Defeitos da imunidade inata
Anemia aplástica
Doenças granulomatosas crônicas 
Diabetis mellitus 
Micose oportunistas - FATORES PREDISPONENTES 
Defeitos das defesas do hospedeiro contra fungos 
Defeitos da imunidade celular 
Corticoterapia
Quimioterapia, radioterapia 
AIDS 
Linfomas Leucemias 
Transplantes 
Extremos da idade (prematuros e idosos)
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Intrínsecos (ligados ao hospedeiro)
Fisiológicos (prematuridade, velhice, gravidez) 
Patológicos (neoplasias, hemopatias, lupus eritematoso, diabetis, tuberculose, desnutrição, 
alcoolismo, transplantes, qualquer patologia que altere a imunidade celular) 
FATORES PREDISPONENTES 
Extrínsecos (iatrogênicos) 
Medicamentos (antibióticos, imunossupressores) 
Intervenção cirúrgica, endoscopia, diálise Manipulação invasiva 
(cateter, sondas, ventiladores, alimentação parenteral) 
Agentes físicos (radiação, queimaduras) 
Ambiente hospitalar e tempo de internação
CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS FUNGOS
Características Gerais:
Unicelulares
Ovoides
Estruturas Vegetativas:
• Leveduras
 Longos filamentos
Ramificações verdadeiras
 Estruturas de frutificação
 Filamentosos  Dimórficos
Supra-Reino: Eukarya
Heterotróficos
Parede celular rígida com quitina
Micélio
Estrutura de Frutificação
Hifa
Ramificação
FUNGOS FILAMENTOSOS:
TORTORA, G.J.; FUNKE, B.R.; CASE, CL. Microbiologia. 10. ed., Porto Alegre: Artmed, 2010
Hifas Aéreas
Micélio Aéreo
Esporos
Dente de Leão
Estrutura de
Frutificação
Micélio Vegetativo
FUNGOS FILAMENTOSOS: Reprodução - Esporulação
TORTORA, G.J.; FUNKE, B.R.; CASE, CL. Microbiologia. 10. ed., Porto Alegre: Artmed, 2010
Trichophyton mentagrophytes 
Agente etiológico da Tinea pedis, Tinea corporis e
onicomicose, apresentando pontos brancos nas unhas.
É a espécie mais comumente isolada em tinea corporis
Tinea pedis:
A escamação pode envolver uma pequena área (principalmente
entre os dedos do pé) ou a sola inteira do pé
Como o fungo pode causar rachaduras na pele, o pé de 
atleta pode conduzir a infecções bacterianas
Prevalência 
A transmissão animal-animal ou animal-humano ocorre por 
contato direto ou indireto
Tinea corporis
A infecção geralmente causa placas arredondadas e de cor entre
rosa e vermelha, com bordas escamosas elevadas que tendem a
permanecer claras na parte central.
Desenvolver-se em qualquer parte da pele
Propagar-se rapidamente para outras partes do corpo
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Onicomicose
 Trata-se de uma doença comum
 Responsável por mais de 50% das doenças ungueais.
 Pode causar dor, desconforto ou deformação da unhas acometida
Prejudicando a qualidade de vida
Macromorfologia - Trichophyton mentagrophytes
 As colônias são geralmente planas
 Cor - branca a creme
 Superfície pulverulenta a granular (aspecto de cimento)
 Algumas culturas mostram dobragem central ou desenvolvem tufos centrais elevados
 Pigmentação reversa é geralmente uma cor marrom-amarelada
Trichophyton rubrum
Prevalência 
Agente etiológico da Tinea corporis, Tinea barbae, Tinea cruris, pedis e ONICOMICOSES. 
Tinea barbae
A tinea da barba geralmente causa placas circulares
superficiais, mas pode ocorrer infecção mais profunda.
Rara 
Querion inflamado também pode se desenvolver, o que pode 
resultar em formação de cicatrizes e perda de pelos. 
Tinea cruris
Os fatores associados 
• Umidade (clima quente, roupas quentes e apertadas) 
• Obesidade causando atrito entre as dobras da pele)
Os homens são 
mais acometidos escroto com a virilha
Lesões arciformes pruriginosas estendem-se da dobra crural até 
a região da face interna da coxa
 Bilateral
 Verão
 Indivíduos suscetíveis ou pessoas com oncomicose
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Microsporum gypseum
Prevalência 
Agente etiológico da Tinea capitis, Tinea corporis e Tinea cruris. 
Geralmente produz uma única lesão inflamatória na pele ou no couro cabeludo. 
 Pelos invadidos mostram uma infecção por ectotrix, mas não fluorescem sob a luz 
ultravioleta de Wood.
Comum em indivíduos que 
fazem jardinagem ou que 
trabalham com a terra.
Macromorfologia - Microsporum gypseum
As colônias são geralmente planas, espalhando-se, semelhantes a camurças, com uma 
superfície cor de canela pálida
Muitas culturas desenvolvem um umbigo branco central (domo) ou um tufo branco fofo 
de micélio
Um pigmento reverso marrom avermelhado pode estar presente em algumas linhagens
 As culturas produzem macroconídios abundantes, simétricos, elipsoidais, de paredes 
finas, verrucosas, com 4-6 células. 
 As extremidades distais ou terminais da maioria dos macroconídios
são ligeiramente arredondadas. 
 Numerosos microconídios também estão presentes
Micromorfologia - Microsporum gypseum
Aspergillus fumigatus
Forma: filamentosa.
Infecção humana: 4 tipos predominantes de aspergilose:
* espécie mais predominante na infecção por Aspergillus.
Amostras: pele, unhas, tecidos biopsiados, sangue,
escarro e secreções pulmonares.
Colonização, alergia, infecção disseminada e toxicidade.
As infecções pelas espécies de Aspergillus causam um largo espectro de doenças
nos humanos dependendo do estado imune do hospedeiro.
infecção de natureza sobretudo nosocomial, que vem
apresentando um aumento significativo em sua frequência
nos últimos anos, paralelamente com o aumento do
número de pacientes com baixo status imunológico.
Dentre as manifestações que podem ser causadas pelo Aspergillus, a mais grave 
é sem dúvida a aspergilose pulmonar invasiva (API), 
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Fatores que predispõem o hospedeiro ao desenvolvimento - infecção por Aspergillus
A frequência da API encontra-se entre:
 5% e 15% em pacientes submetidos a transplantes de órgãos
sólidos,
 8% a 15% em pacientes que realizaram TMO e aproxima-se de
70% após 34 dias de neutropenia em indivíduos com qualquer
malignidade hematológica.
 Além de frequente, a API nesses pacientes apresenta uma alta
taxa de mortalidade, que atinge 94% em alguns estudos, mas
que predominantemente gira em torno de 58%.
Maiores responsáveis pelo desenvolvimento da forma invasiva da doença seriam:
 Casos de neutropenia
 Transplante de medula óssea (TMO) e órgãos sólidos
O prognóstico não favorável da API é consequência tanto da imunossupressão do paciente
quanto da dificuldade do diagnóstico clínico
Já que a doença não apresenta sintomas específicos.
Geralmente ocorre um atraso no início do
tratamento -> resultar na morte do paciente.
Porém, infelizmente, a identificação do fungo não
costuma passar de 30% dos casos e por isso existe uma
busca constante de exames que possam indicar a
presença de Aspergillus sp. no paciente imunodeprimido.
O diagnóstico 
precoce é um fator 
fundamental para a 
diminuição da 
mortalidade
A presença de hifas no tecido analisado juntamente com a cultura positiva
para Aspergillus do mesmo local onde a amostra foi colhida é diagnóstico de API.
Padrão ouro para diagnosticar a aspergilose invasiva é o exame histopatológico ou citopatológico
obtido por toracoscopia ou biópsia do pulmão
Entretanto, por ser um procedimento invasivo, a biópsia do 
local afetado é dificilmente realizadaem razão do grande 
risco de hemorragia em pacientes com trombocitopenia.
Macromorfologia - Aspergillus 
fumigatus•Colônias planas, esbranquiçadas, azul esverdeada a cinza quando amadurece
•Reverso não pigmentado, branco ou marfim.
•Textura aveludada a flocosa com topografia geralmente rugosa.
Micromorfologia - Aspergillus fumigatus
 Conidióforos longos
 Vesícula globosa na extremidade, coberta por fiálides
Dão origem aos conídios
•Hifas hialinas, septadas e largas.
•Conídios hialinos em cadeia longa e simples.
•Vesículas em forma de frasco.
•Fiálides unisseriadas.
•Conidióforo largo e longo.
•Células podais.
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Penicillium
O Penicillium é um gênero de fungos, o comum bolor do pão, que cresce em matéria orgânica
Especialmente no solo e outros ambientes úmidos e escuros 
Por contágio, contaminam frutas e sementes e chegam a invadir habitações, sendo 
responsáveis pelos bolores que se instalam em alimentos para consumo humano.
https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Moho_del_Pan_2013_000.JPG
Penicillium
Penicillium notatum
Penicillium marneffei
 Alexander Fleming em 1928
 Esporos de fungos Penicillium notatum
 Impedinde desenvolvimento de bactérias.
 Infecções na pele e trato respiratório do homem
 indivíduos imunodeprimidos
 Síndrome de imunodeficiência adquirida 
(SIDA ou AIDS).
A peniciliose, infecção por Penicillium marneffei é micose oportunística com apresentação
clínica inespecífica.
Penicillium marneffei é a única espécie do gênero, com dimorfismo térmico. 
A infecção se inicia após a inalação de conídios que em
sua fase leveduriforme se desenvolvem dentro da célula
do hospedeiro ocorrendo a disseminação para nódulos
linfáticos, fígado, baço, pulmão, medula e pele. o sistema
retículo endotelial é o principal alvo do parasita.
 Infecção por Penicillium marneffei ocorre principalmente
em pacientes com AIDS, que vivem no Sudeste Asiático.
Febre, perda de peso, anemia, linfonodomegalia generalizada, hepatomegalia, diarreia,
lesões cutâneas numerosas, em especial no rosto, tipo molusco contagioso são algumas das
manifestações associadas à infecção.
Sintomas
A micose tem sido diagnosticada também em transplantados, pacientes em uso de 
corticosteroides e imunossupressores e outros com déficit imunitário celular
 Um aumento significativo da sua incidência está 
diretamente relacionado ao aumento dos casos de AIDS. 
Diagnóstico
O parasita é geralmente intracelular e se observa como
células leveduriformes pequenas com reprodução por
cissiparidade em exame de material de sangue, medula óssea,
biópsia de pele, linfonodos, corado por PAS ou prata.
A micose foi descrita também em pacientes do continente europeu e americano do norte que
apresentaram a peniciliose após visitar regiões endêmicas.
No Vietnam o número de casos aumenta com a estação chuvosa 
A pneumocitose está associada a elevado índice de morbidade e letalidade, quando o 
diagnóstico e o tratamento não são precoces Tratamento
Itraconazol 200 mg/dia é a droga de escolha para as formas leves
a moderadas da doença; anfotericina B (0,6 mg/kg/d durante 15
dias) seguida de itraconazol (400mg/d por 10 semanas) têm sido
empregados com sucesso, nas formas graves.
A cultura em Sabouraud dextrose ágar incubada à temperatura ambiente ainda que
positiva em mais de 70% do material de sangue, pele ou medula, demora algum tempo
para o fungo ser identificado.
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Macromorfologia - Penicillium
 Cultura filamentosa aveludada
 Coloração, inicialmente branca -> torna-se esverdeada
 O cultivo algodonoso 
 coloração rosada a avermelhada
 hifas hialinas septadas 
 conídios típicos de Penicillium
Micromorfologia - Penicillium
Meio de cultura de fungos - Ágar Saboraud
Seletividade e facilidade no cultivo de fungos
pH Levemente ácido Favorece o crescimento de dermatófitos e inibe 
algumas espécies bacterianas de interesse clínico
Cloranfenicol - antibiótico de amplo espectro 
Elevada concentração de dextrose 
 Proporciona uma vantagem para o desenvolvimento dos 
fungos estáveis por osmose
Incubação do Ágar Sabouraud
Vantagens:
Fonte: encurtador.com.br/agzR3 ; encurtador.com.br/krxy0
Mínimo 3 dias em temperatura de 25°C.
 Caldo presente no método serve para controlar a esterilidade e realizar procedimentos 
baseados na utilização de membranas filtrantes
 Fornecido em placas prontas para o uso eliminando o complicado trabalho de preparar o 
meio no laboratório.
Composição parede celular
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