aula 5 - SNC

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Diagnóstico microbiológico
das infecções do Sistema
Nervoso Central (SNC)
Prof. Alan Brito
SNC
 A meningite aguda é uma das infecções mais comuns do sistema
nervoso central (SNC);
 Podem ser causadas por bactérias (meningite bacteriana aguda),
vírus (meningite asséptica), fungos, parasitas e outros;
 Nos últimos anos, temos observado relativas alteracões na
epdemiologia das meningites, devido à vacinação contra
Haemophilus influenzae tipo b, vacinas polivalentes contra
Streptococcus penumonie e aumento de cepas de Streptococcus
pneumoniae não sensíveis à penicilina.
Microrganismos mais comumente
envolvidos
Microrganismo envolvido Faixa etária
 E. coli, S. agalactiae, L. monocytogenes, 
herpes simples tipo 2
Recém-nascido
 L. monocytogenes, S. agalactiae e E. coli < 2 meses
 H. influenzae, S. pneumoniae, N. 
meningitidis
< 10 anos
 N. meningitidis, vírus Adulto jovem
 S. pneumoniae, N. meningitidis Adulto
 Cryptococcus neoformans, Listeria 
monocytogenes
Imunocomprometido
Espécime clínico e coleta
 A amostra (LCR ou líquor ou liquidocefalorraquidiano) deve ser coletada
em tubo estéril e enviada ao laboratório imediatamente e em
temperatura ambiente;
 Volume mínimo recommendável  1 mL para isolamento de bactérias, 2
mL para isolamento de fungos e 2 mL para isolamento de micobactérias;
 Se mais de um tubo for coletado, encaminhar ao laboratório de
microbiologia a amostra que apresenta turbidez.
Controle de qualidade
 Os meios de cultura utilizados devem ser controlados para
verificar se os microrganismos patogênicos mais
frequentemente isolados nesse material clínico apresentam
bom crescimento;
 Reagentes e kits devem ser testados com microrganismos
conhecidos todas as vezes que forem utilizados.
Procedimento Laboratorial
 Para realização de cultura do LCR, outros parâmetros devem ser
avaliados para uma interpretação correta do achado microbiológico;
 Parâmetros que auxiliam na interpretação da cultura de LCR
Contagem de leucócitos
Células predominantes
Dosagem de proteína
Dosagem de glicose
Dosagem de lactato
Parâmetros
PROCEDIMENTO LABORATORIAL
Diagnóstico 
laboratorial
Leucócitos/mm3 Células predominantes Proteínas Glicose Lactato
Normal 0 - 4 Nenhuma ou linfócito 15-40mg/dL 
(adulto) e até 
120mg/dL (RN)
2/3 da 
glicemia
Até 
20mg/dL
Provável etiologia 
viral
0 - 500 Mononucleares (em 
alguns casos, nas primeiras 
24h pode predominar 
polimorfonucleares
Normais ou pouco 
aumentadas (50-
100mg/dL)
Normal Normal
Provável etiologia 
bacteriana
> 500 Polimorfonucleares > 100mg/dL Diminuída Aumentado
Provável 
tuberculose ou 
fúngica
Até 500 Perfil misto > 50mg/dL Normal ou 
diminuída
Aumentado
TESTES RÁPIDOS / LÁTEX
Em casos de infecção aguda, pode ser solicitada a pesquisa de ant ígenos
diretamente no LCR;
Essa pesquisa pode ser realizada ut ilizando-se “kits” comerciais pela
metodologia de aglut inação em lát ex;
Os ant ígenos mais comumente pesquisados são os de N. meninigit idis
sorogrupos A, C, Y, W135 e B/ E, E. col i , S. pneumoniae, Haemophilus
influenzae t ipo b, S. agalact iae e C. neoformans.
Teses rápidos / Látex
 Em casos de infecção aguda, pode ser solicitada a pesquisa de antígenos
diretamente no LCR;
 Essa pesquisa pode ser realizada utilizando-se kits comerciais pela
metodologia de alglutinação em látex;
 Os antígenos mais comumente pesquisados são os de N. meningitidis
sorogrupos A, C, Y, W135 e B, E. coli K1, S. pneumoniae, Haemophilus
influenzae tipo b, S. galactiae e Cryptococcus neoformans.
Teses rápidos / Látex
A sensibilidade do método é variável, dependendo do kit empregado,
podendo oscilar:
 65 a 71% para S pneumoniae;
 88 a 95% para Haemophilus influenzae;
 97% para S. agalactiae;
 64% para Neisseria meningitidis, com 98% de especificidade.
Microscopia
 Microscopia direta
 Coloração pelo método de Gram;
 Coloração pelo método de Ziehl-Neelsen;
 Tinta da China ou Tinta Nanquim.
MICROSCOPIA DIRETA
Microscopia direta
Coloração pelo método de Gram;
Coloração pelo método de Ziehl-Neelsen;
Tinta da China ou Tinta Nanquim.
SEMEADURA PRIMÁRIA
Meios de cultura
Agar chocolate
Agar Thayer-Mart in
Agar sangue
Caldo Tioglicolato
Semeadura primária
 Meios de cultura
 Ágar chocolate;
 Ágar Thayer-Martin; N. gonorrohoeae e N. meningitidis
 Ágar sangue.
Identificação dos principais patógenos
 Streptococcus pneumoniae
 Microscopia pelo método de Gram  Diplococos
Gram positivos lanceolados;
 Padrão de hemólise em ágar sangue  alfa-
hemolítico;
 Teste de susceptibilidade à optoquina  Sensível;
 Teste de bile solubilidade  Solúvel;
 Sorotipagem  Reação de Neufeld ou Quellung
Identificação dos principais patógenos
 Haemophilus influenzae
 Microscopia pelo método de Gram  Cocobacilos ou bacilos Gram
negativos;
 Necessidade de fatores X e V;
 Satelismo;
 Fermentação de açúcares  Glicose (P), xilose (P), frutose (V) e
sacarose (N);
 Prova da catalase  Positiva;
 Sorotipagem  Reação de aglutinação.
IDENTIFICAÇÃO DOS PRINCIPAIS PATÓGENOS
Haemophilus influenzae
Microscopia pelo método de Gram Cocobacilos ou bacilos Gram negat ivos;
Necessidade de fatores X e V;
Satelit ismo;
Fermentação de açúcares Glicose (P), xilose (P), frutose (V) e sacarose (N);
Prova da catalase Posit iva.
Sorot ipagem Reação de aglut inação
H. influenzae
S. aureus
IDENTIFICAÇÃO DOS PRINCIPAIS PATÓGENOS
Haemophilus influenzae
Microscopia pelo método de Gram Cocobacilos ou bacilos Gram negat ivos;
Necessidade de fatores X e V;
Satelit ismo;
Fermentação de açúcares Glicose (P), xilose (P), frutose (V) e sacarose (N);
Prova da catalase Posit iva.
Sorot ipagem Reação de aglut inação
H. influenzae
S. aureus
S. epidermidis
Identificação dos principais patógenos
 Neisseria meningitidis
 Microscopia pelo método de Gram  Diplococos Gram negativos;
 Teste de oxidade e catalase  Positivos;
 Fermentação de carboidratos:
 Glicose  Positivo
 Maltose  Positivo
 Sacarose  Negativo
 Lactosose  Negativo
 Sorotipatem  A, B/E, C, Y e W135
IDENTIFICAÇÃO DOS PRINCIPAIS PATÓGENOS
Neisseria meningit idis
Microscopia pelo método de Gram Diplococos Gram negat ivos;
Teste de oxidase e catalase Posit ivos;
Fermentação de carboidratos Glicose Posit ivo
Maltose Posit ivo
Sacarose Negat ivo
Lactose Negat ivo
Sorot ipagem A, B/ E, C, Y e W135
Identificação dos principais patógenos
 Streptococcus agalactiae
 Microscopia pelo método de Gram  Cocos Gram positivos em cadeia;
 Padrão de hemólise em ágar sangue  beta-hemolítico;
 Bile esculina e NaCl 6,5%  Negativo / Sensível;
 Teste CAMP  Positivo;
 Hidrólise do hipurato  Positivo;
 Sorologia  Grupo B de Lancefield.
Identificação dos principais patógenos
 Listeria monocytogenes
 Microscopia pelo método de Gram  Bacilos Gram positivos curtos;
 Teste da catalase  Positivo;
 Teste da oxidase  Negativo;
 Bile esculina e NaCl 6,5%  Positivo / Resistente;
 Teste CAMP  Positivo;
 Fermentação da glicose  Positivo;
 Padrão de hemólise  beta-hemolítico;
 Motilidade  Móvel em TA (“guarda-chuva”)