bacteria coco negativo F_111001

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INSTITUTO DE CIÊNCIAS DE SAÚDE DE INFULENE
CURSO DE QUALIFICAÇÃO PROFISSIONAL DE TÉCNICOS DE LABORATÓRIO E ANÁLISES CLÍNICAS
Bactérias de Gram Negativo (cocos)
Maputo, Fevereiro de 2025
	
INSTITUTO DE CIÊNCIAS DE SAÚDE DE INFULENE
CURSO DE QUALIFICAÇÃO PROFISSIONAL DE TÉCNICOS DE LABORATÓRIO E ANÁLISES CLÍNICAS
Bactérias de Gram Negativo (cocos)
	Trabalho de Pesquisa a ser entregue e apresentado no Modulo de Microbiologia, para fins de avaliação sob orientação do formador: Amoz Jacinto
	Nomes dos Formandos:	
· Cassamo Clemente _N. 1203
· Carmen Palassa _N. 1202
· Juvêncio Gulele _N.1213
· Ian Arlindo _N. 1208
· Inoc Horácio _N. 1209
Maputo, Fevereiro de 2025
Índice
2.Objectivos	5
2.1.Geral	5
2.1.2.Específicos	5
3.Epidemiologia	6
3.1.Neisseria gonorrhoeae e Neisseria meningitidis	6
3.1.2.Características de crescimento das Neisserias	7
3.1.3.Fisiologia e Estrutura	8
3.2.Doenças Clinicas	9
3.2.1.Neisseria meningitides	10
3.3.1.Diagnóstico Laboratorial	12
3.3.2.Microscopia	12
3.3.3.Detecção de Antígeno	13
3.4.Testes Baseados em Ácidos Nucleicos	13
3.4.1Cultura	13
3.5.Identificação das Neisserias	14
3.5.1.Moraxella catarrhalis	15
3.5.2.Acinetobacter baumannii	16
4.Conclusão	18
5.Referências Bibliográficas	19
1.Introdução
O presente trabalho fornece uma visão geral do género niesserias que são bactérias dee gram negativo, são estruturas imóveis, possuem uma forma adjacente achatado e possuem em sua disposição pares (Diplococos), onde também conceituamos detalhadamente acerca das duas espécies das mesmas, dentre elas, temos as N. gonorrhoeae que é transmitida primariamente por contacto sexual e as N. meningitidis, a maioria das infecções são as meningites. 
Após clamidia, N. gonorrhoeae é A segunda causa de doenças sexualmente transmitidas nos Estados Unidos. A incidência da infecção é a mesma em homens e mulheres, desproporcionalmente maior em negros. O pico da incidência da doença ocorre na faixa etária entre 15 e 24 anos.
N. meningitidis é um paradoxo que, frequentemente, coloniza a nasofaringe de pessoas saudáveis. Porem, constitui a segunda causa mais comum de meningite em adultos, adquirida em comunidades. Pode causar sepse fatal e de evolução muito rápida, e também broncopneumonia em pacientes com doença pulmonar de base.
2.Objectivos
2.1.Geral
· Descrever as bactérias de Gram Negativo (cocos)
2.1.2.Específicos 
· Explicar a fisiologia e a estrutura das de Neisseria de Gram negativo;
· Conhecer o diagnóstico laboratorial das Neisseria de Gram negativo;
· Explicar as principais patologias das bactérias de Gram Negativo.
3.Epidemiologia
A gonorreia ocorre naturalmente somente em humanos; a doença não tem outro reservatório conhecido. Após clamidia, N. gonorrhoeae é a segunda causa de doenças sexualmente transmitidas nos Estados Unidos. A incidência da infecção é a mesma em homens e mulheres, desproporcionalmente maior em negros. O pico da incidência da doença ocorre na faixa etária entre 15 e 24 anos. A incidência da doença diminuiu no período de 1978 a 1997; no entanto entre 1998 e 2006 a incidência de gonorreia permaneceu constante. Em 2006, quase 360 mil novas infecções foram relatas nos Estados Unidos.
N. gonorrhoeae é transmitida primariamente por contacto sexual. As mulheres tem 50%de chances de adquirir a infecção após um único contacto com um homem infectado, enquanto para o homem o risco é a aproximadamente 20%. O risco da infecção aumenta à medida que aumentam os encontros sexuais com parceiros infectados.
O principal reservatório do gonococo é a pessoa infectada e assintomática. Portadores assintomáticos são mais comuns entre mulheres que em homens. Cerca de 50% das mulheres são assintomáticas ou apresentam infecções brandas enquanto na maioria dos homens é sintomática no início da infecção. Geralmente, os sintomas desaparecem em poucas semanas em pessoas não tratantadas e então se estabelece o estado do portador. 
3.1.Neisseria gonorrhoeae e Neisseria meningitidis 
A família Neisseriacea abrange os géneros Neisseria, kingella Eikenella, Simonsiella e Alysiella. As neisseria são cocos gram-negativos que habitualmente ocorrem em pares diplococos. A Nisseria gonorrhoea e gonococo e a Neisseria meningitidis meningococo são patogénicas para os seres humanos e, em geral encontradas em associação com células polifornucleares ou no interior dessas células. Algumas neisserias são habitantes normais das vias respiratórias humanas, raramente ou nunca provocam doença, e são encontradas fora das células. 
A infecção causada por N. gonorrhoeae é conhecida há séculos. Apesar da antibioticoterapia eficaz, a gonorreia é uma das doenças sexualmente transmitidas mais comuns nos Estados Unidos. N.gonorrhoeae é sempre considerada um patógeno. N. meningitidis é um paradoxo que, frequentemente, coloniza a nasofaringe de pessoas saudáveis. Porem, constitui a segunda causa mais comum de meningite em adultos, adquirida em comunidades. Pode causar sepse fatal e de evolução muito rápida, e também broncopneumonia em pacientes com doença pulmonar de base. 
Os gonnococos e os meningococos estão estreitamente relacionados, com 70% de homologia do DNAse, e são diferenciados com base em alguns testes laboratoriais e certas características especificas: os meningococos possuem cápsulas de polissacarídeos, raramente tem plasmídeos, enquanto a maioria dos gonococos os possui. Entretanto, o aspecto mais importante é que as duas espécies são diferenciadas pelos quadros clínicos habituais das doenças que provocam: tipicamente, os meningococos são encontradas nas vias respiratórias superiores e causam meningite, enquanto os gonococos provocam infecções genitais. Todavia, observa –se uma superposição nos aspectos clínicos da doenças causadas por gonococos e meningococos. 
3.1.2.Características de crescimento das Neisserias
As neisserias crescem melhor em condições aeróbicas, porem algumas crescem em ambientes anaeróbicas. Tem exigências complexas para o seu crescimento. A maioria de esses microrganismos oxida carbohidratos, produzindo ácido, e seus padrões de fermentação de carbohidratos proporcionam um meio para que se possa distingui-los. As neisserias produzem oxidase e reacções positivas para oxidase. O teste da oxidase e essencial para sua identificação. Quando as bactérias são colocadas em papel de filtro embebido com cloridrato de tetrametil parafenilenodiamina (oxidase), as neisserias rapidamente adquirem uma coloração púrpura escura.
 Os meningococcos e os gonococos crescem melhor em meio de cultura que contenham substâncias orgânicas complexas, como sangue aquecido, hemina e proteínas animais em uma atmosfera que contenha 5% de dióxido de carbono. Exemplo: recipiente com vela. 
O crescimento é inibido por alguns componentes tóxicos do meio. Exemplo: ácidos graxos ou sais. Os microrganismos são rapidamente destruídos por ressecamento, luz solar, calor húmido e por muitos desinfectantes. Produzem enzimas autolíticas que resulta em rápido intumescimento, bem como lise in- vitro a 25°C e pH alcalino.
3.1.3.Fisiologia e Estrutura
As espécies de Neisseria são bactérias Gram negativas, aeróbias, tipicamente na forma de cocos (0,6 a 1,0 µm de diâmetro) e dispostas em pares (diplococos) com os lados adjacentes achatados (lembrando grãos de café;). São imóveis e não formam endoesporos. Todas as espécies são positivas para oxidase e a maioria produz catálase, propriedades que combinadas com coloração de Gram e a morfologia permitem a identificação rápida e presuntiva de um isolado clinico. A oxidação (não a fermentação) de carboidratos induz à produção de ácidos. As cepas de N.gonorrhoeae produzem ácido através da oxidação da glicose e N. meningitidis oxida glicose e maltose. Outros carboidratos não são oxidados. Este perfil de utilização de carboidrato é útil para diferenciar estes patógenos das outras espécies de Neisseria.
 
As espécies não patogénicas podem crescer em ágar nutriente a 35°C - 37°C. Ao contrário, o crescimento de N.meningitidisem ágar nutriente é variável. N.gonorrhoeae é um microrganismo fastidioso, que exige meios complexos para o crescimento, sendo prejudicado pela exposição à baixa humidade ou aos ácidos graxos. Todas as cepas de N. gonorrhoease necessitam de cistina e fonte de energia (exemplo: glicose, piruvato e lactato) para o crescimento, e muitas cepas necessitam da adição de suplementos como aminoácidos, purinas, pirimidinas e vitaminas. 
Amido solúvel é adicionado ao meio para neutralizar o efeito tóxico dos ácidos graxos. Por tanto, N. gonorrhoeae não cresce em ágar sangue, mas cresce em ágar chocolate e outros meios enriquecidos. A temperatura óptima de crescimento é de 35°C a 37°C, uma vez que o microrganismo é sensível a temperaturas mais baixas. N gonorrhoeae requer ou se beneficia de uma atmosfera húmida com 5% de dióxido de carbono (CO2) para seu crescimento. A natureza fastidiosa deste microrganismo torna difícil o seu isolamento em espécimes clínicos, no entanto, a bactéria é facilmente transmitida pelo contacto sexual.
A estrutura de N. gonorrhoeae e N.meningitidis é típica de bactéria Gram negativa, com uma fina camada de peptideoglicano localizada entre a membrana citoplasmática e a membrana externa. O principal factor da virulência de N.meningitidis é a cápsula polissacaridica. N. gonorrhoeae não possui uma cápsula verdadeira na sua superfície, mas possui uma estrutura semelhante à cápsula com carga negativa. 
Propriedades da cápsula polissacardica do meningococo
· Intensifica a virulência por sua acção antifagocitaria;
· É o antígeno que define os grupos serológicos;
· É o antígeno detectado no líquor de pacientes com meningite;
· É o antígeno presente na vacina.
3.2.Doenças Clinicas 
Gonorreia 
A infecção genital em homens é primariamente restrita a uretra. Após período de incubação de dois a cinco dias ocorre o corrimento uretral purulento e a disúria.
 Aproximadamente 95% dos homens infectados apresentam sintomas agudos. Embora as complicações sejam raras, podem ocorrer epididimite, prostatite e abscesso periuretral. O sítio primário de infecção em mulheres é o cérvix (colo uterino), pois bactéria infecta as células do epitélio colunar do endocervix. A bactéria não pode infectar as células do epitélio escamoso da vagina de mulheres pos-puberais. Pacientes sintomáticas geralmente experimentam corrimento vaginal, disúria abdominal. Infecções genitais ascendentes, incluindo sapingites, abscessos tuboovarianos e doença inflamatória pélvica, são observadas em 10% a 20% das mulheres. 
Gonococcemia
Infecções disseminadas com septicemia e infecção da pele e a articulações ocorrem em 1% a 3% das mulheres infectadas e em muito menor proporção nos homens infectados. A maior proporção de doenças disseminadas em mulheres é causada pelo grande número de infecções assintomáticas não tratadas nesta população. As manifestações clinicas de doenças disseminadas incluem febre, enteralgia migratória, artrite supurativa nos punhos, joelhos e tornozelos e exantema postular numa base eritemotosa sobre os membros, preservando a cabeça e o tronco. N. gonorrhoeae é a principal causa de artrite purulenta em adultos.
3.2.1.Neisseria meningitides
Miningite
Em 2005 foram relatados nos Estados Unidos 1.245 casos de doença meningocóccica (aproximadamente 0,4 caso por 100 mil habitantes). A maioria das infecções era meningite. Geralmente, a doença começa abruptamente com dor de cabeça, sinais meníngeos e febre.
Porem, crianças menores podem apresentar sintomas não específicos como febre e vómitos. A taxa de mortalidade nos pacientes não tratados se aproxima de 100%, mas é menor que 10% entre os pacientes cuja antibioticoterapia apropriada é prontamente instituída. A incidência de sequelas neurológicas é baixa, sendo que as mais comummente relatadas são deficientes auditivas e artrites.
Meningococcemia
Septicemia (meningococcemia) com ou sem meningite é uma doença potencialmente fetal. As manifestações clinicas características são trombose de pequenos vasos sanguíneos e o comprometimento de diversos órgãos. É comum a ocorrência de petequeias no tronco e nos membros inferiores, que podem coalescer, formando lesões hemorrágicas maiores. Pode ocorrer coagulação intravascular disseminada com choque e destruição bilateral das glândulas supra-renais (síndrome de Waterhouse-Friderichsen). Também se pode observar septicemia crónica, mais branda. Bacteremia pode persistir por dias ou semanas e os únicos sintomas da infecção são febre baixa, artrite e petequeias. 
 
3.3.1.Diagnóstico Laboratorial
3.3.2.Microscopia 
A coloração de Gram é muito sensível (acima de 90%) e especifica (98%) para a detecção de infecção gonococica em homens com uretrite purulenta. Porem, a sensibilidade deste método para detectar a infecção em homens assintomáticos é de 60% ou menos. Esse teste também é relativamente de baixa sensibilidade para detectar cervicite gonocócica em mulheres sintomáticas ou não. No entanto, um resultado positivo é considerado confiável de leucócitos polimorfonucleares. Desta forma, a coloração de Gram pode ser utilizada com segurança para diagnosticar infecções em homens com uretrite purulenta e mulheres com cervicite, mas todos os resultados negativos em mulheres e em homens assintomáticos devem ser confirmados por cultura.
A coloração 	de Gram também é útil para o diagnóstico precoce de artrite purulenta, mas sem sensibilidade e especificidade para a detenção de N.gonorrhoeae em pacientes com lesões cutâneas, infecções anorretais ou faringite. Espécies comensais de Neisseria na orofaringe e bactérias morfologicamente similares no trato gastrintestinal podem ser confundidas com N.gonorrhoeae.
N. meningitidis pode ser facilmente visualizada no líquido cefalorraquidiano (LCR) de pacientes com meningite, a menos que o paciente tenha sido previamente tratado com antibióticos. A maioria dos pacientes com bacteremia causada por outros microrganismos possui poucos organismos no sangue e a coloração de Gram não tem valor diagnostico. Ao contrário, pacientes com doença meningocóccica grave, normalmente possuem um grande número de microrganismos no sangue e estes podem ser visualizadas pela coloração de Gram.
3.3.3.Detecção de Antígeno 
Os testes para detecção de antígenos de N.gonorrhoeae são menos sensíveis para cultura ou testes de amplificação de ácidos nucleicos, e não são recomendados, a menos que testes confirmatórios sejam realizados em espécimes negativos. Teste scomerciais para detectar antígenos capsulares de N. meningitidis no LCR, sangue e urina (onde os antígenos são excretados) foram amplamente utilizados no passado, mas recentemente caíram em desuso nos Estados Unidos porque estes testes são menos sensíveis que a coloração de Gram, e podem ocorrer reacções falso-positivas, particularmente na urina.
3.4.Testes Baseados em Ácidos Nucleicos
Testes de amplificação de ácido nucleico (NAA) específicos para N.gonorrhoeae têm sido desenvolvidos para a detenção direita da bactéria em espécimes clínicos. Estes testes são sensíveis, específicos e rápidos (resultando viáveis em 4 horas). Estão disponíveis combinações destes testes para a detecção de N.gonorrhoeae e Chlmydia, e os mesmos estão substituindo a cultura na maioria dos laboratórios. O problema básico desta estratégia é que estes testes não podem ser usados para monitorar a resistência aos antibióticos dos patogenos identificados.
3.4.1Cultura
N.gonorrhoeae pode ser facilmente isolada de espécimes genitais se forem tomados os cuidados adequados durante a colheita e o processamento do espécime. Após 48horas em meios enriquecidos os gonococos e os meningococos formam colónias mucóides convexas, elevadas e brilhantes, com 1 a 5 mm de diâmetro. As colónias são transparentes ou opacas, não pigmentadas e não hemolíticas. Niesseria flavescens, niesseria cinérea, podem exibir pigmentação amarela.
Todos os espécimes genitais, retais e da faringe devem ser inoculados em meios não selectivos (por exemplo; ágar chocolate) e meios selectivos (por exemplo; meio ThaYER-Martin modificado)que inibem o crescimento de microrganismos contaminantes, como organismos comensais que colonizam a superfície dessas mucosas. O meio não selectivo devera ser usado porque algumas cepas gonococo são inibidas pela vancomicina presente na maioria dos meios selectivos. Estes microrganismos também são inibidos por ácidos graxos e traços de metais presentes nos hidrolisados de peptona e ágar utilizados comummente nos laboratórios (ágar sangue, ágar nutriente). Os gonococos morrem rapidamente se os espécimes secarem. Portanto, o ressecamento e as temperaturas frias devem ser evitados e os espécimes devem ser inoculados em meios pré-aquecidos no momento da colheita.
3.5.Identificação das Neisserias
Espécies de Neisseria patogénicas são, preliminarmente, identificados por serem oxidase-positiva, diplococos Gram negativos e por crescerem em ágar chocolate ou em meios selectivos para espécies patogénicas de Neisseria. A identificação é feita pelo perfil de oxidação de carboidratos e outros testes seleccionados.
Fermentação de açúcar 
Meio de New York City - 37°C, 5% de CO2 em ambiente húmido
3.5.1.Moraxella catarrhalis
Moraxella catarrhalis é um diplococo fastidioso, imóvel, Gram-negativo com tamanho variável muitas vezes maior que o meningococo ou o gonococo, aeróbico , oxidase positivo que pode causar infecções do sistema respiratório , ouvido médio , olho , sistema nervoso central e articulações de humanos . Em ágar sangue, o organismo forma colónias pequenas, opacas, cinza claro de 1 a 3mm de diâmetro, circulares, não hemolíticas, quando deslocadas, tendem a permanecer intactas e deslizam na superfície do ágar semelhante a um jogo de hóquei no gelo. 
Patologias Relacionadas:
· Otite média, Sinusite, Bronquite, entre outras.
Otite média
 É um grupo de doenças inflamatórias do ouvido médio. Os dois principais tipos são a otite média aguda (OMA) e otite média com efusão (OME). A OMA é uma infecção súbita que geralmente se apresenta com dor no ouvido.
Diagnóstico laboratorial
A identificação da Moraxella catarrhalis 	Envolve a colecta de amostras clinicas, como secreções respiratórias ou lavado Bronco-alveolar, seguida de cultura e testes bioquímicos.
Meios de cultura
· Ágar sangue: permite o crescimento da Moraxella catarrhalis e possibilita a observação de suas características como emolisse (destruição dos glóbulos vermelhos). As colónias de Moraxella catarrhalis são geralmente pequenas, cinzentas e opacas.
· Ágar chocolate: e um meio enriquecido que fornece nutrientes adicionais para o crescimento da Moraxella catarrhalis, facilitando seu isolamento.
· Ágar mueller hinton: pode ser utilizada para o teste de sensibilidade e antibióticos (antibiograma).
Testes bioquímicos 
· Teste de oxidase – a M. catarrhalis e oxidase positiva, o que significa que produz enzima oxidase;
· Teste de catálase-M. catarrhalis e catálase positiva o que indica a produção de enzima catálase;
· Teste de fermentação de carbohidratos – a M. catarrahlis não fermenta a maioria dos carbohidratos como glicose e lactose;
· Teste de produção de DNAse – a M.catarrahalis produz enzima DNAse, que quebra o DNA.
3.5.2.Acinetobacter baumannii
 Acinetobacter baumannii é uma espécie de bactéria aeróbia Gram-negativa, com distribuição cosmopolita no solo, onde desempenha um importante papel na decomposição de compostos aromáticos. Apesar de ser a segunda bactéria não-fermentadora mais frequentemente isolada em humanos, apresenta elevada patogenicidade, com estirpes resistentes à maioria dos antibióticos. 
Identificação 
A identificação de A. Baumanni geralmente envolve uma combinação de métodos incl5uindo: 
Colorão de Gram – permite classificar a bactéria como gram negativo e determinar sua morfologia (cocobacilos) 
Cultura 
· A bactéria e cultivada em meios de cultura apropriados, como Ágar sangue ou A. Macconkey
· As colónias de acinetobacter são geralmente opacas e de coloração cinza com um aspecto mucóide.
Testes bioquímicos
Permitem identificar as características bioquímicas específicas das bactérias, auxiliando na identificação da espécie.
· Teste de oxidase - A acinetobacter e oxidase negativo; 
· Teste de catálase - A acinetobacter e catálase positiva;
· Teste de motilidade – A acinetobacter e geralmente imóvel;
Identificação molecular
· Testes de Biologia molecular, como PCR e sequenciamento do DNA, podem ser utilizadas para identificar a bactéria a nível genético. 
Manifestações clínicas
Pulmões pneumonia nosocomial (infecção hospitalar) associada a ventilação mecânica, pneumonia comunitária (menos comum)
Sangue Bacteriana (infecção na corrente sanguínea), que pode levar a sepse, uma condição grave com risco de morte.
Meninges – meningite (infecção das membrtanas que envolvem o cérebro e a medula espinhal)
4.Conclusão
Em forma de síntese, o presente trabalho esteve centrado na discrição, das espécies de niesserias, que são bactérias de gram negativo, e são incubadas em situações aeróbicas (O2), tipicamente apresenta-se na forma de cocos, medem 0,6 a 1,0 µm de diâmetro e despostas em pares (Diplococos), com os lados adjacentes achatados (lembrando grãos de café) são imóveis e não formam endoesporos. Para além disso as niesserias apresentam dois tipos de espécies bacterianas: N. gonorrhoeae gonococos e N. minengitidis meningococos são patogénicas para seres humanos, e em geral encontrados associado com células poliformonucleares ou no interior da célula. 
A infecção causada por N. gonorhoeae e conhecida há séculos. Apesar da antibioticoterapia eficaz, a gonorrhoeae e uma doença sexualmente transmitidas mais comuns nos estados Unidos e pouco em Moçambique. A N. meningitids e um paradoxo que, frequentemente, coloniza a mesofaringe de pessoas saudáveis. As niesserias em torno de crescimento e melhor em condições aeróbicas. Porem algumas crescem melhor em ambientes anaeróbicos.
5.Referências Bibliográficas 
· Geo. F, Brooks, et al (2014). Microbiologia Médica, de Jawetz, Melnick e Adelberg, 26ª Edição.
· Patrick R. Murray, et al (2010). Microbiologia Médica, 6ª Edição. Rio de Janeiro.
· Warren, Levinson. (2014). Microbiologia Médica e Parasitologia, 10ª Edição. Porto Alegre. 
 
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