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Alexandre Adriano Arroteia Extração de DNA do morango Monte Carmelo - MG 22 de fevereiro de 2024 Sumário Sumário . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 1 INTRODUÇÃO . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3 2 MATERIAIS UTILIZADOS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5 3 MÉTODODOS EXPERIMENTAIS . . . . . . . . . . . . . . . . . 7 4 CONSIDERAÇÕES FINAIS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9 REFERÊNCIAS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11 1 Introdução Segundo (LEWONTIN et al., 2013), genética é o estudo de todos os aspectos dos genes e genes são definidos como as unidades fundamentais da informação biológica, tais ge- nes são compostos por DNA (ácido dioxirribonucleico). Assim o estudo do DNA é de suma importância para o entendimento da genética que é uma área fascinante, com diver- sas aplicações, como por exemplo, na área médica gerando conhecimentos relacionados a saúde humana no que tange a uma qualidade de vida mais saudável, na agricultura permi- tindo a obtenção de alimentos. (SNUSTAD; SIMMONS, 2013) Atravéz do melhoramento genético podemos desenvolver novas variedades de plantas, animais e microrganismos que proporcionarão um desenvolvimento na produção de alimentos. O DNA, que possui a função de armazenar todas as informações genéticas codificadas, é conhecido como a molécula da hereditariedade e está no núcleo da célula. Para a extração do DNA afim de estudos, é necessário a degradação da membrana celular, que é formada por uma dupla camada lipídica. A extração do DNA é realizada com o auxílio de uma solução preparada para esse obje- tivo. Tal solução tem a finalidade de romper a membrana plasmática e outras membranas. O detergente contido na solução extratora permite a desestruturação das moléculas de li- pídios das membranas. Com a ruptura das membranas o conteúdo celular, incluído as proteínas e o DNA, soltam-se e dispersam-se pela solução. A adição de sal (NaCl) na solução proporciona um ambiente favorável à extração do DNA. O sal contribui com íons positivos que irão neutralizar as cargas negativas do DNA. A utilização de álcool gelado torna possível a visualização das moléculas, que se agru- pam formando vários filamentos muito finos parecendo nuvens flutuando na solução. Isso ocorre, pois, as proteínas são insolúveis em álcool. Como o DNA é menos denso que a água e os restos celulares, ele "fluta"no álcool. Por fim, a utilização do morango (Fragaria ananassa), se justifica pela sua macies e assim são fáceis de serem amassado, o que se faz necessário para a extração do material genético. Os morangos maduros também produzem pectinases e celulases, que são enzimas que degradam a pectina e a celulose, respectivamente, presentes nas paredes celulares das células vegetais. Além disso, os morangos possuem muito DNA: eles possuem 8 (oito) cópias de cada conjunto de cromossomos, ou seja, são octoplóides. 2 Materiais Utilizados 1. 1 saco plástico; 2. aproximadamente 10 morangos maduros; 3. aproximadamente 500ml de álcool etílico relado ou álcool 70%; 4. 1 tubo de ensaio limpo; 5. 1 palito de madeira 6. 1 becker ; 7. 10ml de solução de extração de DNA: 15ml de cloreto de sódio (NaCl); 900ml de água mineral; 50ml de detergente incolor; 8. aparato filtrante: 1 filtro de papel descartável; 1 funil. 3 Métododos Experimentais Foram colocados os morangos, previamente lavados e sem as sépalas, em um saco plástico e esmagados com as mãos por, aproximadamente, 2 minutos. Foi adicionada a solução extratora ao conteúdo do saco plástico; Realizou-se a mistura apertando todo o conteúdo com as mão, por aproximadamente 1 minuto, até a homogeneização; O conteúdo do saco plástico, morangos misturados com a solução extratora, foi derra- mado no aparato filtrante e deixado filtrar diretamente dentro do becker o líquido coletado no becker foi transferido, em parte, para o tubo e ensaio, até preencher um total de 1/8 do volume total do tubo de ensaio; Com o auxilio de uma pisseta de laboratório foi derramado o álcool gelado dentro do tubo com o liquido, até que o volume do tubo de ensaio ficou preenchido pela metade; Foi mergulhado o palito de madeira dentro do tubo de ensaio no local onde a camada de álcool fez contato com a camada de extrato (líquido); Com o tubo de ensaio ao nível dos olhos foi verificado a formação de uma espécie de nuvem no extrato estudado. 4 Considerações Finais Assim que o álcool foi derramado no material extraído dos morangos amassados, foi observado a formação de faixas brancas com texturas de nuvens. Estas faixas brancas é o material genético, DNA, dos morangos. É importante observar que foi possível a observação no material genético e não da estrutura de dupla hélice do DNA, pois, apesar do comprimento do DNA ser muito longo, a sua espessura é muito pequena, da ordem de alguns nanômetros, o que impossibilita a observação da estrutura de dupla hélice a olho nú. O experimento se mostrou de importância para a observação do material genético e principalmente para o entendimento da utilização da solução de extração. Compreender a forma com que cada molécula utilizada na solução extratora contribui com uma fase da extração do material genético. (GUIMARAES et al., 2020) Referências GUIMARAES, D. et al. Zoneamento agrícola de risco climático (zarc) para o sorgo granífero no brasil. Sete Lagoas: Embrapa Milho e Sorgo, 2020., 2020. LEWONTIN, R. C. et al. Introdução à Genética. [S.l.]: São Paulo: Guanabara Koogan, 2013. 479 p. SNUSTAD, D. P.; SIMMONS, M. J. Fundamentos de Genética. 6. Edição. Rio de Janeiro. Ed. [S.l.]: Guanabara Koogan, 2013. Sumário Introdução Materiais Utilizados Métododos Experimentais Considerações Finais Referências