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RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS EAD 2021 - Bioquímica Humana - AULA 1 (ILZA CARLA MACÊDO)
6 pág.

Bioquímica Faculdade Maurício de Nassau de RecifeFaculdade Maurício de Nassau de Recife

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## Resumo das Aulas Práticas de Bioquímica Humana – EAD Aula 01 (17/03/2022)Este relatório abrange diversas atividades práticas realizadas na disciplina de Bioquímica Humana, focando em temas essenciais como a atividade catalítica da amilase salivar, reações químicas para distinção de carboidratos, precipitação de proteínas e identificação de açúcares redutores. Cada experimento foi conduzido com materiais específicos e seguiu protocolos que permitiram a observação de fenômenos bioquímicos fundamentais para a compreensão dos processos metabólicos e estruturais no organismo humano.### Atividade Catalítica da Amilase SalivarA amilase é uma enzima hidrolase responsável pela degradação dos carboidratos, especificamente do amido, que é um homopolissacarídeo composto por amilose (cadeia linear com ligações α(1→4)) e amilopectina (cadeia ramificada com ligações α(1→4) e α(1→6)). A amilase atua quebrando as ligações α(1→4) da amilose, liberando moléculas menores como maltose e glicose, facilitando a digestão.No experimento, a hidrólise química do amido foi realizada utilizando ácido clorídrico (HCl), aquecimento e resfriamento, que promovem a quebra das ligações glicosídicas e das ramificações da amilopectina. A hidrólise enzimática, por sua vez, foi monitorada pelo teste do lugol, que detecta a presença de amido pela coloração azul/escura. A diminuição dessa coloração indica a atividade da amilase, que hidrolisa o amido. Observou-se que a coloração azul/preta diminui proporcionalmente ao tempo de incubação da enzima com o amido, confirmando a ação catalítica da amilase salivar.### Reação de Seliwanoff para Distinção entre Aldoses e CetoosesA reação de Seliwanoff é um teste químico utilizado para diferenciar aldoses de cetoses, dois tipos de monossacarídeos que se distinguem pela posição do grupo carbonila (-C=O). Aldoses possuem o grupo na extremidade da molécula, enquanto cetoses o possuem no interior.O teste baseia-se na desidratação dos carboidratos em meio ácido (HCl concentrado) sob aquecimento, formando derivados de furfural e hidroximetilfurfural (HMF). Estes derivados reagem com o resorcinol presente no reagente de Seliwanoff, produzindo um composto vermelho. Como as cetoses desidratam mais rapidamente, a coloração vermelha indica sua presença. No experimento, a frutose (cetose) apresentou coloração vermelha, enquanto a glicose (aldose) não apresentou alteração, e a água (controle negativo) também não reagiu, confirmando a especificidade do teste.### Precipitação de Proteínas por Ácidos Fortes e Metais PesadosAs proteínas são polímeros de aminoácidos ligados por ligações peptídicas, cuja estrutura tridimensional é fundamental para suas funções biológicas. A precipitação de proteínas pode ser induzida por ácidos fortes e metais pesados, que alteram a solubilidade das proteínas ao modificar a carga líquida da molécula e promover interações iônicas.No experimento, a ovoalbumina foi submetida a ácido tricloroacético e acetato de chumbo, resultando em uma solução leitosa com precipitado branco. Isso ocorre porque os cátions de metais pesados formam complexos insolúveis (proteinatos) com as proteínas, especialmente em pH alcalino, enquanto ácidos fortes podem levar a precipitação ao atingir o ponto isoelétrico da proteína. A precipitação é reversível com alteração do pH, demonstrando a importância do equilíbrio iônico na solubilidade proteica.### Precipitação Fracionada por Soluções Salinas ConcentradasEste experimento explorou o fenômeno do “salting in” e “salting out”, que descrevem como a adição de sais neutros influencia a solubilidade das proteínas em solução aquosa. O “salting in” ocorre quando sais aumentam a força iônica do meio, promovendo a solvatação das proteínas e aumentando sua solubilidade. Já o “salting out” acontece quando a concentração salina é alta, fazendo com que as moléculas de água se liguem preferencialmente aos íons do sal, diminuindo a solvatação das proteínas e levando à sua precipitação.A adição de sulfato de amônio em solução de ovoalbumina demonstrou a formação de precipitado branco em ausência de água, evidenciando a diminuição da solubilidade da proteína devido ao aumento da força iônica. Esse método é amplamente utilizado para purificação e fracionamento de proteínas em bioquímica.### Teste de Benedict para Identificação de Açúcares RedutoresO teste de Benedict é um método clássico para detectar açúcares redutores, que são monossacarídeos capazes de doar elétrons e reduzir íons metálicos em solução alcalina. O reagente de Benedict é composto por sulfato de cobre, carbonato de sódio e citrato de sódio, e reage com açúcares redutores formando um precipitado de óxido de cobre (I) de cor vermelho tijolo.No experimento, a glicose (açúcar redutor) apresentou precipitação e mudança de cor, enquanto a sacarose (não redutora) e a água (controle negativo) não apresentaram reação. Este teste é qualitativo e tem aplicações clínicas importantes, como a detecção de glicose na urina, auxiliando no diagnóstico de diabetes.---## Destaques- A amilase salivar catalisa a hidrólise do amido, quebrando ligações α(1→4) e liberando maltose e glicose, com atividade monitorada pelo teste do lugol.- A reação de Seliwanoff diferencia aldoses e cetoses pela velocidade de desidratação em meio ácido, evidenciada pela coloração vermelha para cetoses.- A precipitação de proteínas por ácidos fortes e metais pesados depende do pH e da carga líquida da proteína, podendo ser revertida pela alteração do pH.- O fenômeno de “salting in” e “salting out” explica como sais neutros influenciam a solubilidade das proteínas, sendo o sulfato de amônio um agente comum para precipitação proteica.- O teste de Benedict identifica açúcares redutores pela redução do íon cúprico, formando precipitado vermelho, com aplicações clínicas na detecção de glicose.Este conjunto de práticas proporciona uma compreensão integrada dos processos bioquímicos relacionados a carboidratos e proteínas, fundamentais para a biomedicina e áreas afins.

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