Biologia celular

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Conceito estudo da célula funções entre identificação da Robert (1665) = do de cascas de cavidades cela célula Antonie Van análise de de peixes, e anfíbios. Jakob Schleiden e Theodor schwann (1930)= tearia celular: todo ser vivo é por limite do humano 0,001 nm Inm 0,001 Mm Microscópio até 100 Métodos de estudo da 1 Imediato organismo limitado por tempo e observação Supra-vital: é feito a coleta do material ex: da bochecha, Intra- uma substância líquido de contraste é injetada no ela instala área médico quer e as células tumorais se depois, é feita uma (ex: cintilografia 2 é muite usado labora de utiliza uma substância que metabolismo celular (fixador) fixador: físico: calor e é recomendado, calor e congelamento a célula Usado com bactérias. indicados a) Éter, picrico, etc. a célula se retrai ele é eo é alcalino. obs fixador é usado endurecer e proteger material. a 10 % destilada + não existe fixador ideal, usa-se aquele com menor entre as aplicações tamponado ao ph próximo ao organismo e a retrai menos. Melhores resultados b) Carnoy 60% + 30% + 5% dc. acético + 5% cloreto férrico. tecido mistura dos tecidos moles olho, figado, baço) Líquido de solução saturada de picrico + formal ac acético m) (usado na botânica, não é cado no estudo pois quebra a ligação do antigeno e anticorpo) Zenker sulfato de sódio + cloreto de mercúnio 5g + Bicrometo de 2,5g + H2O destilada- deionizada 100ml obs: formal fixa de dentro fona (pq term uma term ação mais lenta devido pícrico e acético, fixando de pl dentro.Método de Rotina: (Passo a Passo) 1. coleta do material com animal anestesiado ou e colocar no * tempo de fixação vai depender do tamanno da peça. a etiquetação é à grafite nos potes. 2. depois da do fixador e coloca de álcool a 70% (min. 24h, 15 dias) 3. do material Para coletar é preciso usando a parafina histológica. Retina Se do material em uma bancada de álcool crescente estruturas) 10 min cada, processo de desidratação. caso de vários materiais usados cassetes. cancerigeno, não cheino forte, 4. Diafanização ou ( solvente de parafina) clareia material e facilita a entrada de panafina, que, posteriormente visualização do material. 0 material 100 % quando a solução do pote estiver transparente, não turva. parafina entra nas cavidades e forma tipo um" Histotécnico equipamento pl facilitar processo. 5. Impregnação (da no material) material por dentro. No pote com material, parte do xilol é coloca-se pote solidifica a parafina. na estufa e adiciona parafina Banho 1:1 (50% xilol e 50% parafina), choque térmico e a parafina mistura com xilol. Banho 100% a- diciona parafina puna Banho 2:1 (2 de parafina de deixa de um dia para Procedimento feito com a estufa aquecida (58-609) 6. Inclusão vai proteger material por Antes de mexer no material precisa moldes e as caixinhas (cl a parafina e Antes de mexer na dentro do banno de parafina, precisa flambar a Depois, molde material é preenchido corm Após a solidificação, está pronto para 7. equipamento (fatia o material solidificado) Após a fixação da peça, ela pode ser gelada apenas para Um bloco de de madeina é fixado ao bloco pl alinhar a peça. o é fino e forma uma fita do material, chamada de Essa fita pode conter dobras parafina, mas é removivel térmico em a visualização depois. banho mania é feito de ouo e glicerina de Depois é feita a secagem nurma estufa por no min. 24h a de genal) 1. desparafinização 2 de xilol 3-5 minutos cada. 3 minutos 2. porque corantes à base de Hidrata orderm decrescente no álcool até e depois na H2O destilada. 3. coloração a) corante que reage com as da Cora núcleo mais da devido nucleico). 0 tempo de coração vai depender da idade do Após passar a no colocamos na de pois, com a de sais presentes a fixar melhor a cor (deixa + vivo).b) Eosina ácido que reage com as estruturas cora citoplasma A vai depender do tecido. coloca fixar, apenas passa erm álcool rapidamente tempo também vai depender da idade do 1 dura no anos. 4. para fungos Mesmo processo de menos tempo, pois e. uma e também por causa do corante. crescente no depois é tirada uma 5. Diafanização: limpeza do conante nas Feita em 2 banhos no 6. cola a laminula sobre a previamente limpas solução de Uma gota de (entellan Balsamo do canada) sobre a e cola a coloca na estufa e depois Preparação de de Angulação de 45°, e faz Espena secar um pouco e depois fixa com fixadores de sangue: leishman, wright. Métodos de estudo da para algo específico. (célula) e histoquímica (tecido) isolar a substância no local onde é produzida usado é para a dentro da célula açúcar, matriz extracelular colágeno, fibras 1 1. Periódico de (PAS) corante especifico para glicose glicogênio e * neutros reserva Junta as moléculos de glicose e forma ( metabolizado. produz 70% do nosso 2. Sudan Red (energia) e colesterol ( da membrana e harmonios esteroides) Para corar lipidios não pode usar pois xilol quebra a 3. Black colesterol 4. Reação de Feulgen: cora 0 DNA (Num histograma é possível ver a quantidade de pixel de urma uma foto). 5. Reação de galocianina cora 6. Glicosaminoglicanas Alcian Blue. coram as células calciformes do intestino a comida que veio do estômago e nutri- entes)rico erm componentes como 1. fibras tricômetros cora 3 cores Mallory: 0 colágeno cora o colágeno verde de Picrosirus ou Sirius Red: cona colágeno de rosa identifica colágeno 1e3, observa a formação e substituição) 2. Fibras Resorcina Fucsina sais de prata. 3. Fibras Reticulares impregnação argêntica (cora as fibras reticulares que por exemplo sustentam 0 figado). 3 identifica moléculos especificas nas células. baseia reação Anticorpo = proteina pela alerta e defesa do organismo quando há um agente causador de obenças no corpo. Ele Se liga antigeno. substâncias que imunológico reconnece e estimula uma resposta imunológica. Epítopo específicas da que são alvo de imunes. Anticorpo e antigeno ligam epítopo. Anticuerpos Regiones variables Epítopos Pré- requisito = tecidual deve permanecer e sua estrutura deve ser para que a ligação com anticorpo. obs Quando trabalha um animal anticorpo vir de outro tipo de animal. Usado diagnóstico quando a morfologia e dados clinopatológicos não distinção entre histologicamente semelhantes de tumores malignos. usa apenas 1 anticorpo ( marcado) ex: material que estiver usando for, exemplo, de anticorpo usado pode ser de rato, senão efeito não 2 + sendo 0 marcado. ex: Aqui primeino anticorpo precisa diferente, mos demais ser do mesmo material, que não vai se ligarele se liga primeiro anticorpo. Enzimas que marcam: (+ usada), fosfatase DIRETA INDIRETA Fluoróforo alcalina. Anticorpo secundário Anticorpo primário cromógeno (substância que con), precipta a Epítopo e a marrom ALVO ALVO ligação antígeno anticorpo. Preparo do material no 1. Preserva as Pode usar mas não é tão borm. Aldeídos (formol, glutaraldeido, pode líquido de Bouin, ele interfere na ligação antígeno- anticorpo Epítopo). 2. e para ensaio da com a corta e vai montar a 3. Retina a parafina com xilol 4. Hidnatação Aumenta as chances de ligação do 5. Antigênica traz 0 à sua forma original, que foi modificada no etapa da fixação. Enzimas: de volta receptor estado normal dele. (Pronase, e Proteinase Recuperação por epítopo microondas) forma combinada: digestão e pelo calor Bloqueio das reações inespecificas tenta evitar qualquer chance de ligação do com outra substância leite em pó caseina) Anticorpo é produzido em laboratório. líquida em um frasco. Bloqueio da peroxidase ou fosfatase alcalina endógena: de peróxido de hidrogênio e coloca por cima da (H2O2), neutralizando peroxidase endógena. Metodos de visualização 4 Reação omitida pela interação do isótopo com nitrato de prata presente no papel fotografico) - isotopo um elemento precisa Ser para que for analisado. - Não cromógeno- Resultado pontos escuros em dia há uma forma líquida qual se faz banho mania da lâmina, deixa e leva 2 Criofratura: É feito 0 congelamento da peça com nitrogênio líquido 172°C), depois é e gena um molde (relevo das estruturas) - molde / moldura é feito com líquida + carbono - Apenas é visualizada a topografia do material microscópio de varredura) - ver poros do núcleo. Muito 1 µm 3 Centrifugação fracionada: - Usada na - tecido/célula é macerado e submetido à centrifugação - Sobrenadante e preciptado - Macenação em pilão. - Guanda e analisa precipitado pode ser centrifugado mais vezes (fracionado) até líquido ficar particulas - Permitiu visualização das organelas diferenciação do procarionte para Revolução: descoberta dos ribossomos Procarionte 70s velocidade que as Eucarionte 80s a isso, a conseguiv fabricar que impedem a proteica da a impedem a renovação da parede4 PCR Chain Receptor): -Reação erm cadeia da polimenase - em pegar fragmento de ácido nucleico e formar várias cópias, e depois 0 tipo de gene do segmento. - -Origina genéticos Processo: 1. encontrar os fragmentos 2. copiar fragmento as pontes de e copia as 2 cadeias; abre submetendo material calor). 3. iniciador Primer / (identificador de algum gene) em cada cadeia. 4. de toda a cadeia ( Pega para complementar a cadeia), formando uma nova cadeia. Nova cadeia T A A C T G Primer 5 DNA polimerase forma a cadeia complementar, mas devido à sensibilidade calor, extrain a DNA da bactéria termus (Que vive lugares muito quentes), e a denominaram de "Taq". 6 segmento é colocado no termociclador (de uma molécula ele replica - Técnica usada em laboratórios de analise Detecta doenças não observadas exames comuns - das verifica se as bases coincidem com a amostra (ex: testes de paternidade). 5 DNA Recombinante: - faz uma transgenia fragmento de DNA de uma espécie é inoculado erm outra espécie. - em seres vivos: feito através de de (Material genético) Normalmente pedaço do plasmideo a nele. Resistência e Reprodução - isola DNA, for a extrai gene de interesse, insere 0 transgente no tecido da planta. ( As sementes tamberm transgênicas). Insere na Seiva e chega nas Pode ter efeito nocivo!6 Transcriptase Reversa: Inspinado nos virus uma de RNA, da maquinaria do célula pana as moléculas. 1. Microscópio de luz = funciona com feixe luminoso (Usado no HE) 2. MET (eletrônico de ultraestrutura, pana ver componentes da célula eletrônicos funcionam par feixes de elétrons. 3. MEV= (eletrônico de varredura), topografia, usado na MET: faz a coleta do material todo! usa fixador aldeídos e mistura e forma Karnovsky) Etapas comuns para MEV e MET. fixação ( escurece as membranas), tetróxido de Ósmio (0504) usado pana preservar as à base de H2O destilada membranas celulares, deixa 2h no desidratação álcool acetona (213 banhos) impregnação Resina (cola): Epon, Spurr ou LR ( depois coloca no estufa) inclusão coloca a resina puna moldes de e adiciona material. corte usa uma navalha de ou em nanômetro), leva para e Exclusivo do MET! corta Seca e contrastação poder visualizar com Contrastação impregração de metais pesados no material de Uranila e de chumbo) MEV: Não feito carte pois observa a Mesmas etapas iniciais do MET até a Ponto crítico equipamento que produz um que tira toda a do material Metalização Primeiro fixa em tubos de metais, equipamento cobre material com ouro, prata ou platina Retina epronto visualizar no No próprio microscopio é genado um vácuo pana que as elétrons possam atingin O material Imagem preto e branco + (eletrodenso) = mais material pesado = menos material pesado Consegue ver as sinapses. Microscopio de Luz ultravioleta term um que direciona luz para a amostra feito uma sala escura Não duna por muito tempo, a fluorescência dissipa. term A bater no material emite cor. Usa fluorescente. Microscópio de Observação de esculturas é preciso que alguns materiais importantes a observação de estruturas escuro= claro= actina Microscópio contraste de fase: 0 olho humano não vê a velocidade da luz, e sim a intensidade Contrasta a luz e possibilita ver estruturas não coradas Usado por querm trabalha corm cultivo de células. Mioroscopia confocal: As vezes não há um equilíbrio focal, esse trabalha com laser.Cortes virtuais do estrutura que Usado mais pesquisas Precisa ter 0 corante fluorescente Consegue obter dados ( volume, Estudo da célula: Seres Procariontes: SÓ vistos pelo MET; possuerm citoesqueleto, membrana envolvendo genético - que determina a forma deles é a parede celular. - bactérias, cianobactérias a algas azuis e não - Bacterias parasitas obrigatorias usam da maquinaria da célula a forma da bactéria Rickkelsia e esporo bacterianos diplococos bactéria flagelada estreptococos estafilococos vibriões esperilos bacilos forma da célula STEM CELLS NEURON RED BLOOD CELLS ENTEROCYTES BLASTOCYST FAT CELLS EPITHELIAL CELLS CHONDROCYTE CARDIAC CELLS SMOOTH CELLS SKELETAL MUSCLEBacteria - cápsula fímbrias gelatinosa proteção à meio não muito camada externa camada de parede celular peptidoglucano celular mais espessa, componentes variam tipo de membrana plasmática bactéria DNA em nucleóide Metodo de Gram = de com safranina e violeta Gram positivo A parede celular reage e fica conada com cor ( Camada peptideoglicana tecóico + ác lipotecoico flagelo Gram A parede celular não se cona Fico com cor rosa (proteoglicanas + glicoproteinas + memb + fímbria: locomoção ancoragem * nem toda bacteria term parede fimbrias sexuais passam material genético pl outra célula term term nunca 2. Pode ser pana Separar a célula terum ligado a ele ou Nucleóide material genetico preso membrana pelo septu procarionte, nucleoide; enzimos que a respinação corpúsculos elementares local onde enzimas produção de ATP fragmento de DNA Solto independente do serve resistência a medicamentos e meio ambiente. Ribossomos proteica, organela células Transferência de Material Transformação Processo biológico que permite às incorporar DNA externo, originado de outnas bactérias mortas e Mais recorrente em laboratório Toda a incorporação é no não no Duplica e passa Recorrente no natureza Processo de transferência de material entre duas doadora (virulenta) e outra receptora (não virulenta) por meio dos fimbrias a pontes 3 Transdução É mais É um mecanismo de transferência de DNA entre bacterias por meio de virus, sepas de mesma espécie. generalizada qualquer gene pode que limita a alguns genesTransformação Transformação Molécula de DNAcircular Fragmentos de bacteriana obs que é é plasmideo! DNA pequeno Lise celular Quebra bacteriana do DNA Fragmentos de DNA ligam-se superficie da célula receptora. fragmento de incorporado à célula receptora fragmento de DNA integrado ao cromossomo da célula receptora Célula transformada Conjugação Transdução DNA do bacteriófago Durante ciclo Em uma injetado para iniciar um fragmentos de DNA DNA bacteriano insere se dentro bacteriano são empacotados do novo cromossomo hospedeiro em capsideos do fago. por meio de DNA de fago Cromossomo bacteriano Capsideo do fago Cromossomo da célula receptora Reprodução Assexuada divisão por invaginação membrana pana dentro da formando septos a duplicação do material genético maioria consegue se dividir sem parasitar outra célula Os septos genando uma nova bactéria Célula-mãe Bipartição Células-filhas Cianofíceas / Algas azuis / Cianobactérias portadores de um de que guardam que pigmentos (ficolilina, ficoeritrina) e serve para fazer eles captam energia solar e mandam para a célula. não capta comprimentos de onda vermelhos a azuis, mas pigmentos conseguem e transformam para Phycobilisome Thylakoid membrane Thylakoids Ribosomes Nucleoid Não são patogênicas mas podem ser tóxicas Carboxysome RuBisCO Cell wall Cell membrane Peptidoglycan layer Outer membrane Mucoid sheath Capsule Slime coat cyanobacteriumEucariontes plasmatica sepana a do meio externo composição proteínas e na maioria, Glicerol (Parte Parte Polar Testa idrofila Fosfato ÁC gnaxo (Parte Glicerolo Parte dentro Membrana plasmatica outro lipídio importante presente no membrana é colesterol de Interno della cellula membrana e hormônios esteroides) Em excesso é nocivo, causando infarto, AVC e trom- Coda idrofobica bose. garante a fluidez da membrana ou impermedivel) della cellula * Lipídeo + Açúcan = (funcionam como receptores) Acidi grassi Proteína + Açúcar = glicoproteina Fosfolipide Proteínas Perifericas (externas, não atravessa a membrana, associados a um grupo de (glicose, galactose) formando uma glicoproteína. Erm algumas possui função receptora Integrais (internas) transporte do canal proteico da membrana Modelos de de membrana mais viavel de analisar de (ponque quando maduras, elas penderm núcleo e todas as organelas) 1 Nageli e primeinos a que tinha algo que a célula do meio externo. 2 Charles Ernest Overton que a membrana tinha 1 camada de lipídeos (monocamada lipídica) 3 Irving Langmuir Tina de = disse como lipídeos estavam organizados membrana 4 Goster e Grendel formularam a teoria da bicamada uma camada voltada para a parte externa e a camada voltada para a parte interna 5 e Danielli Propusenam a camada de proteína parte e outra camada na parte interna (Modelo do unidade de membrana 6 Robertson Propôs a estrutura trilaminar e um padrão de membrana (Quando usado de ele impregna no glicerol dos 7 Singer e Modelo do mosaico tanto as proteínas quanto lipídeos mobilidade pelaGlicoproteína Carboidrato Glicolipídeo Modelo do mosaico fluido! Proteína Colesterol globular Proteína integral Proteína Proteína alfa-hélice Proteína de canal periférica Especializações da Aplical 1. Microvilosidade membrana parte aplical, em forma de dedo A célula a membrana lateral para fora ( evaginação) aumentando a superficie de contato mudar É mais espessa Vista no MET. basal (ex: células 2. Estereocilios a mesma coisa das microvilosidades, mas são mais Função de troca de substâncias (ex: epididimo). Visto no MET e de 3. e flagelas revestidos internamente por para a movimentação e transporte de 4. Zona de Adesão Aproximação das dos células (as membranas se aproximam mas não entre as membranas há um espaço que é preenchido pela proteina Função de aderência uma célula a impedindo que se solte) 5. zona de oclusão membranas fundidas uma outna encostam) Função de aderência 6 estrutura em forma de disco que é encontrada entre as células Ela prolongamentos (proteínas) pana as duas célulos vizinhas e prende as duas É constituído por uma place central (rica proteinas chamadas de desmoplaquinas) e as chamadas de ou filamentos de 7. uma célula emite para dentro de aumentando a superfície de contato entre as células Função: de substâncias entre as células 8. Junções (sinapse elétrica) canais formados por proteína caderina entre uma célula e para imediata de substâncias São 6 de uma célula mais 6 proteínas de outra célula que formam um canal entre elas. Função passar de forma mais as para as condunto é chamado de conetons. fica base, se liga a uma membrana que sepana tecido epitelial do tecido conduntivo ( lâmina basal)aplical = microvilosidade, estereocilios, cílios e flagelos. Microvilosidades de adesão, zona de Dermossomos, Zônula de oclusão Zônula de adesão Desmossomo basal= Filamentos de queratina Junção comunicante Hemidesmossomo Lâmina basal Transporte atnavés da membrana 1. Passivo não há gasto de energia (ATP), mas a substância precisa mais concentrada de um lado do que do outro, a favor de um gradiente de concentração Difusão simples a substância lipossolúvel não tená Já que a membrana term bicamada desde que esteja a favor do gnadiente de concentração. Difusão Facilitada Quando a substância está a favor do gradiente de concentração mas é muito grande ou não é a) canal iônico ions por ele. Cada ion term canal, pelo peso molecular ele passa não canal controlado por ligante (acetilcolina) a por voltagem (ca+ actina.) canal não fica exposto a aberto a todo momento, ele é controlado pois a célula pode despolarizar esse controle pode por ligante Ligante= Precisa de uma substância pana Voltagerm= Por diferença de b) Permeases: uma proteína de membrana que passa várias vezes por ela Todos canais de transporte ativo. Permitem a de Uniporte a monotransporte uma substância passa pela permease (ex: glicose). * no transporte passivo há somente uniporte e ou contratransporte uma e (ex: carbônica) 2 Ativo quando a célula precisa liberar uma de lado concentrado, contra gradiente de concentração Há gasto de energia. todo transporte ativo feito for uniporte (monotransporte): Quando 1 molécula passa pana dentro ou da membrana usando * proteina é quebrada emtransporte / ou co- transporte Quando 2 moléculas diferentes passam pela membrana no mesmo sentido, (ex: Na+ + glicose no processo de despolarização na de sódio e Antiporte a contratransporte 2 diferentes que passam diferentes pela membrana (ex: produção de * no transporte passivo e ativo a membrana não 3. Transporte da (grande As vezes a célula engloba grande quantidade de substância líquida a faz transporte atravessando a a) Pinocitose seletiva Quando a célula engloba um líquido mas estando interessada no que term nesse líquido, selecionando por invaginação do membrana, feita pela proteína clatrina, que fica erm torno da membrana e faz uma Tamberm pode formar vesículos para expulsar Absorve e passa para as dos b) fagocitose organismos é processo de defesa É a absorção de (A bactéria revestida por do complemento e aderem As células de defesa as proteínas que term receptores para as Quando ele se liga á a membrana se projeta para internalizar patógeno ação da actina e miosina- para se fundirem e degradarem a célula estranha não seja completamente corpúsculo residual a célula pra sempre D microorganismo pode destruir a Cobertuna de membrana moléculas que não fazerm parte da mas estão associadas ela 1 a) glicocálice presente no superficie membrana, principalmente em células epiteliais. b) caderinas liga uma célula a ( Não funciona erm células 2 Proteínas de reconhecimento uma célula a outra mesma permite a formação de que um se sobreponha a outro. 3 Identificação todos termos de ompatibilidade é a nossa identidade celular. MHC I e II = term (ex: Sistema ABO) Natural todas as term CD (cluster differentiation) = Identifica 4 Formação de Não é preciso que substância entre na para estimular ela, ela pode tocar na membrana e a vai produzir um segundo mensageino executor a na membrana quando estimulados formarm diferentes ciclase AMPc Guanivato 47 DAG CJIP35 Proteina 6 (rica em GDP): A receptora internamente, G (associada ao GDP) e ela term frações alfa beta e Associada ao GDP. Quando a substância toca no, ganha energia e vai pl a C Abre canais de cálcio e Tudo isso sem que a substância entre na célula. No e guanilato é processo, muda apenos o produto GMP-2P 2P+ Abre canais de sódio (ex: contração do * Nos é a negião entre a membrana e 0 núcleo; toda a envolvida pela aplicadas as técnicas de coloração, e MET. componentes a pela inclusão célula que guanda carboidrato forma de b) inclusão lipídica célula guarda erm forma de colesterol c) um tipo de molécula que da à pele, (identificado Dela a luz solar estimula a melanina é injetada em superfici- ais. d)inclusão proteica producem proteína que às vezes ficam guardadas dentro Quando não são ficam inativas dentro grânuios de zimogênio) e quando ficam ativas. 2 Organelas: a) Não membranosa b) Retículo complexo de golgi, lisossomos, 3 Componentes inorgânicos e a) Inorgânicos= H2O (70%) e sais minerais (3%) b) Orgânicos= carboidratos lipídios nucléicos (7%) e proteínas (15%) estrutural energia (combustivel) (familia) a) Chaperonas Proteínas HSP Heat Protein) que acompanham algumas proteínas resisterm calor estresse até certo ponto, e aumentaram de HSp 60 formato de cone, vários unidades de chaperonina Term sulfeto garante dobramento correto de Pode haver Hsp 70 impede que a formada se dobre precocemente (Antes de ser formada Hsp evita que uma substância que na célula Se ligue a um receptor que não é certo pra elab) uma proteína com falha a que a Ela é quebrada em que reaproveitados a em uma nova proteína Term 3 enzimas ubctina A ubctina é reconhecida pela E1, que tina 2 ATP, ea se liga ao E1, que a transfere para a Ez que é capaz de reconhecer a proteina A E3 + ubctina leva as proteinas para