Determinação de fósforo pelo método do molibdo-vanadato

Prévia do material em texto

Introdução
A batata (Solanum tuberosum L. subsp. tuberosum Hawkes) é um alimento rico em vitaminas, como a vitamina C, e em minerais, onde se destaca o potássio (K), porém é pobre em fósforo (P). O método utilizado para realizar a leitura da concentração de fósforo, ou outro mineral ou substância de interesse, em uma amostra é o colorímetro que é descrito geralmente como qualquer instrumento que caracteriza amostras de cores para obter uma medida objetiva das características da cor. O instrumento utilizado nesta prática é chamado de espectrofotômetro UV/Vísivel. Para se obter informação sobre a absorção de uma amostra, ela é inserida no caminho óptico do aparelho. Então, luz UV e/ou visível em um certo comprimento de onda (ou uma faixa de comprimentos de ondas) é passada pela amostra. O espectrofotómetro mede o quanto de luz foi absorvida pela amostra. A intensidade da luz antes de passar pela amostra é simbolizada por I0, e a intensidade da luz depois de passar pela amostra é simbolizada por I. A transmitância da amostra é definida pela razão (I / I0), a qual normalmente é expressa em porcentagem de transmitância (%T). A partir dessa informação, a absorvância da ambos é determinada para esse certo comprimento de onda ou como uma função de uma faixa de comprimentos de onda. Apesar de as amostras poderem ser sólidas (ou mesmo gasosas), elas usualmente são líquidas. Uma cela transparente (ou seja, que não absorve radiação na faixa de comprimentos de onda usada), comumente chamada de cuvete, é enchida com a amostra líquida e inserida no espectrofotómetro. O caminho óptico L pela a amostra é então a largura da cuvete. Espectrofotómetros mais simples (económicos) usam cuvetes com a forma cilíndrica (tubos de ensaio), porém, os mais sofisticados usam cuvetes retangulares, geralmente com uma largura de 1 cm. Para espectroscopia apenas no visível, simples cuvetes de vidro podem ser usadas, porém a espectroscopia no ultravioleta requer cuvetes especiais feitas de um material que (ao contrário do vidro) não absorva luz UV, como o quartzo.
	Procedimento experimental 
 1.1 Material utilizado.
- Extrato da batata;
- Tubo de ensaio;
- Pipetas automáticas e volumétricas;
- Becker;
- Solução padrão de P (0, 25, 50, 75, 100 e 200 ppm);
-Agitador de soluções;
- Espectrofotômetro UV/Visível;
1.2 Metodologia.
Inicialmente foi distribuído 1 ml de cada solução padrão de fósforo (0, 25, 50, 75, 100 e 200 ppm) e do extrato da batata, com a pipeta automática, em tubos de ensaio distintos, em seguida foi acrescentado 5 ml de água deionizada em cada tubo. No mesmo instante foi preparada a mistura de volumes iguais do molibdato de amônio a 5% com o vanadato de amônio a 0,25%, em um Becker, para formar o reagente específico. Uma vez preparado, 2 ml do reagente foi adicionado em cada tubo de amostra padrão e do extrato da batata. De acordo com a concentração de P contida nas amostras a coloração amarela, resultante da reação das amostras com o reagente específico, variava de nula (quando não havia a presença de P) para um amarelo intenso (quando a concentração de P era alta). Após o preparo das amostras para leitura, uma solução de cada vez foi agitada no agitador de soluções para que uma maior homogeneização das substancias contidas nos tubos de ensaio. Antes de realizar as leituras o espectrofotômetro UV/Visível foi ligado e automaticamente estabilizado com as condições do ambiente em que se encontrava. Depois de estabilizado, o equipamento foi iniciado (tecla go to) e digitado o comprimento de onda 470 nm. Em seguida foi realizada a leitura de cada amostra padrão de P, do menor para o maior, onde cada amostra padrão era adicionada à cubeta de vidro, uma de cada vez, e colocada no espectrofotômetro para leitura. Por ultimo foi realizada a leitura do extrato da batata (tabela 1).
	PADRÕES DE P
(PPM)
	LEITURA (ABSORBÂNCIA) 
(PPM)
	LEITURA DO EXTRATO DE BATATA
(PPM)
	0
	0
	0,074
	25
	0,024
	50
	0,134
	75
	0,205
	100
	0,276
	200
	0,622
Tabela 1. Valores das leituras pelo espectrofotômetro UV/Visível das amostras padrão de P e do extrato de batata.
	
Entre o intervalo de uma e outra leitura de amostra a cubeta era enxaguada com a própria amostra que estava sendo utilizada para leitura, para retirar os resíduos da amostra anterior.
 1.3 Resultados (calculo).
Através dos dados da tabela 1 foi obtido o seguinte gráfico:
 De acordo com a equação exibida no gráfico, foi possível determinar a concentração de fósforo no extrato da batata: 
y= bx + a
0,073= 3,0032x – 0,0301
0,032x= 0,073 – 0,0301 
x= 0,0429 ÷ 0,0032
x= 13,40625 mg ou ppm
Através da equação [P]ap= [P]ext x Fd foi obtido a concentração na amostra preparada. 
[P]ap= concentração de fósforo na amostra preparada
[P]ext= concentração de fósforo no extrato
Fd= Fator de diluição
Cálculo do fator de diluição:
Fd= peso do recipiente cheio – peso do recipiente vazio ÷ peso da amostra
Fd= 106,8081 – 11,3792 ÷ 2,0065
Fd= 95,4289 ÷ 2,0065
Fd= 47,55
Cálculo da concentração de P na amostra preparada :
[P]ap= [P]ext x Fd
[P]ap= 13,40625 x 47,55
[P]ap= 637,46 ppm (mg/kg) ou 0,0637 g/kg. 
Conclusão
A determinação de minerais ou de outras substancias de interesse em vegetais, contribui diretamente para compreensão dos valores nutricionais do alimento que esta sendo trabalhado. No caso da batata, um dos alimentos mais consumidos no mundo, a concentração de alguns minerais variam de acordo com a variedade cultivada, mas no geral a batata é um alimento pobre em fósforo, o que não a caracteriza como uma boa fonte deste elemento de acordo com os cálculos descritos neste trabalho. 
Referencias
Bezerra Neto.E – Barreto. L.P – METODOS DE ANALISES QUIMICAS EM PLANTAS. – Editora Universitária, UFRPE - Recife PE 2004.
pt.wikipedia.org/wiki/Espectroscopia_UV/visível - 26k - data: 09/10/08 
pt.wikipedia.org/wiki/Colorímetro - 20k- data: 09/10/08 
www.abbabatatabrasileira.com.br/2008/consumidor/valornutricional.asp - 24k- data: 09/10/08