utilização do microscópio de luz

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Prof.ª Esp. Mara Rosa
UTILIZAÇÃO E MANUTENÇÃO DO MICROSCÓPIO DE LUZ
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Microscópio de Luz
A microscopia óptica ou de luz possibilita o aumento de imagens através da luz que, após incidir sobre determinada amostra, passa por um conjunto de lentes.
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Microscópio de Luz
Além de ampliar a imagem de um objeto, o microscópio serve para aumentar o poder de resolução do olho humano. Poder de resolução é a capacidade de distinguir dois pontos muito próximos um do outro. 
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Microscópio de Luz
a) Utiliza-se feixe de luz comum
b) Resolução: à capacidade de que um sistema óptico ou eletrônico possui de visualizar dois pontos, separados por uma certa distância.
- Limite de resolução: corresponde à menor distância existente entre dois pontos que permite que estes sejam observados individualmente.
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Microscópio de Luz
Os microscópios ópticos têm um limite de resolução da ordem de 0,2 μm, ou seja, as lentes destes microscópios conseguem mostrar dois pontos distintos se estes estiverem separados por distâncias de pelo menos 0,2 μm.
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Microscópio de Luz
c) Espessura dos cortes utilizada para:
- material incluído em parafina varia de 3 a 7 μm;
- material incluído em resina plástica (a partir de 0,5 μm)
d) Ampliação máxima: 100 (objetiva) x 10 (ocular) =1000x
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Componentes de um Microscópio de Luz
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Componentes de um Microscópio de Luz
Ocular - sistema de lentes que permite ampliar a imagem real fornecida pela objetiva 
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Componentes de um Microscópio de Luz
Canhão - cilindro que suporta os sistemas de lentes, localizando-se na extremidade superior a ocular e inferior ao revólver com objetivas.
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Componentes de um Microscópio de Luz
Revólver - peça encontrada abaixo do canhão na qual se inserem várias lentes objetivas. É dotado de um movimento de rotação que permite posicionar a objetiva desejada para a observação do material a ser analisado. 
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Componentes de um Microscópio de Luz
Objetiva - projeta uma imagem aumentada do objeto, em direção à ocular.
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Componentes de um Microscópio de Luz
Objetiva
Secas – pequeno aumento (4x)
 médio aumento (10X)
 grande aumento (40x)
Imersão – 100x
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Componentes de um Microscópio de Luz
Braço ou Coluna: é a peça que liga a base até a parte superior do microscópio e onde se deve segurar o microscópio para ser transportado. 
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Componentes de um Microscópio de Luz
Platina - onde se fixa a reparação a observar; tem uma janela por onde passam os raios luminosos e também parafusos dentados que permitem deslocar a preparação.
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Componentes de um Microscópio de Luz
Charriot: localizado acessória e superficialmente à platina, é formado por uma presilha, dois botões giratórios e dois trilhos que têm a função de movimentar a lâmina no plano horizontal (da frente para trás e da esquerda para a direita, ou vice-versa) e assim permitir a observação de toda a sua área. 
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Componentes de um Microscópio de Luz
Parafuso macrométrico - a sua rotação é responsável por movimentos verticais da platina, rápidos e de grande amplitude.
Parafuso micrométrico a sua rotação é responsável por movimentos verticais da platina, lentos e de pequena amplitude, permitem aperfeiçoar a focagem.
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Componentes de um Microscópio de Luz
Base ou Pé: é o suporte do microscópio, peça que sustenta todas as outras. 
Condensador: forma circular e situado entre a platina e a base, o condensador converge os raios luminosos provindos da lâmpada e projeta-os como um cone de luz sobre o material que está sendo examinado. 
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Componentes de um Microscópio de Luz
Diafragma: possui uma alavanca que permite sua abertura ou fechamento, levando ao controle da passagem total ou parcial da luz. 
 
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Componentes de um Microscópio de Luz
Fonte luminosa - a mais utilizada atualmente é a luz artificial, fornecida por uma lâmpada.
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Microscópio Eletrônico de Transmissão (MET)
a) Utiliza-se um feixe de elétrons acelerados por uma diferença de potencial de 60 a 100 KV pelo aquecimento de um filamento de tungstênio.
b) Limite de Resolução: 0,0001 μm
c) Espessura dos cortes utilizada: 20 a 100nm (0,02 a 0,1μm)
d) Ampliação máxima: 400 000x
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Microscópio Eletrônico de Transmissão (MET)
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Microscópio Eletrônico de Varredura
- As espécimes , geralmente, não precisam ser cortadas;
- Fragmentos de 1 cm ou mais podem ser examinados inteiros;
- O material após fixado em glutaraldeído ou outro fixador, é cuidadosamente dessecado e recoberto por delgada camada condutora de eletricidade, em geral, ouro ou platina depositados a vácuo está pronto para ser examinado.
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Cuidados com o microscópio óptico
Quando não estiver sendo utilizado – coberto com capa;
Limpeza das oculares e objetivas secas – lenço limpo ou gaze;
Objetiva de imersão – gaze levemente umedecida com solução de álcool/absoluto/éter 1:1
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O que nunca deve ser feito com um microscópio
Nunca mergulhe as objetivas em líquido para limpá-las. 
Nunca tente fazer consertos em seu microscópio.
Nunca tente desmontar as oculares e/ou objetivas.
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O que nunca deve ser feito com um microscópio
Nunca mova o microscópio de um lugar para outro do laboratório. Se precisar de auxílio o professor ou monitor deve ir até seu microscópio.
Nunca troque peças do seu microscópio por outras de outro microscópio.
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O que nunca deve ser feito com um microscópio
Nunca arraste seu microscópio sobre a bancada.
Nunca se retire do laboratório sem deixar seu material em ordem na bancada.
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Como usar o microscópio?
Ligue o aparelho na tomada.
Gire o revólver do microscópio de modo que a objetiva de menor aumento (4x) fique na posição de uso.
Coloque a lâmina a ser examinada sobre a platina estando a lamínula voltada para cima.
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Como usar o microscópio?
Ligue o interruptor do aparelho para iluminação;
Usando o parafuso macrométrico, aproxime a platina da objetiva, ao máximo. Olhando pela ocular, gire o parafuso em sentido contrário, o que deslocará a platina para baixo até focalizar o espécime.
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Como usar o microscópio?
Melhore o foco usando o parafuso micrométrico.
Uma vez bem focalizada com a objetiva de menor aumento (4x), gire o revólver e mude para uma objetiva de médio aumento (10x) com cuidado para que a mesma não atinja a lâmina ou quebre a lamínula.
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Como usar o microscópio?
Obs.: as objetivas secas são parafocais – se o espécime está bem focalizado com uma, estará muito perto de sê-lo com a próxima objetiva.
Próxima objetiva – movimento delicado girando o parafuso micrométrico para frente e para trás até obter o foco.
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Como usar o microscópio?
Obs.: coloque o detalhe que deseja examinar com maior aumento, no centro do campo do microscópio para poder observá-lo no próximo aumento.
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Uso da objetiva de imersão
Focalize o espécime com as objetivas 4x, 10x, 40x,
Desloque a objetiva de 40x, colocando lateralmente, mas sem a objetiva 100x estar em posição para a observação da estrutura.
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Uso da objetiva de imersão
Coloque sobre a lamínula uma gota de óleo de imersão.
Coloque a objetiva de imersão (100x) em posição de uso e ajuste o foco com o parafuso micrométrico.
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Uso da objetiva de imersão
Atenção: 
- Após o uso da objetiva de imersão (100x) cuidado para não girar o revólver e sujar de óleo a objetiva de 40x.
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Uso da objetiva de imersão
Após o uso:
- Limpar a objetiva e a lâmina com pano macio ou lenço de papel levemente umedecido com uma solução álcool absoluto/éter.