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Ciclo dos ácidos tricarboxílicos ou ciclo de Krebs 1. Adicionando-se Acetil CoA a um extrato que contém apenas as enzimas e os cofatores do ciclo de Krebs obtem-se síntese efetiva de oxaloacetato? Por que? 2. A reação de oxidação do malato até oxaloacetato, pelo NAD + é muito endotérmica nas condições padrões. Entretanto, em condições fisiológicas, a reação ocorre porque as concentrações de estado estacionário dos produtos são muito pequenas quando comparadas com as dos reagentes. Considerando-se que em pH 7,0 a relação [NAD + ]/[NADH] é igual a 8 qual deverá ser a menor relação [malato]/[oxaloacetato] para que o oxaloacetato possa ser formado a partir do malato? Malato + NAD + oxaloacetato + NADH + H + Gº = 7 kcal/mol 3. O pão fermentado é preparado misturando-se farinha de trigo, água, fermento (levedura), sal e sacarose. Após mistura bem todos os ingredientes, a massa obtida é deixada em repouso em um local relativamente aquecido. Durante esse período de repouso a massa aumenta de volume. Por que isso acontece? 4. A adição de pequenas quantidades de succinato a um extrato de tecido muscular aumenta consideravelmente a oxidação do piruvato até gás carbônico e água. Entretanto, se o extrato for incubado com malonato, a oxidação do piruvato é interrompida e só volta a ocorrer se o succinato for adicionado ao extrato. Como se explicam tais fatos? 5. No ciclo de Krebs, o citrato é formado através de uma reação de condensação entre o Acetil CoA e o oxaloacetato, que é catalisada pela citrato sintase, conforme a reação que segue. Sabendo-se que em pH 7,0 e a 25ºC, Gº = -7.700 cal/mol e que nas mitocôndrias de coração de ratos [CoA]= 65 M; [oxaloacetato]= 1 M; [Acetil CoA]= 1 M e [citrato]= 220 M, calcular o G dessa reação. Oxaloacetato + Acetil CoA + H2O Citrato + CoA + H + 6. Embora o oxigênio molecular (O2) não participa do ciclo de Krebs, o ciclo só funciona quando o oxigênio está presente. Por que? 7. Pacientes com beriberi, uma doença causada por deficiência de tiamina, apresentam níveis elevados de piruvato e -cetoglutarato no sangue após uma refeição rica em glicose. Como esses efeitos estão relacionados com a deficiência de tiamina? 8. O oxaloacetato existente no interior da mitocôndria é um precursor da síntese de vários aminoácidos. O que acontece com o fluxo do piruvato no ciclo de Krebs quando o oxaloacetato é desviado para a síntese desses aminoácidos? Como o ciclo pode ser reabastecido de oxaloacetato nas céluals animais? O Acetil CoA pode ser usado como fonte de carbono para a reposição de oxaloacetato nas células animais? 9. (Desafio) A ligação da tiamina tiazolona pirofosfato (TTPP) à piruvato desidrogenase é cerca de 20.000 vezes maior que a da tiamina pirofosfato (TPP). Assim, a TTPP é usada para inibir competitivamente a enzima. Qual é a explicação para tais fatos?
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