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Curso: Farmácia Disciplina: Microbiologia clínica Estudo dirigido Qual a coloração utilizada para esporos e espiroquetas? Esses microrganismos podem ser observados ao microscópio em preparações a fresco ou pela técnica de Fontana-Tribondeaux, em que sais de prata impregnam a superfície da bactéria tornando-a mais espessa. Espirilos e espiroquetas tem pouca afinidade pelos corantes comumente empregados e coram-se fracamente. Quando tratados com sais de prata, as espiroquetas podem ser visualizadas em marrom-escuro ou negro contra um fundo castanho-amarelado. Quais os meios de cultura mais utilizados para urinocultura? Ágar Cled, Ágar MacConkey e em urina de primeiro jato Ágar Sangue, Thayer Martin. Descreva o passo a passo da coloração de Gram. Passo1: Uma gota de cristal violeta, 1 min - Lavar com água destilada Passo 2: Colocar um gota de lugou, 1 min - Lavar com água destilada Passo 3: Lavar com solução de álcool acetônico Passo 4: Colorar com uma gota de fuccina, 30 seg - Lavar com água destilada Passo 5: Secar delicadamente com papel toalha. Passo 6: Colocar um gota de óleo de imersão Descreva o passo a passo da coloração de Ziehl-Neelsen. Passo 1: Cobrir toda a lâmina com fucsina - Lavar com água destilada Passo 2: Aquecer a lâmina no Bico de Bunsen até à emissão de vapores (é importante não deixar ferver); A partir disso contar 5 minutos - Lavar a lâmina suavemente Passo 3: Cobrir com álcool-ácido clorídrico, por 1 minuto - Lavar a lâmina suavemente Passo 4: Cobrir o esfregaço com azul de metileno durante 1 minuto -Lavar a lamina com agua destilada e deixar secar Passo 5: Colocar um gota de óleo de imersão -Esperara lâmina secar naturalmente Diferencie microbiota permanente e transitória. 5.1 – Microbiota Residente – a microbiota residente, formada por diversos tipos de microorganismos relativamente fixos, encontrados com regularidade em certos locais e em determinada idade, mas quando destruída, se recupera rapidamente. 5.2 – Microbiota Transitória – a microbiota transitória, constituída de organismos não patogênicos ou potencialmente patogênicos que permanecem na pele ou nas mucosas por horas, dias ou semanas, oriundas do ambiente, não produzem enfermidade e nem se estabelece de forma permanente na superfície. De um modo geral, os membros da microbiota transitória possui pouca importância, enquanto a microbiota residente permanece intacta. No caso da microbiota residente sofrer agravos, os micróbios transitórios podem colonizar e proliferar, produzindo doenças. Defina patógenos oportunistas. Microorganismo de microbiota normal que em determinadas condições causam infecção. Descreva detalhadamente a técnica de coleta do jato médio em homens e mulheres. HOMENS Passo 1: Lave as mãos Passo 2: Exponha a glande e mantenha o prepúcio retraído Passo 3: Lave com agua e sabão. Enxague com agua em abundancia Passo 4: Enxugue com papel toalha Passo 5: Comece a urinar no vaso sanitário Passo 6: Sem interromper a micção, coloque o copo descartável na frente do jato e colete aproximadamente dois dedos de urina. Passo 7: Despreze o restante da urina no vaso sanitário Passo 8: Feche o frasco e leve imediatamente ao laboratório MULHERES Passo 1: Lave as mãos Passo 2: Afaste os grandes lábios Passo 3: Lave a região vaginal com agua e sabão. Enxague com agua em abundancia Passo 4: Enxugue de frente para trás com papel toalha Passo 5: Comece a urinar no vaso sanitário Passo 6: Sem interromper a micção, coloque o copo descartável na frente do jato e colete aproximadamente dois dedos de urina. Passo 7: Despreze o restante da urina no vaso sanitário Passo 8: Feche o frasco e leve imediatamente ao laboratório Diferencie a parede celular das bactérias Gram positivas e Gram negativas. Gram-positivas: bactérias que possuem parede celular com uma única e espessa camada de peptidoglicanos. Pelo emprego da coloração de Gram, tingem-se na cor púrpura ou azul quando fixadas com cristal violeta, porque retêm esse corante mesmo sendo expostas a álcool. Gram-negativas: bactérias que possuem uma parede celular mais delgada e uma segunda membrana lipídica - distinta quimicamente da membrana plasmática - no exterior desta parede celular. No processo de coloração o lipídio dessa membrana mais externa é dissolvido pelo álcool e libera o primeiro corante: cristal violeta. Ao término da coloração, essa células são visualizadas com a tonalidade rosa-avermelhada do segundo corante, safranina que lhes confere apenas a coloração vermelha. A principal diferença entre as duas está na parede celular: as gram-positivas apresentam uma espessa camada de peptideoglicanos na parede celular, enquanto as gram-negativas uma parede celular dupla, externamente formada de carboidratos, proteínas e fosfolipídeos e, internamente, constituída de peptideoglicanos. . Descreva a parede celular das micobactérias. Parede Lipídica (60%) BAAR • Ácido resistência • Propriedades patogênicas e imunológicas • Gradiente de fluidez com orientação contrária à de bactérias Gram negativas: regiões externas mais fluídas que as internas; • Porinas: controlam a difusão de moléculas hidrofílicas (baixa permeabilidade); • Permite a sobrevivência em macrófagos e a aderência entre bactérias; • Resistência à corrosivos e ácidos ou álcalis fortes; • Resistência ao ressecamento; • Não resistentes ao calor ou irradiação UV Descreva as etapas da realização de um antibiograma. Retirar as placas e os frascos com os discos da geladeira cerca de 20-30 minutos para que adquiram a temperatura ambiente antes da execução da prova. Com uma alça bacteriológica em platina devidamente flambada e resfriada, tocar na colônia recente (18-24h); Suspender as colônias em solução salina estéril (NaCl 0,85%) até se obter uma turvação compatível com o grau 0,5 da escala Mac Farland (1x106 UFC/mL). Para este passo deve ser utilizado um tubo aferido na escala 0,5 de Mac Farland como comparativo (solicite ao seu vendedor) ou um turbidímetro. Aguardar (não mais que 15 minutos) a superfície do agar secar; Com auxílio de uma pinça flambada e resfriada, colocar os monodiscos ou multidiscos, sobre a superfície do meio inoculado, exercendo uma leve pressão com a ponta da pinça para uma boa adesão dos discos; Com auxílio de uma pinça flambada e resfriada, colocar os monodiscos ou multidiscos, sobre a superfície do meio inoculado, exercendo uma leve pressão com a ponta da pinça para uma boa adesão dos discos; Incubar a placa com os discos em estufa bacteriológica a 36 oC por 18 a 24 horas; Resultados: Com o auxílio de uma régua, paquímetro ou dispositivo semelhante, medir o diâmetro dos halos inibitórios de cada disco, e consultar uma tabela apropriada para determinar se a bactéria em análise é sensível, intermediário ou resistente ao antimicrobiano testado. Cite os principais microrganismos isolados em infecções do trato urinário. Família Enterobacteriaceae Escherichia coli (80%),Klebsiella, Proteus e Enterobacter Enterococcus faecalis, Pseudomonas aeruginosa e Staaphylococcus saprophyticus . Bons estudos!!
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