EXTRAÇÃO DO DNA

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EXTRAÇÃO DO DNA
ESTRUTURA DO DNA
Watson e Crick, em abril de 1953 publicaram um estudo onde explicavam a estrutura do DNA em dupla-hélice. 
Em geometria, a dupla hélice consiste tipicamente de duas hélices congruentes com o mesmo eixo, que diferem por uma translação ao longo do seu eixo, que pode estar ou não a meio caminho.
A composição geral do DNA já era conhecida, mas não se sabia como suas partes componentes se reuniam.
O DNA toma esta forma naturalmente por duas razões: 
Tem de ser 'dupla' de maneira que possa conseguir replicar-se e a hélice, estando entrelaçada
É mais forte que duas cadeias paralelas porque puxando em uma direção qualquer a cadeia não se desfaz.
A estrutura de DNA sugerida por Watson e Crick possui duas fitas de nucleotídeos que dispostas lado a lado e ficam torcidas na forma de dupla hélice, formando uma estrutura em espiral. 
As fitas são mantidas unidas pela formação de pares de bases entre as duas fitas: 
A pareia com T por meio de duas ligações de hidrogênio;
G pareia com C através de três ligações de hidrogênio. 
A presença de milhares de ligações de hidrogênio na molécula de DNA contribui para a estabilidade da dupla hélice.
Cada fita é composta por unidades alternadas de fosfato e açúcar (desoxirribose), que são conectadas por ligações fosfodiéster. 
Os átomos de carbono que compõem o açúcar de desoxirribose são numerados de 1’ a 5’. 
O átomo de carbono 5’ de uma desoxirribose se liga um grupo fosfato, que se ligará ao carbono 3’ da próxima desoxirribose através de uma ligação de fosfodiéster (ligação covalente)
Dessa forma, cada ligação açúcar-fosfato tem orientação 5’ para 3’.
Na molécula de DNA as fitas estão pareadas com orientação oposta: uma se inicia pela extremidade 5’ e outra começa pela extremidade 3’
O DNA é encontrado no núcleo das células eucariontes, nas mitocôndrias e nos cloroplastos. 
O DNA e RNA consistem em apenas 4 tipos de nucleotídeos
Os nucleoossomos são DNA associadas a 8 unidades de histonas
CROMOSSOMOS:
 
EXTRAÇÃO DE DNA VEGETAL 
MACERAÇÃO: Quanto mais os morangos forem macerados maior será sua superfície de contato com a solução de lise e melhor a ação da solução sobre as células. Isto permitirá a liberação de uma maior quantidade de moléculas de DNA e, portanto, um bom rendimento.
ÁGUA MORNA: O aumento da temperatura promove uma maior agitação molecular, o que ajuda a desestabilizar as membranas lipídicas. Além disso, a alta temperatura inativa enzimas que podem degradar o DNA (DNAses)
SAL: A adição do sal (NaCl) proporciona ao DNA um ambiente favorável para a extração de DNA. O sal contribui com íons positivos que neutralizam a carga negativa do DNA. Numerosas moléculas de DNA podem coexistir nessa solução.
DETERGENTE: permite a desestruturação das moléculas de lipídios das membranas. Com a ruptura das membranas o conteúdo celular, incluindo as proteínas e o DNA, soltam-se e dispersam-se na solução.
ÁLCOOL GELADO: Porque o DNA é insolúvel em etanol (álcool etílico). Quando as moléculas são solúveis em um dado solvente, elas se dispersam e não são, portanto, visíveis. Quando as moléculas são insolúveis em um dado solvente, elas se agrupam, tornando – se visíveis. Quando mais gelado estiver o álcool, menos solúvel o DNA vai estar.
EXTRAÇÃO DO DNA ANIMAL 
BOCHECHO DE SOLUÇÃO SALINA: A adição do sal (NaCl) proporciona ao DNA um ambiente favorável para a extração de DNA. O sal contribui com íons positivos que neutralizam a carga negativa do DNA. Numerosas moléculas de DNA podem coexistir nessa solução.
DETERGENTE: O detergente desestrutura as moléculas de lipídeos presentes nas membranas celulares. Com a ruptura das membranas o conteúdo celular, incluindo as proteínas e o DNA, solta – se e dispersam – se na solução. A função de algumas dessas proteínas é manter o DNA enrolado num espiral muito apertada.
ÁLCOOL GELADO: Porque o DNA é insolúvel em etanol (álcool etílico). Quando as moléculas são solúveis em um dado solvente, elas se dispersam e não são, portanto, visíveis. Quando as moléculas são insolúveis em um dado solvente, elas se agrupam, tornando – se visíveis. Quando mais gelado estiver o álcool, menos solúvel o DNA vai estar.