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PREPARAÇÃO DE MATERIAL BIOLÓGICO PARA M.O.C. MICROSCOPIA OBJETIVOS: Rever os procedimentos para utilização do microscópio Realizar a preparação “a fresco” de lâminas utilizando diferentes espécimes de material biológico; Utilizar diferentes métodos de coloração para observação do material à fresco; Observar no M.O.C. as preparações realizadas na presença ou ausência de corantes; Reconhecer as estruturas observadas na lâminas preparadas durante a atividade. Observar no M.O.C. células sanguíneas em imersão. 1a ATIVIDADE –Observação ao M.O.C. de células à fresco Parte A: 1- Separe uma lâmina e lamínula, limpa e seca; 2- Com o auxílio de uma pinça, retire uma pequena porção do epitélio da cebola; 3- Coloque o material coletado sobre a gota de água contida na lâmina previamente preparada; 4-Posicione a lamínula em um ângulo aproximado de 450 na borda da preparação, soltando-a em seguida de modo a cobrir a preparação. 5-Observe a lâmina ao M.O.C. nos aumentos de 40x e 100x, seguindo os procedimentos já demonstrados nas atividades anteriores. 6-Anote na folha do grupo o que foi observado. Parte B: 7-Após a observação, adicione à preparação 1-2 gotas de azul de metileno; 8-Adicione, após observação, uma–duas gotas de lugol. 9-Encoste um pedaço de papel de filtro do lado oposto da colocação do corante para que o mesmo penetre sob a lamínula e atinja o material; 10-Observe a lâmina ao M.O.C. nos aumentos de 40x e 100x, anotando o maior número de detalhes. Ângulo 45 Objeto Lamínula 2a ATIVIDADE –Observação ao M.O.C. de células à fresco da Mucosa bucal Parte A: 1- Separe uma lâmina e lamínula, limpa e seca; 2- Com o auxílio de uma espátula de madeira, raspe delicadamente e colete amostra de mucosa bucal de um aluno voluntário; 3- Distribua a mostra de modo homogêneo, ao centro da lâmina (se necessário com uma gota de solução fisiológica) e cubra com a lamínula conforme procedimento realizado na 1ª atividade; 4- Observe a preparação ao M.O.C. Nos aumentos de 40x e 100x. 5- Anote o observado (características celulares) na folha do grupo. Parte B: 6- Após a observação, adicione à preparação 1-2 gotas de AZUL DE METILENO; 7- Observe novamente, conforme procedimentos da 1a ATIVIDADE - Parte B. 8 -Anote o observado (características celulares) na folha do grupo. 3a ATIVIDADE – OBSERVAÇÃO AO M.O.C. DE EXTENSÃO SANGUÍNEA (1000X-IMERSÃO) 1 -Acompanhe a explicação e demonstração da realização e coloração de uma extensão sanguínea. 2 - Realize a observação da lâmina de extensão sanguínea previamente preparada no aumento de 400x, e aguarde orientação para realizar a observação da lâmina em IMERSÃO. 3- Anote o observado (características celulares) na folha do grupo. 100x 100x 400x 400x 40X 1000X400X 100X EM RELAÇÃO A 1a ATIVIDADE : -Quais a principais diferenças evidenciadas entre a primeira e segunda parte do procedimento? Justifique. EM RELAÇÃO A 2a ATIVIDADE : -Quais a principais diferenças evidenciadas entre a primeira e segunda parte do procedimento? Justifique. -Caracterizar as principais diferenças existentes entre as observações realizadas na 1a e 2a atividade. EM RELAÇÃO A 3a ATIVIDADE : -Explique por que é necessário a utilização do óleo de imersão para se obter um aumento de 1000x. -Quais as diferenças evidenciadas na observação da lâmina de extensão sanguínea num aumento de 400x e de 1000x.
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