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Interpretação do Hemograma e Revisão de Lâminas Hematológicas Prof. Kamila Lacerda Biomédica Mestre em Ciências Ambientais e Saúde Novembro, 2016 Células do sangue kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Hemograma É o exame laboratorial de rotina para a avaliação dos elementos figurados do sangue qualitativamente e quantitativamente. “Na investigação de funções fisiológicas e disfunção do sangue, é fundamental que, dentro do possível, não forneçam informações enganadoras devido a erros técnicos.” Mitchell Lewis kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Hemograma • Eritrograma Contagem de hemácias Hemoglobina Hematócrito Índices Hematimétricos RDW: amplitude de distribuição dos eritrócitos • Leucograma Contagem total ou global de leucócitos Diferencial de Leucócitos • Contagem de plaquetas kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Anemias Policitemias Infecções Leucemias Avaliação da Hemostasia Interpretação do Eritrograma Fatores pré Análise Alimentação (2h). Atividade física (20 minutos) / Estresse. Hemoconcentração (tempo de garroteamento). Quantidade adequada de anticoagulante. Homogeneização da amostra. Identificação do paciente e/ou da amostra. Demora na execução do exame. Evitar a hemólise (material limpo, agulhas apropriadas, pressão negativa adequada e homogeneização suave). Confecção da distensão sanguínea kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Interferência Crioaglutininas Crioglobulinas Aumento do CHCM (aquecer 37º C /15 min) Lipemia CHCM • Elevadas leucometrias • RBC fragmentados - CHCM – Hemólise (inspeção plasma/LDH aumenta) kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Anticoagulantes – Excesso de EDTA kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Hemácias tamanho degeneração Leucócitos tamanho degeneração CHCM Plaquetas desintegram contagem superestimada Erros... Armazenamento da coleta Leucócitos e plaquetas diminuem Reticulócitos diminuem após 6 horas Hemoglobina estável por dias Sem alterações no HT e VGM se conservado a 4°C até 24h. Demora na contagem (deterioração das hemácias) Anticoagulante insuficientes (formação de pequenos coágulos) kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Conservação GLÓBULOS VERMELHOS Até 4 hs (18 a 25º C) – alterações mínimas Após 8hs – hemácias crenadas e esferócitos kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Erros na dosagem de Hemoglobina Amostra de sangue capilar (fluido tecidual pode diluir a amostra) Sedimentação durante a armazenagem Agitação vigorosa Calibração dos instrumentos Deterioração dos reagentes, manter ao abrigo da luz Leucometrias superiores a 50/106 fl Plasma lipêmico kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Erros no hematócrito Erro de leitura Concentração de anticoagulantes Presença de micro coágulos (erro pra menos) Falta de homogeneização Hemólise (temp. de centrífuga, coleta inadequada) erro para menos Armazenamento da amostra (erro para mais) Leitura do menisco (leucocitose ou trombocitose) kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Classificações das anemias Etiopatogênica Hipoproliferativa - Hiperproliferativa Falta de produção X Excesso de destruição ou perda Morfológica Volume Conteúdo hemoglobínico kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Anemias microcíticas e hipocrômicas kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Anemias microcíticas e hipocrômicas kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Anemias microcíticas e hipocrômicas kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Caso 01: Lâmina 1 kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Paciente de cor branca, com 30 anos, apresentando palidez e cansaço fácil. O diagnóstico foi concluído mediante a dosagem de ferro sérico que apresentou um resultado de 30mg/dL. Eritrograma: Hm: 4,200.000/mm3 Hb: 9,6g/dL Ht: 31% VCM: 73fL HCM: 23pg CHCM:29,6% Leucograma: Global de leucócitos: 7.200/mm3 Diferencial de leucócitos: Blastos --00 Promielócito--00 Mielócitos--00 Metamielócito--00 Bastonete--04 Segmentado--53 Eosinófilo--01 Basófilo--00 Linfócito--40 Monócito--02 Plaquetas: 331.000/mm3 Obs: Discreta microcitose e hipocromia. Raros micrócitos. Discreta anisopoiquilocitose. Caso 11: Lâmina 8773 kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Eritrograma: Hm: 3,690.000/mm3 Hb: 7,3g/dL Ht: 23,6% VCM: 64fl HCM: 19,8pg CHCM:30,9% Global de leucócitos: 6.200/mm3 (sem correções) Plaquetas: 173.000/mm3 Obs: Presença de 21 eritroblastos ortocromáticos em 100 células contadas. Anisopoiquilocitose acentuada. Numerosos dacriócitos, discretos ovalócitos, pontilhados basófilos e codócitos. Frequentes esquizócitos. Policromasia moderada. Anemias normocíticas e normocrômicas kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Anemias normocíticas e normocrômicas Reticulócitos aumentados? sim Não Hemorragia hemólise MO anormal Hipoplasia medular Infiltrações Leucemias, linfomas, mieloma, metastase MO normal IRC Doenças hepáticas Hipopotireoidismo Doenças crônicas Anemias hemolíticas kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Presença de Hb S em estado homozigótico (Hb SS), cuja anormalidade consiste na substituição do aminoácido 6 da cadeia beta (ácido glutâmico - valina). Policromasia Anemias hemolíticas kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Eritroblasto ortocromático Policromasia Codócitos Drepanócitos Anemias hemolíticas kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Anemia macrocítica kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Macrócitos Hipersegmentados Caso 02 (lâmina 02) kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Paciente de cor negra, com 23 anos, apresentando dores ósseas. O diagnóstico laboratorial foi confirmado mediante a eletroforese de hemoglobina em pH alcalino (a qual apresentou uma única fração na posição da HBS), além do teste de falcização das hemácias em presença de metabissulfito de sódio, o qual acusou resultado positivo. A dosagem de bilirrubina se mostrou elevada, coerente com o quadro do paciente. A contagem de reticulócitos foi de 20% Eritrograma: Hm: 3.000.000/mm3 Hb: 9,7g/dL Ht: 27% Global de leucócitos: 6.000/mm3 Diferencial de leucócitos (%) Blastos --00 Promielócito--00 Mielócitos--00 Metamielócito--01 Bastonete--02 Segmentado--55 Eosinófilo--01 Basófilo--01 Linfócito--35 Monócito--05 Plaquetas: 236.000/mm3Obs: Presença de 09 (nove) eritroblastos em 100 células contadas, moderada anisopoiquilocitose com alguns drepanócitos. Células em alvo e raras hemácias com corpúsculo de Howell-Jolly e ponteados basófilos. Algumas macroplaquetas. Caso 08 (lâmina 7227) kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Eritrograma: Hm: 3.303.000/mm3 Hb: 8,1g/dL Ht: 25,0% VCM: 82,5fl HCM: 26,7pg CHCM:32,4% RDW: 21,8% Global de leucócitos: 19.900/mm3 Diferencial de leucócitos (%) Blastos --00 Promielócito--00 Mielócitos--00 Metamielócito--10 Bastonete--02 Segmentado--55 Eosinófilo--01 Basófilo--00 Linfócitos --40 Monócito--02 Plaquetas: 340.000/mm3 Obs: Presença de 130 eritroblastos em 100 células contadas. Duas populações da série vermelha. Leucograma kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Objetivos Contagem global de leucócitos •Determinar infecção ou inflamação. •Determinar a necessidade de testes adicionais, como, por exemplo, a biópsia de medula óssea. •Monitorar a resposta à quimioterapia, radioterapia ou outros tipos de terapia. Diferencial de Leucócito •Determinar o estágio e gravidade de uma infecção. •Monitorar a infecção. •Detectar reações alérgicas. •Avaliar a gravidade de reações alérgicas (contagem de eosinófilos). •Detectar infecções parasíticas. •Servir de suporte para o diagnóstico de outras doenças. •Detectar e identificar diversos tipos de leucemia. Interpretação do Leucograma Manual – imprecisões Erros de pipetagem e calibração Espessura do esfregaço Variações do tamanho, gravidades específicas e aderências dos leucócitos. Distribuição irregular dos leucócitos na lâmina Erro de contagem Pequena quantidade de células avaliadas kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Leucograma - automação Rapidez: ≥ 90 -150 hemogramas / hora Parâmetros hematológicos: 25 - 42 Tubos de EDTA: aceitam todas as marcas Pelo menos 10.000 células examinadas Volume de amostra: 40 µL -300 µL Autolavagem contínua e programável Exatidão / Precisão / Linearidade / Sensibilidade Robustez: 500 amostras consecutivas Pelo menos 2 tecnologias de contagem / análise kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Leucograma - automação Software atualizável Diferencial de Leucócitos em 5 partes/ 6 partes? Controle de Qualidade Memória: 10.000 -90.000 exames, com gráficos Controles comerciais Alertas Qualitativos / Quantitativos Módulos extras: Preparador e Corador de Lâminas Sistemas Inteligentes interligados - Modular kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Limitação da tecnologia Calibração, Controles e manutenção do equipamento 20% DE não detectados c/neutrofilia 60% DE sem neutrofilia Pelger-Hüet Granulações tóxicas, Corp. de Dohle 30% Atipia com linfocitose 60% atipia sem linfocitose Núcleos convolutos ( linfomas ) Granulações e vacuolizações anormais kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Neutrofilia Aumento da produção pela M.O. Doenças mieloprolifaretivas Aumento reacional: infecção, inflamação, necrose. Liberação acelerada pelo compartimento de reserva Infecção, inflamação, necrose, corticosteróides. Redistribuição do compartimento de reserva. Estresse, adrenalina, exercício Corticosteróide kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Desvio à esquerda kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Desvio à esquerda Literatura diverge quanto ao conceito de bastonete; Não há acordo entre os valores de referência para Bastões (%) em adultos; Aceita-se que em Adultos ≥10 % →Desvio a esquerda representativo; Nos RN’s o número de bastonetes pode estar aumentado naturalmente ( 10 a 15% ); Idade < 5 anos : dificuldades na definição de Valores de Referência ( % ) para bastonetes kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Desvio à esquerda Uniformização de critérios morfológicos no conceito de bastonete no laboratório Definição de valores de referência por faixas etárias Consenso na interpretação do DE e seu real valor. – Interação médico X laboratório kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Caso 05: (lâmina 3996) kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Eritrograma: Hm: 2.600.000/mm3 Hb: 8,2g/dL Ht: 25,4% VCM: 97.7fl HCM: 31.5pg CHCM:32.3% Global de leucócitos: 18.690/mm3 Diferencial de leucócitos (%) Blastos --00 Promielócito--00 Mielócitos--04 Metamielócito--06 Bastonete--11 Segmentado--66 Eosinófilo--01 Basófilo--00 Linfócitos--11 Linfócitos atípicos--00 Monócito--01 Plaquetas: 160.000/mm3 Leucograma: comparação de resultados kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Global de Leucócitos: 8.800/mm3 Global de Leucócitos: 4.200/mm3 Bastonete: 23% Bastonete: 01% Segmentado: 57 % Segmentado: 20% Eosinófilo: 03 % Eosinófilo: 01% Linfócitos: 12% Linfócitos:75% Linfócito atípico: 00% Linfócito atípico: 00% Monócito: 05% Monócito: 03% kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Alteração Tipo de alteração Significado Granulações tóxicas Aumento de granulações nos neutrófilos Resposta medular acelerada a uma infecção, inflamação, queimadura, etc. Corpúsculos de Döhle Granulação grosseira, basófila, na borda do citoplasma do neutrófilo Comum em infecções graves, queimaduras e após uso de citotóxicos. Vacuolização tóxica Vacúolos citoplasmáticos Fagocitose de bactérias com grande atividade lisossômica. Hipersegmentação e gigantismo celular Anomalia de Pelger Núcleo com mais de 4 lobos e células de grande tamanho Os neutrófilos geralmente apresentam núcleos hipossegmentados ou redondos, Alteração na maturação celular por deficiência de vit. B12, de ácido fólico ou após uso de citotóxicos. hereditário raro caracterizado pela falha na segmentação do núcleo Granulações tóxicas kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com 0= granulação normal += leve ++= aproximadamente 50% dos neutrófilos contendo grânulos escuros +++= intensa granulação na maioria das células ++++= GT grosseiras, com o núcleo sendo obscurecido por elas. Corpúsculo de Döhle kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Vacuolização tóxica kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com 0= nenhum += menos que 25% ++= 25-50% +++= 51-75% ++++= mais que 75% dos neutrófilos Hipersegmentação kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Anomalia de Pelger - Huet kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Caso 06: (lâmina 4148) Eritrograma: Hm: 3.990.000/mm3 Hb: 11,3g/dL Ht: 33,9% VCM: 85,0fl HCM: 28,3pg CHCM:33,3% Global de leucócitos: 7.700/mm3 Diferencial de leucócitos (%) Blastos --00 Promielócito--01 Mielócitos--08 Metamielócito--10 Bastonete--02 Segmentado--34 Eosinófilo--02 Basófilo--01 Linfócitoos --36 Monócito--06 Obs: Neutrófilos hiposegmentados com características morfológicas pelgeróides. Plaquetas: 376.000/mm3 Neutropenia Neutrófilos abaixode 1.500/mm3 • Causas: Hereditária: SEM consequência patológica Negros e Judeus Imanenitas Hereditária - COM consequência patológica Adquirida - TODAS patológicas kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Neutropenia adquirida Drogas – QUIMIOTERÁPICOS, ANTIBIÓTICOS: Cloranfenicol, Sulfas, Penicilina semi-sintética, ANTI-EPÍLÉTICOS, ANALGÉSICOS: Aminopirinas e Dipirona, PROPILTILURACIL Infiltração patológica na medula kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Metástase Fibrose na medula Neutropenia adquirida Neutropenias auto e isoimunes: ISOIMUNE: RN por transferência de anticorpos da mãe para o feto AUTOIMUNE: Artrite reumatóide, LES, infecções e drogas Deficiência de Vit. B12 e folatos Hiperesplenismo kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Neutropenia pós infecciosa INFECÇÕES VIRAIS: sarampo, rubéola, HIV, gripe e varicela - comum em crianças INFECÇÕES NÃO VIRAIS: estafilococos, pneumonia estreptocócica, riquétsias. kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Eosinófilos Eosinofilia ( ↑): • Parasitoses (90%), reações alérgicas e uso de certos medicamentos (clorpromazina, penicilinase estreptomicina). Eosinopenia (↓): • Aparece em doenças mieloproliferativas, utilização de corticóides e infecções bacterianas. kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Eosinófilos Comparar Leucograma: criança de 05 anos. Laboratórios diferentes. kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Global de Leucócitos: 31.270/mm3 Global de Leucócitos: 25.700/mm3 Bastonete: 00 Bastonete: 02% Segmentado: 10 % Segmentado: 77% Eosinófilo: 70 % Eosinófilo: 05% Linfócitos:13 % Linfócitos:15% Linfócito atípico: 04% Linfócito atípico: 00% Monócito: 03% Monócito: 01% Linfócitos Idade Neutrófilos mm3 Linfócitos mm3 3 dias a 3 anos 2000 a 3000 3000 a 6000 3 a 6 anos 2500 a 4000 3000 a 5000 3 a 9 anos 3000 a 5000 2500 a 3500 9 em diante 3500 a 6500 1200 a 2000 kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Crianças → Predominância do sistema linfoide sobre o mieloide. Causas da linfocitose Reativas Infecções virais: Mononucleose; citomegalovírus Infecções bacterianas: brucelose; sífilis; tuberculose; inf. Aguda infantil Patológicas Leucemia Linfocítica Crônica Linfomas Macroglobulinemia de Waldenstrom kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Caso 03 (lâmina 5) kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Eritrograma: Hm: 4.800.000/mm3 Hb: 13,5g/dL Ht: 41% Global de leucócitos: 5.000/mm3 Diferencial de leucócitos (%) Blastos --00 Promielócito--00 Mielócitos--00 Metamielócito--01 Bastonete--03 Segmentado--47 Eosinófilo--02 Basófilo--00 Linfócito--45 Monócito--02 Plaquetas: 208.000/mm3 Obs: Série vermelha sem alterações aparentes. Presença de 05% de linfócitos com características de linfócitos atípicos. Predominam as atipias do tipo citoplasma abundante, núcleo excêntrico (linfócitos plasmocitóides). Monócitos vacuolizados e neutrófilos apresentando granulações tóxicas médias e finas. Causas da monocitose Monocitose primária – Doenças mieloproliferativas Infecções bacterianas, protozoários e vírus – Tuberculose, malária, leishmaniose, sífilis Doenças inflamatórias – Lúpus eritematoso disseminado, artrite reumatóide, Sarcoidose, Doença de Crohn, Colite ulcerativa kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Leucograma kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Leucemias • São doenças de natureza maligna, caracterizada pela proliferação desregulada, na medula óssea, de uma célula hematopoética (célula maligna/cancerosa/leucêmica). • Células leucêmicas diferem das células normais por não mais responderem aos mecanismos de controle do organismo. kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Interpretação da leucocitose kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com As leucocitoses variáveis entre 12 a 30 mil, geralmente estão associadas às infecções bacterianas. Entretanto, leucemias em fase de tratamento podem apresentar este quadro. Leucocitose entre 30 e 40 mil, sem células blásticas, porém com desvio à esquerda escalonado, pode ocorrer na reação leucemóide - um tipo de infecção grave. Leucocitose acima de 50 mil geralmente é indicativo de leucemia. Avaliação laboratorial LMC x Reação leucemóide Fosfatase alcalina Encontrada nos grânulos secundários dos neutrófilos. Princípio: o substrato hidrolisado pela enzima em combinação com um corante produz um precipitado colorido. Interpretação: é usada na diferenciação de LMC (diminuição) com reação leucemóide(normal ou alta). kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Resultado – Fosfatase alcalina kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Leucemia mieloide aguda kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Células blásticas com aspecto indiferenciado; Observa-se nucléolos e Bastão de Auer. Leucemia mieloide aguda kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Quadro característico de leucemia mielóide aguda do tipo M3 pela classificação FAB. Esta é também denominada leucemia promielocítica. Observa-se no campo a presença de cinco células em estágio de promielócito. Leucemia mieloide aguda kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com As leucemias mielomonocíticas são classificadas como do tipo M4, segundo a classificação FAB e representam cerca de 20% dos casos de leucemias agudas do tipo mielóide. Leucemia mieloide aguda kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Predomínio de células jovens da linhagem monocítica: monoblastos. Estes se apresentam de tamanho grande, núcleo ocupando cerca de 2/3 do volume celular, com cromatina nuclear pouco condensada e a presença de 2 a 4 nucléolos, muito nítidos, por célula. Leucemia mieloide crônica Diversidade de formas maturativas. Geralmente a proporção de células mais jovens como mieloblastos e promielócitos não ultrapassam 10% das células, sendo assim, menor do que as mesmas proporções destas nos processos leucêmicos agudos. Mielócitos, metamielócitos, bastonetes e segmentados predominam. Eosinofilia e basofilia absolutas estão frequentemente presentes. kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Leucemia mieloide crônica kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Basófilo, mielócito eosinofílico e neutrofílico Mielócitos basofílico, eosinofílico e neutrofílico Leucemia linfoide aguda kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com L1: blastos são pequenos, homogêneos e com pouco citoplasma. L2: heterogeneidade de tamanho dos blastos na leucemia linfoblástica. Leucemia linfoide aguda kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Dois linfoblastos hipercorados e vacuolizados característicos da leucemia linfoblástica do tipo L3. Leucemia linfoide crônica kamila Lacerda -Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Predomínio de células linfóides com aspecto de linfócitos maduros e frequentes restos nucleares (sombras ou manchas de Gumprecht). Linfoma Hodgkin e não Hodgkin kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Neoplasia do sistema linfático e retículo endotelial caracterizada pela presença de células de Reed-Sternberg – linfócito maligno. (HODGKIN) Mais comum e apresenta vários subtipos, com prognósticos distintos. (NÃO HODGKIN) Classificação: Indolentes: evolução lenta, linfadenomegalia com ausência de dor, esplenomegalia, comprometimento da medula óssea, que diminui as células sanguíneas. Agressivo: rápida evolução, levando a morte, quando não tratados adequadamente. Caso 09 (lâmina 8629) kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Eritrograma: Hm: 4.100.000/mm3 Hb: 11,2g/dL Ht: 34,8% VCM: 84,9fl HCM: 27,3pg CHCM:32,2% RDW: 22% Global de leucócitos: 83.590/mm3 Diferencial de leucócitos (%) Blastos --69 Promielócito--00 Mielócitos--01 Metamielócito--01 Bastonete--01 Segmentado--06 Eosinófilo--01 Basófilo--00 Linfócitos--17 Monócito--04 Plaquetas: 131.000/mm3 VMP: 10,5 fl Obs: Blastos das linhagens mieloide e linfoide. Presença de 69% de células blásticas de tamanho irregular, núcleo irregular, alta relação núcleo-citoplasma e citoplasma agranular. Caso 10 (lâmina 7527) kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Eritrograma: Hm: 4.300.000/mm3 Hb: 12,7g/dL Ht: 39,5% VCM: 91,9fl HCM: 29,5pg CHCM:32,2% Global de leucócitos: 16.920/mm3 Plaquetas: 167.000/mm3 Obs: Células linfoides sugestivas de doença linfoproliferativa crônica. Recomenda-se, a critério clínico, imunofenotipagem para investigação diagnóstica. Presença de manchas (sombras) nucleares. Plaquetas kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Células incompletas Forma discoide Vida média: 8-10 dias V.N -150,000 - 450,000/mm3 Plaquetas - EDTA EDTA excessivo, torna o meio hipertônico, podendo reduzir o tamanho dos eritrócitos, diminuir o VCM, aumentar a CHCM, degenerar os leucócitos. Desintegrar as plaquetas (contagem falsamente diminuída) e aumentar (por impedância) ou diminuir (por método óptico) o volume plaquetário médio (VPM). kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Pseudotrombocitopenia e satelitismo plaquetário EDTA - agregação plaquetária com diminuição do número de plaqueta (pseudotrombocitopenia) e satelitismo plaquetário (plaquetas agregadas ao redor de neutrófilos), causando falsas leucopenia e trombocitopenia. kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Pseudotrombocitopenia e satelitismo plaquetário É necessário confirmar a presença de agregados plaquetários isolados e agrupados nas diversas regiões da lâmina. CUIDADO! kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Nos casos de intensa trombocitose pelo excesso de plaquetas na lâmina, pode ocorrer a falsa impressão de que as plaquetas estão agregadas Técnicas para avaliação Aquecer a amostra a 37o C, por dez minutos, homogeneizá-la por um minuto e realizar novamente a contagem de plaquetas e o esfregaço. O uso de vórtex, por três minutos, em amostras com pseudotrombocitopenia pode desagregar as plaquetas em 43,6% dos casos. Problema não for solucionado, deve-se solicitar a coleta de nova amostra em tubo contendo citrato de sódio 3,2% e, a partir dessa amostra, aquecida a 37o C, preparar e corar um novo esfregaço para verificar se a agregação ainda persiste e realizar a contagem de plaquetas no analisador hematológico. kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Técnicas para avaliação Calculo que poderá ser realizado caso a contagem de plaquetas em citrato de sódio seja compatível com resultado do EDTA. RBC EDTA /RBC CITRATO X PLAQUETAS DE CITRATO kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Para evitar a pseudotrombocitopenia por EDTA, deve-se analisar a amostra para o hemograma imediatamente após a coleta, não dando tempo para formação dos agregados plaquetários. Estudo do laboratório Fleury: Analisou 56.337 amostras não selecionadas e sequenciais de sangue periférico, coletadas em tubos com EDTA. Dentre os hemogramas, 117 casos (0,2%) apresentaram pseudoplaquetopenia, identificada pela sinalização automática do equipamento para a presença de plaquetas agregadas e por meio da análise morfológica microscópica. Essas amostras foram submetidas à técnica de agitação pelo vórtex, durante dois minutos, e reprocessadas para nova contagem plaquetária. Com esse procedimento, o número de plaquetas normalizou-se em 100 das 117 amostras (85,5%). Nos 17 casos restantes (14,5%), houve necessidade de nova coleta de sangue periférico em tubo sem EDTA. Em 12 (10,3%) deles, confirmou-se a impressão inicial de pseudoplaquetopenia EDTA- dependente e, nos cinco (4,3%) remanescentes, a deposição de fibrina foi identificada como a causa inicial dessa alteração laboratorial. Esses resultados comprovam que a técnica de agitação mecânica pelo vórtex é eficaz e soluciona a grande maioria dos casos de pseudoplaquetopenia sem interferir na qualidade do exame. “O estudo demonstra a importância da existência de um fluxo na rotina laboratorial para identificar e resolver tais casos, garantindo a acurácia da contagem de plaquetas”, avalia o assessor médico em Hematologia do Fleury, Alex Freire Sandes. Autores: MOURAD, S.C.; SANDES, A.F.; TAKIHI, I.Y.; PACHECO; L.Z.C.; CHAUFFAILLE; M.L.; RIZZATTI, E.G kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Volume plaquetário médio (VPM) Sensível indicador de desordens plaquetárias in vivo, mas pode ser tecnicamente difícil de analisa-lo in vitro por causa dos interferentes pré-analíticos, como tempo de armazenamento da amostra e artefatos gerados pelos anticoagulantes. VPM: determina a função e atividade plaquetária. Não pode ser avaliado separadamente da contagem de plaquetas. Trombocitopenia e trombocitose (importante avaliação do VMP) kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Problemas na determinação do VPM EDTA- pode induzir alterações na forma e na estrutura das plaquetas; essa alteração na forma causa aumento aparente de aproximadamente 20% no VPM nas duas primeiras horas em exposição ao EDTA, em relação as amostras coletadas com citrato. Estouros das plaquetas causado pelo EDTA – Diminui o VPM Partículas menos de 20 fL podem ser contadas como plaquetas, a contagem fica elevada e o VPM fica alterado, Eritrócitos infectados por trofozoítos do P. falciparum, por fungos ou bactérias também podem interferir na contagem de plaquetas e na determinação do VPM kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Aplicação clínica - VPM O VPM elevado pode ser encontrado: Pré-eclampsia, diabetes, doenças cardíacas, hipertireoidismo, esplenectomia, talassemias α ou β, vírus da imunodeficiência humana (HIV)e púrpura trombocitopênica idiopática (PTI). Em desordens mieloproliferativas, como a leucemia mieloide crônica e a mielofibrose, as plaquetas frequentemente, mas não sempre, são grandes e anormalmente heterogêneas. Nessas doenças, realmente há plaquetas “gigantes” no sangue periférico. kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Aplicação clínica - VPM O VPM diminuído pode ser encontrado:Sepse, quimioterapia, doenças inflamatórias do intestino, como colite ulcerativa e doença de Crohn, hipotireoidismo, anemia megaloblástica e síndrome de Wiskott-Aldrich. Nessa rara síndrome hereditária, a trombocitopenia e acompanhada por plaquetas pequenas e hipofuncionais. kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Caso 07: (lâmina 4399) kamila Lacerda - Biomédica Kamila Lacerda – Biomédica e-mail: kamilatlll@gmail.com Eritrograma: Hm: 4.480.000/mm3 Hb: 14,0g/dL Ht: 41,5% VCM: 92,6fl HCM: 31,3pg CHCM:33,7% Global de leucócitos: 7.300/mm3 Diferencial de leucócitos (%) Blastos --00 Promielócito--00 Mielócitos--00 Metamielócito--10 Bastonete--02 Segmentado--55 Eosinófilo--01 Basófilo--00 Linfócitoos --40 Monócito--02 Plaquetas: 109.000/mm3 VMP: 10,7 fl Obs: Pseudoplaquetopenia, ou seja, contagem plaquetária falsamente diminuída pela presença de grumos plaquetários na amostra. A análise estimada na microscopia mostra plaquetas normais em números. A critério clínico, poderá ser realizada nova coleta sem ônus, utilizando anticoagulante alternativo (citrato de sódio) RBC EDTA / RBC CITRATO x Plaquetas citrato
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