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04/09/2017 1 Crescimento microbiano PROFa. Ana Paula Alves FaSar – 02/2017 Introdução Fatores necessários divididos em 2 categorias: ✓Físicos: temperatura, pH e pressão osmótica ✓Químicos: fontes de C e N, S, P, oligoelementos, oxigênio e fatores orgânicos para crescimento 04/09/2017 2 Fatores físicos Temperatura Microorganismos classificados em 3 grupos principais: 1. Psicrófilos→ crescem em baixas temperaturas 2. Mesófilos→ crescem em temperaturas moderadas 3. Termófilos→ crescem em altas temperaturas 04/09/2017 3 04/09/2017 4 Fatores físicos Temperatura Alguns membros da família Archea apresentam T ótima de crescimento em 80°C ou superior → hipertermófilos ou termófilos extremos Vivem em fontes de águas quentes associadas à atividade vulcânica Utilizam o enxofre para sua atividade metabólica Fatores físicos pH Maioria das bactérias: variações pequenas de pH (6,5 e 7,5) Poucas bactérias crescem em pH ácido como 4,0 – acidófilas Fungos e leveduras crescem em variações de pH maiores que as bactérias (3,8 a 5,6) Um tipo de bactéria quimioautotrófica encontrada em drenagem de mina de carvão → oxida enxofre e forma ácido sulfúrico→ sobrevive em pH 1 04/09/2017 5 Fatores físicos pH Bactérias cultivadas em laboratório produzem ácidos que podem acabar interferindo no seu próprio crescimento Para neutralizar→ uso de tampões químicos ✓ Peptonas e aminoácidos ✓ Sais de fosfato → não são tóxicos e fornecem fósforo como nutriente 04/09/2017 6 Fatores físicos Pressão osmótica Microorganismos → retiram nutrientes da água do meio onde vivem Necessidade da água para crescimento Solução hipertônica: água passa de dentro da célula para o meio mais concentrado ✓ Perda de água por osmose = plasmólise 04/09/2017 7 Fatores físicos Pressão osmótica Organismos halofílicos → adaptam-se em meios com ↑ concentrações de sais Maioria dos microorganismos → devem crescer em meio que contenha quase somente água ✓ Ex.: 1,5% ágar (polissacarídeo isolado de algas) utilizado para solidificar os meios de cultivo microbiano Se concentrações maiores de ágar são utilizados, o aumento da pressão osmótica pode inibir o crescimento de algumas bactérias. 04/09/2017 8 Fatores físicos Pressão osmótica Se pressão osmótica estiver parcialmente baixa (hipotônica): ✓ Água tende a entrar na célula ao invés de sair dela ✓ Indução de lise celular em microorganismos que apresentam uma parede celular relativamente fraca Fatores químicos Carbono Um dos elementos mais importantes para o crescimento microbiano Carbono → essencial para síntese de todos os compostos orgânicos necessários para viabilidade celular Metade dos organismos quimio-heterotróficos → obtém carbono de materiais orgânicos → proteínas, carboidratos e lipídeos Quimioautotróficos→ obtém carbono a partir do CO2 04/09/2017 9 Fatores químicos Nitrogênio, Enxofre e Fósforo Síntese de material celular: ✓Proteínas: N e S ✓DNA e RNA: N e P ✓Fontes de N: decomposição de matéria orgânica protéica, amônia (NH4 +), nitratos Fatores químicos Nitrogênio, Enxofre e Fósforo Cianobactérias fotossintetizadoras: usam N2 gasoso diretamente da atmosfera ✓Fixação de nitrogênio ✓Organismos que vivem no solo 04/09/2017 10 Fatores químicos Nitrogênio, Enxofre e Fósforo Fontes de S: íons sulfato (SO4 2-), sulfito de hidrogênio e aminoácidos que contêm S P: íon fosfato (PO4 3-) Outros elementos importantes: K, Mg e Ca ✓Co-fatores para reações enzimáticas Fatores químicos Oligoelementos Minerais: ferro, cobre, molibdênio e zinco Essenciais para atividade de algumas enzimas: co-fatores Normalmente presentes na água Podem ser adicionados ao meio de cultivo Uso de água não destilada para elaboração de alguns meios de cultivo 04/09/2017 11 Fatores químicos Oxigênio Organismos aeróbios produzem mais energia a partir do uso de nutrientes que os anaeróbios Aeróbios obrigatórios Anaeróbios facultativos Anaeróbios obrigatórios 04/09/2017 12 04/09/2017 13 Fatores químicos Oxigênio Formas tóxicas do oxigênio: 1. Oxigênio singlet: O2 que foi induzido a um estado de alta energia, extremamente reativo 2. Radicais superóxidos livres: O2 -. Formados em pequenas quantidades durante a respiração normal. Por serem tóxicos, microorganismos produzem a enzima SOD (superóxido dismutase)→ neutraliza esses radicais ✓ Bactérias aeróbicas, anaeróbicos facultativos e anaeróbicos aerotolerantes - transformação do radical superóxido em oxigênio molecular e peróxido de hidrogênio: O2 - + O2 - + 2H+ → H2O2 + O2 Fatores químicos Oxigênio 3. Peróxido de hidrogênio: contém o ânion peróxido O2 2-→ tóxico ✓ Enzima catalase: converte o H2O2 em água e oxigênio ✓ Atividade dessa enzima é facilmente detectada por meio de sua ação sobre o H2O2 → liberação de bolhas de ar quando colocadauma gota de H2O2 sobre uma colônia bacteriana ✓ Outra enzima: peroxidase. Não gera oxigênio, apenas água 4. Radical OH: forma intermediária do oxigênio, o mais reativo 04/09/2017 14 Fatores químicos Fatores orgânicos de crescimento Compostos orgânicos essenciais que o organismo não é capaz de sintetizar: ✓Vitaminas ✓Aminoácidos ✓Purinas e pirimidinas 04/09/2017 15 DIVISÃO BACTERIANA CRESCIMENTO BACTERIANO = AUMENTO DO No. DE BACTÉRIAS ≠ AUMENTO NO TAMANHO DAS CÉLULAS DIVISÃO CELULAR BROTAMENTO formam uma pequena região inicial de crescimento (o broto), que vai se alargando ate atingir um tamanho similar ao da cel. parental, e então se separam dela. 04/09/2017 16 FISSÃO BINÁRIA – MAIORIA DOS PROCARIOTOS TEMPO DE GERAÇÃO Considera-se a fissão binária que é o método mais comum de multiplicação bacteriana. 04/09/2017 17 REPRESENTAÇÃO LOGARITMICA DAS POPULAÇÕES BACTERIANAS 04/09/2017 18 CURVA DE CRESCIMENTO BACTERIANO 04/09/2017 19 04/09/2017 20 REVISÃO Fazer em dupla, entregar na próxima aula. Fonte: TORTORA, MICROBIOLOGIA, 10ª EDIÇÃO 4.
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