IDENTIFICAÇaO DE ENTERAIS SEMEADURA SA

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ISOLAMENTO DE ENTERAIS 
 
ENTEROBACTÉRIAS 
ENTEROBACTÉRIAS 
Família: Enterobacteriacea 
Gêneros: 30 
Espécies: 100 
Gêneros mais importantes: 
 
Escherichia - Citrobacter 
Salmonella - Serratia 
Yersinia - Morganella 
Enterobacter - Shigella 
Proteus - Klebsiella 
Responsáveis por 70% das Infecções Urinarias e 50% das Septecemia 
ENTEROBACTÉRIAS 
CARACTERÍSTICAS: 
 
•Habitat (solo, água, vegetais, intestino de humanos e animais) 
•Bacilos ou cocobacilos 
•Gram negativos 
•Imoveis ou Movéis (peritriquia) 
•Não formam endosporos 
•Capsula (facultativo) 
•Anaeróbica facultativa 
ENTEROBACTÉRIAS 
PROPRIEDADES DAS ENTOBACTERIAS 
 
•Fermentador de glicose 
•Reduz nitrito a nitrato 
•Oxidase negativa 
ENTEROBACTÉRIAS 
ISOLAMENTO PRIMÁRIO 
•Amostra 
•Coloração de Gram 
•Meios seletivos 
•Meios diferenciais 
•Características das colônias 
PRINCIPAIS MEIOS UTILIZADOS 
• Ágar EMB (Eosin Methylene Blue ) 
• Ágar MacConkey 
• Ágar SS (Salmonella-Shigella) 
• Ágar VB (Verde Brilhante) 
 
ENTEROBACTÉRIAS 
FERMENTAÇÃO 
Processo metabólico de oxirredução que ocorre em 
anaerobiose, onde o aceptor final de eletrons é um 
substrato orgânico. 
Meios de cultivo a fermentação é observada pela 
mudança de cor através de indicadores de pH quando a 
formação de produtos ácidos. 
Carboidrato Degradação 
Produtos ácidos 
Formação de gás 
COMPONETES EXEMPLOS 
Hidrolisado de proteinas Peptona, infusão de carne e 
caseina 
Carboidratos Lactose, sacarose e maltose 
Enriquecimento Sangue, soro, extrato de carne e 
levedura 
Inibidores Bile, citrato, neomicina, metais 
pesados corantes amilinicos 
(verde brilhante e eosina) 
Indicador de pH Fucsina, azul de metileno, 
vermelho neutro e vermelho de 
fenol 
Componentes de meios de cultura para enterais 
SEMEADURA 
Esgotamento – Alça bacteriológica (Isolar colônias) 
EMB - Eosin methylene blue agar 
– Isolamento, cultivo e diferenciação de enterobactérias 
– Fermentação da lactose e produção de H2S 
– Eosina e Azul de Metileno (inibidores e indicadores de pH) 
EMB 
Agar MacConkey 
– Isolamento, cultivo e diferenciação de enterobactérias 
com base na habilidade de fermentar a lactose. 
– Sais biliares e cristal violeta – inibidores 
– Vermelho neutro – indicador de pH 
Agar MacConkey 
SS – Agar Salmonella-Shigella 
– Isolamento e diferenciação de bacilos entéricos 
patogênicos, especialmente do gênero Salmonella 
– Produção de H2S 
– Sais biliares e citrato de sódio – inibidores 
– Vermelho neutro – Indicador de pH 
VB - Agar Verde Brilhante 
– Seletivo para Salmonella spp. 
– Colônias vermelhas, rosa forte ou translúcidas 
circundadas de vermelho 
– Vermelho de fenol - Indicador de pH 
– Verde brilhante e bile - inibidores 
Fermentação da lactose e/ou sacarose 
ENTEROBACTÉRIAS 
Metodologia – Aula Prática 
Semear Amostra em Ágar Sólido na Placa de Petri 
Técnica de Esgotamento por Estrias – Alça bacteriológica 
TSI - Triple sugar iron agar 
– Princípio – determinar a capacidade de bastonetes 
Gram negativos fermentarem glicose, lactose e/ou 
sacarose, com produção de gás (CO2) e gás 
sulfídrico (H2S). 
 
• Componentes: 
– Vermelho de fenol – indicador de pH 
– Açúcares – glicose, lactose e sacarose 
– Indicador de H2S – sulfato ferroso de 
amônia/tiossulfato de sódio 
 
TSI 
• Inoculação 
– Perfurar com agulha bacteriológica até a base 
do tubo e fazer estrias em zig-zag na 
superfície do meio. 
– Incubar por 18 a 24h, a 35oC-37oC. 
 
TSI (triple sugar iron 
agar) 
Produção de Gás Formação de bolhas e 
rachaduras 
Base Produção de H2S Presença de pigmento 
negro de qualquer 
intensidade 
Fermentação de glicose Reação positiva: 
coloração amarela 
Superfície Fermentação de lactose 
e/ou sacarose 
Reação positiva: 
coloração amarela 
Base Superfície 
TSI 
• Interpretação 
– K-K (alcalino – alcalino) 
– A bactéria não é capaz de fermentar nenhum dos 3 
açúcares. A utilização da peptona como fonte de 
energia torna o pH alcalino, tanto na base como no 
ápice. 
 
TSI 
• Interpretação 
– A-A (ácido – ácido) 
– A bactéria foi capaz de fermentar tanto a glicose 
como a lactose e/ou sacarose, causando completa 
reversão do meio (amarelo). 
 
TSI 
• Interpretação 
– K-A (alcalino – ácido) 
– A bactéria é capaz de fermentar a glicose, mas não a 
lactose nem sacarose, causando reversão parcial do 
meio (base amarela e ápice alcalino). 
 
 
TSI