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19/05/2015 1 o Finalidade: verificar a integridade e a função hepática. o Utilidade: Detectar anormalidades da função hepática. Determinar o tipo e o local da lesão. Facilitar o prognóstico e o acompanhamento do paciente com enfermidade hepática. o Aplicação: empregadas na avaliação das funções e doenças hepáticas. o Tipos: Testes de bioquímicos de rotina. Testes bioquímicos especiais. Testes urinários. Marcadores imunológicos das hepatites por vírus. Testes hematológicos. Testes de biologia molecular. o Tipos: Bilirrubina (conjugada e não-conjugada) Albumina Proteínas totais Aminotransferases (ALT / TGP e AST / TGO) Fosfatase alcalina γ-Glutamil transferase (γ -GT) o Definição: produto catabolico do heme. o Síntese diária: 250 a 350 mg/dia (adultos). o Classificação: Bilirrubina não conjugada, Bilirrubina conjugada o Excreção: Hepática (bile) → intestino → fezes e urina. 19/05/2015 2 Degradação do heme em bilirrubina Degradação do heme em bilirrubina o Sinonímia: Bilirrubina Indireta; BI. o Síntese: Sistema Retículo Endotelial (SRE). o Características: é apolar e insolúvel em água o Transporte: Complexada com a albumina plasmática. o Sinonímia: Bilirrubina Direta; BD. o Síntese Retículo endoplasmático dos hepatócitos. o Características: mistura polar/não polar que atravessa as membranas celulares, solúvel em água. Retículo endoplasmático dos hepatócitos o Conjugação: com o ácido glicurônico – enzima uridina- difosfat-glicuroniltransferase (UDPGT) o Excreção: bile (pigmentos biliares) → intestino → fezes (urobilina ou estercobilina) 19/05/2015 3 o Definição: Acúmulo (aumento) de bilirrubina ou seus conjugados no plasma. o Causa: Desequilíbrio entre síntese e excreção. o Característica Clínica: Icterícia (pigmentação amarela). o Significado Clínico: sinal precoce de uma série de patologias hepáticas e biliares. o Caracterização: Concentração plasmática de bilirrubina excede 3 mg/dL [Normais: <1,0mg/dL]. o Classificação: Pré-hepática: Aumento da produção de bilirrubina não conjugada. Intra-hepática: Inadequada captação, conjugação ou secreção hepática. Aumento da fração não conjugada. E conjugada. Pós-hepática: Obstrução da drenagem biliar. Aumento da fração conjugada. o Caracterização: Excesso de bilirrubina não conjugada plasmática. o Causa: Aumento da produção de bilirrubina indireta. Bilirrubina Predominante Causa Exemplo Clínico Frequência Não conjugada (Indireta) hemólise Auto-imune Hemoglobina anormal Incomum Depende da região 19/05/2015 4 o Caracterização: Aumento de BI ou BD. oCausa: inadequada captação, conjugação ou secreção hepática. Bilirrubina Predominante Causa Exemplo Clínico Frequência Não-Conjugada (Indireta) ou Conjugada (Direta) Infecção Química/drogas Hepatites A, B e C Acetominofeno Álcool comum/muito comum Comum Comum Erros genéticos: metabolismo da bilirrubina Síndrome de Gilbert Síndrome de Crigler-Najjar Síndrome de Dubin Johnson Síndrome de Rotor 1 em 20 Muito rara Muito rara Muito rara Erros genéticos: proteínas específicas Doença de Wilson α1-antitripsina 1 em 200mil 1 em mil com genótipo Auto-imune Hepatite cronica ativa incomum/rara Neonatal Fisiológica Muito comum o Causa: Obstrução da árvore biliar. o Característica Clínica: fezes com coloração pálida e urina escura. Bilirrubina Predominante Causa Exemplo Clínico Frequência Conjugada (Direta) Obstrução dos Ductos biliares intra hepáticos Drogas Cirrose biliar primária Colangite Comum Incomum comum Obstrução dos Ductos biliares extra hepáticos Cálculos biliares Tumor pancreático calangiocarcinoma Muito comum Incomum raro o Paciente → Permanecer em Jejum 8 horas antes do teste. o Amostra Tipo: Soro (isento de hemólise e lipemia). Cuidados especiais: Mantê-la no escuro até a realização do teste (no máximo 3 horas após a coleta). Estabilidade: 1 semana no escuro e refrigerado. o Determinação Bioquímica → Espectrofotometria (colorimétrica (525nm) – Reação de Ponto final) 19/05/2015 5 Testes Bioquímicos Pré-hepático Intra-hepático Pós-hepático Bilirrubina Conjugada – ↑ ↑ AST ou ALT NORMAL ↑ NORMAL ALP NORMAL NORMAL ↑ Bilirrubina urinária – PRESENTE PRESENTE Urobilinogênio urinário PRESENTE PRESENTE – o Sinonímia: Transaminases o Definição: São enzimas intracelulares o Função: Síntese e degradação de aminoácidos. o Classificação: Aspartato-amino-transferase (AST). Alanina-amino-transferase (ALT. o Sinonímia: Transaminase glutâmico-oxalacética (TGO). o Definição: Enzima bilocular (citoplasmática e mitocondrial) amplamente difundida no organismo. MitocôndriaCitoplasma músculos esqueléticosFígado o Local de atividade: fígado, coração e músculos esqueléticos. Coração o Sinonímia: Transaminase glutâmico-pirúvica (TGP). o Definição: Enzima unilocular (citoplasmática) amplamente difundida no organismo. o Local de atividade: Tecido hepático Fígado 19/05/2015 6 Significado Clínico Relação ALT / AST ALTERAÇÕES NOS NÍVEIS DE ALT Outros achados Hepatites Virais Agudas ALT > AST Relação < 1 Fase de cura inverte Pico: 7ª - 12º dia Normalização: 3 -5º semana São encontrados ↑ bilirrubinemia, FAL, bilirrubinúria. Cirrose AST > ALT Relação > 1 Elevação, reflete o grau da fibrose ↑ 5x > limites superiores dos VR Síntese de Albumina prejudicada; TAP ↑; Bilirrubinemia ↑; Amônia ↑; uremia ↓ o Paciente → Não necessita de cuidados especiais. o Amostra Tipo: Soro (isento de hemólise e lipemia) Estabilidade: 48 horas sobre refrigeração. o Diagnóstico Laboratorial: Espectrofotometria (Ultra- violeta (340 nm) – Cinética Contínua Decrescente) Aminotransferases/ Transaminases Valor de Referência AST / TGO 5 – 34 U/L ALT / TGP 6 – 37 U/L Observação: valor de referência a 37°C o Definição: É uma enzima amplamente difundida no organismo. o Função: Hidrolisa de fosfomonoésteres em pH alcalino Transporte lipídico Processo de calcificação óssea. o Distribuição: membranas e superfícies celulares: Fígado (canalículos biliares); Ossos (osteoblastos) Mucosa do intestino delgado; Placenta; Túbulos renais; Baço; Leucócitos. Membrana celular 19/05/2015 7 o Definição: Aumento nos níveis de FAL sérica. o Significado clínico: Elevações nas atividades da FAL sérica são comumente originárias do: Fígado → fração termoestável Osso → fração termolábil Fígado ossos SIGNIFICADO CLÍNICO FISIOLÓGICO PATOLÓGICO Crianças em idade de crescimento (3Xadulto) Carcinoma metastático em fígado e ossos Final do 3º mês de gravidez (2xvalores normais) Doença hepatobiliar (2-3x os limites superiores dos VR; podendo alcançar 10 a 12x) Obstrução extra-hepática das vias biliares: 3-10X limites superiores VR. Ex.: cálculos biliares, câncer de cabeça de pâncreas Hepatites virais e cirrose: elevações < 3xlimites superiores dos valores de referência Doenças ósseas: de Paget (osteíte deformante): 10-15x limites superiores do VR Osteomalacia e raquitismo: 2-4xlimite superior do VR Câncer ósseo osteogênico: bastante elevado o Paciente → Permanecer em jejum por 8 horas. o Amostra Tipo: Soro (isento de hemólise e lipemia) ou plasma (heparina). Obs.: O ensaio deve ser realizado logo após coleta (!3h). o Determinação laboratorial → Espectrofotometria – Reação: Ponto final ou Cinética de Tempo Fixo (590 nm – 37°C) Classe Valor de Referência Homens Adultos53 – 128 U/L Mulheres Adultas 42 – 98 U/L o Sinonímia: γ-GT; GGT; γ-glutamiltransferase; γ- glutamiltranspeptidase. o Definição: É uma enzima de membrana amplamente distribuída no organismo. Membrana celular 19/05/2015 8 o Função: Transporte (aminoácidos e peptídeos através das membranas celulares); Síntese (proteínas); Regulação (glutationa tecidual). o Distribuição: A γ-GT está distribuída nas membranas: Fígado (Vesículas seminais; Pâncreas; Rim; Baço; Cérebro). o Definição: Aumento nos níveis de γ-GT sérica. o Significado clínico: Elevações nas atividades da γ-GT sérica tem origem, principalmente, hepatobiliar. o Outras causas de aumento: Utilização de fármacos (barbitúricos, antimicrobianos, etc); Fibrose cística; Câncer prostático; LES; Hipertireoidismo. o Paciente → Permanecer em jejum por 8 h. Não ingerir álcool por 24h antes da prova. o Amostra Tipo: Soro ou plasma (EDTA), isentos de hemólise e lipemia. Estabilidade: 1 mês (refrigeração); 1 ano (-20°C). o Diagnóstico Laboratorial: Espectrofotometria (reação Cinética Contínua ou Cinética de Tempo fixo (405nm)) Classe Valor de Referência Homens 5 – 38 U/L Mulheres 8 – 55 U/L o ~ 300 proteínas plasmáticas o Apresentam papéis bioquímicos específicos o Suas concentrações podem ser afetadas por processos patológicos o São determinadas na investigação de várias doenças. o Funções: transporte, manutenção da pressão oncótica, tamponamento de alterações do pH, imunidade humoral, atividade enzimática, coagulação e resposta de fase aguda. 19/05/2015 9 o Hiperproteinemia Desidratação; Enfermidades mono e policlonais crônicas. o Hipoproteínemia Aumento do volume plasmático; Perda renal proteínas. Perda de proteínas pela pele; Gota. o Paciente → Não deve ingerir dieta rica em gorduras durante 8 horas antes do teste. Suspender as medicações que interferem nos níveis das proteínas séricas. o Amostra Tipo: Soro sem hemólise e não lipêmico. Estabilidade: 1 semana (refrigeração). o Determinação bioquímica → Espectrofotometria (Colorimétrica - Reação de Ponto Final (545nm)) Crianças e Adolescentes Valor de Referência Prematuro 3,6 a 6,0 g/dL Recém-nascido a termo 4,6 a 7,0 g/dL 7 dias a 1 ano 4,4 a 7,6 g/dL 1 a 2 anos 5,6 a 7,5 g/dL > 3 anos 6,0 a 8,0 g/dL Adultos 6,0 a 8,0 g/dL o Definição: Proteína plasmática. o Síntese: Hepática (~15g/dia) o Funções: regulação osmótica; transporte e armazenamento. o Hiperalbuminemia carcinomatose metastática, desidratação aguda, estresse, febre reumática, gravidez, intoxicação hídrica, LUS, meningite, neoplasias, osteomielite, pneumonia, traumatismo, tuberculose, vômito, hemoconcentração, etc. o Hipoalbuminemia: Esta condição pode ser fisiológica ou patológica. Redução da síntese; Aumento do catabolismo protéico; Perda de proteínas; Distribuição alterada; etc. 19/05/2015 10 o Paciente → Não deve consumir dieta rica em gordura por 48 h antes da prova. o Amostra Tipo: Soro. Estabilidade: 1 semana (temperatura ambiente); 1 mês (refrigeração). o Determinação bioquímica: Espectrofotometria (colorimétrica - Reação de Ponto Final (630nm)) Crianças e Adolescentes Valor de Referência 1 – 30 dias 2,6 a 4,3 g/dL 31 – 182 dias 2,8 a 4,6 g/dL 183 365 dias 2,8 a 4,8 g/dL 1 a 18 anos 2,9 a 4,7 g/dL Adultos Valor de Referência Homens 3,5 a 4,5 g/dL Mulheres 3,7 a 5,3 g/dL > 60 anos 3,4 a 4,8 g/dL o MOTTA, V.T. Bioquímica Clínica para Laboratório. Princípios e interpretações. EDUCS. 2009. o BASQUES, JC. Fotometria e Padronização. 2010 o BASQUES, JC. Reagentes e Reações – Intervenções em problemas técnicos. 2010. o ROBBINS, SL; CONTRAN, R.S. Patologia - Bases Patológicas das Doenças. ELSEVIER. 2005. o BAYNES, J.W. Bioquímica Médica. Rio de Janeiro: ELSEVIER, 2007.
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