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Prof. Dr.Hélio Histórico da Microbiologia; Morfologia de microrganismos 1590 Hans Janssen- microscópio tenha sido inventado. No início, o instrumento era considerado um brinquedo, que possibilitava a observação de pequenos objetos; Zacharias quem montava os microscópios, distribuídos para realeza européia. HISTÓRICO Hans Janssen HISTÓRICO Robert Hooke (1635 - 1703) e Antony van Leeuwenhoek (1632-1723) - Desenvolveram microscópios; - Primeiros a fazer observações microscópicas de materiais biológicos. Robert Hooke Antony van Leeuwenhoek HISTÓRICO Antony van Leeuwenhoek Era zelador da prefeitura e servia como provador oficial de vinhos na cidade de Deft, na Holanda. Possuía habilidade em polir e montar lentes; Passou a observar águas de rio, salivas, fezes etc. “Animálculos” Antony van Leeuwenhoek A descoberta dos microrganismos de Leeuwenhoek incitou discussões sobre a origem dos “animálculos” HISTÓRICO Surgiram 2 Escolas de pensamento GERAÇÃO ABIOGÊNESE X BIOGÊNESE Formulada por Aristóteles (384-322 a.C.) Grécia antiga Os seres vivos surgem da matéria bruta, espontaneamente. John T. Needham (1713-1781) Em 1745 fez experimentos em que submetia à fervura frascos contendo substâncias nutritivas. Após a fervura, fechava os frascos com rolhas e deixava-os em repouso por alguns dias. Depois examinava ao micro e observava pequenos microrganismos. Os microrganismos teriam surgido por geração espontânea. A solução nutritiva continha uma “força vital”. Francisco Redi (1626-1698) Realizou experiências controladas para provar que a Geração Espontânea era equivocada Lazzaro Spallanzani (1729-1799) 25 anos mais tarde, um padre italiano, repetiu os experimentos de Needham, com algumas modificações. “Needham não ferveu o suficiente para matar todos os microrganismos”. Needham- “ao ferver por muito tempo a força vital era destruída”. Spallanzani não consegui explicar direito, fortalecendo a abiogênese. Louis Pasteur (1822-1895) Por volta de 1860 prova definitivamente que os seres vivos originam-se de outros seres vivos. Realizou experimentos com balões do tipo “pescoço de cisne” : Louis Paster “RESOLVEU” A POLÊMICA DA ORIGEM DOS MICRORGANISMOS Louis Pasteur (1822-1895) Passou a estudar a utilização dos microrganismos na produção de vinho e como causa de doenças ; Teoria microbiana da fermentação. Louis Paster Teoria microbiana da fermentação Paster- “Os produtos da fermentação do suco de uva eram resultado da presença de microrganismos e não que a fermentação produzia microrganismos”. Por volta de 1850, Paster respondeu a uma solicitação de ajuda da industria de vinho francês... Pasteurização Louis Paster Teoria microbiana das doenças Antes acreditava-se que as doenças eram causadas por fatores vagos: -Ar -Sangue ruins Anton von Plenciz (1705-1786), de Viena: -Estabeleceu que os seres vivos eram causas de doenças. -“Diferentes agentes eram responsáveis por diferentes doenças”. Em 1546, Girolama Fracastoro (1483-1553) de Verona: -“As doenças surgiam devido a organismos pequenos demais para serem vistos”. -“Estes podem ser transmitidos de pessoas para pessoa”. Na Alemanha Robert Koch (1843-1910); Rival de longas datas de Paster; Buscava descobrir a causa do Carbúnculo Desenvolveu técnicas laboratoriais para o estudo dos microrganismos; Estudo com modelos em animais: - bactérias de carneiros infectados eram inoculadas em camundongos. 1 a provar que um tipo específico de microrganismos causa um tipo definido de doença. Descobriu as bactérias causadoras do cólera e da tuberculose. Robert Koch HISTÓRICO Postulados de Koch O Postulado conduziu à descoberta da maioria das bactérias que causam doenças humanas. 1. Um microrganismo específico pode sempre estar associado a uma doença. 2. O microrganismo deve ser isolado e cultivado em cultura pura em condições laboratoriais. 3. A cultura pura do microrganismo produzirá a doença quando inoculada em animal susceptível. 4. É possível recuperar o microrganismo inoculado do animal infectado experimentalmente. Robert Koch (1843-1910) HISTÓRICO Theobald Smith (1859-1934) 1 a descrever que um microrganismo poderia ser veiculado por um artrópode. Provou que um protozoário era responsável pela febre do gado do Texas. Conduziu a pesquisa de doenças microbianas transmitidas por artrópodes ex: Theobald Smith HISTÓRICO -Malaria -Febre amarela -Doença do sono Desenvolvimento nos processos de prevenção e tratamento das doenças Diante de todo este contexto os cientistas passaram a dar mais atenção: Prevenção Tratamento (ex: anti-sepsia) Imunização, Quimioterapia. Edward Jenner (1749-1822) ERRADICAÇÃO DA VARÍOLA Declaração OMS 1979 DESCOBERTA DA PENICILINA Em 22 de setembro de 1928 Fleming observava ao microscópio o crescimento de uma colônia de bactérias Staphylococcus aureus, Para sua frustração, constatou que um fungo havia contaminado. Decidiu acompanhar o crescimento Penicillium notatum. Alexander Fleming (1881 – 1955) HISTÓRICO DESCOBERTA DA PENICILINA Graças a esses medicamentos, doenças infecciosas, deixaram de ser fatais. Durante a Segunda Guerra Mundial, a penicilina salvou a vida de milhões de soldados feridos nos campos de batalha. Howard Florey e Ernst Chain, em 1937 purificaram a penicilina. A partir de 1940, o medicamento passou a ser aplicado com injeções. Alexander Fleming HISTÓRICO Pneumonia, escarlatina, sífilis, gonorréia, febre reumática, septicemia e tuberculose A penicilina funcionou bem contra infecções estafilocócicas até os anos 60, quando rapidamente começaram a surgir cepas resistentes à penicilina. DESCOBERTA DA PENICILINA HISTÓRICO DESCOBERTA DO ME Início dos anos 30 - O alemão Ernest Ruska Utilizam feixes de elétrons e lentes eletromagnéticas, no lugar da luz e das lentes de vidro Permite ampliações de até um milhão de vezes. Há 3 tipos básicos de microscópio eletrônico: 1. Transmissão (para observação de cortes ultrafinos) 2. Varredura (para observação de superfícies) 3. Tunelamento (para visualização de átomos) Introdução MICRORGANISMOS: São seres em que sua unidade funcional é vista ao microscópio ou não e não formam tecidos ou órgãos. Thiomargarita namibiensis CARACTERÍSTICAS MICRORGANISMOS PROCARIOTOS MICRORGANISMOS EUCARIOTOS TAMANHO 0,2 – 5 µm 5 - 150 µm ESTRUTURA NUCLEAR DNA circular, não envolvido em proteínas DNA complexo, proteínas básicas LOCALIZAÇÃO DA ESTRUTURA NUCLEAR DNA concentrado numa zona, sem membrana nuclear - nucleóide DNA no núcleo, rodeado de membrana nuclear CITOPLASMA ribossomo 70S ribossomo 80S PAREDE CELULAR Parede celular rígida, com mureína, exceto micoplasmas Fungos: glucanos, mananos, quitina e celulose REPRODUÇÃO Assexuada, por divisão binária transversal Sexuada ou assexuada - Produtores de antibióticos e antifúngicos - Fixadoras de nitrogênio - Controle biológico - Produtores de alimentos: iogurte - Produtores de ácidos e vitaminas - Sintetizadores de hormônios por engenharia genética Bactérias- Fotossintetizantes Algas - Controle biológico - Engenharia genética (vetores de terapia genética) Vírus - Base da cadeia alimentar Microrganismos marinhos - Produtores de alimentos: queijos, cerveja, pão, vinho, rum, uísque. - Produtores de antibióticos e antifúngicos - Maiores decompositores do planeta Fungos São procariontes. Unicelulares Não possuem núcleo organizado. O tamanho geralmente varia de 0,5 a 5 μm Podem ser vistas com ou sem microscópio. Sem microscópio é possível ver as colônias. BACTÉRIAS CARACTERÍSTICAS Thiomargarita namibiensis Existem há mais do que 3,5 bilhões anos. Podem ser encontrados: no ar, no solo, na água, vulcão, no mar profundo, nas fontes quentes, no gelo, no sal, na pele dos homens, etc. Em condições desfavoráveis algumas formam esporos. BACTÉRIAS CARACTERÍSTICAS Produção de alimentos e bebidas Degradação de lixo problemático Produção de medicamentos Digestão (Escherichia coli) Fixação do N2 na atmosfera Microrganismo patogênico Deterioração dos alimentos Corrosão BENEFÍCIO PATOGENICIDADE Bactérias podem ser diferenciadas pela morfologia; Tamanho (0,2 a 0,5 µm) Forma (cocos, bacilos, espirilos e vibriões) Características tintoriais (Coloração de Gram) • Esféricas Cocos • Forma de bastão Bacilos • Forma espiral Espiroquetas ou Espirilos • Forma de virgula Vibrião Cocos e Bacilos podem unir-se => colônias Por exemplo: cocos em cadeias são chamados estreptococos MORFOLOGIA FORMA BACTÉRIAS •cadeias (“estrepto-“) • grupos (“estafilo-“) • pares (“diplo-“) As formas não são constantes, podem variar de acordo com o meio e com o tipo de associação. As mudanças de forma podem ser consideradas como: MORFOLOGIA BACTÉRIAS - Involução - mudança de forma devido à condições desfavoráveis, presença ou ausência de oxigênio, pH, ou por produtos tóxicos, entre outros. - Pleomorfismo - a bactéria não apresenta uma morfologia única, mesmo que se encontre em condições favoráveis à sua sobrevivência. Componentes estruturais Principais funções: - Prevenir a ruptura da célula devido à diferença na pressão osmótica do meio intracelular e extracelular; - Atuar como suporte aos flagelos; - Dar forma ao microrganismo; - Regular a entrada e saída de substâncias na célula. Parede celular das bactérias Diferenças estruturais Bactérias Gram Positivas Gram Negativas Camada de peptidoglicano n-acetilglicosamina (NAG) Ácido n-acetilmurâmico (NAM) Parede celular Bacteriana Composição: 2 açucares Ligações glicosídicas (destruídas pela lisozima) A lisozima, enzima presente em meios biológicos tais como secreções (lágrimas, saliva, muco nasal, clara do ovo, etc.) ou no citoplasma das células fagocitárias. Peptidioglicano – Pontos Importantes hidrolisa o peptidoglicano A penicilina conduz ao mesmo efeito. inibe sua síntese do peptidioglicano Síntese do peptidioglicano Síntese da Parede Celular Ação de Beta-Lactâmicos N- acetilmurâmico (NAM) N-acetilglucosamina (NAG) L-alanina, ácido D-glutâmico, L-lisina e D-lanina Bactérias Gram-Positivas Parede celular espessa (constituída principalmente de peptidioglicano) Outros componentes especiais da parede celular das bactérias gram positivas: ácidos teicóico (fatores de virulência) lipoteicóico (antígenos de superfície) Bactérias Gram-Negativas Delgada camada de peptidioglicano Presença da membrana externa e do espaço periplasmático Presença do LPS COLORAÇÃO DE GRAM SAFRANINA Christian Gram, em 1884. Características tintoriais São exemplos de bactérias Gram-negativas: CORANTE DE GRAM - Estreptococos; - Estafilococos; - Enterococos. São exemplos de bactérias Gram-positivas : - Vibrão Colérico; - Colibacilo; - Salmonelas. Bactérias Gram-Negativas Lipopolissacarídeo - LPS (componente estrutural exclusivo da membrana externa das bactérias gram-negativas). 1. Lipídeo A, firmemente embebido na membrana (endotoxina) - Choque pirogênico; 2. Core, cerne do polisssacarídeo, localizado na superfície da membrana; 3. Antígenos O (são polissacarídeos que se estendem como pêlos a partir da superfície da membrana em direção ao meio circundante). Os LPSs são compostos por três segmentos ligados covalentemente: Surgem quando a célula bacteriana não se encontra em um meio ideal para o seu desenvolvimento. Endosporos: esporos formados dentro da célula. São exclusivos das bactérias (principalmente as pertencentes ao gênero bacillus e clostridium). Possuem parede celular espessa São altamente refráteis (brilham muito com a luz do microscópio). São altamente resistentes a agentes físicos (dessecação e aquecimento) e químicos (anti-sépticos). Esporulação ou esporogênese Esporos Alterações estruturais da célula bacteriana durante a esporulação. Alterações estruturais da célula bacteriana durante a esporulação. Cápsulas Camada viscosa externa à parede. É geralmente de natureza polissacarídica Constitui um dos antígenos de superfície das bactérias e está relacionada com a virulência das mesmas. Permite à bactéria se aderir a superfícies como rochas, raízes de plantas, dentes, plásticos, metais, etc. Muitas comunidades microbianas existem na forma de biofilmes. Evidenciação: Estruturas da Superfície Bacteriana Estruturas da Superfície Bacteriana Microscopia de fase ME Colorações especiais Flagelos Estruturas da Superfície Bacteriana Natureza protéica Evidenciação: Impregnação pela prata, microscopia de campo escuro, ME, meio semi-sólido. Fímbrias Mais curtos e mais delicados que os flagelos Função: Evidenciação: Aderência Cunjugação Sítio de adsorção de bacteriófagos. ME Estruturas da Superfície Bacteriana Estruturas Externas à Parede Celular Pêlos (fímbrias): Membrana citoplasmática: seleciona e transporta os nutrientes que podem entrar ou sair da célula, alterando a pressão osmótica. Citoplasma: é um fluido denso, composto por água, compostos químicos como ácidos nucléicos, proteínas, lipídeos, carboidratos e muitos outros. Ribossomos: local onde ocorre a síntese de proteínas. Área nuclear: é a região que contém a informação genética, hereditária de uma geração para outra. Plasmídios: DNA circular e pequeno, muito comum na célula bacteriana. Aspecto de um plasmídio bacteriano. Estruturas Internas à Parede Celular "O vigor físico é bom, o vigor intelectual é melhor ainda, mas, muito acima de ambos, está o vigor do caráter." Theodore Roosevelt
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