Resumo | Microbiologia Básica | Histórico Isolamento e caracterização de microrganismos | Biossegurança | Técnicas de Isolamento | Coloração de Gram

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Microbiologia 
Histórico 
1665 – Robert Hookeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeee 
 
 Utilizando um conjunto de lentes observa estrutura repetitiva e organizadas – pequenas 
celas - e emaranhados em uma fatia de cortiça. 
 
1663–1723 – Antoni Van Leewinheekaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa 
 Observa estrutura pequenas em um microscópio rudimentar – gotículas que 
 
1668 – Redi iiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa 
 Questiona a geração espontânea. 
 
 1745 – John Needhamiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa 
 Fortalece a teoria da geração espontânea, em suas experiências ele permitia que o caldo ficasse 
exposto, ou seja, permitia que a força vital (água, terra, ar e fogo) entrasse. 
 
1681 – Pasteur iiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaal 
 Derruba definitivamente a teria da geração espontânea. 
1876 – Robert Hockiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa 
 Postula que os microrganismos são capazes de causar doenças. 
 
*Postulados=Empíricos 
 
1892 – Dimitri Ivanovskiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa 
 A descoberta do vírus: 
 Desenvolvimento de processos de prevenção de doenças 
 Biotecnologia a partir da evolução da Microbiologia. 
 
1768 – Edward Jenneriiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa 
 Foi o primeiro a realizar a vacinação contra varíola, trabalhando com vírus da varíola humana. 
 
1880 – Pasteuriiiiiiiiiiiiiiiiiiieeeeeeeiiiiiiiiiiaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa 
 Descoberta da imunização quando isolou a bactéria da cólera aviária. 
 
Isolamento e caracterização de microrganismos 
A era do desenvolvimento de técnicas microbiológicas: 
 Técnica da cultura pura; 
 Desenvolvimento dos meios de cultura; 
 Invenção do ágar extraído de algas; 
 Invenção da Placa de Cultura; 
 
Cultura PuraiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiaaaaaaaaaaaaaaaaaaVVVVVVaaaaaaaaaaaaaaa 
 Cultura pura de um dado microrganismo é uma cultura de células genética e morfologicamente 
idênticas. 
 
Meios de Cultura iiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiaaaaaaaaaaaaaaaaaaVVVVVVaaaaaaaaaaa 
 
Um meio de cultura é uma solução nutriente utilizada para promover o crescimento de 
microrganismos. 
Meios definidos e meios complexos: 
 Os meios definidos são preparados pela adição de quantidades precisas de compostos químicos 
inorgânicos ou orgânicos à água destilada. Portanto, a composição química exata de um meio 
definido (de forma qualitativa e quantitativa) é conhecida. A fonte de carbono é de importância 
fundamental em qualquer meio de cultura, uma vez que todas as células necessitam de grandes 
quantidades de carbono a fim de sintetizarem novo material celular. Alguns meios definidos, como 
aquele listado para Escherichia coli, são considerados “simples”, uma vez que apresentam apenas 
uma única fonte de carbono. 
 Os meios complexos empregam componentes de produtos microbianos, animais ou vegetais, 
como a caseína (proteína do leite), carne (extrato de carne), soja (caldo tríptico de soja), células de 
leveduras (extrato de levedura), ou várias outras substâncias altamente nutritivas. 
 
Os meios sólidos imobilizam as células, permitindo que elas cresçam e originem massas isoladas e 
visíveis, denominadas Colônias. As colônias bacterianas podem exibir várias formas e vários tamanhos, 
dependendo do organismo, das condições de cultivo, dos nutrientes fornecidos, além de vários outros 
parâmetros fisiológicos. Alguns microrganismos produzem pigmentos que tornam toda a colônia colorida. 
As colônias permitem ao microbiologista observar a composição e pureza presumida da cultura. Placas 
contendo mais de um tipo de colônia são indicativas de uma cultura contaminada. 
 
Os meios de cultura precisam ser esterilizados antes do uso, e o processo de esterilização é obtido pelo 
aquecimento do meio em uma autoclave. Uma vez que um meio de cultura estéril tenha sido preparado, o 
mesmo se encontra pronto para inoculação. Essa manipulação requer o emprego de uma técnica asséptica 
uma série de etapas que visam prevenir a contaminação durante a manipulação de culturas e de meios de 
cultura estéreis. O domínio da técnica asséptica é necessário para a manutenção de culturas puras, uma 
vez que os contaminantes transmitidos pelo ar estão presentes em todo lugar. A coleta e nova semeadura 
de uma colônia isolada é o principal método para a obtenção de culturas puras. 
 
 
 
Biossegurança: Assepsia, antissepsia, desinfecção, esterilização; iiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiii 
 
Assepsia: é o conjunto de medidas que utilizamos para impedir a penetração de microrganismos num 
ambiente que logicamente não os tem, logo um ambiente asséptico é aquele que está livre de infecção. 
 
Antissepsia: é o conjunto de medidas propostas para inibir o crescimento de microrganismos ou removê-
los de um determinado ambiente, podendo ou não os destruí-los e para tal fim utilizamos antissépticos ou 
desinfetantes. 
 
Desinfecção: é o processo pelo qual se destroem particularmente os germes patogênicos e/ou se inativa 
sua toxina ou se inibe o seu desenvolvimento. Os esporos não são necessariamente destruídos. 
 
Esterilização: processo físico e/ou químico capaz de eliminar todas as formas viáveis* de micro-organismos 
e partículas virais de um ambiente ou material. 
 
Técnicas de IsolamentoiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiaaaaaaaaaaaaaaaaaaVVVVVVaaaaaa 
 
Técnica de Isolamento por estria (alça de platina) -> + comum 
 
 
 
Como isolar? 
 
 
 
 
 
 
 
Técnica de Isolamento Semeadura em Profundidade - SOBRE a placa. 
 
Objetivo: Diminuir a concentração de microrganismos e obter uma amostra pura. 
AMOSTRA SALIVA SEMEAR INÓCULO 
NA PLACA CONTENDO MEIO SÓLIDO 
OBSERVAR 
CRESCIMENTO 
Nesta a amostra é diluída em tubos diluentes e adicionadas alíquotas em uma placa de Petri 
esterilizada vazia, onde posteriormente será adicionado ágar liquefeito (fundido), e após solidificação, as 
placas serão incubadas. Como alguns microrganismos são retidos abaixo da superfície do ágar durante a 
solidificação, a placa mostrará colônias na superfície e colônias situadas logo abaixo da mesma. Esta técnica 
é recomendada para isolamento de microrganismos móveis ou quando há suspeita de microrganismos 
anaeróbios e também muito utilizado para a contagem microbiana em diferentes diluições, em uma análise 
de alimento. 
Formas de ArmazanamentoiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiaaaaaaaaaaaaaaaaaaVVVVVVaaaa 
 
 Refrigerador 4 – 10º C; 
 Freezer -70º C; 
 Nitrogênio Líquido -196º C (+ %20 de glicerol); 
 Liofilização: uma desidratação a baixa pressão, a vácuo que resfria (perde-se muito material por 
inviabilidade). 
 
Como identificar certas espécies iiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiaaaaaaaaaaaaaaaaaaVVVVVV 
 
 Meios de Cultura; 
 Reações Bioquímicas; 
 Microscopia; 
 
Preparação de uma lâminaiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiaaaaaaaaaaaaaaaaaa...........VVVVVV 
 
1. Confecção do Esfregaço 
2. Fixação do microrganismo – por calor: mata o microrganismo e fixa na lâmina, preserva sua estrutura. 
3. Coloração: simples (1 cor), diferencial (2 cores: Gram + ou -), Especial (cápsulas). 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Outras informações para caracterizar os microorganismosiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiialllllllll 
 
1. Caracterização morfológica; 
2. Caracterização nutricionais; 
3. Caracterização metabólica; 
4. Caracterização antigênica; 
5. Caracterização patogênica; 
6. Caracterização genéticas; 
 
 
Coloração de Gram 
Geralmente é a primeira coisa que se faz para identificar uma bactéria. 
Corante Diferencial iiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiaaaaaaaaaaaaaaaaaa...........VVVVVV 
 
Conferem cores diferentes a diferentes tipos celulares. De acordo com a coloração a 
bactérias podem ser divididas entre Gram Positivas e Gram Negativas. 
 
 
 
 
 
 
Corante Básico: Cristal Violeta 
GRAM POSITIVASGRAM NEGATIVAS 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Após a coloração de contraste com um corante de cor diferente os dois tipos de célula podem ser 
identificados.