Antígenos Eritrocitários

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Prof. Amilton Marques
AntAntíígenos genos EritrocitEritrocitááriosrios
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ANTIGENOS ANTIGENOS 
ERITROCITERITROCITÁÁRIOSRIOS
�� ProteProteíínas presentes na superfnas presentes na superfíície cie 
dos eritrdos eritróócitos funcionam como citos funcionam como 
antantíígenos, sendo conhecidos mais genos, sendo conhecidos mais 
de 400 tipos diferentes, os quais se de 400 tipos diferentes, os quais se 
agrupam em sistemas:agrupam em sistemas:
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Açúcar Terminal
Matriz de
Fosfolipídios
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(L-fucose)
(N-acetil-D-galactosamina)
(D-galactose)
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-- DombrockDombrock, , 
etcetc……
-- PP-- DuffyDuffy
-- ColtonColton-- MNSsMNSs-- KellKell
-- DiegoDiego-- LewisLewis**-- RhRh
-- LutheranLutheran-- KiddKidd**-- ABOABO
* Estes são os trivialmente pesquisados* Estes são os trivialmente pesquisados
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�� DenominamDenominam--se se aloantaloantíígenosgenos e seus e seus 
anticorpos anticorpos aloanticorposaloanticorpos, estes , estes 
antantíígenos são transmitidos em genos são transmitidos em 
carcarááter dominante de acordo com a ter dominante de acordo com a 
gengenéética tica mendelianamendeliana..
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IgMIgM, , IgGIgGAntiAnti--A, A, 
antianti--B B 
OO
A,BA,BAA--BB
IgMIgMAntiAnti--AABBBB
IgMIgMAntiAnti--BBAAAA
ClasseClasse--
anticorposanticorpos
Anticorpo Anticorpo AntAntíígenogenoGrupo Grupo 
sangsangüíüíneoneo
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SensibilizaSensibilizaççãoão::
Testes laboratoriais para o sistema Testes laboratoriais para o sistema 
ABOABO
tipagemtipagem diretadireta �������� hemhemáácias paciente x cias paciente x 
soro conhecidosoro conhecido
tipagemtipagem reversareversa�������� plasma ou soro plasma ou soro 
paciente x hempaciente x hemáácias conhecidascias conhecidas
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Incidência 
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OO++++------
ABAB----++++++
BB--++++++--
AA++--++--++
GlobGlob. . 
BB
GlobGlob. . 
AA
AntiAnti--
ABAB
AntiAnti--BBAntiAnti--AA
ResultadoResultadoReversa Reversa (Plasma)(Plasma)Direta Direta (Amostra Eritr(Amostra Eritróócitos)citos)
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A B OAB
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�� Importância do teste Importância do teste antianti--ABAB capta capta 
erros de erros de tipagemtipagem ou possou possííveis veis 
subgrupos (não subgrupos (não éé antiAantiA + anti+ anti--B e B e 
sim sim antiAantiA--B), tem afinidades por B), tem afinidades por 
estruturas comuns.estruturas comuns.
�� Para a prova reversa utilizar Para a prova reversa utilizar 
hemhemáácias Rh(cias Rh(--), evitar resultados ), evitar resultados 
falso positivos.falso positivos.
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SISTEMA RHESUS (Rh)SISTEMA RHESUS (Rh)
�� ÉÉ o maior e mais complexo sistema o maior e mais complexo sistema 
de grupo sangde grupo sangüíüíneo atneo atéé o momentoo momento
�� EstEstáá na dependência de mais de um na dependência de mais de um 
gene, possuindo 45 antgene, possuindo 45 antíígenos e mais genos e mais 
de uma de uma nomeclaturanomeclatura (Fisher e (Fisher e RaceRace ––
CDE), (CDE), (WienerWiener –– RhRh--hrhr), sistema ), sistema 
numnuméérico de Rosenfeldrico de Rosenfeld
�� Apenas 5 destes antApenas 5 destes antíígenos (CDE) genos (CDE) 
são responssão responsááveis por 99% dos veis por 99% dos 
problemas clproblemas clíínicos associados a nicos associados a 
este sistema.este sistema.
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�� Estes antEstes antíígenos se combinam genos se combinam 
formando: formando: CDeCDe, , cDEcDE, , cDecDe, CDE, , CDE, cdecde, , 
CdeCde, , cdEcdE, , CdECdE. Quando o ant. Quando o antíígeno D geno D 
estestáá presente o individuo presente o individuo éé RhRh--
positivopositivo
�� Se a determinaSe a determinaçção ão éé feita apenas feita apenas 
com anticom anti--D não se detecta os D não se detecta os 
antantíígenos C ou Egenos C ou E
�� O indivO indivííduo duo éé efetivamente negativo efetivamente negativo 
se se cdecde (doador de sangue (doador de sangue RhRh--
negativonegativo).).
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Variantes do antVariantes do antíígeno Dgeno D
AntAntíígeno D geno D ““fracofraco”” (antigo DU)(antigo DU)
�� Possui o antPossui o antíígeno D completo, geno D completo, 
porporéém com menor quantidade de m com menor quantidade de 
ssíítios antigênicos, o que leva a tios antigênicos, o que leva a 
reareaçção fraca frente ão fraca frente àà antianti--DD
�� O O DD--fracofraco éé RhRh--positivopositivo provocando provocando 
aloalo--imunizaimunizaççãoão transfusionaltransfusional ou feto ou feto 
maternamaterna
�� O O DD--fracofraco éé detectado atravdetectado atravéés do s do 
mméétodo de todo de CoombsCoombs indireto ou indireto ou 
utilizandoutilizando--se antise anti--D D monoclonaismonoclonais ou ou 
potentes.potentes.
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AntAntíígeno D parcial e D elevadogeno D parcial e D elevado
�� O D parcial corresponde aquele com O D parcial corresponde aquele com 
menor numero de determinantes menor numero de determinantes 
antigênicos (antigênicos (epepíítopostopos). ). 
�� A transfusão de sangue Rh(D)A transfusão de sangue Rh(D)--
positivo num indivpositivo num indivííduo D parcial duo D parcial 
pode levar a sensibilizapode levar a sensibilizaççãoão
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35%35%VIIVII
74%74%VV
96%96%IVIV
100%100%II, III, IVII, III, IV
ReatividadeReatividadeCategoriaCategoria
Reatividade das hemReatividade das hemáácias D parciais contra cias D parciais contra 
AntiAnti--D D monoclonalmonoclonal
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Rh(D) – Normal Rh(D) – Fraco Rh(D) – parcial Rh(D) – parcial fraco 
Normal Normal Variante 
Variante
Normal Reduzido Normal 
Reduzido
Legenda: Epítopo Antígeno
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ConsideraConsideraçções sobre a ões sobre a tipagemtipagem Rh:Rh:
�� Realizar o teste em tubo com Realizar o teste em tubo com 
suspensão de hemsuspensão de hemáácias lavadascias lavadas
�� Pesquisar D fraco quando não for Pesquisar D fraco quando não for 
detectado reatividade apdetectado reatividade apóós s 
incubaincubaçção a temperatura ambiente e ão a temperatura ambiente e 
37C 37C –– atravatravéés da ts da téécnica do cnica do DuDu
�� Levar o teste atLevar o teste atéé a fase de a fase de CoombsCoombs
�� Jamais emitir resultado: RhJamais emitir resultado: Rh-- negativo negativo 
DuDu positivo (contrapositivo (contra--senso), o senso), o 
antantíígeno D estgeno D estáá presente e presente e 
geralmente completo, ocorrendo geralmente completo, ocorrendo 
apenas reatividade fraca.apenas reatividade fraca.
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--2gts2gts2gts2gtsSoroSoro antianti--RhRh (D)(D)
--2 2 gtsgts--HemHemáácias O Rh + 2%cias O Rh + 2%
2gts2gts--2 2 gtsgtsHemHemáácias desc. a 2%cias desc. a 2%
CNCNCPCPDDReagentes/tubosReagentes/tubos
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�� incubar a 37C 1h em BMincubar a 37C 1h em BM
�� lavar as hemlavar as hemáácias 3x com salina por cias 3x com salina por 
centrifugacentrifugaççãoão
�� ressuspenderressuspender e adicionar 2 e adicionar 2 gtsgts de soro de de soro de 
CoombsCoombs em cada tubo.em cada tubo.
�� agitar, centrifugar 1.000agitar, centrifugar 1.000rpmrpm por 1min. por 1min. 
Observar.Observar.
InterpretaInterpretaçção: D ão: D –– se houveraglutinase houver aglutinaçção ão 
fina fina DuDu positivopositivo
CP CP –– sempre aglutinasempre aglutina
CN CN –– nunca aglutinanunca aglutina
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REAREAÇÇÃO DE COOMBS OU ÃO DE COOMBS OU 
TESTE DA ANTIGLOBULINATESTE DA ANTIGLOBULINA
�� Introduzido em 1945 para estudo das Introduzido em 1945 para estudo das 
anemias hemolanemias hemolííticasticas
�� Detecta anticorpos incompletos Detecta anticorpos incompletos 
adsorvidos as cadsorvidos as céélulas lulas RhRh--positivaspositivas, , 
mediante amediante açção de uma antião de uma anti--
gamaglobulina humana (soro de gamaglobulina humana (soro de 
CoombsCoombs))
�� Os anticorpos ditos completos são Os anticorpos ditos completos são 
aqueles capazes de aglutinar caqueles capazes de aglutinar céélulas lulas 
RhRh--positivaspositivas suspensas em salina suspensas em salina ––
geralmente são do tipo geralmente são do tipo IgMIgM
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�� Os anticorpos ditos Os anticorpos ditos incompletos incompletos 
geralmente são do tipo geralmente são do tipo IgGIgG e apenas e apenas 
sensibilizamsensibilizam as cas céélulas lulas RhRh--positivaspositivas, , 
promovendo aglutinapromovendo aglutinaçção mediante a ão mediante a 
reareaçção de ão de CoombsCoombs ((antianti--IgGIgG))
�� Pesquisa Direta e Pesquisa IndiretaPesquisa Direta e Pesquisa Indireta
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Principais aplicabilidades da prova de Principais aplicabilidades da prova de 
CoombsCoombs
Coombs diretoCoombs direto:
1.1. PrincPrincíípio:pio:
�� DetecDetecçção de eritrão de eritróócitos sensibilizados citos sensibilizados ““in vivoin vivo”” por anticorpos por anticorpos 
ou por fraou por fraçções do complemento.ões do complemento.
2.2. AplicaAplicaçções:ões:
�� DoenDoençça hemola hemolíítica perinataltica perinatal
�� Anemias hemolAnemias hemolííticas autoticas auto--imunesimunes
�� Anemias hemolAnemias hemolííticas induzidas por drogasticas induzidas por drogas
�� ReaReaçções hemolões hemolííticas ticas ppóóss--transfusionaistransfusionais
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Prova de Coombs Direta
YYYY
YYYY
YYYY
YYYY
Eritrócitos 
sensibilizados “in vivo”
YYYY
YYYY
YYYY
YYYYYYYY
YYYY
YYYY
Eritrócitos aglutinados
Centrifugação
Eritrócitos não 
sensibilizados “in vivo”
YYYY
YYYY
Eritrócitos não aglutinados
Centrifugação
Coombs direto negativoCoombs direto negativo
Coombs direto positivoCoombs direto positivo
YYYY
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� Coombs indireto:
�� PrincPrincíípio:pio:
–– DetecDetecçção de anticorpos ão de anticorpos antianti--eritrociteritrocitááriosrios atravatravéés s 
da sensibilizada sensibilizaçção de hemão de hemáácias cias ““in in vitrovitro””..
�� AplicaAplicaçções:ões:
–– Pesquisa de anticorpos irregulares no soroPesquisa de anticorpos irregulares no soro
•• de pacientes polide pacientes poli--transfundidos, gestantes, doadores, transfundidos, gestantes, doadores, 
etc...etc...
–– IdentificaIdentificaçção das especificidades de anticorpos ão das especificidades de anticorpos 
irregulares em painel de hemirregulares em painel de hemááciascias
–– InvestigaInvestigaçção das reaão das reaçções hemolões hemolííticas ticas ppóóss--
transfusionaistransfusionais
–– IdentificaIdentificaçção de antão de antíígenos genos eritrociteritrocitááriosrios
((fenotipagemfenotipagem))
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Prova de Coombs indireta 
Soro com anticorpos 
irregulares
YYYY
YYYY
YYYY
YYYY
Eritrócitos sensibilizados 
“in vitro”
Hemácias I e II
Primeira fase: sensibilização dos eritrócitos “in vitro”
YYYY
Soro sem anticorpos 
irregulares
Eritrócitos não 
sensibilizados “in vitro”
Hemácias I e II
+
+
Incubação
Incubação
YYYY
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Prova de Coombs indireta 
YYYY
YYYY
YYYY
YYYY
Eritrócitos sensibilizados 
“in vitro”
Segunda fase: detecção dos eritrócitos sensibilizados.
Eritrócitos não 
sensibilizados “in vitro”
Centrifugação YYYY
YYYY
YYYY
YYYY
YYYY
YYYY
Eritrócitos sensibilizados 
“in vitro” aglutinados
YYYY
Eritrócitos não sensibilizados 
“in vitro” não aglutinados
Coombs indireto 
positivo
YYYY
YYYY
Coombs indireto 
negativo
Centrifugação
YYYY