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MICROBIOLOGIA BÁSICA- MEIOS DE CULTURA MEIOS DE ENRIQUECIMENTO A) LÍQUIDOS: BRAIN HEART INFUSION (BHI) B) SÓLIDOS: I)ÁGAR SANGUE (DIFERENCIA HEMÓLISE) 5% SANGUE DE CARNEIRO DIFERENCIAM BACTÉRIAS COM CAPACIDADE DE LISAR HEMÁCIAS, GERANDO HEMÓLISE α HEMÓLISE: HEMÓLISE PARCIAL- S. pneumoneae β HEMÓLISE: HEMÓLISE TOTAL- S. pyogenes γ HEMÓLISE: NÃO HEMOLÍTICO- E. faecalis II) ÁGAR CHOCOLATE MEIO SELETIVO E DIFERENCIAL 1)ÁGAR SALMONELLA/SHIGELLA (SS) SELETIVO: CONTÉM SAIS DE BILE, VERDE BRILHANTE E CITRATO DE SÓDIO QUE INIBE CRESCIMENTO DE MICRORGANISMOS GRAM + DIFERENCIAL: CONTÉM TIOSSULFATO DE SÓDIO FÉRRICO QUE PERMITE A DETECÇÃO DE SULFITO FERROSO E SULFETO DE HIDROGÊNIO ATRAVÉS DA COLORAÇÃO NEGRA; CONTÉM TAMBÉM LACTOSE QUE PERMITE DIFERENCIAR MICRORGANISMOS FERMENTADORES 2)ÁGAR MACCONKEY (MC) SELETIVO: CONTÉM CRISTAL VIOLETA QUE INIBE CRESCIMENTO DE GRAM + DIFERENCIAL: CONTÉM LACTOSE, PERMITINDO DIFERENCIAR MICRORGANISMOS FERMENTADORES MEIOS DE CULTURA OS MEIOS DE CULTURA SÃO QUIMICAMENTE DEFINIDOS; SEMPRE DEVE-SE UTILIZAR MEIOS DE CULTURA PRÉ AQUECIDOS PARA SEMEAR AS AMOSTRAS TIPOS DE MEIOS: A) SÓLIDOS SERVEM PARA ISOLAR COLÔNIAS (PLACA); CULTIVAR OU VERIFICAR CARACTERÍSTICAS (TUBO); 1,5% DE ÁGAR B)LÍQUIDOS O CRESCIMENTO MICROBIANO É EVIDENCIADO PELA TURVAÇÃO DO MEIO LÍQUIDO; NÃO PERMITE SABER QUANTOS TIPOS DE MICRORGANISMOS CRESCERAM C) SEMI-SÓLIDOS SERVEM PARA VERIFICAR A MOTILIDADE MICROBIANA; 0,5% DE ÁGAR MEIO REDUTOR (SÓLIDO OU LÍQUIDO)- CONTÉM REAGENTES QUE SE COMBINAM COM OXIGÊNIO DISSOLVIDO NO MEIO, ELIMINANDO-O DO MEIO DE CULTIVO; UTILIZADO PARA CULTIVO DE ANAERÓBIOS OS MEIOS DE TRANSPORTE MANTÉM A VIABILIDADE DOS MICRORGANISMOS SECREÇÕES: AMIES, STUART FEZES: CARY-BLAIR, SALINA GLICERINADA TAMPONADA COLETA E TRANSPORTE DE AMOSTRAS AMOSTRA FASE PRÉ ANALÍTICA FASE ANALÍTICA FASE PÓS ANALÍTICA FASE PRÉ-ANALÍTICA: O QUE PROCURAR NA AMOSTRA; COLETA ADEQUADA; TRANSPORTE DA AMOSTRA FASE ANALÍTICA: (=LABORATÓRIO) PROCEDIMENTO E INTERPRETAÇÃO DOS RESULTADOS FASE PÓS-ANALÍTICA: LIBERAÇÃO DO RESULTADO; CONDUTA TODA AMOSTRA DEVE SER TRATADA COMO POSSIVELMENTE PATOGÊNICA O RESULTADO É CONSEQUÊNCIA DA QUALIDADE DA AMOSTRA -A AMOSTRA DEVE CONTER: Nº DE REGISTRO, DATA, TIPO DE MATERIAL COLHIDO -A AMOSTRA DEVE SER TRANSPORTADA CORRETAMENTE: TEMPERATURA, TEMPO, ATMOSFERA CULTIVO DE AERÓBIOS- SEMEAR OS MICRORGANISMOS NA PLACA OU TUBO E INCUBAR NA TEMPERATURA ADEQUADA E NA PRESENÇA DE OXIGÊNIO CULTIVO DE ANAERÓBIOS- MÉTODOS DE PRODUÇÃO DE AMBIENTE ANAERÓBIO CABINE ANAERÓBIA- MISTURA DE GASES (H2, CO2, N2) PARA ELIMINAÇÃO DO AR DEVE-SE SEMPRE OBSERVAR E DESCREVER A MORFOLOGIA DAS COLÔNIAS MICROBIANAS MACROMORFOLOGIA BACTERIANA COR, ODOR, HEMÓLISE MICROMORFOLOGIA BACTERIANA MEIO SELETIVO 3) CALDO TETRATIONATO- CONTÉM SAIS DE BILE QUE INIBEM CRESCIMENTO DE MICRORGANISMOS GRAM +, ADIÇÃO DE IODO INIBE CRESCIMENTO DE MICROBIOTA INTESTINAL, DESTINADO AO ISOLAMENTO DE BACTÉRIAS ENTEROPATOGÊNICAS 4)THAYER-MARTIN (TM)- CONTÉM ANTIBIÓTICOS QUE INIBEM CRESCIMENTO DE BACTÉRIAS DE MICROBIOTA RESIDENTE , DESTINADO AO ISOLAMENTO DE N. gonorrhoea FATORES PARA A ESCOLHA DO MEIO DE CULTURA -ORIGEM DO MATERIAL A SER ANALISADO -MICRORGANISMOS DE INTERESSE PARA SER CULTIVADO -NECESSIDADES NUTRICIONAIS DOS MICRORGANISMOS TÉCNICA DE SEMEADURA QUALITATIVA MÉTODOS DE ESGOTAMENTO- TEM COMO OBJETIVO OBTER COLÔNIAS ISOLADAS PARA VISUALIZAÇÃO DE MACROMORFOLOGIA E POSTERIORMENTE PARA IDENTIFICAÇÃO E TESTES DE SUSCEPTABILIDADE AOS ANTIMICROBIANOS CULTURA QUALITATIVA- TEM COMO OBJETIVO OBSERVAR E IDENTIFICAR COLÔNIAS DIFERENTES MÉTODOS DE COLORAÇÃO CARACTERÍSTICAS TINTORIAIS E MICRO-MORFOLÓGICAS I) COLORAÇÃO GRAM BACTÉRIAS GRAM (+) E (-) II) COLORAÇÃO DE ZIEHL- NEELSEN BACILOS ÁLCOOL ÁCIDO RESISTENTES (BAAR) CONSERVAÇÃO DE CULTURAS PURAS APÓS A OBTENÇÃO DE UMA CULTURA PURA, DEVERÁ SER ADOTADO UM MÉTODO DE CONSERVAÇÃO DESTAS CULTURAS VIVAS A) CONSERVAÇÃO POR UM CURTO PERÍODO (DIAS A MESES) ARMAZENAR A 4°C-10°C B) CONSERVAÇÃO POR UM LONGO PERÍODO (MESES A ANOS) NITROGÊNIO LÍQUIDO: -196°C; FREEZER A -70°C; LIOFILIZAÇÃO: CONGELAMENTO A SECO- AS AMOSTRAS SÃO CONGELADAS, DESISDRATADAS E FECHADAS À VÁCUO, O QUE POSSIBILITA A VIABILIDADE DAS CULTURAS POR MUITOS ANOS
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