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REVISÃO EMBRIOLOGIA & INTRODUÇÃO À HISTOLOGIA Profª Dra. Jacqueline da C. E. Piccoli UNIVERSIDADE FEDERAL DO PAMPA CAMPUS URUGUAIANA ATENÇÃO "É expressamente proibida cópia, reprodução parcial, reprografia, fotocópia ou qualquer forma de extração de informações deste material sem prévia autorização dos autores conforme legislação vigente" SERES VIVOS SEXUADA ASSEXUADA • Bipartição • Divisão binária • Cissiparidade • Brotamento • Meiose e fecundação GAMETAS Células n óvulo GAMETOGÊNESE Uma breve revisão... óvulo espermatozóide 22+X 22+X ou 22+Y MEIOSE Processo de divisão celular através do qual a célula tem o seu número cromossômico reduzido pela metade Uma breve revisão... • Principais características da meiose: – reduz o número de cromossomos das células - gametas – O produto final da meiose sempre será quatro células haplóides (n), (ainda que no sexo feminino apenas uma seja funcional – ovócito) – Ocorrência de recombinação (permuta ou crossing-over): troca de segmentos dos cromossomos homólogos, variabilidade genética Gametogênese (espermatogênese) Células germinativas (2n) Período germinativo Período de crescimento Período de maturação Período de diferenciação Espermatozóides Epidídimo (armazena espermatozóides) Túbulo seminífero Mitoses 2n Mitose 2n 2n Meiose n n n n n n n n n n 2n Crescimento sem divisão celular Testículo Espermatogônia Espermatócito I (2n) Espermatócitos II (n cromossomos duplicados) Espermátides (n) célula de Sertoli (em corte transversal) Gametogênese (ovulogênese) Células germinativas (2n) Meiose II (só se completa se ocorre fecundação) São formados eventualmente Período germinativo Período de crescimento Período de maturação Corpos lúteos Folículo ovariano primário Ovulação Ovócito II Folículo maduro Ovário Ovogônias (2n) 2n Mitose Ovogônias (2n) 2n 2n Crescimento sem divisão celular Ovócito I (2n) Meiose I 2n Ovócito II (n cromossomos duplicados) n Primeiro corpúsculo polar (n cromossomos duplicados) n n n Corpúsculos polares (n) n n Óvulo (n) FECUNDAÇÃO FECUNDAÇÃO Espermatozóide (N) Ovócito (N) ZIGOTO (2N) FECUNDAÇÃO - ETAPAS 1. CAPACITAÇÃO 2. REAÇÃO ACROSSÔMICA 3. FUSÃO DA MEMBRANA PLASMÁTICA DO ESPERMATOZÓIDE E DO OVÓCITO 4. REAÇÃO DE ZONA 5. FINALIZAÇÃO DA MEIOSE 6. FUSÃO DOS PRÓ-NÚCLEOS MASCULINO E FEMININO E ATIVAÇÃO DO OVO FECUNDAÇÃO • Espermatozóides estão embebidos em produtos glandulares que são importantes para a sua sobrevivência e sucesso reprodutivo. • Estes produtos envolvem a presença de substâncias nutritivas e com função imunológica para a neutralização do pH vaginal. • Uma vez no interior do corpo feminino irá ocorrer uma reação ácido-base formando sal e água e a degradação de glicoproteínas presentes no esperma → a capacitação é fundamental para que ocorra a fecundação. • Espermatozóides não capacitados não conseguem fecundar o gameta feminino. • Em humanos demora de 1-2 horas enquanto que os espermatozóides migram em direção ao ovócito. 1. CAPACITAÇÃO FECUNDAÇÃO 1. CAPACITAÇÃO Envolve alterações biológicas de moleculares dos domínios da membrana plasmática dos espermatozoides Remoção do fluído seminal Alterações de membrana especialmente sobre a região acrossomal FECUNDAÇÃO • Os espermatozóides através de uma ação conjunta e cooperativa forçam passagem por entre as células da corona radiata até que um consegue tocar na zona pelúcida liberando o conteúdo do acrossomo. • Este processo é muito rápido e é a primeira estratégia que ocorre para evitar a poliespermia. 2. REAÇÃO ACROSSÔMICA FECUNDAÇÃO FECUNDAÇÃO 3. FUSÃO DA MEMBRANA PLASMÁTICA DO ESPERMATOZÓIDE E DO OVÓCITO FECUNDAÇÃO • É um processo desencadeado no citoplasma do ovócito que também visa impedir a poliespermia. • Ocorre por consequência da fusão e liberação do conteúdo de grânulos corticais presentes no interior do ovócito entre a membrana e a zona pelúcida. • Esta reação faz com que líquido seja acumulado entre a zona pelúcida e a membrana formando uma espécie “de fosso” intransponível para a entrada de outros espermatozoides que ficam inativados. 4. REAÇÃO DE ZONA FECUNDAÇÃO • Despolarização da membrana envolve liberação de íons de Ca 2+ armazenados em organelas como o retículo endoplasmático que estão presentes dentro do citoplasma do óvulo. • A liberação destes íons ativa o metabolismo do óvulo. O pH do citoplasma aumenta, o consumo de oxigênio, a síntese de proteínas também e a segunda divisão meiótica é finalizada, havendo liberação do segundo corpúsculo polar. 5. FINALIZAÇÃO DA MEIOSE FECUNDAÇÃO • a fusão total do espermatozoide com o óvulo não ocorre até que todos os seus componentes, exceto sua membrana plasmática não penetre dentro do óvulo. • No período em que os pró-núcleos estão migrando um em direção ao outro os mesmos já começam a se preparar para a primeira mitose assim que logo que se fundem a célula ovo se torna duas células. 6. FUSÃO DOS PRÓ-NÚCLEOS MASCULINO E FEMININO E ATIVAÇÃO DO OVO Após a fecundação e ativação do zigoto uma série de eventos será desencadeada a fim de transformar uma única célula em um corpo tridimensional com cerca de 216 tipos de células que compõe tecidos, órgãos e sistemas. Os principais eventos relacionados à embriologia são: CLIVAGEM Aumento no número de células, sem aumento de volume. As células formadas são chamadas blastômeros. Quando o embrião contém cerca de 8-16 células ele é denominado mórula por possuir uma estrutura semelhante a uma amora. Logo após este período ocorre o fenômeno da compactação. PRIMEIRA SEMANA DO DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO COMPACTAÇÃO Ocorre porque os blastômeros mais externos se aderem uns ao outros através da formação de junções comunicantes entre as células que aumenta a sua interação para que ocorram trocas de compostos bioquímicos relacionados a diferenciação. FORMAÇÃO DO BLASTOCISTO Aproximadamente quatro dias após a fecundação os blastômeros começam a secretar líquido formando uma cavidade interna no embrião conhecido como blastocele. O embrião neste estágio é denominado blastocisto. Neste estágio reconhecemos dois tipos células: • trofoblasto – células externas que circundam e delimitam o embrião • massa celular interna - agrupamento de células que fica concentrado em uma das extremidades do blastocisto. PRIMEIRA SEMANA DO DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO Massa Celular Interna INÍCIO DA IMPLANTAÇÃO EMBRIONÁRIA NO ÚTERO A zona pelúcida será mantida. Esta estrutura só será degradada por ocasião da chegada do embrião ao útero da mãe. Entre o 6-7º dia da fecundação ocorre o início da implantação do embrião no útero materno. PRIMEIRA/SEGUNDA SEMANA DO DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO TERCEIRA SEMANA DO DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO Conhecida como a fase da GASTRULAÇÃO e envolve a ocorrência dos seguintes fenômenos: (1) formação da linha primitiva (2) formação das três camadas germinativas (ectoderme, mesoderme e endoderme) (3) formação da notocorda (4) formação do tubo neural (neurulação) (5) formação da crista neural (6) formação do alantóide (7) destino embrionário do mesoderma e dos somitos Podemos dizer que a terceira semana embrionária é dramáticae vital para o desenvolvimento. Disco trilaminar Folhetos embrionários e derivação tecidual MESODERME sistema muscular, esqueleto, tecido conjuntivo, sistema genito urinário (menos as células germinativas), sangue, vasos (coração) ENDODERME Todo tubo digestório, glândulas anexas (fígado e pâncreas), sistema respiratório e células germinativas Teste seus conhecimentos... 1. Defina célula eucariota e cite exemplos. 2. Diferencie células haploides de células diploides. Onde essas células são encontradas no corpo humano? 3. Qual é a função da meiose no corpo humano? Qual o produto deste processo em homens e mulheres? 4. Por que apenas um espermatozoide pode fecundar o óvulo? A histologia estuda as células e o material extracelular que constituem os tecidos do corpo. A histologia, que estava limitada pela capacidade do microscópio óptico (MO), ampliou consideravelmente seu campo de estudo com a utilização do microscópio eletrônico (cerca de 1000 vezes mais potente que o óptico). As principais unidades de medida utilizadas em histologia são o micrômetro (1m = 0,001 mm) e o nanômetro (1nm = 0,001m) Como são feitas as Lâminas Histológicas A lâmina é uma estrutura plana, de vidro, suficientemente fina e transparente, para que os cortes dos tecidos preparados possam ser fixados e visualizados sob a luz do microscópio óptico. Micrótomo: Instrumento onde os cortes histológicos são confeccionados. Antes de serem cortados, os tecidos devem passar por uma série de tratamentos. ÓRGÃO FIXAÇÃO A peça fica em um fixador para preservar a morfologia e composição do tecido (o tempo pode variar cerca de 12h) DESIDRATAÇÃO 70º 80º 90º 100º ÁLCOOL ETÍLICO Sequência de álcool etílico com o objetivo de remover água dos tecidos (6-24h) CLAREAMENTO XILOL Substância miscível à parafina (1-6 horas) IMPREGNAÇÃO Parafina fundida impregna por toda peça tornando + fácil o corte (30min a 6h) Estufa ± 60ºC INCLUSÃO Obtenção do bloco de parafina de forma regular para ser cortado no micrótomo CORTE HISTOLÓGICO Secção do bloco pela navalha de aço do micrótomo. Após colocado em água quente e montado em lâmina de vidro. COLORAÇÃO Conforme a técnica desejada ETAPAS PELAS QUAIS PASSAM OS FRAGMENTOS DE ÓRGÃOS REMOVIDOS PARA ESTUDO HISTOLÓGICO (PEÇAS HISTOLÓGICAS) O microscópio óptico é usado para examinar cortes por transluminação, isto é, por luz direta através deles. A luz da amostra é refratada (dobrada) pela lente objetiva para produzir uma imagem aumentada, que então é novamente aumentada a medida que ela passa através da lente ocular e é transmitida para a retina do olho. O aumento produzido por cada lente está marcado na lente. O aumento total da amostra é o produto dos valores da lente objetiva e da lente ocular. Uma vez que microscópios típicos têm objetivas de 4X (pequeno aumento), 10X (médio aumento), 40X (grande aumento) e 100X (imersão em óleo) e sendo as oculares com aumento de 10X, os aumentos reais são de 40X, 100X, 400X e 1000X, respectivamente. RESOLUÇÃO: é a capacidade de uma lente de ver dois pontos separados como estando de fato separados. O limite de resolução do M.O. é de cerca de 0,2 m. VISUALIZAÇÃO - MICROSCOPIA OCULARES Revólver OBJETIVAS Braço Lente condensadora Parafuso Macrométrico Parafuso Micrométrico Charriot pinça Mesa/platina Diafragma Fonte de luz Pé ou base MICROSCÓPIO ÓPTICO
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