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INTRODUÇÃO As proteínas são compostos altamente polimerizados que são formados por aminoácidos. Também se unem a componentes não proteicos denominados protídeos (MATISSEK et al., 1998). O termo proteína bruta envolve grande grupo de substâncias com estruturas semelhantes, porém com funções fisiológicas muito diferentes. Com base no fato das proteínas terem porcentagem de nitrogênio quase constante, em torno de 16%, o que se faz é determinar o nitrogênio e, por meio de uma conversão, transformar o resultado em proteína bruta (SILVA, 2009). As proteínas são compostas de aminoácidos e têm a função de reparar os tecidos, participam no equilíbrio entre os fluídos do corpo, de acordo com sua estrutura molecular, tem uma função biológica associada às atividades vitais. São encontradas nas carnes vermelhas, frango, peixe, ovos, leite e derivados. Nos alimentos, além da função nutricional, as proteínas têm propriedades organolépticas e de textura. Podem vir combinadas com lipídeos e carboidratos (CECCHI, 2003). O método de Kjeldahl determina N orgânico total, isto é, o N proteico e não proteico orgânico. Porém, na maioria dos alimentos, o N não proteico representa muito pouco no total. A razão entre o nitrogênio medido e a proteína estimada depende do tipo de amostra e de outros fatores (CECCHI, 2003). O nitrogênio é o elemento de propriedades mais distintas presente nas proteínas. O teor em materiais biológicos não provém somente das proteínas, mas também de outros componentes como ácidos nucleicos, aminas carboidrato s e lipídios substituídos por radicais nitrogenados, aminoácidos não proteicos etc. A medida de nitrogênio é uma boa estimativa do conteúdo de proteínas de materiais biológicos (JOSÈ CARLOS, 2011). O procedimento mais comum para a determinação de proteína é através da determinação de um elemento ou um grupo pertencente à proteína. A conversão para conteúdo de proteína é feita através de um fator. O elemento analisado é o nitrogênio, e os grupos são aminoácidos e ligações peptídicas (CECCHI, 2003). O objetivo deste trabalho foi determinar o teor de proteína bruta em alimentos por meio da técnica de Kjeldahl, com a determinação de nitrogênio total da amostra. MATERIAIS E MÉTODOS O experimento foi realizado no Laboratório de Bromatologia do Centro Universitário de Várzea Grande, conduzido pela Profª. Drª. Daniella Moreira Pinto. Materiais Digestão (1ª Etapa) Farinha de soja seca e desengordurada 3 Tubos para kjeldahl; 1 Bloco digestor; 1 Balança analítica; Papel manteiga; 4 Espátulas; 4 Proveta de 25 ml. Destilação e titulação (2ª e 3ª Etapas) Aparelho de Kjeldahl; 3 Erlenmeyer de 125 ml; 1Proveta de 50 ml; 1 Bureta de 25 ml; Método O método Kjeldahl, foi criado em 1883 por Johan Kjeldahl, um dinamarquês que na época revolucionou a quantificação de nitrogênio e proteína naquela época, mas ainda hoje é o método mais utilizado no mundo inteiro. Este método, consiste em três principais fases para se alcançar a determinação de nitrogênio ou proteína que são: Digestão, Destilação e Titulação. Este que é o método mais difundido no mundo para este tipo de determinação, pode-se levar até 2 horas para se obter um resultado final, e este tempo pode variar com o tipo da amostra (INSTITUTO ADOLFO LUTZ, 2008). Procedimento Digestão (1ª Etapa) Foram pesadas 3 repetições, 1310mg(R1), 1054mg(R2) e 1242mg(R3), de amostra seca e desengordurada de farinha de soja em papel manteiga, transferimos a amostra identificadas envolta no papel manteiga para tubo de digestão e adicionamos ao tubo 0,5g da mistura catalítica e 5ml de H₂SO₄, agitando levemente. A amostra foi levada ao bloco digestor, aumentando gradativamente a temperatura até 400°C, deixando até que a amostra se torne verde claro, em seguida deixamos esfriando, adicionamos ± 1mL de H₂O₂ 10v. e aquecemos por mais 30 minutos. Procedimento da destilação e titulação Acoplamos o tubo de digestão com a amostra digerida [(NH₄)₂SO₄] ao aparelho de “Kjeldahl” o erlenmeyer contendo 5 ml de ácido bórico (H₃BO₃), foi colocado à saída do condensador do aparelho de “Kjeldahl”, adicionamos aproximadamente 22,5 ml de hidróxido de sódio (NaOH) ao reservatório apropriado do aparelho de “Kjeldahl”, vertendo lentamente dentro do tubo acoplado, a temperatura foi acionada para que a caldeira do aparelho de “Kjeldahl” ferva a água que irá conduzir a amônia (NH₃) para o erlenmeyer contendo o H₃BO₃. Foi coletado cerca de 50 ml de condensado no erlenmeyer, levando em seguida, agora borato ácido de amônio (NH₄H₂BO₃) para titulação. Titular o NH₄H₂BO₃ com HCl 0,02N até a viragem de cor. RESULTADOS E DISCUSSÃO Após a realização das análises, obtivemos os resultados dos teores de proteína mostrados na tabela a seguir: REPETIÇÃO AMOSTRA (mg) VOL. DE HCL(ML) TITULAÇÃO CONCEN- TRAÇÃO DO HCL (MOL) NITROGÊNIO (%) PROTEÍNA MSD(%) PROTEÍNA MS(%) PROTEÍNA MI(%) R1 1310 7,4 0,1 7,9 45,10 38,30 37,35 R2 1054 5,8 0,1 7,7 43,96 37,33 36,40 R3 1242 6,4 0,1 7,21 41,16 34,96 34,09 Média 7,60 43,41 36,86 35,95 Tabela1. Resultados de teores de proteína na Farinha de soja Conforme os resultados apresentados na Tabela 1 o teor de proteína na farinha de soja analisada está de acordo com os dados apresentados na TACO (2011), de 36% de proteína . Cálculos: 𝐍 = Vol. gasto HCL x N x 14 t(e) x100 Fator de conversão: P=N x fator de conversão (soja 5,71) EE=15,06 U=2,47 Transformar para MS MS=MSD+EE 100=MSD+15,06 MSD= 84,94 Transformar para MI MS=MS+U 100=MS+2,47 MS= 97,53 R1 𝐍 = 7,4 x 0,1 x 14 131 x100 N=7,9% P= 7,9 x 5,71 P= 45,10 45,10_______100g X_______84,94 38,30%MS 38,30________100g X________97,53 37,35% MI R2 𝐍 = 5,8 x 0,1 x 14 105,4 x100 N=7,70% P= 7,70 x 5,71 P= 43,96 43,96_______100g X_______84,94 37,33%MS 37,33________100g X________97,53 36,40% MI R3 𝐍 = 6,4 x 0,1 x 14 124,2 x100 N=7,21% P= 7,21 x 5,71 P= 41,16 41,16_______100g X_______84,94 34,96%MS 34,96________100g X________97,53 34,09% MI Em qualquer análise de alimentos, o que se busca é a exatidão e precisão da análise. Por este motivo, a escolha de um método que atenda esses requisitos é de fundamental importância. A disponibilidade de recursos gera uma condição para que se tenham resultados mais confiáveis (BOBBIO, 1989). CONCLUSÃO O resultado do experimento foi satisfatório, com valores próximos aos encontrados na tabela TACO. O Método de Kjeldahl é um dos métodos mais conhecidos para determinação de proteínas, e pode ser utilizado em qualquer alimento. REFERENCIAS BOBBIO, Florinda O. Introdução à química de alimentos. 2.ed. Livraria: Varela, 1989. CECCHI, Heloisa Máscia. Fundamentos teóricos e práticos em análise de alimentos. 2°ed.rev. Campinas: Editora Unicamp, 2003. INSTITUTO ADOLFO LUTZ. Métodos fisico-químicospara análise de alimentos. São Paulo: Instituto Adolfo Lutz, 2008. p.1020. JOSÉ CARLOS GOMES, GUSTAVO F ONSECA OLIVEIRA. Análises Físico- Químicas de Alimentos. Editora UFV, 2011. MATISSEK et al. Análisis de los Alimentos – Fundamentos, métodos, aplicaciones. 2.ed. Acribia. Zaragoza, 1998. SILVA, D.J. e QUEIROZ, A.C.. Análise de Alimentos – Métodos Químicos e Biológicos. UFV. 3ed. Viçosa, 2009.TACO. Tabela Brasileira de Composição de Alimentos. 4ed. revisada e ampliada. Campinas, SP: UNICAMP, 2011. TACO. Tabela Brasileira de Composição de Alimentos. 4ed. revisada e ampliada. Campinas, SP: UNICAMP, 2011.
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